卵巢肿瘤端粒酶活性及其催化亚基hTERT mRNA表达的相关性研究

目的；研究端粒酶激活及其催化亚基的表达在卵巢肿瘤的发生、发展 的意义。方法：采用端粒重复序列扩增－酶联免疫吸附法（Trap-ELISA）及逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）测定端粒酶活性并观察hTERT mRNA表达。结果：3株卵巢癌细胞系端粒酶活性均呈高水平表达，同时hTERT mRNA亦呈高表达；端粒酶阳性率在癌、交界性卵巢肿瘤中分别为74.19%、2／4，在良性及正常卵巢组织中未检测出活性。各组间有显著性差异（P＜0.01)。hTERT mRNA仅卵巢癌中表达，阳性率为61.79%；端粒酶阳性率及hTERT mRNA表达率均随手术分期的增高而增高（P＜0.01）。卵巢肿瘤端粒酶阳性率及hTERT mRNA表达率呈正相关。结论：端粒酶的激活及其催化亚基的表达与卵巢癌的发生和进展密切相关，二者有望成为卵巢癌预后判断的新指标及基因治疗的新靶点。     

靶向siRNA下调人结直肠癌Colo320细胞端粒长度与端粒酶逆转录酶基因表达的研究

目的:探讨发夹状shRNA封阻原癌基因(c-myc),抑制癌细胞增殖、生长的作用。方法:针对c-myc的构建发夹状shRNA的真核表达质粒,并转染人结直肠癌Colo320细胞。荧光定量RT-PCR检测c-myc及细胞端粒酶逆转录酶的mRNA的表达,Western-blot检测c-myc、端粒酶逆转录酶(hu-man telomerase reverse transeriptase,hTERT)蛋白表达水平。Southernblot检测端粒的长度,PCR-ELISE法检测端粒酶活性。3H-thymidine实验分析DNA合成和细胞增殖。结果:转染细胞增殖、生长皆受到抑制。同时c-myc和hTERT的mRNA和蛋白表达显著下降,端粒的长度明显缩短,端粒酶活性降低。结论:c-myc的shRNA对人结直肠癌Colo320细胞的生长增殖、端粒长度、端粒酶活性有特异性抑制作用,并呈剂量依赖关系。     

乳腺癌患者端粒酶活性表达与c-Myc基因的相关性

人类端粒酶逆转录酶（hTERT）是新近克隆的端粒酶催化亚单位,是端粒酶活性的限速因素。在端粒酶活性呈阳性的肿瘤中常见hTERT的高表达。研究报道大多数乳腺癌中有端粒酶活性和hTERT的表达,但是其阳性定位和调控机制尚不清楚。本研究采用PCR-ELISA法检测端粒酶的活性和RT-PCR检测端粒酶逆转录酶mRNA的表达．流式细胞术检测c-Myc蛋白的表达。探讨乳腺癌中hTERT表达的意义及其与癌基因c-Myc的关系。     

端粒酶活性抑制用于肿瘤治疗研究的展望

端粒酶是一种核糖蛋白酶,有三个主要组成部分.即人端粒酶 RNA(human telomerase RNA,hTR)、端粒酶相关蛋白(telomerase-associated protein,TP 1/TLP 1)和人端粒酶催化亚单位(the catalytic protein subunit of telomerase,hTERT)。端粒酶具有逆转录酶活性,能以 hTR 为模板.向染色体末端添加端粒 DNA 序列(TTAGG 序列)。现有研究     

胃癌及癌旁组织端粒酶活性检测与术后早期复发的关系

目的 探讨端粒酶活性与胃癌术后早期复发的关系.方法 应用TRAP法对经病理证实的34例胃癌及癌旁组织进行端粒酶活性测定.结果 胃癌阳性29例(85.3%),癌旁组织阳性2例(5.9%),表明胃癌与癌旁组织中的端粒酶检测阳性率相比,差异有非常显著性(P＜0.01).34例胃癌病例中出现术后早期复发7例,复发病例中胃癌组织端粒酶活性均呈阳性,其中1例癌旁组织端粒酶活性亦呈阳性,提示胃癌及癌旁组织端粒酶表达阳性的肿瘤术后有较高的复发率(P＜0.01).结论 端粒酶活性与胃癌的发生、发展密切相关,检测端粒酶活性可为胃癌术后早期复发提供参考依据.     

胃癌患者外周血中端粒酶活性表达及其临床意义

目的 检测胃癌患外周血中癌细胞端粒酶活性，以探讨端粒酶活性的表达及其临床意义。方法 通过用PCR-TRAP-ELISA法检测52例胃癌患外周血端粒酶的活性，按照肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结有无转移来分析端粒酶与胃癌的关系。结果 外周血中检测端粒酶活性阳性率为53．8％，低于相应的胃癌组织阳性率(81．3％)，胃癌患外周血中肿瘤细胞端粒酶相对活性的升高与患的淋巴结转移和肿瘤的分化程度呈正相关。结论 对患判断肿瘤是否转移复发，检测患外周血中端粒酶活性要优于检测肿瘤组织的端粒酶活性。     

瘦素对HepG2细胞端粒酶及端粒酶反转录酶的调控作用研究

目的 探讨瘦素(leptin)对人肝癌细胞株HepG2的增殖机制及对端粒酶(telomerase,TA)与端粒酶反转录酶(hTERT)活性表达的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度leptin作用不同时间对HepG2细胞的增殖影响;流式细胞仪分析其细胞周期;TRAP-PCR银染法检测不同浓度leptin作用HepG2细胞后端粒酶的活性;实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹(Western-blot)分析leptin作用24 h后hTERT mRNA及蛋白水平的表达情况.结果 leptin可以促进HepG2细胞增殖,具有浓度-时间依赖性;流式细胞仪结果显示leptin可以改变HepG2的细胞周期,使S期比例升高;leptin可以活化HepG2细胞端粒酶,上调HepG2 hTERT mRNA及蛋白水平的表达.结论 leptin可能通过上调HepG2 hTERT表达,增强端粒酶活性,改变肝癌细胞株HepG2的生物学行为.     

端粒酶活性在胃癌组织中表达的临床意义

目的研究胃癌组织中端粒酶的活性表达。方法采用端粒酶重复序列扩增法。结果胃癌组织中端粒酶活性表达阳性率达91%。正常胃黏膜组织中未检出端粒酶活性。两者有显著性差异（P〈0.001）。胃癌组织不同分化程度及淋巴结转移之间端粒酶活性阳性率未发现显著差异（P〉0.05）。结论端粒酶参与各型不同分化程度胃癌的发生,在胃癌组织中高度表达,而在正常组织中不表达,有助于提高早期胃癌的检出率。     

端粒酶逆转录酶基因hTERT知膀胱癌组织中的表达及意义

为研究端粒转录酶基因hTERT在膀胱移行细胞癌（TCC）组织中的表达，探讨其与TCC生物学行为的关系，应用免抗人hTERT多克隆抗体及S－P免疫组化法检测其在56例TCC及10例下膀胱粘膜组织的表达情况。结果,hTERT在TCC中阳性表达率为64．3％，与正常膀胱粘膜组织表达率0％相比，差异有显著性（P＜0．05）。hTERT阳性表达率与TCC病理分级、临床分期及复发显著相关性（P＜0．05）。结论：端粒酶逆转录酶基因hTERT表达异常可能与膀胱肿瘤的发生、发展有关，检测hTERT表达可作为预测膀胱肿瘤预测复发的潜在指标。     

联合干扰人端粒酶催化亚基对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的探讨基因的联合干扰对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法将转染细胞分为共四组:psi-control对照组(A组)、psi-端粒酶催化亚基(hTERT)1组(B组)、psi-hTERT1和psi-hTERT2共转染组(C组)、psi-hTERT1和psi-端粒酶调节相关蛋白(TRAP)1共转染组(D组)。采用RT-PCR及Western blot分别检测hTERT mRNA和蛋白表达,端粒重复序列扩增-PCR法检测端粒酶活性,MTT法检测SGC-7901细胞增殖。结果与A组相比,B组、C组hTERT mRNA和蛋白表达、端粒酶活性降低(P<0.05),细胞增殖减慢,细胞凋亡增加;而D组各指标与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合干扰的效果可能与剂量和目的基因有关。     

胃液中端粒酶活性检测临床意义探讨

日益增多的资料提示，端粒酶激活是恶性肿瘤一个显的生物学特征，是肿瘤细胞区别于正常细胞的根本所在。胃癌组织端粒酶活性的研究国内外已有报道，我们采用TRAP-PCR-ELISA技术检测胃液中脱落细胞的端粒酶活性，探索其在胃癌诊断方面的应用前景。     

利用组织芯片研究星形细胞瘤组织中端粒酶hTERT P53及Ki-67的表达及意义

目的探讨端粒酶hTERT、P53及Ki-67在星形细胞瘤组织中的表达与病理分级的关系。方法应用组织芯片技术,链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶(SP)免疫组织化学法检测56例不同级别的星形细胞瘤及10名正常脑组织中3种蛋白的表达情况。结果端粒酶hTERT、P53及Ki-67蛋白表达的阳性率分别为45.0%(25/56)、53.6%(30/56)、64.2%(36/56),三者的表达均随肿瘤级别的增高而增高,端粒酶hTERT、P53的表达与Ki-67表达呈正相关。结论端粒酶hTERT、P53及Ki-67基因的蛋白表达与肿瘤细胞的分化程度有关,可作为星形细胞瘤恶性程度的重要标记物。     

幽门螺杆菌、端粒酶基因和p53在胃癌及癌前病变中的表达及相关性研究

目的探讨幽门螺杆菌（Hp）、端粒酶基因（hTERT）、p53在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法采用特殊染色、免疫组化和原位杂交方法，分别检测130例石蜡包埋标本中的Hp感染、p53蛋白和hTERT mRNA的表达。结果①在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、非典型增生和胃癌患者中Hp的感染率分别为40％、60％、70％和72．5％。胃癌与慢性浅表性胃炎比较差异有统计学意义（P〈0．05）。四种病变中p53蛋白的表达率分别为5％、25％、50％、62．5％，其中胃癌与慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎比较差异有统计学意义（P〈0．01）。hTERT mRNA的表达率分别为0、10％、30％、78．75％，胃癌与慢性萎缩性胃炎、非典型增生相比差异有统计学意义（P〈0．05）。②Hp感染阳性的胃癌病例，p53、hTERT mRNA阳性的表达率明显高于Hp阴性胃癌病例（P〈0．05）；p53阳性的胃癌中端粒酶基因表达均为阳性，p53阴性的胃癌中有部分端粒酶基因表达阳性（66．7％）。结论Hp感染与p53基因的突变、hTERT活性密切相关；p53基因突变可导致端粒酶活化，但端粒酶激活可能不完全依赖于p53基因的调控。     

胰腺癌组织端粒酶逆转录酶的表达与临床病理的关系研究

目的研究胰腺癌组织端粒酶逆转录酶(hTERT)的表达与临床病理的关系。方法回顾性分析我院在2009年6月至2014年2月间收治的46例胰腺癌患者的临床资料,对胰腺癌病灶大小、具体部位与临床分明、组织分级进行描述。利用SABC免疫组化,对hTERT表达进行检测。同时取46例患者癌旁组织进行对照。结果经研究发现,患者肿瘤部位和hTERT表达无关联(P>0.05)。通过对胰腺癌患者胰腺组织观察可得知,有39例患者呈现hTERT表达为阳性,阳性率为84.8%,在癌旁组织中,有12例标本呈现为阳性,阳性率为26.1%。hTERT表达在临床分期中具有统计学意义(P<0.05),其在Ⅰ期的hTERT表达阳性率最低,明显低于Ⅲ期和Ⅳ期。它与肿瘤分级、大小、位置无关联。结论人端粒酶逆转录酶在胰腺癌组织中表达较高,它的表达与肿瘤临床分期有很大关联,这表明hTERT表达在肿瘤组织与癌旁组织中的表达差异非常大。     

HTERT基因在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系

目的 检测端粒酶逆转录酶(hTERT)基因在胃癌中的表达,探讨hTERT基因表达与幽门螺杆菌(H.pylori)感染在胃癌病变中的关系.方法 采用免疫组织化学染色的方法 检测胃黏膜病变组织(包括肠化生、异型增生及胃癌)hTERT蛋白表达情况以及H.pylori感染率.结果 胃黏膜病变组织hTERT蛋白表达及H.pylori感染阳性率均显著高于正常胃黏膜(P<0.05或<0.01).HTERT的表达与胃癌的分化程度、肿瘤大小无关(P>0.05),而与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05或<0.01).结论 HTERT过表达参与了胃癌发生发展及浸润转移,且与H.pylori感染有关.     

胃粘膜活检组织端粒酶活性检测及其意义

目的 探讨端粒酶在胃癌诊断中的价值及其作为胃癌标记物的可能性。方法 采用端粒重复序列扩增法(TRAP-PCR-ELISA)检测72例胃病患胃镜活检标本端粒酶活性。结果 胃癌标本端粒酶检测阳性率为84．4%(27／32)；癌旁组织端粒酶检测阳性率为4．2％(1／24)；慢性浅表性胃炎及肠上皮化生标本端粒酶阳性率0％(0／16)。结论 端粒酶活性检测对胃癌的早期诊断可能有重要意义，有望成为一种理想的胃癌标记物。     

神经上皮肿瘤端粒酶活性及其相关基因的表达

目的研究神经上皮肿瘤的端粒酶活性及其相关基因TRF1、TRF2、TP1、hTERT的表达。方法改良TRAP法检测65例神经上皮肿瘤的端粒酶活性,免疫组化法检测TRF1、TRF2、TP1、hTERT的表达。结果神经上皮肿瘤端粒酶阳性率为61．54％,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ级肿瘤的端粒酶活性分别为39．0TPG、74．0TPG、171．1TPG和255．2TPG。TP1、hTERT和肿瘤恶性度呈正相关;TRF1、TRF2和肿瘤恶性度呈负相关。结论端粒酶活性及hTERT和神经上皮肿瘤恶性度密切相关;hTERT是端粒酶活性水平调节的关键。     

Sp1反义寡核苷酸抑制Jurkat T细胞hTERT表达而抑制端粒酶活性(英文)

目的:研究转录因子Sp1反义寡核苷酸(ODN)对Jurkat T细胞端粒酶活性和端粒酶催化亚基hTERT表达的影响。方法:设计Sp1反义ODN并用脂质体转染细胞,用端粒酶PCR-ELISA方法检测端粒酶活性;用逆转录PCR方法检测Sp1和hTERT mRNA水平,用Western blot检测蛋白水平。结果:sp1反义ODN(1μmol/L)明显抑制Jurkat T细胞Sp1 mRNA和蛋白表达,抑制率分别为44.8％(P<0.05)和57％(P<0.01),并抑制hTERT mRNA表达,抑制率为43.7％(P<0.01);当浓度从0.25到2.0μmol/L,Sp1反义ODN对端粒酶活性抑制率从27.1％到64.6％,呈明显的剂量依赖性关系。结论:Sp1反义寡核苷酸通过抑制hTERT mRNA表达而抑制端粒酶活性。