SDS—PAGE的标化及麻风病人血清谱的初步研究

作者建立了标化的分析血清抗原的SDS—PAGE法,并初步分析了麻风、结核、类风湿关节炎病人的血清抗原谱带,发现12.5％为最适分析胶浓度。在受试血清中同病的不同个体之间条带基本相同不同病种与正常血清比较有条带减弱甚至缺失的现象,特别是多菌型麻风血清C、E、I带缺失,少菌型的C、E带缺失,提示其对麻风的诊断,分型可能有一定作用,值得扩大样本进一步研究。     

M-Dot-ELISA检测麻风家内接触者血清中麻风杆菌特异性抗原

用改良酶联免疫斑点１５试验（简称 Ｍ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）对麻风家内接触者（ＨＣ）血清进行了麻风杆菌特异性酚酚糖脂Ｉ（ＰＧＬ－Ｉ）抗原检测。７５例ＨＣ均经麻风杆菌明胶微粒凝集试验（ＭＬＰＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）证实为麻风杆菌特异性抗体阳性者。结果表明：①７５例ＨＣ中抗原阳性者１６例，阳性率为２１％。接触多菌型麻风（ＭＢ）者的抗原阳性率（２８％）明显高于接触少菌型麻风（ＰＢ）者（０％），两者之间有极显著性差异（ Ｐ ＜０．０１ ）。②抗体弱、强阳性组的抗原阳性率和抗原量之间亦有极显著差异（Ｐ＜０．０１）。③４０例正常人及１０例经ＭＬＰＡ和ＥＬＩＳＡ检测证实特异性抗体阳性的非麻风患者血清标本，抗原检测均阴性。     

免疫印迹实验及麻风菌抗原血清学活性的初步研究

初步分析了自己建立的聚丙烯酰胺凝胶电泳与免疫印迹试验及其应用于麻风菌和有关分支菌抗原的结果，表明受试各菌都有自己独特的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱和ＷＲ反应谱。ＭＬ的ＷＢ反应带与有关报民大多相符，虽未能显示２８ＫＤ，但发现ＭＬ有新的５５ＫＤ反应带。作者谇为，这些结果及特性可用于菌株鉴别和筛选血清试验用的吸收剂，对分析和寻找用于血清试验和疫苗的抗原及分离提纯这些抗原有相当的潜力。     

鼻分泌物及皮肤组织中麻风菌及共PGL—1抗原的检测

为了更好地理解麻风菌处携带在麻风病传播，维持中的作用，以及运用鼻携带检测来评价麻风病防治效果，比较了ＰＣＲ和Ｄｏｌ－ＥＬＩＳＡ／ＥＣＬ平行检测３２例活动性麻风患者，１３例愈后者和１４３名麻风家内接触者鼻分泌物及皮肤组织中的麻风菌及其ＰＧＬ－１抗原。     

麻风患者治疗前后血清麻风杆菌特异性抗原和抗体的变化

用免疫斑点试验改良法（Ｍ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对１０例多菌型麻风患者治疗前后的９９份血清进行了ＰＧＬ－Ｉ抗原和抗体检测。结果表明治疗前后及治疗中各段时间的抗原下降速度远快于抗体，二者之间有非常显著性差异（Ｕ＝９．０５，＞２．５８，Ｐ＜０，０１）。抗原量的下降以治疗后第１个月最快（７９．１４％），治疗第３个月时已下降９９％以上，这提示抗原的检测可用于监测多菌型麻风的早期疗效，在发现耐药和抗麻风新药筛选方面亦有应用价值。     

麻风菌重组融合蛋白α-抗原的血清学活性

用麻风患者的血清（Ｌ３８份、Ｂ１９份、Ｔ３６份）比较了α１－ＥＬＩＳＡ、α２－－ＥＬＩＳＡ与ＰＧＬ－Ｉ－ＥＬＩＳＡ法，结果各型患者血清中的抗体滴度分别为：α１－抗原＞α２－抗原＞ＰＧＬ－Ｉ，尽管Ｌ型的血清中抗α１－抗原的滴度明显高于其它两种抗原，但其阳性率在三种方法之间统计学上没有差别，分别为９７％，９２％和９４％；Ｂ和Ｔ型血清α１－ＥＬＩＳＡ法的阳性率明显高于其它两种方法，分别为８４％、５８％、６８％和４７％、３８％、３０％，以α１－ＥＬＩＳＡ法的敏感性最高。提示α１－ＥＬＩＳＡ在麻风血清诊断中有很大潜力，值得进一步扩大样本进行评价     

麻风杆菌重组α抗原的应用研究:α2-ELISA在麻风复发监测中的应用初探

目的：探讨以重组麻风杆菌α２融合蛋白为抗原的酶联免疫吸附试验（α２－ＥＬＩＳＡ）在监测麻风复发中的应用价值。方法：用已建立的α２－ＥＬＩＳＡ检测３１２例用ＤＤＳ单疗的麻风病治愈者血清中的抗α２融合蛋白抗体。结果：多菌型组α２抗体阳性率高于少菌型组,且在多菌型治愈者中的α２抗体滴度显示随着ＤＤＳ疗程的增加而降低的趋势。结论：提示α２－ＥＬＩＳＡ在多菌型麻风治愈者中可望成为一个麻风复发监测的血清学手段之一,且在麻风疗效的评价中有一定的意义。     

SACT的建立及其与PGL—I—ELISA的比较研究

用抗麻风菌特异酚糖脂Ｉ（ＰＧＬ－Ｉ）单克隆抗体Ｂ８Ｆ１ＩＶ建立了间接血清抗体竞争试验（ｓｃｒｕｍ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ ｔｅｓｔ，ＳＡＣＴ），其性为９９％特异性为９６．５％。以本法与标准化的Ｃ ＰＧＬ－抗原的间接酶联免疫吸附试验（ＰＧＬ－Ｉ－ＥＬＩＳＡ）作了比较。所用麻风血清为１００例（ＬＬ２０、ＢＩ２０，ＢＢ２０，ＢＴ２０），正常人血清为２８例，结果显示丙地在检测ＭＢ病人上无     

用ND—O—BSA和PGL—I作抗原的家庭接解者麻风血清流行病学研究

作者于１９９１年４－５月对麻风高流行区广南县和文山县的麻风家庭接触（ＨＣＰ）７２３人，健康人（ＥＨＰ）１６３２人和甘肃省非麻风流行区健康人（ＮＨＰ）１３１人，用检测血清抗ＮＤ－Ｏ－ＢＳＡ和ＰＧＬ－１抗体水平的ＥＬＩＳＡ进行了血清流行病学研究，血清阳性标准是根据ＥＨＰ和ＮＨＰ的血清抗体水平，即ＥＨＰ的阳性标准分别为０．２３和０．２２５，ＮＨＰ的分别为０．１４和０．１７，根据ＮＨＰ的阳性标准（ＮＨＰＣ     

麻风菌重组融合蛋白α—抗原的血清学活性

用麻风２的血清（Ｌ３８份、Ｂ１９份、Ｔ３６份）比较了α１－ＥＬＩＳＡ、α２－－ＥＬＩＳＡ与ＰＧＬ－Ｉ－ＥＬＩＳＡ法，结果各型患者血清中的抗何不工分别为：α１－抗原〉α２－抗原〉ＰＧＬ－Ｉ，尽管ＬＧ 血清中α１－怕的滴度明显高于其它两种抗原，但其阳性率在三种方法之间统计学上没有差别，分别为９７％，９２％和９４％；Ｂ和Ｔ型血清α１－ＥＬＩＳＡ法的阳性率明显高于其它两种方法，分别为８４％、５８％、６８％     

大疱性系统性红斑狼疮的皮肤基底膜带相关抗原

免疫印迹和盐裂皮肤间接免疫荧光检测 ５例大疱性系统红斑狼疮（ＢＳＬＥ）血清，对照为 ５例获得性大疤性表皮松解症（ＥＢＡ）、２０例类天疱疮（ＢＰ）、２０例ＳＬＥ和１０例正常人血清。结果表明，３例（３／５）ＢＳＬＥ血清结合盐裂皮肤真皮侧和真皮提取物中２９０ ０００抗原，其中２例ＢＳＬＥ血清也结合表皮提取物中 １６５ ０００抗原，结果与 ＥＢＡ和部分ＢＰ血清相同。ＳＬＥ血清未结合 ２９０ ０００和 １６５ ０００抗原。提示ＢＳＬＥ血清中存在ＥＢＡ和ＢＰ抗体，推测ＥＢＡ和ＢＰ抗原可能是ＢＳＬＥ的皮肤基底膜带相关抗原。     

麻风血清流行学—不同人群的横向研究

在对不同人群中的麻风血清流行学进行了研究，样本取自江苏宝应、高邮，陕西城固、桔园、湖南桑植、城步，湖北天门，建始，辽宁本溪和美国芝加哥等地，共５８６１份，其中包括各型麻风病人５５例、家内接触者１０８３例，配对随机人群４２５例、随机人群３１７１例和正常人３８０例。正常人采自麻风流行区的９５例，非流行区的（ＮＮＣ）２８５。除辽宁本溪用ＭＳ－ＥＬＩＳＡ筛选外，其余各地均用ＰＧＬ－Ｉ－ＥＬＩＳＡ。结果：１     

几种检测麻风菌的基因扩增试验的比较研究

对检测麻风菌用的几种ＰＣＲ方法进行了比较研究，这些ＰＣＲ以编码麻风菌６５ＫＤ，３６ＫＤ，１８ＫＤ，ｇｒｏＥＬ和１６ＳｒＲＮＡ的基因为基础。比较用的指标是敏感性，特异性，简易快速和节省试剂，结果显示以编码麻风菌６５ＫＤ抗原的基因为基础的ＰＣＲ为最实用，其检测下限为１０－１００条麻风菌，与其它已知的分枝菌无交叉反应，用单对引物，仅需３０个循环，以２．５－３个小时就能完成实验，且用料公为其它常用反应体系     

免疫印迹法检测结缔组织病抗ENA抗体

目前测定抗ＥＮＡ抗体的方法，国内常应用对流免疫电泳法（ＣＩＥ），国外则多采用双向免疫扩散法（ＤＩＤ）。以上两法虽简便，但需多种标准血清，且不能探明相应抗原的结构，限制了对抗原及其抗体的深化研究。我们采用免疫印迹法（ｉ。ｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ，ＩＢ）与ＣＩＥ法作对比检测了皮肌炎ＩＤＭ）、进行性系统性硬化症（ＰＳＳ）、Ｓｊ６ｇｒｅｎ综合征（ＳｊＳ）、类风湿性关节炎（ＲＡ）、重叠综合征（ＯＩ。Ｓ）和混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）等患者的血清抗ＥＮＡ抗体，现将检测结果报道如下。一、病例和方法（一）病例：…     

免疫印迹实验及麻风菌抗原血清学活性的初步研究

初步分析了自己建立的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)与免疫印迹试验(WB)及其应用于麻风菌(ML)和有关分支菌(AFB)抗原分析的结果,表明受试各菌都有自己独特的SDS—PAGE谱和WB反应谱。ML的WB反应带与有关报导大多相符,虽未能显示28KD,但发现ML有新的55KD反应带。作者认为,这些结果及特性可用于菌株鉴别和筛选血清试验用的吸收剂,对分析和寻找用于血清试验和疫苗的抗原及分离提纯这些抗原有相当的潜力。作者对实验方法及应用技巧作了详细描述,分析麻风菌(ML)抗原及其免疫活性对了解ML的抗原组成,探索麻风诊断、分型乃至发病机理都有重要意义。对此,国外已有些报道,但国内尚未见。     

麻风病

２００００１０２ 麻风杆菌重组α抗原的应用研究：α２－ＥＬＩＳＡ的建立／尹跃平（中国医科院皮研所）…／／中国麻风皮肤病杂志．－１９９９，１５（２）．－１２～１４ 应用重组麻风杆菌α２融合蛋白为抗原，建立α２酶联免疫吸附试验，对麻风病人和健康正常人的血清进行了检测，评价了α２酶联免疫吸附试验中有关试剂及最适浓度，其敏感性与ＰＧ－１－ＥＬＩＳＡ进行了比较。结果显示：（１）挥发性缓冲液醋酸铵碳酚盐（０．０１ｍｏｌ／Ｌ）为α２抗原最佳包被液；（２）重组α２融合蛋白的最适包被浓度为５μｇ／ｍｌ；（３）显色剂…     

用CAMS—A做指示菌筛选抗麻风中药的初步研究

用Ｍ．ＣＡＭＳ－Ａ株做为抗麻药筛选指示菌，自行设计了初筛抗麻风药的双相培基试验，初筛２００种中药，发现４８种有抗Ｍ．ＣＡＭＳ－Ａ活性。作者认为ＤＭＡ简单，易行、廉价、实验周期短，且集中了固、液两相单用时全部的优点，加之不同时间用已与受试验物相互作用过的菌做划线接种有药物动力试验的效果，所以系一有潜力的抗麻风药物体外初筛试验。     

麻风血清中的抗结核抗体

麻风和结核是相关的慢性病,常出现在世界上同一地区,但有关两病共同感染的病例资料不多。作者自印尼的泗水地区采集了各型麻风血清26份,健康血清70份,用Hewitt的竞争法以单克隆抗体明确抗原特性,测定了这些血清对7个分枝杆菌抗原表位的抗体。这些表位中的一个是麻风菌特异的,三个对结核菌特异,一个与其它分枝菌呈广泛交叉反应,两个对麻风菌有交叉反应而对其它分枝菌交叉反应小。结果大多数瘤型和一些结核样型病人显示对麻风菌特异抗     

麻风菌α抗原基因不同表位DNA段的制备及表达

为筛选麻风菌α抗原基因的特异表位，通过限制性内切酶消化法及多引物ＰＣＲ法制备出麻风菌α抗原基因不同表位的ＤＮＡ片段，并对以消化法得到的ＤＮＡ片段进行了初步表达，为确定麻风菌α抗原基因的特异表位奠定了基础。     

麻风病人的抗酚糖脂抗体和抗全麻风菌抗体:治疗过程中的变化

抗体对麻风病人并不具有保护作用。由于抗体是抗原刺激后的早期表现,因此抗体测定可作为早期诊断亚临床感染的工具,并且可作为治疗中的观察指标。过去用全麻风菌或部份纯化的麻风菌提取物作抗原与先经其它分枝杆菌吸收过的、消除了交叉反应抗体的血清进行测试。近来发现从感染麻风菌的犰狳组织可以提取大量麻风菌特异性酚糖脂(PhenolicGlycolipid,PGL-1),从而开创了麻风血清学新的远景。至于用全麻风菌或其它分枝杆菌为抗原与未加预先吸收的血清起反应的