淫羊藿总黄酮调控Wnt/β-catenin信号通路对去卵巢大鼠抗骨质疏松作用研究

目的 通过淫羊藿总黄酮(TFE)对去卵巢大鼠骨组织Wnt/β-catenin信号通路及腰椎骨和股骨生物力学性能影响研究,探讨TFE对去卵巢大鼠抗骨质疏松的可能机制.方法 选用40只90天龄的SPF级SD雌性大白鼠,随机分为4组:对照组、去卵巢组(OVX)组、去卵巢+己烯雌酚(DES)组、去卵巢+淫羊藿总黄酮(TFE)组.实验持续12周后处死全部大鼠,取腰椎骨、股骨分别测量生物力学参数及骨密度.免疫蛋白印迹法检测各组大鼠胫骨骨皮质区p-GSK3-β(thr9)、RANKL、OPG、β-catenin蛋白表达水平.结果 与对照组比较,OVX组大鼠股骨、腰椎骨的生物力学性能及骨密度下降(P＜0.05);DES组、TFE组股骨和腰椎骨的生物力学性能和骨密度较去卵巢OVX组明显改善(P＜0.05);两治疗组的组间差异无统计学意义(P＞0.05).免疫蛋白印迹法提示去卵巢大鼠分别加用TFE、DES治疗后,胫骨蛋白β-catenin、OPG表达上调,p-GSK3-β(thr9)、RANKL表达下调.结论 淫羊藿总黄酮能够改善去卵巢大鼠的骨生物力学性能,上调Wnt/β-catenin信号通路,从而改善骨质疏松.     

去势大鼠骨形态计量学、生物性能变化

目的 通过观察大鼠血清学、骨形态计量学测定、骨生物性能等方法研究去卵巢大鼠骨变化.方法 采用7-12月龄SD雌性大鼠30只,随机分为对照组、模型组和尼尔雌醇组.模型组和尼尔雌醇组大鼠切除双侧卵巢进行造模.尼尔雌醇组大鼠造模后45天开始灌服尼尔雌醇,连续90天;对照组和模型组大鼠手术后第45天开始灌服去离子水,连续90天.所有大鼠给药第80、87天时两次ip四环素20mg/kg进行骨荧光标记.实验结束时,取出大鼠股骨及第四腰椎骨进行股骨形态计量学测定、股骨骨密度测量、股骨三点弯曲实验及椎骨压缩实验,同时测定血清碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)水平.结果 大鼠去双侧卵巢后,股骨骨密度、骨最大载荷、最大应力、弹性模量、刚度水平和骨小梁体积显著性提高;椎体压缩性能、股骨形态计量学、股骨弯曲性能有明显改变;而雌激素对以上变化有不同程度改善作用.结论 骨组织形态、骨生物性能是评价骨质疏松模型或药物疗效的重要指标;发生骨质疏松时,骨组织形态学变化先于骨生物性能变化.     

中药独活激活Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的作用

目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200～250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,连续灌胃给药60d。测定股骨密度、骨灰重/干重百分比;测定大鼠血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清钙、无机磷的水平。免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;Western blot法检测大鼠骨组织中β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达。结果独活高剂量和阳性药均能够增加大鼠股骨密度、骨灰重/干重,降低BGP、ALP及TRAP的水平,并增加血清钙的水平,对无机磷的表达无显著性影响,增加骨组织中OPG蛋白表达水平,降低RANKL蛋白表达水平,增加β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达水平,降低p-β-catenin、GSK-3β蛋白表达。结论独活高剂量(1.8 mg/kg)对去卵巢导致的骨质疏松大鼠的治疗作用,与激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨形成相关。     

去卵巢大鼠骨组织的变化

目的:观察去卵巢对大鼠骨组织的改变,以建立妇女绝经后骨质疏松的动物模型。方法:选用3月龄SD雌性大鼠16只,随机分为对照组和去卵巢组。去卵巢组大鼠的双侧卵巢被切除,对照组做假手术,持续90天。用骨矿测定仪测量大鼠股骨的骨密度及在半自动图像分析仪观测胫骨近端骨小梁的静、动态指标,并在扫描电镜下观察大鼠股骨松质骨结构的改变。结果:与对照正常组比较,去卵巢组大鼠股骨的远端的骨密度降低(P<0.05)。胫骨骨小梁的面积减少,骨小梁间隙增大。股骨的骨小梁变少,变细,断裂,连接不紧密,表面常见骨吸收形成的陷窝。结论:用切除卵巢的方法造成雌激素缺乏,导致骨质疏松,作为研究因绝经引起的原发性骨质疏松的可靠动物模型。     

去卵巢大鼠骨组织的变化

目的:观察去卵巢对大鼠骨组织的改变,以建立妇女绝经后骨质疏松的动物模型。方法:选用3月龄SD雌性大鼠16只,随机分为对照组和去卵巢组。去卵巢组的大鼠的双侧卵巢被切除,对照组做假手术,持续90天。用骨矿测定仪测量大鼠股骨的骨密度及在半自动图像分析仪观测胫骨近端骨小梁的静、动态指标,并在扫描电镜下观察大鼠股骨松质骨结构的改变。结果:与对照组比较,去卵巢组大鼠股骨远端的骨密度明显降低。胫骨骨小梁的面积减少,骨小梁间隙增加。股骨的骨小梁减少,变细,断裂,连接不紧密,表面常见骨吸收形成的陷窝。结论:用切除卵巢的方法造成雌激素缺乏,导致骨质疏松,是研究因绝经引起原发性骨质疏松的可靠动物模型。     

仙珍骨宝干预泼尼松诱发大鼠的骨丢失

背景：仙珍骨宝胶囊由蛇床子、淫羊藿等制成,对糖皮质激素、维甲酸等诱发的骨质疏松有一定的预防作用。 目的：建立泼尼松诱发大鼠骨质疏松模型,通过骨形态计量学和骨生物力学等方法探讨仙珍骨宝对大鼠不同部位骨骼的影响。 方法：32只SD大鼠随机分成对照组、模型组和仙珍骨宝高、低剂量组。后3组给予泼尼松3.5 mg/(kg•d)灌胃建立骨质疏松模型。仙珍骨宝高、低剂量组大鼠在泼尼松灌胃1 h后给予仙珍骨宝胶囊0.95 g/(kg•d)、0.475 g/(kg•d)。 结果与结论：与对照组比较,模型组大鼠股骨骨密度、弹性载荷、最大载荷和断裂载荷均下降,胫骨上段动态参数标记周长百分数、骨表面形成率、骨转换率均降低,但静态参数骨小梁面积百分数、骨小梁数量、骨小梁厚度和骨小梁分离度无明显变化。胫骨中段皮质骨形态计量学参数均无明显变化。与模型组比较,仙珍骨宝高剂量组股骨密度、骨生物力学参数,胫骨上段标记周长百分数、骨表面形成率和骨转换率增加,但胫骨中段的骨形态计量学参数无明显变化。与模型组比较,仙珍骨宝低剂量组各项参数均无明显变化。提示高剂量仙珍骨宝促进骨形成,可预防泼尼松所致大鼠股骨骨密度及生物力学的降低,但对胫骨中段皮质骨无明显影响。     

绝经后骨质疏松症模型体视学测量和机理初探

目的:观测去势术后大鼠骨组织体视学的改变,复制绝经后骨质疏松症的动物模型,初步探讨骨质疏松症的发病机制。方法:将31只3月龄雌性SD大鼠随机分为卵巢切除术组(OVX)和假手术组(sham),术后28d和56d分别处死。测量子宫湿重,骨矿物密度(BMD)和骨组织形态计量参数,分析骨组织微结构的变化。结果:OVX组术后28d和56d大鼠子宫湿重和股骨远端1/3处骨密度均显著少于sham组(P＜0.05);OVX组股骨远端和胫骨近端的干骺端骨小梁面积百分率显著少于sham组(P＜0.01)。结论:卵巢切除术后大鼠股骨远端骨矿物密度和骨组织形态计量学参数稳步下降,胫骨近端骨矿物密度和骨组织形态计量学参数迅速下降而且不稳定;雌激素减少导致的骨质疏松主要发生在长骨的干骺端,骨骺受影响较少;骨组织形态计量参数中骨小梁面积百分比敏感性和稳定性较高。     

中等强度跑台运动对去卵巢大鼠股骨头骨松质结构的影响

目的:观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠股骨头骨松质结构的影响,探讨运动对绝经期妇女骨质疏松的预防作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、去卵巢手术组、雌激素对照组和运动组。假手术组进行模拟手术不切除卵巢,其余各组行双侧卵巢切除术。手术2周后开始为期8周的干预治疗。雌激素对照组用尼尔雌醇治疗,运动组按要求进行运动。治疗结束后取股骨头骨松质进行树脂包埋及体视显微观察并进行骨组织形态计量学分析。结果:运动组的骨小梁面积、骨小梁厚度、骨小梁数量明显高于去卵巢手术组,骨小梁分离度、骨小梁游离末端数显著低于去卵巢手术组。结论:中等强度运动可以抑制去卵巢导致的大鼠股骨头骨松质骨量的丢失,确保其骨结构的维持,保证其正常的骨强度。     

脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基联合骨形态发生蛋白2治疗去卵巢大鼠骨质疏松症

文题释义： 骨质疏松症：是由多种原因引起的老年性骨病。通常由于骨量下降、骨的细微结构发生改变,导致骨脆性增加,易发生骨折,好发于胸、腰椎椎体、桡骨远端及股骨上端等。骨质疏松可发生在任何年龄和任何性别,但通常多发生于绝经后妇女和老年男性。 RANKL/OPG：骨重建需要骨形成和骨吸收之间的精确平衡,RANKL/OPG在骨重建中起着至关重要的作用。RANKL是一种细胞因子,可诱导祖细胞分化为成熟的破骨细胞。OPG通过与RANKL结合而成为诱骗受体。因此,RANKL/OPG的比例是维持骨形成和骨吸收之间平衡的关键。 背景：脂肪间充质干细胞分泌各种骨重塑需要的细胞因子和生长因子,被认为是骨再生的优良候选细胞。骨形态发生蛋白2与脂肪间充质干细胞对骨再生有协同作用,并能显著增强脂肪间充质干细胞的成骨分化作用。 目的：探讨脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基与骨形态发生蛋白2联合应用对大鼠绝经后骨质疏松症的影响。 方法：8-10月龄雌性SD大鼠75只,随机取60只采用卵巢切除方法建立绝经后骨质疏松症大鼠模型,余15只进行假手术,未切除卵巢。将60只造模成功大鼠随机分为4组：骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组、联合治疗组,通过尾静脉分别注射DMEM培养基、脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基、骨形态发生蛋白2、脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基联合骨形态发生蛋白2。治疗12周,取各组大鼠股骨和血清,组织学观察骨小梁数量和结构以及骨小梁间距,ELISA检测血清P1NP、ALP、TRAP、OPG、RANKL水平,Western blot、Realtime PCR检测RANKL、OPG蛋白和mRNA水平,细胞因子芯片分析脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基中细胞因子水平。 结果与结论：①与假手术组相比,骨质疏松症组大鼠的骨小梁间距扩大,骨小梁数量明显减少,骨小梁失去正常结构并且不连续。与骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组比较,联合治疗组大鼠骨小梁间距扩大较少,骨小梁结构更完整、更连续;②与骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组比较,联合治疗组大鼠血清P1NP和ALP水平显著升高(P < 0.05),血清TRAP水平显著降低(P < 0.05);③与骨质疏松症组、条件培养基组、骨形态发生蛋白2组比较,联合治疗组RANKL/OPG比值显著降低(P < 0.01),从而促进更多的骨形成;④脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基含有多种与骨形成密不可分的细胞因子,包括骨形态发生蛋白4和7、白血病抑制因子、脑源性神经营养因子、骨保护素、胰岛素样生长因子1等;⑤结果表明,脂肪间充质干细胞成骨分化条件培养基与骨形态发生蛋白2联合应用可减轻卵巢切除大鼠骨质疏松,可能成为治疗绝经后骨质疏松症的新方案。 ORCID: 0000-0003-0552-4818(杨九杰) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

补骨脂提取物干预骨质疏松模型大鼠骨密度及骨生物力学的变化

文题释义： RANKL/OPG通路：核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB Ligand,RANKL)/骨保护蛋白在维持成骨与破骨的动态平衡,调节骨代谢功能方面发挥着重要作用。RANKL 可与破骨细胞前体细胞膜表面的核因子κB受体活化因子结合,促进破骨细胞分化和激活,抑制其凋亡,最终促进骨吸收;骨保护蛋白作为RANKL的天然抗体,可与RANKL直接结合,竞争性抑制核因子κB受体活化因子与其的结合,进而抑制破骨细胞分化、成熟,最终抑制骨吸收。生理状态下,体内RANKL与骨保护蛋白的表达保持一定的比例,若二者表达比例失衡,则会造成骨代谢紊乱,导致骨相关疾病发生。 骨生物力学：是骨组织在外力作用下的力学生物学效应,对其进行检测可直接评价骨质量,是评价各种治疗骨丢失措施的最佳方案,其检测指标包括弹性模量、最大载荷、屈服载荷等。 背景：地塞米松作为一种糖皮质激素,长期应用会破坏成骨与破骨的动态平衡,降低骨密度,损伤骨生物力学,调控核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)/骨保护蛋白通路可能影响地塞米松诱导的骨质疏松症大鼠骨密度及骨生物力学。 目的：探讨基于RANKL/骨保护蛋白通路研究补骨脂提取物对地塞米松诱导骨质疏松症大鼠骨密度及骨生物力学的影响。 方法：SPF级Wistar大鼠肌肉注射地塞米松,建立骨质疏松大鼠模型。选择1×10⁷ TU/mL浓度的慢病毒载体进行实验。将模型大鼠随机分为模型组、空载组(空慢病毒载体)、骨保护蛋白沉默组(含骨保护蛋白基因干扰片段的慢病毒载体)、补骨脂提取物组、补骨脂提取物+骨保护蛋白沉默组,每组12只,另取12只正常大鼠设为对照组。药物处理后,采用骨密度仪测定大鼠左侧股骨骨密度,采用力学实验测试机测定大鼠右侧股骨生物力学指标弹性模量、最大载荷、屈服载荷,测定大鼠股骨骨矿物盐含量,酶联免疫吸附法检测血清中RANKL、骨保护蛋白水平,蛋白免疫印迹法检测骨组织中RANKL、骨保护蛋白表达水平。实验方案经青海大学医学院动物实验伦理委员会批准(批准号为2017081501) 结果与结论：①大鼠骨密度、弹性模量、最大载荷、屈服载荷、骨矿物盐含量、血清中骨保护蛋白水平、骨组织中骨保护蛋白表达：模型组较对照组降低,骨保护蛋白沉默组较模型组降低,补骨脂提取物组较模型组升高,补骨脂提取物+骨保护蛋白沉默组较骨保护蛋白沉默组升高,较补骨脂提取物组降低(均P < 0.05);②大鼠血清中RANKL水平、骨组织中RANKL蛋白表达结果显示,模型组较对照组升高;骨保护蛋白沉默组较模型组升高,补骨脂提取物组较模型组降低,补骨脂提取物+骨保护蛋白沉默组较骨保护蛋白沉默组降低,较补骨脂提取物组升高(均P < 0.05);③模型组与空载组两组间各指标比较无明显变化(P > 0.05);④结果说明,补骨脂提取物可提高地塞米松诱导骨质疏松症大鼠的骨密度,改善其骨生物力学,可能是通过上调骨保护蛋白表达,下调RANKL表达实现的。 ORCID: 0000-0001-9896-6214(周倚墨) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

补肾补骨汤治疗绝经后骨质疏松症的疗效及分子机制

目的:明确补肾补骨汤(BuShenBuGuTang,BSBGT)治疗绝经后骨质疏松症的分子机制。方法:SD成年雌鼠分为阴性对照组、去势组、中药治疗组和雌激素治疗组4组,12周后检测4组骨密度、骨形态计量学参数及I型胶原的变化并比较各组间差异。体外实验采用大鼠骨髓基质细胞的原代培养体系,加用不同药物处理后,用半定量RT-PCR方法检测破骨细胞分化因子和护骨因子的变化情况。结果:补肾补骨汤对SD大鼠上述3项指标的维持具有明显的效果,而且在体外可明显地抑制破骨细胞分化因子的表达和促进护骨因子的表达。结论:补肾补骨汤对于绝经后骨质疏松症有明显的治疗作用,是通过调节破骨细胞分化因子和护骨因子的表达和分泌而发挥作用的。     

自拟补肾活血颗粒对去卵巢骨质疏松症大鼠的治疗作用

目的:观察自拟补肾活血颗粒(MBHG)对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法:雌性SD大鼠,随机取10只作为假手术组(sham组),其余大鼠制备去卵巢骨质疏松症,随机分为:模型(model)组;补肾活血颗粒高(200 mg/kg)、中(100 mg/kg)、低(50 mg/kg)剂量组;阳性对照组(戊酸雌二醇组)。每组10只,连续灌胃给药12周。观察大鼠骨小梁形态,测量骨小梁的面积、厚度、间距及面积百分数,全自动分析仪检测血清中钙、磷和碱性磷酸酶(ALP)含量,测量大鼠骨密度(BMD),ELISA法检测血清雌激素(E2)、骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子(RANK)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平。结果:与模型组比较,各给药组骨小梁显著变宽,数目增多,网状结构有部分恢复。各给药组骨小梁厚度、骨小梁面积和骨小梁面积百分数均大于模型组,骨小梁间距均小于模型组(P0.05)。各给药组血清中钙、磷、E2、OPG以及股骨BMD水平均显著高于模型组,ALP、BGP、RANK和RANKL水平均显著低于模型组(P0.01)。结论:自拟补肾活血颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症有显著的治疗作用。作用机制可能与上调OPG、抑制RANKL分泌有关。     

Therapeutic effects of Radix Dipsaci, Pyrola Herb, and Cynomorium Songaricum on bone metabolism of ovariectomized rats

ABSTRACT: BACKGROUND: It is not yet determined whether herbs can be used as alternative medicines for therapy of osteoporosis. The objective of this study was to evaluate the effects of herbal medicines, such as Radix Dipsaci (RDD), Pyrola Herb (PHD), and Cynomorium songaricum decoction (CSD), on osteoporotic rats induced by ovariectomy (OVX). METHODS: OVX or sham operations were performed on 69 virgin Wistar rats that were divided into six groups: sham (sham, n = 12), OVX control group (OVX, n = 12), and OVX rats with treatments (diethylstilbestrol, DES, n = 12; RDD, n = 11, PHD, n = 11, and CSD, n = 11). Non-surgical rats served as normal control (NC, n = 12). The treatments began four weeks after surgery and lasted for 12 weeks. Bone mass and bone turnover were analyzed by histomorphometry. Levels of protein expression and mRNA of OPG and RANKL in osteoblasts (OB) and bone marrow stromal cells (bMSC) were evaluated by immunohistochemistry and in situ hybridization. RESULTS: Compared to NC and sham rats, trabecular bone formation was significantly reduced in OVX rats, but restored in DES-treated rats. Treatment with either RDD or PHD enhanced trabecular bone formation remarkably. No significant change of bone formation was observed in CSD-treated rats. OPG expression of protein and mRNA was reduced significantly in OB and bMSC of OVX control rats. RANKL expression of protein and mRNA was increased significantly in OB and bMSC of OVX control rats. These effects were substantially reversed (increased in OPG and decreased in RANKL) by treatment with DES, RDD, or PHD in OB and bMSC of OVX rats. No significant changes in either OPG or RANKL expression were observed in OB and bMSC of OVX rats treated with CSD. CONCLUSIONS: Our study showed that RDD and PHD increased bone formation by stimulating overexpression of OPG and downregulation of RANKL in OB and bMSC. This suggests that RDD and PHD may be used as alternative therapeutic agents for postmenopausal osteoporosis.     

Association between osteoprotegerin (OPG), receptor activator of nuclear factor-kappaB (RANK), and RANK ligand (RANKL) gene polymorphisms and circulating OPG, soluble RANKL levels, and bone mineral density in Korean postmenopausal women

OBJECTIVE: To investigate the association between osteoprotegerin (OPG), receptor activator of nuclear factor-kappaB (RANK), and RANK ligand (RANKL) gene polymorphisms and circulating OPG, soluble RANKL (sRANKL) levels, and bone mineral density (BMD) in Korean postmenopausal women. DESIGN: The OPG gene A163G, G209A, T245G, and G1181C polymorphisms, the RANK gene C421T and C575T polymorphisms, and the RANKL rs12721445 and rs2277438 polymorphisms were analyzed in 385 Korean postmenopausal women. Levels of serum OPG, soluble RANKL, osteocalcin, C-telopeptide of type I collagen, parathyroid hormone, calcium, and phosphorus and BMD at the lumbar spine and femoral neck were measured. RESULTS: The A163G, G209A, and T245G polymorphisms in the OPG gene were in complete linkage. The RANK C421T and C575T polymorphisms and the RANKL rs12711445 polymorphism were not observed. An association with BMD was found only for the OPG G1181C polymorphism, and BMD at the lumbar spine in women with the CC genotype was significantly higher than in women with the GC or GG genotype, with a C allele dose effect. In itself, the RANKL rs2277438 polymorphism was not related to BMD, but by combining the RANKL genotypes with the GC genotypes of the OPG G1181C polymorphism, the association with BMD at the lumbar spine became significant. No significant differences in the levels of any biochemical marker among genotypes of these polymorphisms were found. CONCLUSIONS: The OPG gene G1181C polymorphism, alone and in combination with the RANKL rs2277438 polymorphism, was identified as a genetic factor associated with BMD of the lumbar spine in Korean women.     

OPG／RANKL在大鼠骨关节炎模型中的表达及意义

目的：检测骨保护素（OPG）和核因子Kβ受体活化因子配体（RANKL）在大鼠骨关节炎（OA）模型软骨下骨中的表达,探讨其与OA软骨下骨病变的关系及意义。方法：36只大鼠分两组。模型组行右膝前交叉韧带＋内侧副韧带横断术造模,对照组仅切开关节囊。术后2,6,8周取两组膝关节标本,观察外观、Mankin评分和骨形态计量参数变化,并检测软骨下骨中OPG和RANKL含量及其比值。结果：模型组软骨Mankin评分随时间逐渐增加（P〈0．01）;骨形态计量学显示造模后2周骨量降低,6、8周增加（P〈0．05）;模型组OPG含量由低变高,RANKL含量则由高变低,其比值逐渐增加（P〈0．01）。结论：OPG、RANKL在OA软骨下骨异常重建中起着重要作用。由此推测,在OA早期对其调控可能抑制异常骨重建,将是治疗OA的一种潜在有效方法。     

Self-emulsified annatto tocotrienol improves bone histomorphometric parameters in a rat model of oestrogen deficiency through suppression of skeletal sclerostin level and RANKL/OPG ratio

Menopause is the leading cause of osteoporosis for elderly women due to imbalanced bone remodelling in the absence of oestrogen. The ability of tocotrienol in reversing established bone loss due to oestrogen deficiency remains unclear despite the plenitude of evidence showcasing its preventive effects. This study aimed to investigate the effects of self-emulsified annatto tocotrienol (SEAT) on bone histomorphometry and remodelling in ovariectomised rats. Female Sprague Dawley rats (n=36) were randomly assigned into baseline, sham, ovariectomised (OVX) control, OVX-treated with annatto tocotrienol (AT) (60 mg/kg), SEAT (60 mg/kg) and raloxifene (1 mg/kg). Daily treatment given through oral gavage was started two months after castration. The rats were euthanised after eight weeks of treatment. Blood was collected for bone biomarkers. Femur and lumbar bones were collected for histomorphometry and remodelling markers. The results showed that AT and SEAT improved osteoblast numbers and trabecular mineralisation rate (p<0.05 vs untreated OVX). AT also decreased skeletal sclerostin expression in OVX rats (p<0.05 vs untreated OVX). Similar effects were observed in the raloxifene-treated group. Only SEAT significantly increased bone formation rate and reduced RANKL/OPG ratio (p<0.05 vs untreated OVX). However, no changes in osteoclast-related parameters were observed among the groups (p>0.05). In conclusion, SEAT exerts potential skeletal anabolic properties by increasing bone formation, suppressing sclerostin expression and reducing RANKL/OPG ratio in rats with oestrogen deficiency.     

聚甲基丙烯酸甲酯颗粒对人滑膜细胞核因子κB受体激动剂配体/骨保护蛋白表达的影响

背景：多种因子可以影响骨保护蛋白/核因子κB受体激动剂配体/核因子κB受体激动剂(Osteoprotegerin / receptor activator of nuclear factor-kappaB/ligand of receptor-activator of nuclear factor-kappaB,OPG/RANKL/RANK)系统的表达影响骨代谢,那么松动假体周围的骨水泥颗粒是否也通过影响其代谢参与假体松动过程？ 目的：观察聚甲基丙烯酸甲酯颗粒对人滑膜细胞RANKL/OPG表达的影响。 方法：体外培养人滑膜细胞,在滑膜细胞培养体系中分别加入质量浓度为0(空白对照),0.2,1,10 g/L的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥颗粒,采用荧光定量PCR检测上述各浓度PMMA颗粒作用不同时间后滑膜细胞内RANKL、OPG的表达量及其比值。 结果与结论：与空白对照组相比,各实验组滑膜细胞内RANKL、OPG的表达量均有下降;随着与聚甲基丙烯酸甲酯颗粒共培养时间延长,各实验组滑膜细胞内RANKL、OPG表达均有下降趋势,而RANKL/OPG表达比值无明显变化。说明聚甲基丙烯酸甲酯颗粒在对滑膜细胞产生生物学反应时并不干扰假体周围骨代谢的动态平衡,并未直接参与人工关节假体的无菌性松动。     

三七总皂苷干预股骨头缺血性坏死兔成骨细胞护骨素基因的表达

背景：前期研究已明确三七总皂苷能抑制乙醇诱导的兔骨髓基质干细胞成脂分化。 目的：进一步观察三七总皂苷对兔成骨细胞的增殖和分化以及骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA表达的影响。 方法：白酒灌胃4周制备新西兰兔股骨头缺血坏死模型,随机分为生理盐水组、复方骨肽组和三七总皂苷组。通过组织块培养法提取各组兔成骨细胞,检测细胞的分化,骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体基因表达情况,检测各目的基因杂交信号的强弱。 结果与结论：三七总皂苷组兔碱性磷酸酶活性、钙结节计数及骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体的表达强度、骨保护素mRNA/细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA均高于生理盐水组(P < 0.01);与复方骨肽组效果接近。证实三七总皂苷能够促进兔成骨细胞的增殖和分化,并能提高成骨细胞的骨保护素mRNA的相对表达量而对其细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA有抑制作用。     

椎体骨微结构参数与椎弓根螺钉固定强度的相关性

目的 测量不同骨密度（bone mineral density, BMD）条件下椎体松质骨显微结构参数,并与椎弓根螺钉拔出力作相关性分析,以了解与螺钉稳定性相关的骨显微结构参数,进一步明确螺钉松动的原因。方法 采用新鲜尸体脊柱标本,根据BMD检测结果,按临床诊断标准分为骨质正常、骨量减少、骨质疏松和重度骨质疏松4个水平。然后植入椎弓根螺钉,进行螺钉轴向拔出实验,测定最大拔出力（maximum pullout strength, MPS）。收集螺钉拔出实验后椎体标本,在椎体中央部钻取松质骨柱状样本,对样本进行显微CT扫描,获取椎体松质骨显微结构参数,并进行各项指标的不同BMD水平间的比较分析,在了解这些指标随骨质疏松程度加重的变化规律的基础上,再对骨显微结构参数与所对应的螺钉MPS开展相关性分析。结果BMD水平从正常下降到重度疏松程度,MPS随之显著性下降。随BMD水平的依梯次下降,即骨质疏松程度进行性加重,椎体松质骨显微结构参数发生相应明显变化,存在BMD水平间的显著性差异。广泛的相关性存在于BMD、显微CT参数和螺钉MPS指标之间。其中,螺钉MPS与显微CT扫描所得的骨体积分数（BV/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）和小梁间隙（Tb.Sp）呈高度相关性。结论 随BMD下降,骨组织会同时发生质的退变;螺钉MPS与部分骨显微结构参数高度相关。