高效液相色谱法测定血浆中布洛芬浓度

建立HPLC法测定健康人血浆中布洛芬浓度的方法。用反相C_(18)柱,甲醇-乙腈-0.02mol/L醋酸钠一醋酸溶液(47:23:30)V/V为流动相,检测波长225nm。结果布洛芬的线性范围为0.11～53.83μg/ml,γ=0.9999,最低检出浓度0.1μg/ml,平均回收率为100.6％,日间变异系数(RSD％)<7％。本法操作简单,快速,准确。     

高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的血清浓度

苯巴比妥(PB)苯妥英(PHT)和卡马西平(CBZ)是临床常用的抗癫痫药物。本文采用二步预处理;Shim—Pack CLC—TMS柱;以非那西丁为内标;甲醇—水 (47/53V/V)为流动相,在UV240nm处检测,可同时测定三种药物的血清浓度。绘制标准曲线,回归方程为PB:As/Ais=0.02502 0.03199C γ=0.9997;PHT:As/Ais=-0.01077 0.02508C γ=0.9998;CBZ:As/Ais=-0.04729 0.2251C γ=0.9992;每药4种浓度5日中重复5次实验,平均回收率分别为:X_(PB)=99.95±4.39％ _(PHT)=101.15±3.30％_(CBZ)=100.7±2.89;变异系数小于5.3％,满足临床监测需要。     

高效液相色谱法测定血浆中布洛芬浓度

建立HPLC法测定健康人血浆中布洛芬浓度的方法。用反相C₁₈柱,甲醇-乙腈-0.02mol/L醋酸钠一醋酸溶液(47:23:30)V/V为流动相,检测波长225nm。结果布洛芬的线性范围为0.11～53.83μg/ml,γ=0.9999,最低检出浓度0.1μg/ml,平均回收率为100.6％,日间变异系数(RSD％)<7％。本法操作简单,快速,准确。     

乙酰胆碱酯酶的连续抗原决定簇(英文)

将从中国丁氏双鳍电鳐电器官中分离提取的乙酰胆碱酯酶(AChE,EC 3.1.1.7)纯品(比活性752mmol ACh/mg蛋白·h,蛋白浓度0.218mg/ml)在0.1mol/L Tris—HCl(pH8.0)溶液中以6mol/L盐酸胍拆解。加两倍于半胱氨酸残基摩尔量的二硫苏糖醇在50℃充氮条件下反应4h,使二硫键还原。再加两倍半摩尔量的碘乙酰胺在25℃反应2h,使巯基烷化。经葡聚糖凝胶G—25柱层析,获纯净的还原并烷化的AChE(RA—AChE)。圆二色性波谱分析表明AChE的高级结构消失。用固相化的TPCK处理过的胰蛋白酶在0.5％NH_4HCO_3溶液(pH8.0)中30℃条件下将RA—AChE水解8h。取水解上清液在Octadccyl=Si300polyol柱上做反相高效液相层析分离。以60％A液(0.1％三氟乙酸,2％乙腈,高纯水)及40％B液(0.1％三氟乙酸,50％乙腈,高纯水)的混合液为平衡液及0～15min的洗脱液。215nm监测。而后用下列线性梯度溶液依次洗脱:16～60min,A:B由60:40(V/V)至20:80(V/V);61～75min,A:B由20:80(V/V)至10:90(V/V);76min以后,A:B=60:40(V/V)。RA—AChE水解液经RP—HPLC分离为60多个洗脱峰。先按峰群收集,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定抗原性。再将出现抗原反应的第6及第8峰群在不同条件下分别进行第二次RP—HPLC。第6峰群获2个单峰6—1及6—2,第8峰群获3个单峰8—1、8—2及8—     

高效液相色谱法测定天舒胶囊中川芎嗪含量

目的:建立天舒胶囊中川芎嗪的含量测定方法。方法:用甲醇提取,以Waters Nova-pak C_(18)色谱柱(3.9 mm×300mm,4μm)为固定相,甲醇-水(50:50 V/V)为流动相,检测波长为282nm。结果:川芎嗪在10～50μg·ml~(-1)范围内呈良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.3％,RSD=1.6％;连续进样的精密度是RSD=0.8％。结论:方法能消除其它成分的干扰,准确可靠、重现性好,操作简便快速。     

高效液相色谱法测定加替沙星眼凝胶的含量

目的:建立测定加替沙星眼凝胶中加替沙星含量的高效液相色谱法。方法:采用Hypersil ODS C18柱(250mm×4．6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0．05 mol/L磷酸缓冲液-乙腈-甲醇(65:25:10,V/V/V),检测波长为290 nm。峰面积外标法。结果:加替沙星浓度线性范围为2-12μg/mL,r=0．999 6;平均回收率为99．7％,RSD=1．12％。结论:该法简便、快捷、灵敏,可作为该制剂含量测定的有效方法。     

简单灵敏的HPLC法测定人血浆中头孢丙烯浓度

目的:建立血浆中头孢丙烯的HPLC检测方法.方法:采用高效液相色谱检测法,分析柱为Hypersil BDS C18 (200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为20 mmol/L乙酸铵/10％乙酸(pH=3.7):乙腈=92:8(V/V),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长282 nm,进样量20μL.血浆样品用三氟醋酸直接沉淀后,取上清进样分析.结果:头孢丙烯在0.10～10.01 μg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),最低定量浓度为0.10μg/mL,日内日间RSD均＜15％(n=15).结论:研究建立的HPLC法快速、简便、高效,精密度和准确度高,适合血样中头孢丙烯浓度的检测.     

高效液相色谱法测定人血浆中复方氨酚帕马溴的含量

目的:建立快速测定人血浆中复方氨酚帕马溴含量的高效液相色谱法。方法:在盐酸酸性条件下用乙酸乙酯对血样进行提取,采用Diamonsil ~(TM)C_(18)柱,以茶碱为内标,同时测定血浆中对乙酰氨基酚和帕马溴的浓度。流动相:0．2％三氟乙酸水溶液:乙腈=87:13(V/V);检测波长:0．00～8．00 min为249 nm,8．01～13．00 min为278 nm。结果:对乙酰氨基酚和帕马溴的保留时间分别为5．9 min和11．3 min, 2药的线性范围都是0．02～20 mg·L~(-1),提取回收率大于60％(n=5),方法回收率大于90％(n=5),日内、日间RSD小于7．5％(n=5)。结论:本试验方法简便快速、灵敏准确,适用于复方氨酚帕马溴制剂药动学、生物等效性研究。     

高效液相色谱法测定氨苄西林/丙磺舒胶囊中氨苄西林、丙磺舒的含量

目的:建立测定氨苄西林/丙磺舒胶囊中氨苄西林、丙磺舒含量的高效液相色谱法(HPLC法)。方法:采用Waters2690-2487型高效液相色谱仪,SymmetryShieldTMRP18柱(150mm×3.9mm,5μm)。氨苄西林流动相为0.068mol/L的磷酸二氢钾溶液(pH=3.0)-乙腈(92∶8,V/V);丙磺舒流动相为水-乙腈-1mol/L磷酸二氢钾溶液-1mol/L冰醋酸(59.5∶39.8∶0.62∶0.08,V/V),加入0.15%的三乙胺调节pH=2.76;流速均为1.4mL/min。氨苄西林检测波长为210nm,丙磺舒检测波长为254nm。结果:氨苄西林的浓度线性范围为1.25～40μg/mL(r=0.9999),丙磺舒的浓度线性范围为0.308～10μg/mL(r=0.9999)。结论:HPLC法操作简便、灵敏、快速、重现性好,适用于该产品中氨苄西林、丙磺舒含量的测定。     

HPLC法测定维格列汀片中的有关物质

目的:建立测定维格列汀片中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Xterra MS C_(18),流动相为[磷酸盐缓冲液-水-乙腈-甲醇(400∶600∶15∶15,V/V/V/V)]-[磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇(400∶450∶150,V/V/V)](梯度洗脱),流速为1.2mL/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果:杂质A、B、C、D检测质量浓度线性范围分别为18.80~188.0μg/mL(r=0.999 5)、22.64~226.4μg/mL(r=0.999 6)、21.74~217.4μg/mL(r=0.999 7)、19.12~191.2μg/mL(r=0.999 8);检测限分别为4.18、2.68、1.12、1.34μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;加样回收率分别为97.9%~103.1%(RSD=2.01%,n=9)、98.8%~104.1%(RSD=1.93%,n=9)、98.0%~103.6%(RSD=1.81%,n=9)、100.8%~104.1%(RSD=0.98%,n=9)。结论:该方法操作简单、结果准确,可用于维格列汀片中有关物质的测定。     

HPLC法同时测定四环素可的松眼膏中四环素和醋酸可的松的含量

目的:建立一种同时测定四环素可的松服膏中四环素和醋酸可的松含量的HPLC法。方法:采用依利特HYPERSILBDS-C_(18)(300mm×4.0mm,5μm)为色谱柱,0.01mol·mL~(-1)十二烷基硫酸钠溶液(用磷酸调节pH值至2.5)-乙腈(60:40,V/V)为流动相,检测波长254nm,流速0.8mL·min~(-1),柱温40℃。结果:四环素在9.99～249.80μg·mL~(-1)浓度范围内有良好的线性关系(r-1.0000),回收率为(102.39±0.72)％(RSD=0.71％,n=9),最低定量限为13.0ng;醋酸可的松在10.20～255.00μg·mL~(-1)浓度范围内有良好的线性关系(r=1.0000),回收率为(99.59±1.59)％(RSD=1.60％,n=9),最低定量限为7.1ng。结论:本方法简便,灵敏,准确,适合于四环素可的松眼膏的质量控制。     

HPLC法测定氨氯地平氢氯噻嗪缬沙坦片中的有关物质

目的:建立测定氨氯地平氢氯噻嗪缬沙坦片中有关物质的方法。方法 :采用高效液相色谱法。色谱柱为Symmetry C_(18),流动相为[水-乙腈-三氟乙酸(90∶10∶0.1,V/V/V)]-[水-乙腈-三氟乙酸(10∶90∶0.1,V/V/V)](梯度洗脱),流速为0.6 m L/min,检测波长为237 nm(杂质A)和225 nm(杂质B、C、D),柱温为30℃。结果:杂质A、B、C、D检测质量浓度线性范围分别为93.43~987.34 ng/m L(r=0.999 4)、12.27~255.92 ng/m L(r=0.999 6)、78.96~657.17 ng/m L(r=0.999 9)、28.39~218.16 ng/m L(r=0.999 7);定量限分别为91.27、11.35、78.31、26.56 ng,检测限分别为22.98、3.13、19.17、8.16 ng;精密度的RSD<2.0%,稳定性、重复性试验中只检出杂质A,RSD=0.79%;回收率分别为99.4%~100.6%(RSD=0.41%,n=9)、98.9%~102.0%(RSD=1.04%,n=9)、99.4%~100.9%(RSD=0.56%,n=9)、98.6%~101.2%(RSD=0.92%,n=9)。结论:该方法简便、快速、灵敏、重复性好,可用于测定氨氯地平氢氯噻嗪缬沙坦片中的有关物质。     

HPLC法测定小细胞肺癌患者依托泊苷血药浓度探讨

目的 建立高效液相色谱法测定小细胞肺癌患者血浆中依托泊苷血药浓度的方法.方法 色谱柱为Waters Symmetry C18( 150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(45:55,V/V);流速为1ml/min,检测波长为220 nm,进样量为20μl,柱温为30℃.结果 样品中各成分峰分离良好,检出限为1.295 mg/L,依托泊苷的线性范围为2.59～ 51.8 mg/L,r =0.999 7,平均回收率为95.5％±0.9％(n=5),RSD为5％.结论 本法操作简便、准确度高,适用于医院的临床监测.     

RP-HPLC法测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷的含量

目的:建立测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为GRACE Alltima TMC 18,流动相为甲醇-水(15∶85,V/V,红景天苷)、乙腈-水(23∶77,V/V,虎杖苷),流速为1.0 m L/min,检测波长为275 nm(红景天苷)、306 nm(虎杖苷),柱温为25℃,进样量为10μL。结果:红景天苷和虎杖苷检测进样量线性范围分别为0.99~10.89μg(r=0.999 8)、0.046~1.196μg(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为96.31%~99.44%(RSD=1.20%,n=6)、95.96%~99.73%(RSD=1.42%,n=6)。结论:该方法操作简单方便、结果准确可靠,适用于测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷的含量。     

手性流动相HPLC法拆分氟比洛芬对映体研究

目的:建立氟比洛芬手性药物的高效液相色谱拆分方法.方法:利用C18柱,以β-环糊精及其衍生物作为手性流动相添加剂,调节有机修饰剂比例和添加不同量的峰型修饰剂对氟比洛芬对映体进行拆分.结果:采用单6-L-脯氨酸-β-环糊精作为手性流动相添加剂,利用C18柱可直接拆分S,R-氟比洛芬对映体.最佳色谱分离条件为:流动相为1.4％的6 -L - proline -β - CD甲醇溶液(w/v):pH为4.0,体积分数1.0％的三乙胺水溶液(V/V) =25:75(V/V);柱温t=25℃;流速1.0ml/min;进样量10ul,检测波长254nm.S,R-氟比洛芬对映体获得了良好分离,分离度为1.65.结论:建立的手性流动相添加剂法能有效拆分氟比洛芬对映体.     

RP-HPLC法测定头孢羟氨苄的血药浓度与药动学的探讨

用快速、灵敏的反相高效液相色谱法测定了血浆中头孢羟氨苄的浓度,色谱柱为YWG-C_(18)柱,4.6×200mm,流动相为甲醇:水(含0.01M磷酸二氢钠)=13:87(V/V)。流速1.0ml/min,紫外检测波长 260um,灵敏度为0.005AuFs。以6％高氯酸作蛋白沉淀剂,头孢羟氨苄的平均相对回收率为98.69％,日内误差为3.5％,日间误差为3.9％,在1～50μg/ml范围内线性良好,r=0.99987。应用本法对8名健康志愿者口服头孢羟氨苄的药物动力学进行了研究。     

HPLC法测定接骨七厘片中柚皮苷的含量

目的:建立测定接骨七厘片中柚皮苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Luna C18,流动相为甲醇-醋酸-水(36∶4∶64,V/V/V),流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为283 nm,进样量为10μl。结果:柚皮苷检测质量浓度在22.7⁴5.4μg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤0.86%;平均回收率为96.8%,RSD=1.1%(n=6)。结论:该方法简便、快速,重复性好,适用于接骨七厘片中柚皮苷的含量测定。     

改进HPLC法测定酮洛芬肠溶胶囊中酮洛芬的含量

目的:改进高效液相色谱法测定酮洛芬肠溶胶囊中酮洛芬的含量。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Chiralpak IC,流动相为正己烷(含0.1%三氟乙酸)-异丙醇(90∶10,V/V),流速为0.8 m L/min,检测波长为268 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果:酮洛芬检测质量浓度线性范围为0.025~0.5 mg/m L(r=0.999 8),定量限为1.0 mg/L,检测限为0.2 mg/L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率为96.36%~100.32%(RSD=1.87%,n=6)。结论:该方法操作简便,准确快速,适用于测定酮洛芬肠溶胶囊中酮洛芬的含量。     

HPLC法测定复方阿替洛尔片中阿替洛尔与硝苯地平的含量

目的:采用高效液相色谱法考察并建立测定复方阿替洛尔片中阿替洛尔与硝苯地平含量的方法。方法:色谱柱为Phe-nomenex—ODS 3柱(250 mm×4.60 mm,5 μm),甲醇-水-磷酸盐缓冲溶液(取磷酸二氢钾6.8 g,加水1000 mL溶解后,用磷酸调pH至3.0)-庚烷磺酸钠适量摇匀(65:35:3:0.13 g=V:V:V:W)为流动相,流速为1.0 mL·min～1,检测波长为240 nm,进样量为10μL。结果:阿替洛尔的线性范围为10-250μg·mL-1(r=0.9999),硝苯地平的线性范围为4—100 μg·mL-1(r=1.0000),平均回收率分别为99.45％和99.51％。结论:本法精密度好,结果准确可靠,适用于该复方制剂的质量检验分析。     

高效阳离子交换色谱法测定尿素[~(13)C]胶囊中尿素的含量

目的:采用高效阳离子交换色谱法测定尿素[~(13)C]胶囊中尿素的含量。方法:色谱柱为Zorbax 300 SCX,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为200 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果:尿素检测质量浓度线性范围为0.003 9~1.003 0 mg/m L(r=0.999 7);定量限为3.918μg/m L,检测限为0.975μg/m L;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率为99.3%~101.0%(RSD=0.67%,n=9)。结论:该方法简便、快速、灵敏,适用于尿素[~(13)C]胶囊中尿素的含量测定。