硫酸卡那霉素体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的评价硫酸卡那霉素体外抗呼吸道合胞病毒作用机制。方法采用细胞培养技术观察硫酸卡那霉素对细胞的毒性和抗呼吸道合胞病毒作用。结果用空斑减数实验测得半数有效剂量(EC50)为(1.71±0.23)mg/ml,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(12.36±0.85)mg/ml,SI为7.2,SI>4(有意义);在不同时间给药对病毒的抑制实验中,呼吸道合胞病毒感染喉癌上皮细胞(Hep-2)细胞后1、2、4、6、8和10h给药均有抑制作用(P<0.05),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程有明显地抑制作用(P<0.05),但是对吸附过程没有抑制作用。硫酸卡那霉素对RSV病毒没有直接的灭活作用。结论硫酸卡那霉素在体外实验中对呼吸道合胞病毒穿入细胞及在细胞内复制的过程均有抑制作用。     

中药抗病毒合剂抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

呼吸道合胞病毒(简称RSV)是引起婴幼儿肺炎的主要原因。由RSV引起的婴幼儿肺炎约占小儿肺炎病例总数的1/2～3/4,是婴幼儿的一种常见病、多发病,对婴幼儿的身体健康危害严重,也是引起婴幼儿死亡的重要原因之一。目前尚无有效的预防办     

夏桑菊抗呼吸道合胞病毒的实验研究

目的 评价夏桑菊抗呼吸道合胞病毒(RSV)的疗效.方法 以病毒唑为对照,通过体外观察病毒致细胞病变效应(CPE)、病毒滴度、抗病毒指数;在体内观察其对染毒小鼠的死亡保护作用以及对小鼠心、脑、肺内病毒增殖的影响,从而判定夏桑菊抗RSV作用.结果 夏桑菊能抑制RSV的增殖,其有效浓度为544.59 μg/ml,并显示出病毒的感染性滴度随药物浓度的增加而下降;治疗RSV感染鼠结果 发现夏桑菊对RSV感染鼠有保护作用,10 g/(kg*d)时,RSV感染鼠的存活率为50%,平均存活天数为(10.9±2.3)d,随着药物剂量增加,疗效增强,该药物还能降低组织内病毒滴度,阻止体内病毒复制,抗RSV作用类似于同剂量的病毒唑.结论 夏桑菊是一种抗呼吸道合胞病毒的有效药物.     

双黄连口服液抗呼吸道合胞病毒的实验研究

目的:评价双黄连口服液抗呼吸道合胞病毒(RSV)的活性。方法:以病毒唑为对照,通过体外观察病毒致细胞病变效应(CPE)、病毒滴度、抗病毒指数,在体内观察其对染毒小鼠的死亡保护作用,以及对小鼠心、脑、肺内病毒增殖的影响,从而判定双黄连口服液抗RSV作用。结果:双黄连口服液能抑制RSV的增殖,其有效浓度为12ug/mL,并显示出病毒的感染性滴度随药物浓度的增加而下降;治疗RSV感染鼠结果发现,双黄连口服液对RSV感染鼠有保护作用,6.7g.k-g 1.d-1时,RSV感染鼠的存活率为75%,平均存活天数为(12.9±2.8)d,随着药物剂量增加,疗效增强;该口服液还能降低组织内病毒滴度,阻止体内病毒复制,抗RSV作用类似于同剂量的病毒唑。结论:双黄连口服液是一种有效的抗RSV中药复方制剂。     

败酱草多糖体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的: 了解败酱草多糖(AP4)对呼吸道合胞病毒的体外抑制作用.方法: 经提取、沉淀、离心、大孔吸附树脂两次层析后,得败酱草抗病毒多糖AP4.通过细胞培养法检测呼吸道合胞病毒对Hela细胞的致病变作用及AP4对呼吸道合胞病毒感染Hela细胞的治疗作用.结果: AP4半数中毒浓度(TC50)为11.07mg/ml,抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.097mg/ml,治疗指数(TI)为114;病毒唑半数中毒浓度(TC50)2.087 mg/ml,抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.0385 mg/ml,治疗指数(TI)为54.结论: 败酱草抗病毒有效部位AP4在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用.     

呼吸道合胞病毒化学治疗药物的研究进展

到目前为止，对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的研究已经有了一定进展，但是尚无特异有效的治疗和预防方案。目前唯一允许用于化学疗法的药物仍是利巴韦林，因此人们加大力量开发研制新的有效防治RSV感染的药物。主要包括两方面：(1)人工合成的具有抗病毒活性的化合物；(2)源于天然药物的抗病毒活性物质。本文综述了近年来国内外人工合成的各种类型的抗病毒因子的结构特点、抗病毒效果和作用机制，以及已经从天然药物中分离出的各种有效的抗RSV成分。     

海洋硫酸多糖PAE的结构和抗病毒活性研究

目的 对肠浒苔来源的硫酸多糖的结构和抗病毒活性进行研究。 方法 通过稀碱提取法,从肠浒苔中提取硫酸多糖,采用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对多糖进行分离纯化;采用高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、傅里叶变换红外光谱(IR)以及气质联用色谱(GC-MS)方法对多糖的结构进行表征;采用细胞病变效应测定PAE对不同病毒的抑制率。 结果 从肠浒苔中分离得到多糖PAE,其分子量为13.98 kDa,主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸和木糖构成,糖链主要由(1→4)-Rhap,(1→3,4)-Rhap,(1→2,4)-Rhap,Xylp(1→和(1→4)-Glcp组成,硫酸根主要位于(1→4)-Rhap 的C-2或C-3位以及Xylp(1→的C-4位上,PAE具有良好的抗病毒活性,特别是对呼吸道合胞体病毒的抑制率较高。 结论 海洋多糖PAE是一种结构新颖的由鼠李糖、葡萄糖醛酸和木糖组成的硫酸多糖,具有良好的抗病毒活性。     

酶法提取马尾藻硫酸多糖的研究

硫酸多糖是一种水溶性的、含硫酸基的杂多糖，具有抗肿瘤、抗凝血等多种生理活性。本文以我国闽粤两省特有的亨氏马尾藻为原料，探索了提取硫酸多糖的最佳工艺条件，与前人不同的是，首次采用酶法提取，改变中性水法及酸法提取率低的局面，使提取率高达５．８４％     

牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性

从中药牛膝中提取得到的一种新多糖化合物一牛膝多糖,用不同的硫酸化试剂合成牛膝多糖硫酸酯。研究了最佳反应条件,其产物水溶性好,呈中性,最高产率达82.11%,取代度(Ds)···达到三以上,硫含量达21%以上。根据牛膝多糖的分子结构,多糖分子中的羟基已最大限度地被酯化。体外抗病毒试验初步表明牛膝多糖硫酸酯有很强的抑制乙型肝炎病毒HBsAg和HBeAg的活性,对I型单纯性疱疹病毒也有明显的抑制力。     

抗病毒1号中药在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用

为了解抗病毒1号单味中草药对呼吸道合胞病毒的抑制作用,本研究采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,观察抗病毒1号对呼吸道合胞病毒的抑制作用。结果表明,抗病毒1号和病毒唑的半数中毒浓度(TC_(50))分别为13.9mg/ml、76.43ug/ml;其抗呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC_(50))分别为0.827mg/ml、5.672ug/ml,TI分别为16.81、13.47;抗病毒1号对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在着明显的量效关系(P<0.01)。     

Inhibition activities of polysaccharide (RG4-1) from Gentiana rigescens against RSV

Respiratory syncytial virus (RSV) is the most important cause of lower respiratory tract infection in infants and young children. With the emergence of drug-resistant strains of RSV, new antiviral agents are needed urgently. Gentiana rigescens is a kind of Chinese herb, belonging to Gentianaceae, which has long been used as a folk medicine for curing inflammation, bacterial infection, viral infection, and so on. In this research, polysaccharide designated RG4-1 was isolated from G. rigescens by hot water extraction, ethanol precipitation, and macroreticular adsorbing resin column chromatography, and its antiviral activity, cytotoxicity, and possible antiviral mechanisms were assayed by cytopathogenic effect inhibition assay, 3-(4,5-dimethythiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) assay, and plaque reduction assay. RG4-1 was a fructose-binding lectin. In host cell cultures, RG4-1 was found to be an effective antiviral component against RSV. It showed good inhibitory effect against RSV when it was added 2 h after virus infection with 50% effective concentration of 12.86 μg/ml. RG4-1 also displayed its direct inactivation, attachment inhibition effect, and penetration inhibition effect against RSV. A time-dependent experiment was set up to confirm that RG4-1 blocked RSV infection at early stages of the infection. But RG4-1 seemed to be ineffective against intracellular virus and viral biosynthesis.     

盐酸阿比朵尔抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的　研究盐酸阿比朵尔、盐酸金刚烷胺及利巴韦林在细胞Hep - 2培养中抑制呼吸道合胞病毒的作用。方法　采用细胞病变抑制法 ,测定 3种药物对呼吸道合胞病毒所致Hep - 2细胞病变效应的抑制作用。结果　 3种药物抗呼吸道合胞病毒的IC50 依次为盐酸阿比朵尔 (38 2 μg·ml-1)、盐酸金刚烷胺 (6 8 0 μg·ml-1)和利巴韦林 (80 3μg·ml-1) ,TI分别为 5 2、2 7、4 7,其中盐酸阿比朵尔表现出较强的抑制呼吸道合胞病毒的效果。结论　在体外抗呼吸道合胞病毒的 3种实验药物中 ,盐酸阿比朵尔应为首选。     

注射用银黄体外抗呼吸道合胞病毒

目的:研究注射用银黄对呼吸道合胞病毒的体外抑制作用。方法:采用细胞培养技术,通过银黄直接抗病毒,病毒感染细胞同时使用银黄,先使用银黄再感染病毒3种给药方法,利用生物显微镜观察人喉癌细胞(Hep-2)和人宫颈癌细胞(Hela)发生病变的情况及观察实验组与病毒对照组病毒感染的滴度。结果:注射用银黄在Hep-2和Hela细胞上对呼吸道合胞病毒均有明显的抗病毒作用,注射用银黄对病毒的最小有效浓度(M IC)为0.016 g.L-1,而且毒性低,最大无毒浓度(TDO)为1.6 g.L-1,治疗指数(TI)为100。结论:体外实验注射用银黄对呼吸道合胞病毒具有抑制和直接杀灭的特异性。     

羊栖菜硫酸多糖通过PI3K/AKT通路抑制H2O2诱导的MRC-5细胞氧化损伤

目的 为阐明羊栖菜硫酸多糖(SFPS Ⅲ)对过氧化氢(H2O2)诱导的正常人胚肺细胞(MRC-5)氧化应激损伤的保护作用及潜在分子机制。方法 试验通过噻唑蓝(MTT)法检测MRC-5细胞暴露于H2O2或SFPS Ⅲ后的活力,Hoechst染色法检测细胞凋亡形态,流式细胞仪测定细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验测定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量。通过免疫印迹Western blot检测相关蛋白水平。结果 H2O2处理使MRC-5细胞活力显著降低(P < 0.05),而SFPS Ⅲ(200～600 μg.mL-1)干预可明显增强MRC-5细胞活力。酶联免疫法结果表明,SFPS Ⅲ干预抑制H2O2诱导的细胞内NO和MDA的过度分泌,并增加了H2O2诱导的细胞内SOD和GSH-Px的活性。免疫印迹结果表明,120 μmol.L-1 H2O2处理的细胞中p-AKT和p-mTOR相对蛋白表达水平下调,而p-AKT和p-mTOR相对蛋白表达水平在SFPS Ⅲ处理的MRC-5细胞中被逆转。结论 SFPS Ⅲ对H2O2诱导的MRC-5细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能是激活PI3K/AKT/mTOR通路发挥其抗凋亡作用。研究结果为羊栖菜高附加值产品开发及天然、安全抗氧化功能因子的筛选提供了一定的理论依据。     

钝顶螺旋藻多糖抗病毒作用的实验研究

目的探讨钝顶螺旋藻多糖(polysaccharide fromSpirulina platensis,PSP)抗单纯疱疹病毒及乙型肝炎病毒的作用及可能机制,为进一步开发该药提供理论依据。方法以不同剂量的PSP分别作用于HSV-1及HSV-2病毒复制周期的各个环节,以病毒半数感染量(TCID50),细胞病变效应(CPE),蚀斑形成单位(PFU),MTT法作为评价指标,判断PSP的抗病毒效果;ELISA法定量检测PSP对HepG2 2.2.15细胞HbsAg,HBeAg分泌的影响;FQ-PCR检测PSP对HBV-DNA合成的影响。结果PSP对Vero细胞及HepG2 2.2.15细胞毒性极低,对HSV-1及HSV-2均无直接灭活作用,可阻滞HSV-1及HSV-2病毒的吸附并抑制感染细胞内病毒的复制,但不影响病毒的释放。在HepG2 2.2.15细胞培养中PSP可显著抑制HB-sAg、HBeAg的分泌以及HBV-DNA的合成,并具有量效和时效关系。结论PSP抗HSV-1及HSV-2病毒作用的机制与抑制病毒吸附和感染细胞内病毒的生物合成有关,而PSP抗HBV作用的机制则与抑制HBV抗原分泌及病毒DNA复制有关。     

Natural antiviral activity of mouse macrophages against encephalomyocarditis virus

Resident mouse peritoneal cells (PC) express a significant antiviral activity against encephalomyocarditis virus (EMCV) in vitro, as judged by decreased virus yield from infected mouse embryo fibroblasts (MEF). This natural antiviral activity of PC was not due either to enhanced lysis of virus-infected cells, as these were protected from lysis rather than destructed by PC, or to interferon (IFN) production, as no direct correlation between IFN and anti-EMCV activity was found. Among PC, macrophages (M phi) appear to be responsible for the anti-EMCV activity, which was indeed attributable to a Thy 1.2-negative, adherent mononuclear cell. Moreover, M phi-defective C3H/HeJ mice showed a significant impairment of anti-EMCV activity, whereas M phi of mice defective for natural killer (NK) activity (bg/bg, SJL/J) or for mature T cells (nu/nu) possessed an intact antiviral capacity.     

羊栖菜多糖抗肿瘤作用及其作用机制的研究

目的观察羊栖菜多糖对6种不同组织肿瘤的抑瘤作用，并对其作用机制进行了讨论。方法通过对S180、H22荷瘤小鼠瘤重和生存时间的研究，观察了羊栖菜多糖的体内抗肿瘤作用，采用MTT法和集落形成实验法观察羊栖菜多糖的体外抗肿瘤作用。采用流式细胞仪观察羊栖菜多糖对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响。结果羊栖菜多糖对人胃癌细胞SGC-7901和人直肠癌COLO-205有较好的疗效。羊栖菜多糖可阻滞SGC-7901人胃癌细胞内Go／G，期进入S期，升高细胞凋亡指数(APO％)。结论羊栖菜多糖对人胃癌细胞和直肠癌细胞效果较好，这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡达到的。     

Antiviral activity of type I and type III interferons against porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV)

The newly identified type III interferons (IFNs), also known as IFN-λ1/IL-29, IFN-λ2/IL-28A and IFN-λ3/IL-28B, like type I IFNs, have antiviral activity against a broad spectrum of viruses. We therefore examined whether type III IFNs, as well as type I IFNs, has the ability to inhibit porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) replication in MARC-145 cells. We found that replication of PRRSV in MARC-145 cells was significantly reduced following treatment with IFN-λ1, IFN-λ2 and IFN-λ3, respectively, and such inhibition was dose-dependent. However, type III IFNs (IFN-λ1, IFN-λ2 and IFN-λ3) was less effective than type I IFNs (IFN-α and IFN-β) in antiviral activity against PRRSV. Mixture of two types of IFNs could not improve the antiviral activity of each type alone. In addition, all types of IFNs in our study were able to induce the expression of ISG56, 2′,5′-OAS and MxA in MARC-145 cells. These data demonstrate that type III IFNs had antiviral activity against PRRSV and may serve as useful antiviral agents against infectious swine diseases.     

Antiviral property and mode of action of a sulphated polysaccharide from Sargassum patens against herpes simplex virus type 2

A sulphated polysaccharide (SP2) was isolated from the brown alga Sargassum patens. SP2 inhibited the replication of herpes simplex virus type 2 (HSV-2) dose-dependently by 38.5-96.1% of the control level, after incubations with 0.78-12.5 microg/ml of the polysaccharide. SP2 exhibited extracellular virucidal activity only in high concentrations (>/=12.5 microg/ml) but significantly inhibited the virus attachment to its host cells by 45.1%, at concentration as low as 1 microg/ml. All the results from this study suggested that the antiviral mode of action of SP2 could be ascribed to the inhibition of virus adsorption, which is different from that of the current drug of choice acyclovir.