微型葡萄糖微传感器的研制及其应用

目的：研究微型葡萄糖传感器的制备与电化学性能。方法：以注射用不锈钢针作壳体，碳纤维束作基质电极，二茂铁作电子传递体，用新鲜蛋清加戊二醛固定葡萄糖氧化酶和酶介体，制备电流式葡萄糖微型传感器。结果：传感器的外径可小至0．35mm，实现工作电极、参比电极和辅助电极一体化。结论：响应时间小于5S，检测的线性范围为0．02－15mmol/L,11次平行测试的相对标准偏差为2．9％，25℃放置3个月，酶活性仍为原来的75％。室温25℃下，该传感器在2个月内连续测试，电流响应基本上保持不变。该传感器对葡萄糖具有良好的电化学响应。     

葡萄糖敏感型聚合物胶体晶体水凝胶的研究

在聚丙烯酰胺水凝胶链段上引入葡萄糖分子,同时在水凝胶内嵌入聚苯乙烯胶体晶体,制备了葡萄糖敏感型聚丙烯酰胺胶体晶体膜。伴刀豆球蛋白可与葡萄糖分子偶合而在聚合物链段间形成交联,水凝胶体积收缩,胶体晶体带隙蓝移约30 nm。相对于固定在聚丙烯酰胺链上的葡萄糖分子,伴刀豆球蛋白与游离葡萄糖分子的偶合常数更大,游离葡萄糖可打断已形成于聚合物链上的葡萄糖与伴刀豆球蛋白间的交联,胶体晶体带隙红移。研究表明:该胶体晶体水凝胶可检测最低葡萄糖浓度为5 mmol/L,且离子强度(50 mmol/L NaCl溶液)对葡萄糖浓度分析时带隙位移没有影响。     

基于二茂铁/纳米金修饰碳糊电极的葡萄糖生物传感器

在碳糊电极上利用溶胶-凝胶法固定葡萄糖氧化酶,并用金纳米颗粒进行修饰,二茂铁作为电子传递介质,制作用于测量人体血浆中葡萄糖的生物传感器。实验结果表明:制得的葡萄糖传感器的响应时间仅为3 s,线性测量范围为3.4~17.7 mmol/L,通过金纳米颗粒的修饰,增大了检测的线性范围,提高了传感器的灵敏度,葡萄糖传感器的灵敏度从42.48μA/(mol.L-1)提高到1.157 6 mA/(mol.L-1)。     

中酯化度果胶离子络合复合物凝胶对葡萄糖迁移的影响

通过控制中酯化度果胶多糖溶液pH、多价离子浓度以及对凝胶-溶胶温度曲线的测定,研究其凝胶敏感特性和可逆性能.利用中酯化度果胶多糖的凝胶特性,以体外模拟实验研究不同凝聚态多糖体系中葡萄糖的生成和迁移行为.结果表明:中酯化度果胶多糖具有酸敏感、多价离子敏感等凝胶特性,且其凝胶具有温度可逆性.在降低葡萄糖迁移速率和降低淀粉生成葡萄糖速率两方面,中酯化度果胶钙凝胶体系效果较其他体系明显,并且使生成葡萄糖呈均化释放.     

丙烯酰胺和葡萄糖烯丙基酰胺共聚水凝胶的合成与性能

用葡萄糖内酯与烯丙基胺反应制备了葡萄糖烯丙基酰胺单体（AAG），然后与丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺共聚得到含糖结构的水凝胶，研究了交联剂浓度和单体配比对共聚合的影响，用红外光谱和热重分析对其结构和热稳定性进行了表征，并计算了干凝胶的热分解活化能，研究了温度、盐的浓度，溶液的PH值及蛋白质对水凝胶的膨胀比的影响，结果发现水凝胶的膨胀比随着温度的提高或盐浓度的增大而略有增加，在高或低的PH时膨胀比由于糖组分的水解也有一定的增加，水凝胶在蛋白质丰在时发生收缩，表明二者发生了键合作用。     

肌苷葡萄糖注射液半成品含量的测定

目的:建立肌苷葡萄糖注射液半成品的含量测定方法。方法::肌苷的含量采用紫外分光光度法,用葡萄糖溶液作空白,在248nm波长处检测;葡萄糖的含量用肌苷溶液作空白,采用旋光法测定。结果:此方法与成品检测方法相比,结果无显著差异。结论:该法简便,快速,可做为肌苷葡萄糖注射液生产中半成品的测定方法。     

基于石墨烯/氮化镓肖特基异质结的葡萄糖传感特性研究

目的：利用石墨烯/氮化镓肖特基异质结构建一种新型的葡萄糖传感器,并对其灵敏度、线性检测范围、最低检出限和选择性等传感特性进行深入研究。方法：通过转移工艺将单层石墨烯覆盖于氮化镓单晶表面形成肖特基异质结构,将不同浓度葡萄糖溶液滴加到石墨烯表面并干燥后,利用探针台测量葡萄糖/石墨烯/氮化镓体系的电流-电压曲线,并获得开启电压,从而建立葡萄糖浓度和开启电压的对应关系。基于该对应关系可拟合得到标准曲线,并可计算出传感器的灵敏度、线性检测范围和最低检出限等传感参数,进一步将刀豆蛋白A分子修饰在石墨烯表面,实现石墨烯/氮化镓肖特基异质结对于复杂体系中葡萄糖浓度的选择性检测。结果：该新型葡萄糖传感器的标准曲线为U=0.223 63+1.899 68×10^-4C、灵敏度为189.968 V·M^-1、最低检出限为0.330μM、线性检测范围为1～1 000μM、7次重复实验的相对标准差为2.89%、15天前后实验的相对标准差为0.03‰、刀豆蛋白A分子修饰样品表面后各干扰物质的影响程度均低于1.50%。结论：石墨烯/氮化镓肖特基异质结传感器是一种基于开启电压这...     

聚邻苯二胺嵌合葡萄糖氧化酶电极的研制

目的　研制具有消除抗坏血酸干扰的电流型葡萄糖传感器。方法　用电化学法聚合邻苯二胺膜于铂电极上 ,并将葡萄糖氧化酶嵌合其中 ,制成电流型葡萄糖传感器。结果　该传感器对葡萄糖有很好的灵敏度、响应性、线形性、稳定性和抗抗坏血酸干扰性 ,灵敏度为 0 .3 9mA·mmol- 1 ·L- 1 ,响应时间 5s ,线性范围是 3 .5～ 7.5mmol L ,稳定性为 2 5d ,抗坏血酸浓度低于 80 μmol L时 ,对葡萄糖的测定结果均无明显影响 (P >0 .0 5 )。 结论　该传感器可有效地消除抗坏血酸的干扰 ,为研制实用型血糖检测仪奠定了基础。     

脂联素对大鼠肝细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响的研究

目的:探讨脂联素对体外培养大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响,及其在胰岛素抵抗中的意义.方法:以BRL肝脏细胞株为细胞模型,分别用10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml脂联素处理细胞,用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法检测大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性.结果:与对照组比较,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶在脂联素处理24h后活性明显降低,且随脂联素浓度升高作用越明显,P＜0.05.葡萄糖激酶在脂联素处理24小时后,活性与对照组比较没有显著性差异,P＞0.5.结论:脂联素对葡萄糖激酶无明显的调节作用,而对于磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶具有显著的抑制作用.脂联素通过对肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性的调节,降低肝脏葡萄糖异生,减少肝糖输出,改善胰岛素抵抗.     

白术多糖葡萄糖的含量测定

目的 :研究和分析测定白术多糖、葡萄糖的含量 .方法 :采用水提醇沉法提取白术多糖 ,用硫酸 苯酚法在 4 89.3nm处用紫外分光光度法测定 ,用酶法在 5 0 5nm处测定葡萄糖的含量 .结果 :浙江白术与怀化白术多糖含量差异较大 ,测得结果平均回收率 10 3.1% ,RSD为 1.16 % .结论 :简便 ,快速 ,准确 ,可靠 ,可用于不同产地白术的鉴别和质量控制     

A novel biosensor for the rapid determination of biochemical oxygen demand

Objective To investigate the function of a novel biosensor used for the rapid determination of biochemical oxygen demand (BOD) which is developed by our research group based on suspended immobilized microbial cell system in a completely mixed determining chamber as a substitute of the traditional membrane system. Methods Activated sludge was immobilized by PVA gel and used as a bio-sensing element. The novel biosensor was used to measure the short time BOD value and the conventional cultivation method was used for BOD5 measurement. Results A linear relationship was observed for the difference between the current and the concentration of glucose-glutamic acid (GGA) solution below 200 mg/L with a correlation coefficient of 0.995. The optimal response of the sensor was obtained at pH 7.0 and 30℃. The sensor response was within 15 min and was reproducible within ±5% of the mean in a series of eight samples containing 75 mg/L BOD using standard GGA solution. The novel sensor response was found to be fairly constant over a period of 30 days, with ±5% fluctuations. Conclusion A relatively good agreement is found between BOD estimated by the novel BOD biosensor and that determined by the conventional 5-day BOD method. This novel BOD biosensor has good sensitivity, stability and reproducibility.     

Development of a surface acoustic wave LB membrane immunity sensor

In the basic research and clinical diagnosis ofimmunology, traditional methods such as RIA,FIA and EIA suffer not only complicated operationand time wasting but also expensive materials. Soit is important to develop a new kind of biosensorwith fast response, high sensitivity and low costused for immunology. In recent years, a lot ofwork had been carried out in the developed countries and surface acoustic wave (SAW) immunological biosensor was considered to be one of thebest prospects[']. …     

微生物活细胞检测生物传感器的研究

目的：研究微生物活细胞在笔者研制的电化学生物传感器上的响应,探讨使用该生物传感器系统进行了微生物活细胞快速测量的可能。方法：设计、研制了能将微生物活细胞新陈代谢产生的电子转移转换为电流输出的电化学生物传感器,并设计、研制了单片计算机控制 恒温测量池的专用测定仪,研制了传感器对大肠杆菌、啤酒酵母、霍乱弧菌及卡介菌苗的响应,并实际测量了发酵罐中啤酒酵母菌总数及消毒鲜牛奶中的细菌总数。结果：传感器的电流     

A novel improved design for the first-generation glucose biosensor

A novel improved design for the first-generation glucose biosensor@Wang J     

Ang-1对高糖环境中猴脉络膜-视网膜内皮细胞单层通透性的影响

目的：利用猴脉络膜-视网膜内皮细胞建立内皮细胞（EC）单层模型,观察高浓度葡萄糖及血管生成素-1（Ang-1）对该模型通透性的影响．方法：待EC于孔径0．8μm的聚碳酸酯微孔滤膜上形成致密单层后分3组进行培养：对照组（DMEM培养基含25mmol／L葡萄糖）、高糖组（DMEM培养基含30mmol／L葡萄糖）、Ang-高糖组（DMEM培养基含30mmol／L葡萄糖＋0．25mg／L Ang-1）．于1,3,5,7d4个时间点,以含白蛋白1g／L的D—Hanks液灌注滤膜,检测蛋白质渗透压反射系数（8）及滤过系数（K1）;并于5d和7d利用琼脂糖凝胶电泳检测DNAladder．结果：3,5,7d时,高糖组EC单层的通透性高于对照组（P〈0．01）;Ang-高糖组与对照组之间EC单层的通透性无差异（P〉0．05）．高糖组EC的琼脂糖凝胶电泳在5d及7d均出现DNA ladder,对照组及Ang-高糖组未见DNA ladder．结论：高糖能够促进细胞凋亡,增加EC单层通透性;Ang-1能抑制EC的凋亡,对抗高糖所致的EC单层通透性增高．     

大鼠INS-1细胞中IGFBP-2 mRNA的表达调控

目的:研究大鼠胰腺肿瘤β-细胞(INS-1)中,葡萄糖(Glucose)、胰岛素(Insulin)和生长激素(GH)对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)基因的表达调控,探索IGFBP-2基因调节机制及其在维持正常胰腺细胞生理功能中的作用.方法:RNA印迹法(Northern blotting)检测INS-1细胞IGFBP-2 mRNA的表达,酶标法测定INS-1细胞胰岛素分泌量.结果:葡萄糖对IGFBP-2 mRNA调节作用不同;高浓度(10mmol/L)葡萄糖条件下,胰岛素分泌量增加,而IGFBP-2mRNA表达被抑制;低浓度(1～5.6 mmol/L)葡萄糖条件下,胰岛素分泌量无显著性变化,IGFBP-2 mRNA正常表达.INS-1细胞在不完全培养液中,加入GH培养,在不同时间间隔提取培养液进行IGFBP-2 mRNA检测,结果发现,培养16 h以上,IGFBP-2 mRNA表达开始显著下降.外源胰岛素抑制IGFBP-2 mRNA的表达.结论:葡萄糖和生长激素对INS-1细胞中IGFBP-2 mRNA表达的抑制作用是通过胰岛素调控的.     

新型漏声表面波生物传感器液相检测条件的实验研究

目的探讨漏声表面波生物传感器液相检测系统的影响因素.方法构建检测和参比双路延迟线,并观察在不同影响因素如离子浓度、缓冲液pH值及不同粘度的甘油PBS溶液中两路延迟线的相位变化规律.结果检测延迟线声表面波信号的相位值随溶液粘度、离子浓度、pH值的增大而发生明显的变化,而参比通道的相位曲线变化不明显.＃结论成功构建了漏声表面波生物传感器液相检测检测技术平台,并探索了溶液的粘度、离子浓度、pH等因素对传感器的影响.     

异氟醚或异丙酚麻醉对血糖及胰岛素浓度的影响

目的 :观察颅脑手术中吸入异氟醚麻醉或静注异丙酚麻醉静脉血血糖及胰岛素浓度的变化。方法 :30例颅内肿瘤切除术病人随机分为异氟醚组与异丙酚组 ,每组 15例。两组诱异用药相同 ;麻醉维持分别为异丙酚或异氟醚。于诱异前、插管后、麻醉维持 30min及 6 0min采静脉血 ,测定血糖和胰岛素浓度。结果 :异丙酚组各时点血糖、异氟醚组各时点胰岛素浓度无显著变化 ;异氟醚组血糖浓度在麻醉后 30及 6 0min明显升高 (P <0 .0 5及P <0 .0 1) ,异丙酚组胰岛素浓度在麻醉后 6 0min显著升高 (P <0 .0 5 )。结论 :异氟醚麻醉下血糖显著升高 ,而异丙酚麻醉血糖无显著变化 ,故异丙酚麻醉较适用于颅脑手术。     

霉酚酸酯对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：观察霉酚酸酯(mycophenolate mofetil MMF)对高糖环境大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cells MCs)增殖及Ⅳ型胶原的影响。方法：以30?mmol/L葡萄糖刺激体外培养的大鼠MCs增殖,加入不同浓度的MMF,采用MTT比色法观察6、12、24、48?h系膜细胞的增殖情况;放射免疫法测定细胞上清液中Ⅳ型胶原的含量。结果：葡萄糖对系膜细胞的增殖效应呈浓度和时间依赖性,反应最佳浓度为30?mmol/L,最佳时点为24?h。MMF有抑制高糖所致MCs增殖、减少细胞外基质的作用,并呈剂量时间依赖性。结论：高糖在一定浓度和一定时段内有刺激大鼠系膜细胞增殖的效应,MMF对高糖所致MCs增殖具有抑制作用,且随MMF剂量增大,作用时间的延长,抑制作用增强。     

cGMP对大鼠心肌细胞葡萄糖摄取的抑制作用

目的：观察大鼠心脏两种负荷状况时环化鸟苷一磷酸（cGMP）对心肌细胞摄取葡萄糖的影响。方法：应用cGMP类似物8-BrcGMP、一氧化氮合酶（NOS）抑制剂L-NAME和NO供体SNAP灌注Wistar大鼠心脏,并用放免法测定组织内cGMP浓度。根据2-^3H标记率计算葡萄糖摄取量。结果：低负荷状况时8-BrcGMP使冠脉血流增加,细胞内糖原浓度升高。高负荷状况时8-BrcGMP使心排出量减少,心肌细胞对葡萄糖摄取减少和使糖原浓度降低。L-NAME降低心肌细胞cGMP逍度,并刺激葡萄糖摄取,而SNAP作用则相反。结论：心肌细胞内cGMP浓度升高,可抑制葡萄糖摄取;而NOS抑制剂L-NAME则能降低cGMP浓度,使心肌细胞葡萄糖摄取增加,糖原分解减少,使缺血心肌功能受到保护。