抗痘病毒药物的研究进展

痘病毒是所有病毒中最大、最复杂的病毒。致死性的正痘病毒仍然威胁着人类的健康。虽然在20世纪70年代末,世界卫生组织宣布天花病毒已经在全球范围内被消灭,但是,还是存在天花出现的可能性。因此,各国科学家仍在积极寻找能够有效对抗天花病毒及其他能够导致疾病和死亡的痘病毒的药物。西多福韦是全球研究最多、最深入的一个药物,其余处于研究阶段的药物还包括常用的抗病毒药、酶抑制剂及其他核苷类药物等。     

IL-12对HIV痘病毒载体疫苗毒性和免疫原性的影响

目的探讨提高HIV痘病毒天坛株载体疫苗（vTKgpe）的免疫原性及细胞免疫反应。方法用同源重组方法在HIV痘病毒天坛株载体疫苗基因组中插入鼠白介素12（IL12）基因,获得重组病毒vTKgpe—IL12。首先经鼻腔免疫检测其毒力,然后以酶联免疫癍点实验（ELISPOT）和胞内因子染色（ICS）检测vTKgpe—IL12的细胞免疫反应,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测体液免疫应答。结果重组病毒vTKgpe—IL12能正确表达miL12和HIV抗原。miL12对vTKgpe毒性和体液免疫应答无影响。相对vTKgpe而言,vTKgpe—IL12在末次免疫后10d,对细胞免疫应答的强度没有影响;在末次免疫后30d,针对Env的细胞免疫应答有所提高,针对gag-p01的细胞免疫应答略有下降。vTKgpe—IL12诱导的细胞免疫反应30d时比10d显著下降,尤其是针对gag-001的细胞免疫应答显著降低。结论应用DNA初免一痘病毒加强免疫策略时,在痘病毒重组疫苗中加入IL12增强了对env的细胞免疫反应,而降低了对gag-pol的细胞免疫反应。     

痘苗病毒天坛株的减毒与其作为疫苗载体研究进展

1痘苗病毒天坛株的历史天花是人类历史上最可怕的传染病之一。天花由天花病毒（variola virus）引起,人是该病毒的惟一宿主。人感染天花病毒后的死亡率达到30%~40%[1]。世界上公认的对天花最早的准确记录来自中国,晋代药学家葛洪于公元430年左右,在《肘后备急方》中对天花有清楚的描述[1]。     

癌胚抗原重组痘病毒治疗CEA阳性肿瘤的机制及其CEA基因表达的研究

目的：探讨癌胚抗原重组痘病毒（carcinoembryonic antigen recombinant vaccinia virus,CEA-rV)治疗CEA阳性肿瘤的作用部位及其CEA基因表达的情况。方法：采用PCR法探测CEA-rV的作用部位，RT-PCR检测接种CEA-rV鼠腹腔Mφ内CEA的基因表达，免疫组化法检测各组小鼠腹腔MφCEA的蛋白表达，结果：腹腔接种的CEA-rA主要感染腹腔Mφ；皮下接种的CEA-rV主要感染皮肤局部组织，CEA-rV腹腔接种小鼠，其腹腔Mφ有CEAmRNA表达及CEA蛋白表达。结论：推测无论通过腹腔接种还是通过皮肤局部接种，GEA-rV一般多在注射局部表达，CEA-rV不仅可以进入Mφ，而且其CEA基因可以有效地表达，并可使Mφ表面分子MHC-Ⅱ与B7-2表达增强，然后递呈CEA给Th淋巴细胞，使之分泌足够的IL-2，激活Tc细胞分化为CTL，杀伤肿瘤细胞。     

艾滋病疫苗的研究进展

HIV疫苗研制的困难在于HIV病毒的高度遗传变异.根据已发现的10种亚型HIV-1型病毒研制的能激发CTL的新疫苗,已证实在临床上有了实际的应用效果.目前的疫苗研制策略包括质粒DNA载体,活重组载体和联合疫苗等.本文着重介绍这几种艾滋病疫苗的研究现状和存在的问题.     

2017年江苏省江阴市一起疑似痘苗病毒感染聚集性疫情调查

目的分析痘苗病毒感染的临床表现和可能传染原因,为今后采取针对性防治措施提供科学依据。方法建立病例定义,开展病例搜索、卫生学调查和实验室检测。结果共报告4例确诊病例和1例疑似病例,罹患率为62. 5%。主要临床表现为高热或伴有疱疹,疱疹部位为手部。病例均为男性,痘苗病毒核酸检测阳性率为80%。5例病例在未采取有效防护措施的情况下暴露于加工液氮冷冻粉碎兔皮的加工环境中,兔皮为注射过牛痘疫苗5天后宰杀的兔皮。结论本次疫情为暴露于粉碎接种牛痘疫苗5天后宰杀的兔皮的环境中所致,气溶胶吸入导致痘苗病毒感染,未出现人传人的现象。提示需多部门联合加强宣教和培训,增强企业安全管理、规范流程,增强从业人员安全生产意识,共同消除安全隐患。同时加强医务人员培训,提高传染病报告意识,降低传染病传播和扩散的可能。     

HPV58型E7基因重组痘苗疫苗保护作用的实验研究

目的：制备含人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）58型E7基因的重组痘苗病毒疫苗，并利用动物肿瘤模型观察疫苗接种效果。方法：利用PCR方法扩增HPV58 E7 DNA片段，在消除其转化活性的基础上，构建表达HPV58 E7的重组痘苗病毒疫苗并免疫小鼠，观察该疫苗对E7阳性肿瘤细胞生长的抑制作用，体外诱导、测定细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes，CTL）活性。结果：经定点突变的HPV58 E7基因转化活性显著降低，用突变的E7基因构建的重组痘苗病毒免疫小鼠后，能抑制E7阳性肿瘤细胞在小鼠体内的生长并延长小鼠的生存期；免疫小鼠脾淋巴细胞体外可诱导产生针对E7阳性肿瘤的CTL细胞。结论：在消除转化活性的基础上，HPV58E7可用于治疗与HPV58感染有关的肿瘤。     

一种新型慢病毒载体制备体系的改进

目的完善已初步建立的以痘病毒为辅助病毒的慢病毒载体(LV)瞬时制备体系。方法通过同源重组质粒pZIPPY-NEO/GUS,将vTF7-3痘病毒D13L基因的ORF通过同源重组被新霉素基因(neo)以及可视性筛选基因(GUS)替代,制备D13L缺陷性痘病毒(vTF7-3-ΔD13L)。结果经RT-PCR鉴定,D13L基因被完全敲除。制备体系中将vTF7-3-ΔD13L代替vTF7-3后,制备体系培养上清经RT-PCR、Western blotting分别检测到慢病毒载体特异性RNA序列以及特征性p24蛋白的存在,提示系统可以正常制备出慢病毒载体颗粒,并进一步评价了慢病毒载体的感染性。此外,对此系统的动力学特征也进行了初步分析。结论 vTF7-3-ΔD13L制备成功,通过此系统可制备出没有复制性痘病毒污染的慢病毒载体,本研究为该系统的大规模应用奠定了客观基础。     

以痘苗病毒为辅助病毒生产慢病毒载体的探究

目的建立新型、高产量的慢病毒衍生载体的生产体系。方法构建主框架质粒pVECRNA、包装质粒pGAGPOL及包膜质粒pVSVG。通过脂质体将这三个质粒共转染至BHK21细胞,再用含有T7RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF-3感染细胞,培养4d后,收集培养上清,0.22μm滤膜过滤。结果将培养上清进行RT-PCR反应,结果能扩增出96bp长度的目的条带,将培养上清感染BHK21细胞,检测到BHK21细胞中GFP的表达,测定病毒载体滴度为(1.45±0.30)×107tu/ml。结论已初步生产出慢病毒载体,为下一步生产系统建立,系统产量优化奠定良好基础。     

痘苗病毒真核表达载体pMJ601的转化与鉴定

目的 对痘苗病毒表达载体ｐＭＪ６０１进行转化与鉴定,为进一步实施痘苗病毒为载体的基因治疗作必要的准备。方法 利用感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶酶切等多种基因工程技术对质粒ｐＭＪ６０１进行转化及鉴定。结果 琼脂糖凝胶电泳清楚地显示了ｐＭＪ６０１质粒３条带和Ｂａｍ ＨＩ或Ｈｉｎｄ Ⅲ酶切后的线性条带。结论 痘苗病毒表达ｐＭＪ６０１的转化与鉴定,为痘苗病毒载体系统的基因治     

HPV58型E7基因重组痘苗疫苗免疫保护作用的实验研究

目的制备含人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)58型E7基因的重组痘苗病毒疫苗,并利用动物肿瘤模型观察疫苗接种效果。方法利用PCR方法扩增HPV58E7DNA片段,在消除其转化活性的基础上,构建表达HPV58E7的重组痘苗病毒疫苗并免疫小鼠,观察该疫苗对E7阳性肿瘤细胞生长的抑制作用,体外诱导、测定细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytes,CTL)活性。结果经定点突变的HPV58E7基因转化活性显著降低,用突变的E7基因构建的重组痘苗病毒免疫小鼠后,能抑制E7阳性肿瘤细胞在小鼠体内的生长并延长小鼠的生存期;免疫小鼠脾淋巴细胞体外可诱导产生针对E7阳性肿瘤的CTL细胞。结论在消除转化活性的基础上,HPV58E7可用于治疗与HPV58感染有关的肿瘤。     

痘苗病毒载体介导爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2A基因转染树突状细胞对其功能的影响

目的：探讨痘苗病毒载体介导爱泼斯坦－巴尔病毒（EBV）潜伏期膜蛋白2A（LMP2A）基因转染树突状细胞（DC）对DC的表型和功能的影响，以及EBV相关肿瘤免疫治疗性疫苗的可行性，方法：用EBV－LMP2A基因重组痘苗病毒（Vac-LMP2A)转染成熟的DC，流式细胞术（FACS）检测转染前后DC表面分子CD1a,CD83,CD40,CD80,HLA-DR变化，3H－TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖等功能的改变。结果：转染后LMP2A蛋白在DC细胞内高表达，Vac-LMP2A转染成熟DC前后对其表面共刺激分子及特征性表面标志无影响，转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体TI林巴细胞增殖的能力。结论：痘苗病毒载体是介导外源基因LMP2A转染DC的有效载体，Vac-LMP2A转染成熟DC对DC表型和功能无明显影响，是EBV相关肿瘤如鼻咽癌免疫治疗的理想载体。     

小学生接种痘苗病毒重组乙肝疫苗的现场试验

作者报告了西安市８６名易感的小学生接种痘苗病毒重组乙肝疫苗一年的效果观察结果。受试者随机分成３组。免疫剂量分别为２．０，５．０，１０．０μｇ，按０，０，６程序接种。本实验疫苗的免疫原性良好，５．０μｇ与１０．０μｇ组的抗－ＨＢｓ在免疫后３年将能保持较高水平，因此，痘苗重组乙肝疫苗以５．０或１０．０μｇ剂量免疫为宜。     

重组麻疹病毒载体疫苗研究进展

麻疹病毒是一种传染性很强的病毒,是麻疹的病原体.我国自20世纪60年代初应用减毒活疫苗以来,儿童麻疹发病率显著下降.在天花灭绝后,WHO已将麻疹列为计划消灭的传染病之一.随着分子生物学的进展,各种减毒活疫苗和其他微生物载体的麻疹病毒疫苗也相继问世.同时,几十年来麻疹病毒减毒活疫苗的运用表明了其安全、高效,目前也被广泛用...     

人免疫缺陷病毒I型外膜糖蛋白gp^120和gp^160在重组痘苗…

人免疫缺陷病毒Ｉ型（ＨＩＶ－１）是严重威胁人类健康的病原体，其主要抗原是病毒外膜糖蛋白ｇｐ＾１６０（ｇｐ＾１２０＋ｇｐ＾４１）。本文报道运用遗传工程技术，在噬菌体Ｔ７启动子或痘苗病毒启动子ｐ７．５控制下，在重组痘苗病毒系统中构建和表达ＨＩＶ－１ｇｐ＾１２０和ｇｐ＾１６０。进一步研究表明，在此系统中表达的重组ＨＩＶ－１ｇｐ＾１２和ｇｐ＾１６０以糖蛋白形式存在，保留着病毒在自然状况下的抗原表位构象，可     

金丝雀痘病毒用作HIV疫苗载体

美国变态反应和传染病国家研究所(NIAID)已就评价金丝雀痘病毒(CPV)用作人免疫缺陷病毒(HIV)疫苗载体项目而与Paste-ur-Merieux Connaught和Biocine等药物公司加强合作。这是NIAID与工业界合作新政策中最优先考虑的项目,业已与工业界签定了5个临床前和21个临床试验协议,并声称HIV疫苗研究和发展被确定为AIDS相关生物学研究中最优先考虑的课题。     

狂犬病疫苗免疫效果分析

对动物咬伤2585例全程接种狂犬病疫苗后检测狂犬病毒抗体,结果说明：①浓缩狂犬病疫苗阳性率显著高于普通狂犬病疫苗．②男女阳性率无显著差异。③随年龄增大．阳性率也随之降低。④气温＞20℃的阳性率显著低于＜20℃的阳性率。     

美国对82例猴痘病毒感染病例的调查

实验室研究已证实猴痘病毒在美国暴发。猴痘是一种罕见的病毒性疾病，其临床症状与天花相似但很少致命。它多发干中非和西非，1958年因首次在实验室的猴子身上发现而取名“猴痘”。     

腺病毒载体疫苗研究进展

腺病毒不整合到宿主基因组、具有极低的插入突变风险,因此腺病毒载体广泛用作基因治疗载体。此外,腺病毒载体诱导机体产生免疫应答,有较高的热稳定性,使其成为极具潜力的疫苗载体。2019年新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的暴发使人们更加关注腺病毒载体疫苗的应用。接种疫苗仍是预防、控制包括COVID-19在内传染病最经济有效的手段,目前已开发出多种基于腺病毒载体的疫苗。本文综述了腺病毒载体基本性质、免疫机制、临床应用以及研发进展。     

痘苗病毒致病蛋白的研究进展

包括痘苗病毒和猴痘病毒在内的正痘病毒可引起广泛传播的人畜共患病。目前正痘病毒与宿主免疫系统相互作用的机制未明。现从痘苗病毒的结构特征、入胞机制及致病蛋白作用等方面的研究进展进行综述,以助于了解痘苗病毒等正痘病毒入侵机体后可能的免疫相关机制,为免疫治疗提供一定的理论依据。