吡格列酮对缺血-再灌注损伤大鼠皮质神经元的保护作用

目的 探讨过氧化物酶增值物激活受体-γ(PPAR-γ)及其激活剂噻唑烷二酮类药物-吡格列酮(pioglitazone)对缺血.再灌注损伤大鼠皮质神经元肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL-1β)表达的影响.方法 采用原代培养的皮质神经元,通过去除培养液中的糖和氧,模拟缺血缺氧,恢复糖氧供给模拟再灌注.再灌注时分别加用普通培养或含吡格列酮20 μmol/L培养基分别再培养6 h后,以上各组及正常细胞组均采用RT-PCR检测PPAR-γ mRNA表达,MTT法检测细胞活性,同时免疫蛋白印记法检测TNF-α,IL-β蛋白表达.统计学采用单因素方差分析进行统计处理.结果 与正常细胞对照组相比,缺血-再灌注组细胞存活率显著下降,且PPAR-γ mRNA表达明显增强,同时TNF-α及IL-β蛋白表达及分泌均显著上调,而应用pioglitazone治疗进一步增加了大鼠脑组织PPAR-γ的表达,并有效抑制TNF-α及IL-1β的上调表达及分泌,以上差异均具有统计学意义(P相似文献   

PI3K与ERK1/2信号传导通路在吡格列酮保护大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用机制

目的研究PI3K与ERK1/2信号传导通路在吡格列酮介导大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用机制。方法取一日龄Wistar大鼠乳鼠心室肌细胞进行体外培养,建立缺血再灌注损伤模型。分正常对照组(Co组)、缺血再灌注组(Ⅰ组)、Ⅰ组+吡格列酮预处理组(Pi组)、Pi组+PI3K特异性抑制剂LY294002组(Pi+LY组)。采用免疫细胞化学法检测细胞内ERK1/2、p-ERK1/2的分布与变化,Western-bloting检测细胞内p-ERK1/2蛋白表达水平变化。结果免疫细胞化学法结果显示各组ERK变化不大(P>0.05);免疫细胞化学法和Western-bloting结果显示Pi组p-ERK1/2的表达水平高于Ⅰ组(P<0.05),此变化被LY294002抑制(P<0.05);Ⅰ组p-ERK1/2的表达比Co组多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论吡格列酮通过PI3K/ERK1/2信号通路对大鼠心肌缺血再灌注损伤起保护性作用。     

吡格列酮对人胃癌细胞MCG-803生长及基因表达的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）配体吡格列酮对人胃癌细胞株MCG-803生长及基因表达的影响。方法不同浓度吡格列酮作用于MCG-803后,分别应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）、Annexin V/PI双染色流式细胞术、荧光定量PCR法（RT-PCR）检测细胞增殖状态、细胞凋亡率及PPARγ基因表达水平。结果不同浓度吡格列酮均可显著抑制MCG-803细胞增殖（P〈0.01）,且呈时间、剂量依赖性;48小时后细胞凋亡率较对照组显著增加（P〈0.01）;随着吡格列酮浓度增加,PPARγ基因表达呈升高趋势。结论吡格列酮呈剂量及时间依赖性抑制人胃癌细胞株MCG-803生长,并促进其凋亡;PPARγ在MCG-803中有表达且随着吡格列酮浓度增加表达上调。     

吡格列酮对糖尿病肾病肾脏保护作用的疗效观察

目的 :观察吡格列酮对糖尿病肾病肾脏保护作用的疗效。方法 :5 0例 2型糖尿病合并肾病患者在控制饮食、运动治疗基础上 ,治疗组给予吡格列酮 15mg ,每日 1次口服 ,连续服用 3个月 ,对照组予二甲双胍 0 2 5g ,每日 3次口服 ,连续服用 3个月 ,治疗前后测定 2 4h尿蛋白、空腹血糖 (FBG )、餐后 2h血糖 ( 2hPBG)、肝功、肾功。结果 :治疗 3个月后治疗组尿蛋白明显减少 (P <0 0 1) ,对照组尿蛋白无明显变化 ,与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,两组治疗后FBG及 2hPBG均较治疗前明显降低 (P<0 0 1) ,治疗组与对照组相比 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :吡格列酮对糖尿病肾病有肾脏保护作用 ,可延缓糖尿病肾病的发生发展。     

放射性心脏损伤模型大鼠接受吡格列酮干预的心脏保护作用

背景：激活过氧化物酶体增殖物活化受体γ信号途径在心血管系统有许多正效应。血管紧张素Ⅱ与心肌的纤维化密切相关,然而却很少有研究关注激活过氧化物酶体增殖物活化受体γ途径能否通过减弱血管紧张素Ⅱ的表达从而改善放射性心肌损伤。
　　目的：探索激活过氧化物酶体增殖物活化受体γ后血管紧张素Ⅱ1型受体对放射性心脏损伤模型大鼠的作用。方法：60只大鼠随机等分为对照组、吡格列酮组、模型组及照射+低、高剂量吡格列酮组。模型组及照射+低、高剂量吡格列酮组大鼠采用前后对穿照射方法接受6 MV高能X射线照射野心前1.5 cm×1.5 cm,照射剂量300 cGy/min。照射完后6 h时,低、高剂量吡格列酮组大鼠分别接受10,20 mg/kg吡格列酮灌胃,此后每天灌胃1次,连续灌胃30 d;模型组大鼠灌胃2 mL蒸馏水。吡格列酮组大鼠在对应时间灌胃10 mg/kg吡格列酮。
　　结果与结论：给予吡格列酮干预后,受照射大鼠的心脏组织损伤减轻,心脏纤维化减轻,心脏组织中血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白及mRNA表达水平减少。提示吡格列酮干预可降低血管紧张素Ⅱ1型受体在大鼠放射性心脏损伤中的表达,提示激活过氧化物酶体增殖物活化受体γ途径可能对放射性心脏损伤有保护作用。     

吡格列酮促进大鼠骨髓内皮祖细胞的增殖

背景：内皮祖细胞具有增殖、迁移和分化为内皮细胞的特征,对冠状动脉硬化性心脏病及糖尿病心血管并发症的发生、发展可能起着重要作用。目的：探讨选择性过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂吡格列酮对大鼠骨髓内皮祖细胞增殖的影响及相关机制。方法：①采用密度梯度离心法和差速贴壁法培养大鼠骨髓内皮祖细胞,置于含0,1,10,50,100,200μmol/L吡格列酮的培养基中培养,观察吡格列酮促进内皮祖细胞增殖的最佳浓度。②将培养7d的内皮祖细胞随机分5组：对照组加含二甲基亚砜的培养液;吡格列酮组加入50μmol/L吡格列酮;PPAR-γ拮抗剂组加入50μmol/L吡格列酮及10μmol/L过氧化物酶体增殖物激活受体γ拮抗剂GW9662;PI3K/Akt阻滞剂组加入50μmol/L吡格列酮及50μmol/L磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通道阻滞剂Wortmannin;ERK阻滞剂组加入50μmol/L吡格列酮及20μmol/L细胞外调节蛋白激酶通道阻滞剂PD98059,观察不同组内皮祖细胞的增殖情况。结果与结论：倒置显微镜下见培养前4d细胞增殖不明显,第5-10天迅速增殖,并可见细胞集落及线状结构形成,第10天可达80%融合。培养第7天的内皮祖细胞具有吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的荆豆凝集素1的功能。10-200μmol/L的吡格列酮均可明显促进内皮祖细胞的增殖（P〈0.01）,以50μmol/L吡格列酮的作用最明显。进一步阻断相关信号通路发现,Wortmannin和GW9662可明显拮抗吡格列酮的促细胞增殖作用,而PD98059对吡格列酮的作用无影响。说明吡格列酮促进大鼠骨髓内皮祖细胞增殖的作用是通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路介导的。     

腺苷对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用

目的：探讨腺苷对肾脏缺血－再灌注损伤的保护作用机制。方法：将大鼠随机分为对照组（ＣＯＮ）、缺血－再灌注组（ＩＲ）、给予腺苷后缺血－再灌注组（ＡＤ）。除病理组织学变化外,分别检测各组不同灌注时间Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活力的变化。结果：病理组织学肾小管评分,ＡＤ组和ＣＯＮ组均明显低于ＩＲ组,ＡＤ组和ＣＯＮ组之一无显著性差异。Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的活性,在ＡＤ组和Ｃ     

rhKD/APP对肾脏缺血再灌注损伤大鼠的肾保护作用

目的 观察对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护和治疗.方法 取wistar大鼠60只,根据给药不同随机分为6组,伪手术组,模型组,小、中、大剂量组、对照组.造模24小时后检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(SUN)、尿NAG,并光镜、电镜观察肾脏组织病理变化.结果 各实验组与伪手术组比较Cr、BUN、NAG明显升高(P<0.05),与模型组比较rhKD/APP中、大剂量组、对照组Cr、BUN、NAG明显降低(P<0.01 or P<0.05),小剂量组无明显差异.光镜电镜观察rhKD)/APP中、大剂量组、对照组细胞损害较模型组明显减轻.结论 rhKD/APP对大鼠肾缺血再灌注损伤确实具有器官保护作用.     

吡格列酮对实验性兔主动脉粥样硬化的预防作用

目的:探讨预防性应用吡格列酮(Piog)对血脂和动脉粥样硬化(AS)斑块的影响。方法:24只新西兰白兔随机分为四组,I组:正常对照组6只,II组:高胆固醇饮食(Hi-chol)组6只,III组:Hi-chol加高剂量Piog组6只,IV组:Hi-chol加低剂量Piog组6只,喂养8周后处死。于实验终点取兔血清测定血脂;取兔主动脉,观察血管AS斑块及脂质条纹形成情况;免疫组化法测定主动脉血管内皮金属蛋白酶-9(MMP-9)。结果:(1)血脂:Hi-chol成功诱发高脂血症(高TC、TG、LDL-C,HDL-C下降未达显著水平),预防应用高、低剂量Piog明显降低TG,P<0.001。(2)主动脉AS程度:Hi-chol组AS最明显,高、低剂量Piog明显改善主动脉AS情况。(3)主动脉弓血管内壁免疫组化:Hi-chol组、Hi-chol加高低剂量Piog组MMP-9阳性面积比(阳性染色面积/斑块总面积)与正常对照组比较明显升高(P<0.001),高剂量Piog组与单纯Hi-chol组比较,明显降低其表达(P<0.05)。结论:在新西兰兔中,高脂饮食成功诱发高脂血症和动脉粥样硬化,而预防性服用吡格列酮可一定程度上降低TG水平,抑制粥样斑块形成,高剂量吡格列酮降低主动脉粥样斑块内MMP-9表达。     

吡格列酮联合格列吡嗪治疗2型糖尿病30例疗效观察

糖尿病长期高血糖将增加微血管及大血管并发症,使患者生活质量受到严重影响。如何针对2型糖尿病的病理生理基础选择药物治疗以控制血糖、减少慢性并发症的发生、减缓并发症的发展,是治疗2型糖尿病患者的最终目标。本文应用胰岛素增敏剂吡格列酮联合促泌剂格列吡嗪治疗初发2型糖尿病30例,效果良好,报告如下。     

The protective effect of acute pantoprazole pretreatment on renal ischemia/reperfusion injury in rats

Renal ischemia/reperfusion injury (IRI), which occurs in many pathological conditions, is associated with high rate of morbidity and mortality. Activation of inflammatory responses and oxidative stress contribute to induce organ damage following IRI. Pantoprazole, a proton pump inhibitor, which is mostly prescribed for gastroesophageal reflux disease (GERD) has been shown to exert anti‐inflammation effects. In order to evaluate the effects of pantoprazole on renal ischemia/reperfusion injury, four different doses of pantoprazole (4.5, 9, 18, and 36 mg/kg) were administered 30 min before the induction of IRI in male Wistar rats. Serum concentration of creatinine and blood urea nitrogen (BUN) were measured to assess renal function. Histopathological changes, malondialdehyde (MDA) level and toll‐like receptor 4 (TLR‐4) expression in renal tissue were determined and compared to control group. The results revealed that pretreatment with 18 and 36 mg/kg of pantoprazole leads to the significant decline in serum creatinine and BUN levels and the severity of necrosis grade in comparison with control group (P < 0.05). Pantoprazole also reduced the MDA level and TLR‐4 expression in renal tissue. In summary, pantoprazole attenuates renal injury following ischemia/reperfusion. This effect is mediated partially through inhibition of oxidative stress and TLR‐4 signaling pathway.     

左旋精氨酸与褪黑激素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:诱导型一氧化氮合酶来源的一氧化氮与内皮型一氧化氮合酶来源的一氧化氮的平衡对维持血流动力学稳定及内环境动态平衡有重要作用.观察左旋精氨酸与褪黑激素对肾脏缺血再灌注损伤中诱导型一氧化氮合酶与内皮型一氧化氮合酶的影响.方法:实验于2006-07/2007-03在中山大学医学院动物实验中心完成.①实验分组:健康雄性清洁级SD大鼠60只,体质量170～210 g,随机数字表法分为缺血再灌注组、左旋精氨酸治疗组、褪黑激素治疗组、联合治疗组,每组15只.②实验方法:建立大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型,术前1 h各组大鼠腹腔内注射生理盐水及相应药物,每隔24 h重复注射1次,连续5d.③实验评估:观察各组术前及术后1,3,5 d血肌酐、诱导型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶的变化规律及肾脏病理组织学的改变,并采用Paller法对术后第3天肾小管进行评分.结果:纳入大鼠60只,均进入结果分析.①血肌酐的表达:术后第1天联合治疗组水平显著低于缺血再灌注组(P＜0.05);术后第3,5天左旋精氨酸治疗组、褪黑激素治疗组与联合治疗组显著低于缺血再灌注组(P＜0.05).②内皮型一氧化氮合酶的表达:术后第3天缺血再灌注组比术前降低(P＜0.05);术后第3天和第5天左旋精氨酸治疗组、联合治疗组高于缺血再灌注组(P＜0.05).③诱导型一氧化氮合酶的表达:术后第1天缺血再灌注组与术前相比升高,第3天达到高峰,第5天仍高于术前(P＜0.05);褪黑激素治疗组、联合治疗组术后第3天与第5天明显低于缺血再灌注组(P＜0.05).④血肌酐水平与诱导型一氧化氮合酶的表达呈正相关,r=0.57,P＜0.01,与内皮型一氧化氮合酶/诱导型一氧化氮合酶呈负相关,r=-0.61,P＜0.01.⑤肾小管损伤Palller法评分:依次为联合治疗组＜褪黑激素治疗组＜左旋精氨酸治疗组＜缺血再灌注组.结论:通过调高内皮型一氧化氮合酶的表达、抑制诱导型一氧化氮合酶的表达可以减轻肾脏缺血再灌注损伤,联合应用左型精氨酸与褪黑激素即通过以上途径更有效的起到对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用.     

吗啡对急性心肌梗死再灌注损伤保护效应的实验研究

目的　通过测定急性心肌梗死再灌注损伤模型大鼠的血浆降钙素基因相关肽 (CGRP)、内皮素(ET 1)浓度及心肌梗死面积的变化 ,探索吗啡对急性心肌损伤的保护机制。方法　将 4 0只 SD大鼠随机分为单纯缺血再灌注模型组、吗啡预处理组、吗啡 纳洛酮组和手术对照组 ,每组各 10只。采用戊巴比妥钠(40 m g/ kg)腹腔注射麻醉大鼠 ,采用穿线结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌缺血再灌注模型。用放射免疫法测定血浆 CGRP和 ET 1浓度 ,同时测定血清中肌酸磷酸激酶同工酶 (CK MB)含量 ;用氯化三苯四唑(TTC)法染色和数码照相计算机图像分析系统计算心肌梗死面积。结果　大鼠左冠状动脉前降支结扎 10 m in时血浆 ET 1和 CGRP浓度较手术对照组显著增高 (P均 <0 .0 1) ;再灌注 4 .5 h时吗啡预处理组血浆 ET 1及 CK MB浓度较结扎 10 m in时显著降低 ,心肌梗死面积也显著缩小 (P均 <0 .0 1) ;而血浆 CGRP浓度则显著增高 (P<0 .0 1) ;吗啡预处理组以上变化较吗啡 纳洛酮组差异有统计学意义 (P均 <0 .0 1)。结论　吗啡预处理可通过显著降低 ET 1而增加 CGRP血浆浓度、缩小心肌梗死面积 ,对急性心肌梗死后再灌注心肌产生保护效应。     

牛肠碱性磷酸酶对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用途径

背景：肝移植以及广泛的肝叶切除等手术常见的病理过程为肝脏缺血再灌注损伤。研究表明，外源性碱性磷酸酶能通过对内毒素的脱磷酸作用而减轻其毒性作用。 目的：建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型，观察牛肠碱性磷酸酶预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2007～04／11在南方医院消化科实验室完成。 材料：选用SD大鼠72只，用于建立大鼠肝缺血再灌注模型。方法：将72只肝缺血再灌注模型大鼠按随机数字表法分为3组（n=24）：①假手术组打开腹腔，不阻断肝脏供血。②生理盐水组阻断入肝血流20min，在再灌注前5min从尾静脉注射生理盐水1mL。③牛肠碱性磷酸酶预处理组阻断入肝血流20min，再灌注前5min从尾静脉注射牛肠碱性磷酸酶0、5U／g。 主要观察指标：3组大鼠分别于缺血再灌注后1，3，6，12h各时点分别取6只，分别采用鲎试剂终点显色法检测血清内毒素水平：采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素10水平；检测肝组织髓过氧化物酶活性；应用苏木精-伊红染色法观察肝组织病理改变。 结果：①生理盐水组及牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及肝组织髓过氧化物酶活性在再灌注后均高于假手术组（P〈0、05）。②肝脏缺血再灌注损伤后不同时点牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及髓过氧化物酶活性均低于生理盐水组（P〈0、05），白细胞介素10水平高于生理盐水组（P〈0、05），肝组织病理改变也轻于生理盐水组。 结论：牛肠碱性磷酸酶能减少血清内毒素含量，抑制促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的释放并促进抗炎细胞因子白细胞介素10的释放，减少中性粒细胞在肝组织的浸润活化，从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。     

The effect of pentoxifylline on intestinal ischemia/reperfusion injury

The small intestine is highly sensitive to oxygen free radical-induced injury. Post-ischemic intestinal tissue damage appears to be due to the formation of oxygen radicals. Free radical initiated lipid peroxidation (LP) following intestinal ischemia/reperfusion (I/R) may disrupt mucosal integrity. Indirectly, the radicals trigger the accumulation of neutrophils within the affected tissue, initiating inflammatory processes that lead to severe mucosal lesions. In the present study we investigated the effect of pentoxifylline (PTX), a potent inhibitor of tumour necrosis factor production, on I/R induced intestinal injury. Wistar albino rats were divided into four groups: (1) Sham operation (S); (2) Sham operation + PTX (50 mg/kg i.v.) (S + PTX); (3) 1 h ischemia + 2 h reperfusion (I/R); and (4) I/R + PTX. Animals were sacrificed at the end of the reperfusion period and ileum samples were obtained. Malondialdehyde (MDA) levels, an end product of LP, glutathione (GSH) levels, a key antioxidant, and myeloperoxidase (MPO) activity (an index of polymorphonuclear neutrophils) stimulation, were determined in ileum homogenates. The results of the present study indicate that ischemia/reperfusion results in a significant increase in MDA content and MPO activity with a significant decrease in GSH content. Treatment with PTX returns these biomarkers to control values. A mechanism of this protective effect may involve inhibition of neutrophil oxidative burst.     

粉防己碱对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的:建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,观察粉防己碱对缺血再灌注损伤过程中心肌细胞凋亡的干预,初步探讨其保护缺血再灌注损伤心肌的作用机制。方法:实验于2005-03/2006-04在华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科及心血管病研究所完成。①选择健康雄性SD大鼠48只,随机数字表法分为假手术组、缺血/再灌注损伤组、粉防己碱组,各16只。粉防己碱由华中科技大学同济医学院药理学系提供,纯度>98%。②造模前20min,粉防己碱组腹腔注射粉防己碱3mg/kg(约1.2mL),缺血/再灌注损伤组、假手术组均腹腔注入生理盐水1.2mL。③缺血/再灌注损伤组、粉防己碱组大鼠建立缺血/再灌注损伤模型。当结扎点远端心前壁变紫、心电图显示ST段抬高为冠状动脉结扎成功,松扎后抬高的ST段回落1/2以上为再灌注成功的标志。实施30min缺血,再灌注24h。假手术组不造模,在肺动脉圆锥与左心耳间穿线,不结扎,30min关胸,24h后处死。④再灌注结束后检测血清中乳酸脱氢酶活性、心肌组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性和心肌梗死范围,并应用DNA琼脂糖凝胶电泳及原位末端标记法检测各组凋亡细胞及凋亡指数。结果:48只大鼠全部进入结果分析。粉防己碱对大鼠缺血/再灌注损伤的心肌保护作用:①生化指标测定值:心肌细胞受损后,与缺血/再灌注损伤组比较,粉防己碱组乳酸脱氢酶活性、丙二醛含量均显著降低(t=4.337～10.810,P<0.01),超氧化物歧化酶活性显著增高(t=4.352,P<0.01)。②梗死范围:粉防己碱组可明显减少心肌梗死范围,与缺血/再灌注损伤组比较差异有显著性意义[(23.28±4.38)%,(43.76±6.30)%,t=7.552,P<0.01]。粉防己碱对大鼠心肌缺血/再灌注损伤细胞凋亡的影响:①琼脂糖凝胶电泳:假手术组心肌细胞DNA电泳呈一条大分子DNA片段,为正常DNA带型;缺血/再灌注损伤组DNA电泳呈“梯形结构”,可见形似云梯状的DNA片段,为凋亡的典型表现;粉防己碱组的DNA琼脂糖凝胶电泳显示DNA梯形条带明显减弱。②原位末端标记:假手术组偶见凋亡心肌细胞;缺血/再灌注损伤组可见大量胞核呈深浅不一棕褐色的凋亡心肌细胞;粉防己碱组凋亡心肌细胞较缺血/再灌注损伤组明显减少,但较假手术组有所增加。③凋亡指数:与假手术组比较,缺血/再灌注损伤组、粉防己碱组凋亡指数均显著增高[(0.65±0.39)%,(19.36±5.28)%,(8.62±2.45)%,t=9.096～10.006,P<0.01];但粉防己碱组凋亡指数明显低于缺血/再灌注损伤组(t=5.224,P<0.01)。结论:粉防己碱预处理可明显减轻心肌再灌注损伤、抑制细胞凋亡及抗氧自由基,为保护濒死心肌提供了机会窗口。     

维生素E在大鼠肾脏缺血再灌注中的作用

目的 观察维生素E(VE)对大鼠肾脏缺血再灌注(I/R)的作用.方法 18只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、I/R组、VE+ I/R组,每组6只.所有动物于I/R术24h后处死,取肾组织进行光镜检查,留取血清测定尿素氮(BUN)和肌酐(SCr)的浓度.Western印迹测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达.结果 HE、PAS染色结果显示,I/R组肾小管及间质病理损伤显著重于假手术组,VE+ I/R组小管间质损伤程度较肾脏I/R组明显减轻.与假手术组相比,I/R组以及VE+I/R组BUN和SCr均明显升高[BUN:(10.13±2.14)、(7.67±1.63)、(3.85±0.21) mmol/L,SCr:(80.33±7.15)、(63.67±5.40)、(48.67±3.61)μmol/L](P均＜0.05);VE+ I/R组较I/R组BUN和SCr水平显著降低(P均＜0.05).Western Blotting检测显示,VE+ I/R组肾组织TNF-α蛋白表达与I/R组相比显著降低(P＜0.05).结论 VE可能通过抑制TNF-α表达发挥对I/R中肾脏保护作用.     

三七总皂苷对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其线粒体机制

目的:观察三七总皂苷(血栓通注射液的药物成分)对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用,分析其可能的线粒体机制。方法:实验于2006-01/09在广州医学院病理生理学实验室完成。实验分组:取108只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、三七总皂苷组,每组36只。实验干预:①假手术组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾暴露40min后取下。②缺血再灌注模型组:实验前1h腹腔注射生理盐水,全麻下行右肾摘除,左肾动脉夹闭缺血45min后再灌注1h。③三七总皂苷组:实验前1h腹腔注射血栓通注射液70mg/kg,其余方法同缺血再灌注模型组。实验评估:①再灌注后1h取肾组织匀浆检测肾组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量。②测血浆肌酐、尿素氮、血清降钙素基因相关肽含量。③电镜观察肾组织线粒体超微结构的改变。④检测线粒体细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性,Ca2 含量。结果:108只大鼠均进入结果分析。①三七总皂苷组肾组织超氧化物歧化酶活性高于缺血再灌注模型组;丙二醛含量低于缺血再灌注模型组。②三七总皂苷组血浆肌酐、尿素氮含量低于缺血再灌注模型组;降钙素基因相关肽水平高于缺血再灌注模型组。③电镜观察三七总皂苷组线粒体结构有明显的改善,嵴数目减少不多,且排列较整齐,没有线粒体崩解的情况。④三七总皂苷组肾组织线粒体中细胞色素氧化酶、琥珀酸脱氢酶活性高于缺血再灌注模型组;Ca2 含量低于缺血再灌注模型组。结论:三七总皂苷对肾缺血再灌注损伤有明显保护作用,其保护作用机制与直接清除自由基,提高琥珀酸脱氢酶、细胞色素氧化酶活性、升高血清降钙素基因相关肽水平,降低钙超载,从而减轻线粒体损伤有关。     

Protective effect of caffeine administration on myocardial ischemia/reperfusion injury in rats

Many studies have examined the association between coffee consumption and risk of cardiovascular disease, but the results remain controversial. Caffeine is one of the main biologically active compounds of coffee. The aim of this study was to investigate the potential role of caffeine on myocardial ischemia/reperfusion (I/R) injury in the rats. We administered caffeine (25 mg/kg per day) or saline in rats for 4 weeks before myocardial ischemia/reperfusion operation. Compared with the sham group, caffeine treatment decreased ischemia-associated infarct size, serum creatine kinase, and lactate dehydrogenase 3-h reperfusion after 30-min ischemia. Myocardial neutrophil infiltration (assessed by myeloperoxidase activity) was significantly decreased compared with the control group. Meanwhile, caffeine reduced the myocardial apoptosis and suppressed the activation of caspase 3 during myocardial I/R. Importantly, we observed a strong poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) activation during myocardial I/R, and caffeine administration inhibited PARP activation and attenuated the expression of PARP-related proinflammatory mediators such as inducible nitric oxide synthetase, IL-6, and TNF-α, all of which may be correlated with downregulated nuclear factor κB activity. We concluded that caffeine protected against myocardial I/R injury by inhibiting inflammation and apoptosis.