共查询到20条相似文献,搜索用时 16 毫秒
1.
目的探讨片仔癀对大肠癌HCT-8/5-FU细胞对药物外排功能的影响,并探讨其机制。方法MTT法检测5-FU对HCT-8/5-FU细胞和HCT-8细胞活力的影响和片仔癀对HCT-8/5-FU细胞活力的影响;倒置显微镜观察片仔癀对HCT-8/5-FU细胞形态的影响;采用罗丹明染色通过流式细胞仪检测片仔癀对其在耐药细胞内蓄积的影响;RT-PCR检测ABC转运蛋白家族重要成员ABCC1的表达。结果 MTT检测结果显示不同浓度的5-FU干预可显著降低HCT-8细胞活力,呈现一定的剂量依赖和时间依赖,而对HCT-8/5-FU细胞活力未见影响。经片仔癀干预后,HCT-8/5-FU细胞活力也受到显著的抑制;形态学观察表明:随着药物浓度的升高,细胞数目逐渐减少,体积缩小,出现悬浮、脱落而死亡;罗丹明蓄积实验显示:片仔癀干预可显著增加其在细胞内的蓄积;RT-PCR实验表明:经片仔癀干预可显著下调HCT-8/5-FU细胞ABCC1在m RNA水平的表达。结论片仔癀可抑制HCT-8/5-FU细胞生长和药物外排功能,通过下调转运蛋白ABCC1的表达是其重要机制之一。 相似文献
2.
目的探讨半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)调控linc01843逆转大肠癌5-FU耐药的作用机制。方法在5-FU干预HCT-8和HCT-8/5-FU细胞后,通过QPCR法检测linc01843的表达。用lipofectamine 3000将si-linc01843、negative control分别转染到HCT-8和HCT-8/5-FU细胞中去,用5-FU干预转染后的两株细胞,通过MTT法检测5-FU对转染si-linc01843、negative control后的两株细胞生长活力的影响。用ECSB、5-FU、以及ECSB联合5-FU干预HCT-8/5-FU细胞,通过MTT法检测其细胞活力;用5-FU、ECSB联合5-FU干预HCT-8/5-FU细胞,通过QPCR法检测linc01843的表达。结果在5-FU干预下,HCT-8和HCT-8/5-FU细胞中的linc01843表达均显著高于各自对照组(P<0.05)。在5-FU干预下,转染了si-linc01843的HCT-8和HCT-8/5-FU细胞均显著提高了其对5-FU的敏感性(P<0.05)。在HCT-8/5-FU细胞中,ECSB能显著逆转其对5-FU的耐药性(P<0.05),可显著降低HCT-8/5-FU细胞中linc01843的表达(P<0.05)。结论linc01843参与了5-FU耐药的过程,且ECSB逆转大肠癌5-FU耐药的作用机制之一是通过调控linc01843的表达。 相似文献
3.
目的:探讨白花蛇舌草(Hedyotic Diffusa Wilid,HDW)对大肠癌5-FU耐药细胞miRNAs表达的调控作用,进一步揭示其逆转大肠癌多药耐药(Multidrug Resistance,MDR)作用机制。方法:通过体外培养HCT-8/5-FU细胞,经HDW处理,采用MTT检测细胞活力、倒置显微镜观察细胞形态、microRNA(miRNA)表达谱芯片分析、QPCR验证差异miRNA表达、GO及Pathway分析预测差异miRNA调控的信号通路。结果:HDW可显著抑制大肠癌HCT-8/5-FU耐药细胞的活力,降低细胞密度;HDW调控57个miRNA差异表达,其中上调23个,下调34个;QPCR验证HDW上调miR-92b-5p、miR-1247-3p、miR-4800-5p的表达,下调miR-4454、miR-4443、miR-483-5p的表达;信号通路预测显示HDW可调控PI3K/Akt、TGF-β/Smad、MAPK、P53、Wnt、JAK-STAT等多条与细胞耐药、迁移、侵袭、增殖、凋亡有关的信号通路。结论:HDW对大肠癌5-FU耐药细胞HCT-8/5-FU具有显著的抑制作用,通过调控miRNAs表达是其逆转大肠癌耐药的作用机制之一。 相似文献
4.
目的 探讨白花蛇舌草提取物逆转结肠癌细胞5-Fu耐药的作用及其可能作用机制. 方法 白花蛇舌草提取物对结肠癌5-Fu耐药细胞HCT-8/5-Fu进行药物干预,用MTT法检测结肠癌5-Fu耐药细胞的活力;采用Transwell细胞迁移和细胞黏附实验,在倒置显微镜下观察药物对细胞迁移和黏附的影响;RT-PCR法检测耐药相关基因ABCG2的mRNA表达. 结果 白花蛇舌草提取物能显著抑制HCT-8/5-Fu细胞的活力及细胞迁移、黏附的作用,呈现明显的剂量和时间依赖;同时白花蛇舌草提取物能明显抑制ABCG2的mRNA表达. 结论 白花蛇舌草具有抗大肠癌5-Fu耐药的作用,下调耐药基因ABCG2的mRNA表达是白花蛇舌草逆转耐药的重要作用机制之一. 相似文献
5.
《福建中医药》2017,(2)
目的研究半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)促进人结肠癌细胞的凋亡及其逆转HCT-8/5-FU细胞对5-FU耐药的机制。方法用ECSB干预结肠癌细胞株HCT-8,用Gexp技术检测其细胞凋亡相关基因的表达;用5-FU、ECSB联合5-FU干预耐药细胞株HCT-8/5-FU,检测其耐药相关基因的表达。结果在ECSB干预48 h后,能显著下调HCT-8的Bcl-2表达,并且升高Caspase 8的表达,但不影响Bax的表达;ECSB联合5-FU给药后,HCT-8/5-FU的LRP表达比5-FU给药显著下降。结论 ECSB通过上调Bax/Bcl-2和Caspase 8的表达促进HCT-8细胞的凋亡,下调LRP的表达增强HCT-8/5-FU对5-FU的敏感性。 相似文献
6.
《现代中西医结合杂志》2017,(12)
目的探讨白花蛇舌草(HDW)在体内诱导大肠癌HCT-8/5-Fu耐药细胞凋亡情况及其作用机制。方法构建大肠癌HCT-8/5-Fu耐药细胞皮下移植瘤动物模型,按照瘤体积大小随机将30只移植瘤小鼠分为对照组、5-Fu组、HDW组各10只,分别给予生理盐水0.1 mL/10 g、5-Fu 20 mg/kg、HDW 1 g/kg灌胃,其中对照组、HDW组每周灌胃6 d,5-Fu组连续灌胃3 d后停药1 d,均连续6周。测量并记录各组瘤体体积;采用TUNEL染色法观察大肠癌HCT-8/5-Fu耐药移植瘤细胞凋亡情况;采用RT-PCR和免疫组化法检测移植瘤组织中Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达情况。结果与对照组比较,5-Fu对移植瘤的生长无明显影响(P>0.05),HDW治疗可显著抑制移植瘤的生长(P<0.05);5-Fu对HCT-8/5-Fu耐药细胞移植瘤的细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达无明显影响(P均>0.05);HDW能诱导移植瘤组织中HCT-8/5-Fu细胞凋亡,显著下调Bcl-2的mRNA和蛋白表达和上调Bax的mRNA和蛋白表达(P均<0.05)。结论HDW可诱导大肠癌HCT-8/5-Fu耐药移植瘤细胞凋亡,抑制Bcl-2表达和促进Bax表达是其重要作用机制。 相似文献
7.
至真方对人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/VCR的增殖抑制及凋亡诱导作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究至真方含药血清对人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/VCR的增殖抑制及凋亡诱导作用。方法:用MTT法观察至真方含药血清对HCT-8及其耐药细胞HCT-8/VCR的增殖抑制作用;分光光度法检测至真方含药血清作用HCT-8/VCR细胞后Caspase-3活性;流式细胞术检测至真方含药血清对细胞凋亡率的影响。结果:不同体积分数的至真方含药血清对HCT-8及耐药细胞HCT-8/VCR存在明显的增殖抑制作用(P〈0.01),且对两细胞系的抑制无统计学差异(P〉0.05)。10%体积分数的至真方含药血清作用HCT-8/VCR细胞24、48、72、96h后Caspase-3活性变化呈时间依赖性,并在72h之后出现OD峰值(OD=1.4,并达到平台。含药血清作用HCT-8/VCR细胞72h后的细胞凋亡率明显高于空白对照组(P〈0.01)。结论:至真方含药血清对人大肠癌多药耐药HCT-8/VCR细胞生长有明显增殖抑制作用,在一定条件下呈时间、浓度依赖性,并可诱导HCT-8/VCR细胞凋亡,其机制可能与Caspase-3活性升高有关。 相似文献
8.
目的:研究肠胃清方对大肠癌耐药细胞株HCT-8/V的逆转作用及其抑制P-gp表达的影响。方法:MTT法测定肠胃清对HCT-8/V细胞株的逆转作用,流式细胞术测定P糖蛋白(P-gp)的表达。结果:HCT-8/V细胞株对VCR、DDP、5-FU、MMC的耐药指数分别为18.6、22.3、4.3、3.7。经肠胃清方药物血清作用48h后,其对化疗的耐药性显著下降,对VCR、DDP的逆转指数分别为3.3和7.5,静息状态下HCT-8/V细胞的P-gp表达显著高于HCT-8(P<0.01),而经肠胃清药物血清作用后P-gp表达显著降低(P<0.01)。结论:肠胃清方可以逆转人大肠癌耐药细胞株HCT-8/V的多药耐药性,其机制可能与其下调P-gp的表达有关。 相似文献
9.
10.
研究藏药柳茶水提物(Liu Tea extracts,LTE)对人胃癌氟尿嘧啶耐药细胞株BGC823/5-FU的增殖和药物敏感性的影响。将LTE作用于人胃癌耐药细胞BGC823/5-FU,采用MTT检测其对细胞增殖、化疗药物敏感性的影响以及与5-氟尿嘧啶(5-FU)的联用效应,应用CompuSyn软件计算联合用药指数(combination index,CI);流式细胞术(FCM)检测LTE对BGC823/5-FU细胞凋亡的作用;Western blot检测不同质量浓度(100,200,400 mg·L-1)LTE对5-FU作用下胃癌耐药细胞中P-gp,Bcl-2,Bax及Caspase-3(17KD)蛋白表达的影响。结果显示,LTE能够有效的抑制胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU的生长,抑制率与药物浓度及作用时间呈正相关;LTE能够促进细胞发生凋亡,800 mg·L-1的LTE作用细胞24 h后凋亡率可高达46.2%(P0.01)。LTE与5-FU联用后CI1,说明两药具有较好的协同抑制耐药细胞增殖的作用。非细胞毒性剂量LTE可显著降低化疗药物5-FU,CDDP,PTX,ADM对BGC823/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50,P0.05),一定程度上逆转耐药细胞对化疗药物的耐药性,逆转倍数分别为2.35,1.68,1.96,0.52。蛋白检测结果显示,随着柳茶水提物浓度的增加,耐药细胞内Bcl-2表达逐渐下降,Bax和Caspase-3蛋白表达显著升高,差异具有统计学意义(P0.01)。但耐药蛋白P-gp的表达在实验组和对照组细胞中无显著变化。LTE能有效抑制胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU的生长,并在一定程度上逆转其化疗耐药。抑制抗凋亡蛋白的表达、激活促凋亡蛋白、诱导耐药细胞发生凋亡可能是其作用的主要机制。 相似文献
11.
目的 验证丹参酚酸B(Salvianolic acid B,SalB)浓度依赖性抑制人大肠癌HCT-116细胞增殖、促进其凋亡,并从活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)水平进一步探究SalB抑制大肠癌生长的作用机制。方法 以低、中、高剂量SalB干预HCT-116细胞48h,显微镜下观察细胞生长状态及形态学特征;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术分析细胞周期分布、细胞凋亡率以及细胞内ROS含量。结果 随着SalB作用HCT-116细胞浓度增加,镜下可见细胞数量逐渐减少,细胞折光率逐渐减弱,体积变小,核固缩,核颜色加深,出现大量细胞碎片及漂浮细胞;平板克隆实验显示,中剂量和高剂量SalB显著抑制HCT-116细胞克隆形成能力(P<0.05或P<0.01),且随着药物浓度增加,抑制作用更强(P<0.01);中剂量和高剂量SalB处理后,GO/G1期细胞数量显著升高(P<0.01),S期和G2/M期细胞数量均显著降低(P<0.05或P<0.01),该周期阻滞作用在一定浓度范围内与SalB浓度呈正性相关;低、中、高浓... 相似文献
12.
《时珍国医国药》2015,(8)
目的体外观察5-氟尿嘧啶(5-FU)与姜黄素联用对人结肠癌LoVo细胞的生长抑制和凋亡诱导的作用。方法采用MTT方法、流式细胞检测技术和荧光染料AO/EB双染法观察不同浓度姜黄素和5-氟尿嘧啶单独或联合应用对Lovo细胞生长和凋亡的影响。结果 MTT法检测结果显示,各药物组LoVo细胞的生长均受到了显著抑制,各剂量5-FU以及分别联合姜黄素对LoVo细胞的抑制率呈剂量-时间依赖关系;FCM检测结果表明,姜黄素联合低剂量5-FU组的早期、晚期凋亡率显著高于中剂量和高剂量5-FU单用组,姜黄素联合中剂量5-FU组的细胞凋亡率最高;荧光显微镜观察发现各实验组细胞同对照组相比呈现典型凋亡形态,且联合用药组细胞凋亡率最高。结论姜黄素与低剂量5-FU联用对体外培养的结肠癌LoVo细胞的的生长抑制和促凋亡作用能够达到高剂量5-FU单用的效果。 相似文献
13.
《福建中医药》2015,(2)
目的研究半枝莲对大肠癌细胞及其干细胞生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大肠癌HT-29细胞,并用不同浓度的半枝莲干预24h后,采用MTT实验检测半枝莲对大肠癌细胞活力的影响;流式细胞仪分析半枝莲对大肠癌干细胞比例的影响;Western-blot法检测半枝莲对大肠癌干细胞表面标记LGR-5、OCT-4表达的影响;HT-29细胞经1.5 mg/m L半枝莲干预后,采用流式细胞分析技术检测大肠癌细胞β-catenin磷酸化的表达。结果半枝莲可显著降低大肠癌细胞的活力,呈现一定的剂量依赖性;半枝莲可显著降低大肠癌干细胞的比例及抑制干细胞表面标记LGR-5和OCT-4蛋白的表达;另外,半枝莲具有提高β-catenin蛋白磷酸化的作用。结论半枝莲对大肠癌细胞和大肠癌干细胞的生长具有显著抑制作用,其中增强β-catenin蛋白的磷酸化从而降低β-catenin活化是其可能作用机制之一。 相似文献
14.
目的了解肿节风注射液抗肿瘤及与阿霉素联合用药的效果。方法采用四氮唑盐法(MTT法)测定药物的体外抑制作用,用IC50评测直接抗肿瘤效果,用金氏公式进行联合用药分析。结果肿节风注射液能抑制人肝癌细胞Bel7402、人结肠癌细胞HCT-8的增殖,其IC50分别为33.13,52.39mg/mL。3.125,6.25,12.5mg/mL的肿节风注射液与阿霉素联合对HCT-8细胞体外抑制呈相加作用;25,50mg/mL的肿节风注射液与阿霉素联合对HCT-8细胞体外抑制呈协同作用。结论肿节风注射液对Bel7402、HCT-8细胞有一定的抑制肿瘤生长的作用,它与阿霉素联合应用对HCT-8细胞可产生相加或增强的协同抑制效果,尤其是高浓度的肿节风注射液与阿霉素的协同作用更为显著。 相似文献
15.
目的探讨左金丸的主要成分吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞的生长抑制及其诱导细胞凋亡的作用。为临床应用左金丸治疗大肠癌提供实验依据。方法采用活细胞计数试剂盒(CCK-8),AnnexinV—FITC/PI双染色流式细胞术,检测不同浓度的盐酸小檗碱和吴茱萸碱作用后HT29细胞增殖活性和细胞凋亡的变化。结果吴茱萸碱和盐酸小檗碱作用HT29细胞后,增殖明显受到抑制,呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测表明吴茱萸碱和盐酸小檗碱能够诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性。倒置显微镜观察细胞呈现缩小、变圆、皱缩、脱壁等增殖变慢的形态学特征。结论吴茱萸碱和盐酸小檗碱对大肠癌HT29细胞具有显著生长抑制作用。该抑制作用与诱导细胞凋亡相关。 相似文献
16.
目的探讨八宝丹(BBD)对人胃癌细胞增殖与凋亡的影响。方法体外培养胃癌细胞AGS和MGC-803,采用不同浓度的BBD(0、0.25、0.5、0.75、1 mg/m L)进行干预,MTT法检测细胞活力,计算BBD对细胞增殖的抑制率;倒置显微镜观察细胞生长密度;台盼蓝染色法检测细胞数量;细胞集落形成实验检测细胞集落形成能力;Hoechst染色检测细胞凋亡。结果 BBD可显著抑制胃癌细胞AGS和MGC-803的细胞活力,抑制细胞增殖,使细胞密度下降,减少细胞数量,抑制细胞集落形成能力,诱导细胞凋亡。结论 BBD可显著抑制胃癌细胞AGS和MGC-803的增殖及诱导细胞凋亡。 相似文献
17.
《中药药理与临床》2017,(3):70-73
目的:探讨黄芪总苷对阿霉素(ADR)诱导损伤足细胞的结构和功能的影响。方法:采用0.5μmol/L的阿霉素处理MPC5条件永生型小鼠足细胞系24h,以建立足细胞的损伤模型;以50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml的3个浓度的黄芪总苷分别处理阿霉素损伤足细胞24h后,检测LDH、MDA及SOD生成水平或活力,以反映细胞损伤情况及氧化应激水平;MTT法检测足细胞的存活率;transwell法检测MPC5足细胞迁移能力,同时采用荧光染色法观察细胞骨架排布。结果:与空白对照组相比,足细胞损伤模型组足细胞存活率较对照组显著下降,与模型组比较,各浓度黄芪总苷均能上调阿霉素导致的损伤足细胞的存活率;同时,阿霉素可显著促进MPC5足细胞内LDH及MDA的生成量并且降低SOD活性,各浓度黄芪总苷均能抑制由阿霉素导致的MPC5足细胞内LDH及MDA的生成并增加SOD活性;细胞迁移实验结果显示,阿霉素可显著抑制MPC5足细胞的迁移能力,各浓度黄芪总苷均能改善由阿霉素导致的迁移能力下降;激光共聚焦显微镜观察结果显示,阿霉素破坏了细胞骨架完整性,50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml黄芪总苷干预均可抑制由阿霉素导致的足细胞骨架重排及破坏,100μg/ml、200μg/ml黄芪总苷干预的足细胞保持了较好的细胞骨架完整性。结论:黄芪总苷可维持处于阿霉素培养环境内足细胞内氧化应激环境的平衡、改善迁移能力、抑制细胞骨架重排与破坏及抑制细胞凋亡。因此,黄芪总苷对阿霉素损伤的MPC5足细胞具有保护作用。 相似文献
18.
目的探讨黄连的主要药用成分小檗碱的抗结直肠腺癌的机制。方法不同浓度的小檗碱作用于人结直肠腺癌(HCT-15)细胞后,用显微镜观察人结直肠腺癌细胞的形态学改变;细胞染色方法观察细胞凋亡和自噬;细胞计数分析(CCK-8)检测小檗碱对细胞增殖的影响;免疫印迹法检测小檗碱对人结直肠癌细胞自噬和凋亡相关指标的影响;裸鼠移植瘤模型观察小檗碱的体内抑制肿瘤生长活性。结果显微镜观察结果显示小檗碱作用HCT-15细胞后细胞数量减少、间距增大、皱缩。小檗碱能够抑制HCT-15细胞增殖,对HCT-15细胞增殖的半数抑制浓度(IC_(50))为50μmol/L。免疫荧光和印迹法显示0、50、100μmol/L的小檗碱处理细胞不同时间后,细胞凋亡和自噬对应的标志物明显上升。免疫印迹结果显示小檗碱诱导HCT-15细胞自噬和凋亡从而抑制细胞的增殖。小檗碱诱导细胞自噬和凋亡主要通过激活p38途径。裸鼠实验结果表明小檗碱能够有效缩小体内肿瘤体积,0、10、20 mg/kg的小檗碱的抑瘤率分别为0、32%、74%。结论小檗碱在体外对HCT-15细胞增殖具有明显抑制作用,其机制主要是通过激活p38信号通路促进肿瘤细胞自噬和凋亡,并能有效抑制体内肿瘤的生长。 相似文献
19.
20.
《现代中西医结合杂志》2017,(9)
目的探讨白花蛇舌草(HDW)对5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药大肠癌裸鼠移植瘤ABC转运蛋白表达的影响。方法构建BABL/c裸鼠人结肠癌细胞HCT-8/5-Fu的皮下移植瘤模型,按照瘤体积大小将20只移植瘤小鼠随机分成对照组和HDW干预组各10只,分别给予生理盐水0.1 m L/10 g、HDW 1 g/kg灌胃,1次/d,每周灌胃6 d,连续6周。每天观测裸鼠的生活状态;每周测量小鼠体质量和移植瘤大小2次;采用RT-PCR和HE染色方法检测移植瘤组织中ABC转运蛋白ABCC1、ABCB1、ABCG2 mRNA和MRP1、P-gp、BCRP蛋白表达情况。结果 HDW干预治疗可显著抑制移植瘤的生长。HDW干预组HCT-8/5-Fu耐药细胞移植瘤组织中ABCC1、ABCB1、ABCG2 mRNA表达量和MRP1、P-gp、BCRP蛋白表达量均明显低于对照组(P均0.05)。结论白花蛇舌草对5-Fu耐药大肠癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,可明显下调移植瘤组织中ABC转运蛋白的mRNA和蛋白表达。 相似文献