钩吻提取物抗肿瘤作用的实验研究

目的 :探讨钩吻及其减毒后抗肿瘤的作用。方法 :以小鼠肉瘤180、小鼠肝癌为靶瘤 ,观察钩吻醇提物及其加玉叶金花混合提取物的抗肿瘤作用。并分别测定药物的半数致死量LD50 。结果 :钩吻醇提物(以生药计)0.45g/kg·d -1,0.11g/kg·d -1和钩吻 +玉叶金花混合提取物(以钩吻生药计)0.76g/kg·d -1,0.19g/kg·d -1 ,连续灌胃给药14天 ,对小鼠移植性肉瘤180实体型生长均有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01) ,但对小鼠移植性肝癌实体型生长抑制不明显。钩吻醇提物和钩吻 +玉叶金花混合提取物对小鼠的LD50 分别为2.23g/kg,7.64g/kg。结论 :钩吻醇提物具有一定的抗肿瘤作用 ,和玉叶金花混合提取后 ,即可保持疗效 ,又可降低毒性。     

钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白BCRP和药物代谢酶CYP3A11的影响

目的:钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和细胞色素P450 3A11(CYP3A11)的影响,探讨其配伍减毒的机制;同时添加核受体激活剂干预探讨核受体是否在该过程中有调节作用.方法:将C57BL/6小鼠分为空白组,钩吻组(GE组,0.25g·kg-1),钩吻配伍玉叶金花组(GE+MP组,0.25g...     

不同剂量赤芍对马钱子增效减毒作用影响的实验研究

目的:观察不同剂量赤芍对马钱子增效减毒作用影响,为临床中药合理配伍提供理论依据。方法:选择符合药典质量标准马钱子炮制品、赤芍生药为实验药材,采用急性毒性实验测定马钱子的LD50与不同赤芍-马钱子配比(2∶1、4∶1、8∶1、10∶1)的LD50,计算减毒率。采用镇痛实验分别观察马钱子、不同赤芍-马钱子配比对小鼠甩尾痛阈值及对小鼠扭体法扭体次数影响的差异,采用抗炎实验分别观察马钱子、不同赤芍-马钱子配比对小鼠耳廓肿胀影响差异。结果:马钱子混悬液的LD50为304.801mg/kg,LD50的95%的可信限为255.848~370.088 mg/kg;赤芍能够明显降低马钱子的毒性,且减毒率与加入的赤芍剂量呈正相关;马钱子组、赤-马(2∶1)组、赤-马(4∶1)组、赤-马(8∶1)组、赤-马(10∶1)组给药后痛阈值均明显高于空白对照组,P均0.05,扭体次数、肿胀度明显低于空白对照组,且赤-马(4∶1)组、赤-马(8∶1)组、赤-马(10∶1)扭体次数明显低于马钱子组,P均0.05,赤-马(10∶1)肿胀度明显低于马钱子组。结论:赤芍与马钱子配伍是科学、合理的,可达到增强镇痛、抗炎效果,降低毒副反应,起到减毒增效作用,可为临床有效、安全应用马钱子提供理论参考。     

赤芝双向固体发酵钩吻根前后的谱、效、毒研究

目的:考察赤芝菌对钩吻双向固体发酵的减毒存效作用及其化学成分变化。方法:选用药用赤芝菌,在一定条件下对钩吻进行双向固体发酵炮制;以钩吻生品为对照,观察发酵前后钩吻对小鼠急性毒性(LD50)的变化情况,并比较它们对醋酸腹腔刺激所致小鼠扭体作用及热板所致小鼠痛阈值的影响,HPLC考察其主要毒性生物碱含量的变化情况。结果:(1)钩吻生品的LD50为0.25 g/kg;经赤芝菌发酵30 d后,LD50为11.04 g/kg,较生品提高了44倍;(2)钩吻发酵后仍然保留镇痛药效,其小鼠最大安全给药量由生品0.08 g/kg,上升到6 g/kg,最大安全剂量提高了75倍。(3)经过双向发酵,钩吻原有毒性生物碱成分含量降低,并有多个新化学成分产生。结论:赤芝菌双向固体发酵对毒性中药钩吻具有减毒、存效的作用。     

当归-川芎配伍对小鼠原发性痛经的影响

目的:通过观察当归-川芎不同配比(1∶0,2∶1,1.5∶1,1∶1,1∶1.5,1∶2,0∶1)、不同制法(水提液、50%醇提液、先水提后95%醇提液)对痛经模型小鼠的影响,初步探讨当归、川芎药对的配伍用方机制。方法:采用原发性痛经模型小鼠,观察药物对小鼠30 min内扭体次数及对子宫匀浆中NO和Ca2+含量的影响。结果:不同制法当归、川芎药对,先水提后醇提液作用最强,醇提液次之,水提液最弱;不同配比当归、川芎药对,先水提后醇提液及醇提液的1.5∶1配比作用最强;其不仅能显著降低痛经模型小鼠的扭体次数,而且能显著增加子宫组织内NO含量,降低Ca2+含量。结论:当归-川芎配比用量不同,制法用法不同,对痛经模型小鼠的镇痛作用强度所呈现的趋势不同可能与其所溶出的效应物质有关。     

钩吻非生物碱不同极性部位的急性毒性实验研究

目的 观察钩吻非生物碱不同极性部位的急性毒性,为进一步开发充分利用钩吻药材提供依据.方法 用钩吻茎醇提取物制备非生物碱不同极性部位,经一次灌胃ICR小鼠,观察小鼠的毒性反应及死亡情况. 结果 钩吻乙醇总提取物取物的LD50为88.04 mg/kg.钩吻非生物碱的LD50为40.64 mg/kg.钩吻母液的LD50为4.09 g/kg.结论 钩吻非生物碱不同极性部位均具有一定毒性,毒性大小顺序为:非生物碱脂溶性部位,醇总提取物,非生物碱水溶性部分.     

马钱子苏木配伍前后急性毒性和镇痛作用实验研究

目的 :阐明马钱子与苏木(马苏)不同配比对毒性及镇痛作用的影响,寻求最佳比例。方法 :将小鼠随机分为空白组、马钱子组、马苏1∶2,1∶4,1∶6组,通过急性毒性实验,测得马钱子组和马苏不同配比组的LD50;通过冰醋酸所致小鼠扭体法和热板法观察马苏配伍前后镇痛作用的变化。结果:配伍组与马钱子组相比,毒性降低,以马苏1∶6减毒效果较佳。镇痛实验显示,配伍组优于马钱子组,以马苏1∶6镇痛作用较好。结论:苏木可降低马钱子毒性,并增强其镇痛作用,两者配伍可减毒增效,配比以马苏1∶6为宜。     

抵当汤减钩吻毒性的实验研究

目的观察抵当汤对钩吻的解毒作用。方法通过预实验确认钩吻致死量后,采用传统水煎煮和乙醇提取方式的抵当汤与钩吻,通过不同给药方式的毒性试验检测小鼠死亡情况;给药后小鼠眼球后静脉丛取血和肺组织取材,观察各组血常规、乙酰胆碱酯酶变化以及小鼠肺组织HE染色情况。结果急性毒性预实验结果显示:钩吻的Dm剂量为1.5 g/kg。急性毒性实验结果显示:钩吻配伍抵当汤后,小鼠死亡率均明显下降,且死亡时间亦明显延长(P0.05)。与空白组相比,钩吻组小鼠RBC、PLT、HGB、ACH与空白组比较呈显著性差异(P0.05),抵当汤钩吻混合液组小鼠RBC、PLT、HGB、ACH与钩吻组比较呈显著性差异(P0.05),而与空白组无差异。HE染色显示:钩吻抵当汤混合给药后小鼠肺组织细支气管、肺泡壁、肺间质中性粒细胞浸润伴充血减轻,肺泡壁毛细血管扩张不明显,肺泡腔渗出减少,肺组织局灶性实变消失。结论抵当汤能减缓钩吻毒性。     

灰绿黄堇总生物碱的抗炎镇痛作用及毒性观察

目的探讨灰绿黄堇总生物碱的抗炎镇痛作用及其动物毒性反应情况。方法小鼠热板法镇痛实验、小鼠扭体法镇痛实验、小鼠耳廓肿胀实验、小鼠毛细血管通透性实验和小鼠急性毒性实验。结果灰绿黄堇总生物碱能明显延长热板所致小鼠舔后足时间(P<0.05),明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数(P<0.05)、减轻二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.05),但对组胺所致小鼠毛细血管通透性增高无降低作用(P>0.05);小鼠口服半数致死量LD50为1.87 g.kg-1。结论灰绿黄堇总生物碱有较好的镇痛作用及部分抗炎作用,但也具有一定毒性。     

生川乌与不同比例生半夏配伍镇痛作用研究

目的 观察生半夏对生川乌镇痛作用的影响及与配伍比例的关系,为该反药对的配伍应用提供实验依据.方法 采用小鼠热板法(55℃)及酒石酸锑钾扭体法,分别ig给川乌与半夏按1∶0,1∶0.25,1∶0.5,1∶1配伍水浸剂0.311 g/kg体质量(以生川乌生药量计算),以小鼠痛阈和扭体次数为指标,评价半夏对川乌镇痛作用的影响及与半夏配伍比例的关系.结果 在55℃热板试验中,生川乌与生半夏1∶0,1∶0.25,1∶0.5,1∶1配伍组小鼠给药前后痛反应潜伏期之差分别为(4.05±1.92)s、(3.09±1.62)s、(2.74±1.94)s、(1.09±0.80)s均显著高于空白对照组(0.04±0.48)s,且差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).酒石酸锑钾所致扭体试验中,生川乌与生半夏1∶0、1∶0.25、1∶0.5、1∶1配伍组小鼠给药15min内的扭体反应次数(4.70±4.37)次、(9.30±6.70)次、(12.2±9.99)次、(14.20±7.30)次均显著低于空白对照组(22.40±12.73)次,且差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 随着生半夏比例的增加,生川乌的镇痛作用减弱,且有一定的剂量依赖关系.     

玉叶金花苷酸甲酯抗炎、镇痛、抑菌作用研究

目的研究玉叶金花苷酸甲酯的抗炎、镇痛、抑菌作用。方法以二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察其抗炎作用;通过醋酸致小鼠扭体实验及热板法实验观察其镇痛作用;研究玉叶金花苷酸甲酯对7种常见细菌的抑制效果,采用纸片扩散法观察抑菌圈直径,采用连续稀释法测定最低抑菌质量浓度(MIC)。结果玉叶金花苷酸甲酯的中、高剂量(0.10、0.15g/kg)能显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳肿胀度(P0.05);对于由醋酸引起的小鼠扭体反应,玉叶金花苷酸甲酯各剂量组与空白组比较,有显著性差异;在小鼠热板实验中,与空白对照组相比,玉叶金花苷酸甲酯中、高剂量(0.10、0.15g/kg)对热刺激引发的小鼠痛反应时间有明显的延长作用;玉叶金花苷酸甲酯对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌均有抑制作用,其MIC分别为2.5、10、0.312 5、1.25、1.25、10、0.625 mg/mL。结论玉叶金花苷酸甲酯具有明显的抗炎、镇痛及抗菌作用。     

胆汁混合蒸制前后钩吻成分差异及急性毒性研究

目的 探讨钩吻经胆汁混合蒸制前后成分及毒性的差异,旨在为钩吻减毒存效提供新的炮制方案。方法 采用胆汁混合蒸制法炮制钩吻,建立10个批次钩吻生品与胆汁蒸制品(胆钩吻)HPLC指纹图谱,采用层次聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)多元化统计分析方法钩吻生品与胆钩吻指纹图谱信息,筛选成分差异,通过小鼠急性毒性实验比较钩吻生品与胆钩吻急性毒性死亡率。结果 10批钩吻生品及胆钩吻HPLC指纹图谱中分别有15、17个共有色谱峰,其中12个峰为两者所共有,共有峰相似度分别为0.744～0.979、0.998～1.000;HCA分析结果表明10个批次钩吻生品与胆钩吻聚为2类;PCA结果显示建立的HPLC指纹图谱基本能客观反映10个批次钩吻生品与胆钩吻的样本信息;OPLS-DA结果显示钩吻素子、钩吻素己、胡蔓藤碱乙及2号未知物是差异成分,其中前3种成分在钩吻生品中含量较高,2号未知物在胆钩吻中含量较高;小鼠急性毒性实验结果表明钩吻生品致死量为0.2 g/kg,胆钩吻剂量为4 g/kg时小鼠死亡率为0%。结论 钩吻经胆汁炮制后成分及毒性差异显著,具有减毒作...     

基于PGF_(2α)浓度变化研究当归川芎对抗原发性痛经小鼠子宫组织痉挛的机制

目的从PGF2α浓度变化出发,研究当归-川芎对原发性痛经小鼠子宫组织痉挛的作用及其机制;方法采用雌二醇联合缩宫素建立原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)模型,将当归:川芎不同比例(1∶1、2∶1、3∶1、3∶2)作用于PD小鼠,观察小鼠扭体反应潜伏期及30min内扭体次数,用ELISA法测定小鼠子宫组织中前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)、孕酮(P)浓度变化;结果当归-川芎4种配比均能提高扭体潜伏期,减少扭体次数(P0.05、0.01);均能降低PGF2α的浓度(P0.01),提高PGE2及P的水平(P0.05、0.01);PGF2α浓度与扭体次数呈正相关(P0.01),与扭体反应潜伏期呈负相关(P0.05);PGE2、P与扭体次数及扭体潜伏期之间无相关性(P0.05);PGF2α与PGE2、P均呈现出负相关(P0.05、0.01);结论当归-川芎能对抗PD小鼠子宫平滑肌痉挛,其机制与抑制PGF2α生成,提高PGE2、P水平相关。     

不同配制比例的当归/白芍提取物对原发性痛经大鼠的作用研究

目的:探讨当归/白芍组合物对原发性痛经大鼠的干预作用,并从不同药物配置浓度中发现其对治疗原发性痛经的最优化配比。方法:雌性未孕Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、配比组(1∶1、1∶3、1∶5、1∶6、2∶1、2∶3)、单味当归组、单味白芍组,采用缩宫素建立原发性痛经大鼠模型,观察各组大鼠发生扭体的潜伏期及发生次数,计算扭体反应抑制率。同时检测各组大鼠子宫组织中一氧化氮(NO)及内皮素(ET)的含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠发生扭体的潜伏期缩短,扭体次数增加,子宫组织中NO含量降低,ET含量明显增加(P0.05)。与模型组比较,配比组2、3、4大鼠扭体潜伏期明显延长,扭体次数减少,差异具有显著性,其中配比组3大鼠扭体抑制率最高;配比组2、3、4、5、8大鼠子宫组组中NO含量明显增加(P0.05),配比组3、4大鼠ET含量明显下降,差异具有显著性(P0.05)。结论:当归/白芍组提取物可通过抑制子宫收缩,改善子宫供血,从而对原发性痛经产生治疗作用,其中1∶5的配置比例疗效最好。     

钩吻生物碱成分的薄层色谱研究

目的对钩吻根、茎、叶、花、果实生物碱进行薄层色谱研究。方法以钩吻碱甲和钩吻素子为对照,对不同产地钩吻的根、茎、叶、花、果实生物碱进行薄层色谱研究,考察了5种提取方法、4种展开系统、5种薄层板、3种检视方式以及不同温度和湿度对钩吻生物碱薄层色谱的影响。结果以方法 5提取,过PXC柱(阳离子交换树脂),以三氯甲烷-甲醇(9∶1)为展开系统,稀碘化铋钾试液-10%三氯化铁乙醇溶液(10∶1)混合溶液为显色剂,钩吻生物碱薄层色谱信息保留较多,分离较好,薄层效果最佳。结论该方法可作为鉴别钩吻的较专属鉴别方法。     

基于太阳蓄血“方证相关”的钩吻减毒存效的实验研究

目的实验验证中医不同方证对钩吻减毒存效的研究。方法应用太阳蓄血证、瘀血证、气虚证等五个方药分别开展动物实验验证太阳蓄血汤方对钩吻的减毒作用,并通过小鼠醋酸扭体实验、热板镇痛实验、福尔马林致痛实验研究钩吻减毒后的存效作用。结果钩吻配伍抵当汤、桃核承气汤后,小鼠死亡率均显著下降,钩吻合抵当汤混合液组降至6.67%,钩吻合桃核承气汤混合液组降至20%,且有死亡现象者死亡时间亦明显延长,与钩吻组比有显著性差异(P0.05)。而丹参饮、血府逐瘀汤、四君子汤无减毒作用。通过镇痛实验发现抵当汤、桃核承气汤与钩吻合用后均能起到镇痛作用,且总体上效果优于阳性对照组和钩吻组。结论太阳蓄血"方证相关"理论指导的抵当汤、桃核承气汤对钩吻能起到减毒存效作用。     

附子大黄配伍减毒存效实验研究

目的 观察附子配伍不同比例大黄对附子毒性和药效的影响。方法 ICR小鼠,40 mL·kg-1体质量灌胃给药,平行比较附子和附子配伍大黄的急性毒性,测定其半数致死量（LD50）;SD大鼠10 mL·kg-1体质量灌胃给药,平行比较附子和附子配伍大黄的心脏毒性;采用高效液相色谱法测定附子与大黄配伍前后乌头类生物碱成分的含量;通过小鼠耳肿胀试验、醋酸扭体试验和回阳救逆试验考察附子配伍大黄对附子药效的影响。结果 随着大黄配伍比例的增高,附子急性毒性LD50有增加趋势,大黄对附子心脏心律失常抑制率逐渐增大,附子配伍大黄后主要乌头类生物碱成分含量降低,但附子配伍大黄后对附子抗炎、镇痛和回阳救逆药效无明显影响。结论 大黄对附子毒性具有剂量依赖性拮抗作用,大黄配伍附子在减轻附子毒性的同时不影响附子的药效,附子配伍大黄减毒时应该考虑大黄的配伍比例。     

高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱

目的 建立高速逆流色谱技术分离纯化钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱的方法 .方法 采用高速逆流色谱分离技术分离纯化钩吻生物碱单体,以氯仿-甲醇-0.1 mol/L HCl(4∶4∶2)为溶剂体系;高效液相色谱技术分析所提产物的质量分数;核磁共振谱、质谱分析确证单体的化学结构.结果 从300 mg钩吻总碱中经过一次高速逆流色谱技术分离纯化获得19.4 mg钩吻素己和21.2 mg 1-甲氧基钩吻碱,质量分数分别为95.4%、98.6%;经过电喷雾质谱及核磁共振的结构鉴定分析,证实分离得到的两种生物碱分别是钩吻素已和1-甲氧基钩吻碱.结论 高速逆流色谱技术可高效分离纯化钩吻素已和1-甲氧基钩吻碱,为钩吻生物碱的研发提供了制备技术.     

金不换与雪上一枝蒿不同比例配伍的减毒增效作用

目的:探讨金不换水提物(WVBF)配伍雪上一枝蒿总生物碱(CFA)的解毒作用及对药效的影响。方法:建立斑马鱼心血管模型,评价心血管毒性;上下法测小鼠不同比例CFA-WVBF的半数致死量(LD50);以热板法和扭体法比较CFAWVBF 1∶2和1∶5配伍组对小鼠中枢和外周镇痛作用的影响。结果:在心血管毒性评价实验中,单药CFA除了200 mg·L~(-1)组外,别的质量浓度组对斑马鱼心率都没有影响,不诱发斑马鱼心律不齐,CFA 66.6,200 mg·L~(-1)可诱发斑马鱼毒性表型(P0.05)。在不同配伍组心血管毒性评价实验中,除了CFA-WVBF 1∶5配伍组,别的实验组都诱发明显的心血管毒性表型(P0.05)。CFA-WVBF 4个不同比例(5∶1,2∶1,1∶2,1∶5)的LD50依次增加,都高于单独CFA的LD50(P0.05)。在中枢镇痛实验中,CFA-WVBF按1∶2和1∶5配伍组均可提高小鼠的舔足痛阈值,其中按CFA-WVBF 1∶2混合给药组(20 mg·kg~(-1))的镇痛率比单独给予CFA(20 mg·kg~(-1))和阿司匹林组(200 mg·kg~(-1))的镇痛率要高(P0.05),而在给药90 min时1∶2配伍组的镇痛率与CFA组接近,都高于阿司匹林组(P0.05),说明CFA-WVBF 1∶2配伍组有减毒存效作用,按1∶5给药的镇痛率比单独给CFA明显增高,在30,60,90 min也逐渐增加(P0.05),说明CFA-WVBF 1∶5配伍组有减毒增效和延效作用。在外周镇痛方面,各配伍给药组均能有效抑制冰乙酸所致小鼠扭体反应,其中CFA-WVBF 1∶2配伍组的扭体抑制率低于单独给予CFA组(P0.05);CFA-WVBF 1∶5配伍组的扭体抑制率略高于CFA组(P0.05)。表明在外周镇痛方面,CFA-WVBF 1∶2配伍组有减毒减效作用,CFA-WVBF 1∶5配伍组有较弱的减毒增效作用。结论:CFA-WVBF配伍可以减轻CFA诱发的斑马鱼心血管毒性和小鼠急性毒性,CFA-WVBF 1∶2,1∶5配伍组可以提高中枢镇痛效应,CFA-WVBF 1∶5配伍组还可以增加外周镇痛作用,因此CFA-WVBF 1∶5配伍组减毒增效作用最好。     

藏药唐古特乌头总生物碱的急性毒性及抗炎镇痛作用

目的:研究藏药唐古特乌头总生物碱(TAA)的急性毒性及抗炎镇痛作用。方法:采用灌胃和腹腔注射两种给药途径研究TAA的急性毒性;采用二甲苯致小鼠耳肿胀、琼脂肉芽肿两种炎症模型,考察TAA的抗炎作用;采用冰醋酸致小鼠扭体和热板致痛两种疼痛模型,观察TAA的镇痛作用。结果:TAA具有一定急性毒性,对二甲苯致小鼠耳肿胀和皮下琼脂肉芽肿两种炎症模型以及冰醋酸致小鼠扭体和热板致痛两种疼痛模型均有一定的抑制作用。结论:藏药唐古特乌头总生物碱具有抗炎镇痛作用,也具有一定的急性毒性。