硫酸镍与亚砷酸钠联合致叙利亚地鼠胚胎细胞转化作 …

目的 探讨砷在镍治炼工肺癌病因中的作用。方法 采用细胞灶法观察硫酸镍与亚砷酸联 合致叙利亚地鼠胚胎（ＳＨＥ）细胞的形态学转化作用。结果 硫酸镍、亚砷酸钠及硫酸镍与亚砷酸钠联合染毒三个组均有细胞转化灶形成,其形成率均呈现剂量依赖关系。刀豆球蛋白Ａ凝集试验进一步验证了细胞转化结果。联合作用分析显示,硫酸镍为２．５ug/ml,亚 砷酸钠分别为０．１２５、０．２５０、０．５００和１．０００ug/ml,两化合物联合作     

甲醛、苯单独和联合致NIH/3T3细胞转化的研究

目的探讨苯、甲醛单独和联合致NIH/3T3细胞转化活性。方法采用细胞灶法观察甲醛、苯单独和联合致NIH/3T3细胞的转化作用。结果苯、甲醛及苯和甲醛联合染毒组均有细胞转化灶形成,其形成率均呈现剂量依赖关系。联合作用分析显示,苯25μg/ml 甲醛25μg/ml、苯25μg/ml 甲醛50μg/ml、苯50μg/ml 甲醛25μg/ml、苯50μg/ml 甲醛50μg/ml,两化合物联合作用转化率实测值分别为3.6%、5.8%、5.7%和7.6%。而预期转化率分别为3.5%、5.6%、5.6%、7.7%。说明在等剂量原则下,苯、甲醛单独染毒的转化细胞灶形成率之和与两化合物同时染毒的转化细胞灶形成率非常接近;析因分析表明两者间无交互作用(F=0.07,P>0.05)。结论苯、甲醛具有细胞转化活性,二者联合作用类型呈相加作用。     

镍冶炼烟尘致NIH3T3细胞形态转化作用的实验研究

目的　研究镍冶炼工人接触烟尘的生物学效应。方法　以来自我国两家镍冶炼厂的镍冶炼烟尘为受试物 ,处理小鼠NIH3T3细胞 ,观察细胞吞噬活性、毒性和转化活性 ,预测镍冶炼烟尘的致癌危险性。结果　 (1)两种镍冶炼烟尘均可被NIH3T3细胞吞噬 ,两样品在 10 0 .0 0 0 μg/ml剂量的吞噬率分别为6 9 .0 %、39.0 % ,2 0 0 .0 0 0 μg/ml剂量的吞噬率分别为 78.0 %、4 7.0 % ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。剂量为12 .5 0 0～ 10 0 .0 0 0 μg/ml时 ,两样品的相对克隆形成率分别为 71.1%～ 3.9%和 84 .4 %～9.1%。两种镍冶炼烟尘以克隆形成率表示的细胞毒性与Ni2 O3 接近 ,高于TiO2 ,而低于阳性对照物N 甲基 N’ 硝基 N 亚硝基胍 (MNNG)。 (2 )MNNG、Ni2 O3 和两份镍冶炼烟尘均可诱发NIH3T3细胞发生形态转化 ,两种镍冶炼烟尘在 12 .5 0 0～ 5 0 .0 0 0 μg/ml范围内的转化率分别为 1.9%～ 3.6 %和 0 .9%～ 2 .5 %。 (3)MNNG和镍冶炼烟尘处理的NIH3T3细胞均可与刀豆素A(ConA)发生凝集反应 ,并能在软琼脂培养基中形成集落 ,验证了转化克隆的可靠性。结论　镍冶炼烟尘具有细胞转化活性 ,为镍冶炼烟尘的致癌危险性以及镍冶炼工肺癌的病因学研究提供了新的实验室证据。     

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化研究

目的 研究潜在致癌化学物甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱发人支气管上皮细胞恶性转化的作用.方法 分别采用1、2、4、8μg/ml浓度的GMA多次处理人支气管上皮细胞(16HBE),连续动态地观察细胞形态学的改变,通过刀豆凝集素A(conA)试验、软琼脂集落形成试验、电镜扫描和裸鼠体内致瘤性试验观察细胞的恶性转化表型,并运用免疫化学方法对细胞和肿瘤组织来源特性进行鉴定.试验同时设二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组和三甲基胆蒽(MCA)阳性对照组.结果 1～8 μg/ml浓度范围的GMA多次攻击可使16HBE细胞发生恶性转化,转化率随染毒剂量的增加而升高,其中8μg/ml染毒组的转化率(8.48×10-6)与对照组(4.5×10-7)相比差异有统计学意义(P<0.01).转化细胞失去接触抑制呈交错重叠生长并能在软琼脂上形成集落,各剂量组的集落形成率随染毒剂量的增加而升高,其中2、4、8μg/ml染毒组的集落形成率分别为1.20‰、2.35‰和5.70‰,与溶剂对照组(0.30‰)相比差异有统计学意义(P<0.01).转化细胞对conA的凝集敏感性增加,扫描电镜下细胞表面微绒毛增多、变粗、变长.将转化细胞接种于裸鼠皮下可形成肿块,经病理组织学检查诊断为鳞状上皮细胞癌.16HBE细胞和肿块组织经免疫组织化学检测角蛋白呈阳性表达.结论GMA可在体外诱发16HBE细胞发生恶性转化.     

二羟环氧苯并芘诱导16HBE细胞转化最佳实验方案

目的　采用客观又简单的软琼脂细胞集落形成率的指标来探索二羟环氧苯并芘诱导 16 HBE细胞转化的理想实验方案 ,构建恶性转化的细胞模型。方法　根据细胞存活率试验及克隆形成率试验确定诱导的剂量 ,以不同剂量二羟环氧苯并芘 1次或多次处理细胞 ,观察培养的不同阶段转化灶出现情况 ,用软琼脂培养鉴定其锚着依存性生长的恶性特征 ,比较各组转化细胞的集落形成率。结果　以 0 .1、0 .5、1.0、2 .0 μmol/ L的剂量 ,对细胞多次间断染毒 ,传代 15次 ,是二羟环氧苯并芘诱导 16 HBE细胞恶性转化的理想方案 ,其集落形成率分别为 2 .0‰、5 .5‰、7.0‰、10 .5‰ ,剂量 -反应关系呈现良好的直线相关 ,r=0 .9741,P<0 .0 5。结论　二羟环氧苯并芘能诱导人支气管上皮细胞 16 HBE转化 ,构建理想的恶性转化的细胞模型     

彗星实验观察无机砷对人皮肤成纤维细胞的DNA损伤

目的 观察无机砷对人皮肤成纤维细胞的DNA损伤效应.方法 用0.5、1.0和5.0 μmol/L亚砷酸钠诱导离体培养人皮肤成纤维细胞,用彗星实验观察DNA损伤效应.结果 对照组的拖尾细胞率和拖尾细胞尾长分别为19.0%和(28.84±10.10)μm.0.5、1.0和5.0 μmol/L亚砷酸钠剂量组的拖尾细胞率分别为21.0%、31.0%和41.0%,3个染毒组间的差异有统计学意义(P<0.01);3个染毒组的拖尾细胞尾长分别为(28.05±7.71)、(58.13±10.98)和(72.78±11.03)μm,其差异也有统计学意义(P<0.01).1.0、5.O μmol/L剂量组的细胞尾长均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01).当浓度升至10.0 μmol/L时,亚砷酸钠呈现出明显的细胞毒性,存活率仅为64.3%.结论 亚砷酸钠对人皮肤成纤维细胞的遗传损伤作用存在阚值范围.浓度为1.0 μmol/L时,呈现明显的遗传毒性,且随剂量增加,遗传损伤效应增强.但10.0 μmol/L的亚砷酸钠以细胞毒性为主.     

亚砷酸钠对Chang肝细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨亚砷酸钠对正常人Chang肝细胞体外增殖及凋亡的影响.方法 采用0(对照)～100 μmol/L亚砷酸钠分别处理细胞24、48、72、96 h.采用MTT比色法检测细胞活力;采用流式细胞术检测染毒48 h时的细胞凋亡率.结果 仅0.2μmol/L亚砷酸钠染毒24 h的细胞活力略高于对照组,但差异无统计学意义;且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高和染毒时间的延长,Chang肝细胞存活率均呈下降趋势,并具有剂量-效应和时间-效应关系.与对照组相比较,5～100 μmol/L亚砷酸钠染毒组Chang肝细胞凋亡率均显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,Chang肝细胞的凋亡率呈显著升高趋势,并具有剂量-效应关系.结论 亚砷酸钠有明显的细胞毒性,能抑制Chang肝细胞的增殖,这可能与其诱导细胞凋亡有关.     

Protective Effects of Vitamin E Succinate on Cisplatin1-Induced Nephrotoxicity in HEK293 Cells

目的 研究维生素E琥珀酸脂(Vitamin E succinate,VES)对顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)所致人胚肾293( HEK293)细胞毒性的保护作用.方法 体外培养人胚肾293细胞(HEK293),设空白对照组、VES(20 μg/ml)对照组、CDDP(25 μg/ml)单独染毒组以及低剂量CDDP( 25 μg/ml )+VES(5 μg/ml)联合处理组、中剂量CDDP(25 μg/ml)+VES( 10 μg/ml)联合处理组、高剂量CDDP( 25 μg/ml )+VES( 20 μg/ml)联合处理组,染毒12h.采用MTT法观察细胞增殖效应,测定细胞还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和细胞培养液中乳酸脱氧酶(LDH)活力,采用荧光法检测DNA链间的交联情况.结果 与CDDP单独染毒组比较,各剂量CDDP+VES联合处理组HEK293细胞的存活率均升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).VES能明显抑制CDDP所致HEK293细胞MDA含量和细胞培养液中LDH活力的升高,并能提高细胞GSH的含量(P＜0.05,P＜0.01).高剂量CDDP+VES联合处理组HEK293细胞的交联率低于CDDP单独染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 VES能抑制CDDP所致HEK293细胞的细胞毒性,其机制可能与VES的抗氧化作用和对DNA损伤的防护作用有关.     

β-胡萝卜素辅致癌机制体外实验研究

[目的 ]建立改进的BALB/c 3T3细胞转化试验方法 ,简便、快速检测 β 胡萝卜素通过诱导细胞色素P45 0酶提高苯并 (a)芘、吸烟焦油致癌作用。 [方法 ]每组 12瓶细胞 ,每瓶接种 10 4细胞 ,2 4h后加受试物 ,1周后 2瓶细胞用结晶紫方法测定细胞毒性 ,其余 10瓶换含 2 %胎牛血清和 1%ITES( 2 0 0 μg/ml胰岛素 ,2 0 0 μg/ml人转铁蛋白 ,12 2 μg/ml氨基乙醇 ,0 0 3 4μg/ml亚硒酸钠 )DMEM /F12转化表达培养液。每周换液 2次 ,第 2 5天甲醇固定 10min ,2 5 %Giemsa染色 5～ 10min ,肉眼计数直径 >2mm转化灶。 [结果 ] 0 5、1μmol/Lβ 胡萝卜素、10 μmol/Lα 萘黄酮、10 μmol/L苯并 (a)芘和 2μg/ml吸烟焦油对细胞相对存活率均大于 90 %。 1μmol/Lβ 胡萝卜素能提高苯并 (a)芘、吸烟焦油的细胞转化率平均每瓶细胞转化灶分别增高 3 2 %和 5 0 0 %。α 萘黄酮可以抑制 β 胡萝卜素增强吸烟焦油和苯并 (a)芘细胞转化作用。[结论 ]β 胡萝卜素增强苯并 (a)芘和吸烟焦油对BALB/c 3T3细胞转化能力 ,可被混合功能氧化酶抑制剂α 萘黄酮阻止 ,提示 β 胡萝卜素辅致癌作用是通过诱导细胞色素P45 0酶所致     

烹调烟雾冷凝物对DNA完整性影响的研究

采用体外作用的方式探讨烹调烟雾致遗传损伤的机制。通过细胞毒性试验得出 :油烟冷凝物与大鼠肺Ⅱ型细胞生长抑制率之间存在剂量 -效应关系 (r=0 943,P <0 0 1) ,剂量在 2 0 μg ml及以上对细胞有明显毒性作用。在不产生细胞毒性作用的剂量范围内 ,单细胞凝胶电泳试验表明 :大鼠肺Ⅱ型细胞经油烟冷凝物染毒 2小时可引起细胞DNA链断裂 ,在 0～ 5 μg ml剂量范围内 ,损伤程度与剂量存在直线相关关系 (r=0 918,P <0 0 5 ) ;在 10 μg ml剂量下 ,DNA损伤已达最大程度。发生DNA损伤的细胞经修复培养 2小时后受损伤的DNA能被修复。油烟冷凝物对 30 μg小牛胸腺DNA交联试验显示 :在 5 0～ 80 0 μg剂量范围 ,DNA交联率与受试物间存在剂量 -效应关系 (r=0 96 3,P <0 0 1)。提示烹调烟雾冷凝物在较低作用剂量下就可导致大鼠肺Ⅱ型细胞DNA损伤 ,在一定剂量下可以导致DNA交联率的增加     

非有机溶剂高聚物萃取法分离测定Al3+、Ca2+、Co2+、Cu2+、Mg2+、Pb2+、Zn2+混合样品中Al3+的研究

「目的」多组分混合物中铝的测定。「方法」在ＫＨ２ＰＯ４－Ｋ２ＨＰＯ４缓冲溶液，聚乙二醇－铬黑Ｔ－硫酸铵体系中，水溶性高聚物对Ａｌ＾３＋、Ｃａ＾２＋、Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、Ｐｂ＾２＋、Ｚｎ＾２＋萃取研究。「结果」在ｐＨ＝８时，Ｃｏ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、Ｚｎ＾２＋被聚乙二醇相完全萃取，Ｃａ＾２＋、Ｐｂ＾２＋被ＨＰＯ４＾２－掩蔽，而Ａｌ＾３＋几乎不被萃取，从而实现了对上述混合离子     

Regulation of the Renal Na+-H+ Exchanger

Regulation of the activity of this transporter is critical to the overall acid-base economy of the organism. Studies have now elucidated some of the regulatory mechanisms. One important type of regulation is by processes involving protein phosphorylation mediated by specific protein kinases. Some of the intracellular pathways involved in the regulation are described.     

2,3,7,8-四氯二苯并二噁英急性染毒对小鼠脑组织中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力的影响

目的 研究2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)对小鼠脑组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力的影响.方法 将48只雌雄各半的昆明种小鼠按性别随机分为高、中、低剂量TCDD染毒组和对照组,每组雌雄各6只,TCDD染毒剂量分别为100、10、1 μg/kg,用腹腔注射的方式一次染毒,48 h后,测定脑组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ArrP酶活力.结果 雌性低剂量、中剂量染毒组和雄性高剂量染毒组小鼠脑组织中Na+-K+-ATP酶活力[分别为(17.35±3.07)、(16.13±2.42)、(20.25±2.72)μmolPi·mg pro-1·h-1]明显升高,与对照组[分别为(13.60±1.72)、(15.97±1.90) μmol Pi·mg pro-1·h-1相比,差异均有统计学意义(P<0.05).各染毒组小鼠Ca2+-ATP酶活力有增加的趋势,但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 TCDD急性染毒能提高小鼠脑组织中Na+-K+-ATP酶的活力,且存在性别差异.     

Ethanol may stimulate or inhibit (Na+ + K+)-ATPase, depending upon Na+ and K+ concentrations

The influence of varying the ratios of [Na+]/[K+] on the effects of alcohol (500 mg/dl) on brain (Na+ + K+)-ATPase, using a commercial porcine enzyme preparation, showed that, generally, activity was stimulated by ethanol when [Na+] less than [K+], but inhibited when [Na+] greater than [K+] (with sum kept constant at 150 mM). In addition, when [Na+]/[K+] was 15/90 mM, representative of normal intracellular levels, ethanol (500 mg/dl) stimulated the porcine enzyme, but inhibited it when [Na+]/[K+] was 144/6 mM, representative of normal extracellular levels. Similarly, in freshly prepared enzyme from highly purified rat brain synaptic membranes, ethanol (100, 300, and 450 mg/dl) stimulated when [Na+]/[K+] was 15/88 mM (representing intracellular levels), but inhibited when [Na+]/[K+] was 142/4 mM (extracellular levels).     

支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+Foxp3~+IL-10~+ T淋巴细胞水平变化和意义

目的:探讨对尘螨过敏的轻度持续支气管哮喘患儿淋巴细胞增殖情况及CD4+CD25+Foxp3+IL-10+ T淋巴细胞水平变化。方法:选择30例对尘螨过敏的轻度持续支气管哮喘患儿作为实验组,同时选择30例健康儿童作为对照组。分离所有入选者的外周血淋巴细胞,给予户尘螨浸出液刺激48 h后检测淋巴细胞增殖的刺激指数以及CD4+CD25+Foxp3+IL-10+ T淋巴细胞水平变化。结果:支气管哮喘患儿外周血淋巴细胞接受户尘螨浸出液刺激后淋巴细胞增殖的刺激指数显著高于对照组(P<0.01),支气管哮喘患儿CD4+CD25+Foxp3+IL-10+ T淋巴细胞水平显著低于对照组(P<0.01)。结论:支气管哮喘患儿接受过敏原刺激后发生明显的增殖反应,支气管哮喘患儿存在CD4+CD25+Foxp3+IL-10+ T淋巴细胞功能障碍。     

子痫前期患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)调节性T细胞检测及意义

目的:研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在子痫前期患者(PE)外周血中的比例变化,探讨其在子痫前期发病中意义。方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测22例子痫前期患者外周血中CD4+CD25high和CD4+CD25+Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+CD25+Foxp3+的表达显著降低,而且其CD4+CD25+Foxp3+的表达与平均动脉压呈负相关。结论:子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3+的表达明显减少,表明调节性T细胞的降低可能打破了母胎之间的耐受,参与了子痫前期的病理进程。