蛋白激酶C抑制剂H—7抑制肿瘤坏死因子对骨细胞的作用

用富含成骨细胞的小鼠头盖骨细胞测试肿瘤坏死因子对骨细胞的作用以及蛋白激酶抑制剂Ｈ－７对ＴＮＦ的影响．［＾３Ｈ］ＴｄＲ参入法观察细胞增殖。以对硝基苯酚磷酸酯为底物用微量分光光度法测定细胞内碱性磷酸酶和耐酒石酸酸性磷酸酶活性。     

蛋白激酶C激活剂和抑制剂对小鼠腹腔巨噬细胞释出肿瘤坏死因子的影响

本文研究蛋白激酶C（PKC）激活剂TPA和抑制剂H－7，槲皮素对痤疮丙酸杆菌（Propionibacterium acnes,PA)启动的小鼠腹腔巨噬细胞（macrophage,MΦ）释出肿瘤坏死因子（TNF）的影响，表明TPA可诱导PA启动的M分泌TNF，其作用可被H－7和槲皮素抑制，LPS体外和体内诱生TNF的作用亦可被两者抑制，提示PKC和PA启动的M分泌TNF过程中具有关键性作用。     

蛋白激酶C激活剂和抑制剂对肿瘤坏死因子杀瘤活性的影响

以小鼠成纤维细胞瘤L929细胞为靶细胞,研究蛋白激酶C(PKC)的激活剂和抑制剂对人重组肿瘤坏死因子(rHuTNF)杀瘤活性的影响.各种药物与rHuTNF 10 ng·ml~(-1)和放线菌素D 1 μg·ml~(-1)温育18 h,结果表明PKC的激活剂佛波醇-12-肉豆蔻酸盐-13-乙酸盐(PMA)2.5～160ng·ml~(-1)可浓度依赖性地抑制rHuTNF的杀瘤活性.Sc-10(1～16μg·ml~(-1))单独作用很弱,但可浓度依赖地增强PMA 10 ng·ml~(-1)或A23187 0.5μg·ml~(-1)的抑制作用,PKC抑制剂1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪(H-7)单独作用对rHuTNF杀瘤活性无影响,但可减弱PMA 50ng·ml~(-1)的抑制作用.槲皮囊2～16μg·ml~(-1)则可直接抑制rHuTNF的杀瘤活性,钙调蛋白抑制剂N-(6-氨己基)-5-氯-1-萘磺酰胺(W-7)及其同系物也有微弱的抑制作用.结果提示PKC在rHuTNF杀瘤作用中起着重要作用.     

蛋白激酶C抑制剂和钙调素抑制剂对小鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏…

蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂Ｈ－７（０．３１－５０μｇ·ｍｌ＾－１）和钙调素（ＣａＭ）拮抗剂Ｘ－７（１０－４０００ｎｇ·ｍｌ＾－１）皆可浓度依赖地抑制脂多糖诱导卡西霉素启动的小鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）。Ｗ－７（１０ｎｇ·ｍｌ＾－１）抑制ＴＮＦ释放的最佳时间为８ｈ。提示巨噬细胞释放ＴＮＦ可能依赖于ＰＫＣ和ＣａＭ。     

肿瘤坏死因子对牛肺动脉内皮细胞的损伤及蛋白激酶C抑制剂的抑制作用

研究表明:肿瘤坏死因子(TNF)可剂量依赖地引起牛肺动脉内皮细胞乳酸脱氢酶释放率(LDH%)升高,促进中性粒细胞向内皮细胞粘附,并可抑制内皮细胞增殖和DNA合成。蛋白激酶C(PKC)抑制剂1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪(H-7)和槲皮素一方面可剂量依赖地抑制TNF对内皮细胞的直接损伤,另方面又可通过抑制TNF诱导的中性粒细胞对内皮细胞粘附增加,减轻TNF对内皮细胞的间接损伤作用,同时还可抑制TNF对内皮细胞增殖和DNA合成的影响,从而间接加强内皮细胞对损伤的自我修复。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶Cα和肿瘤坏死因子α表达的影响

目的:探讨灯盏花素(breviscapine,Bre)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶Cα(PKCα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)表达的影响。方法:采用SD大鼠尾静脉注射STZ45 mg.kg-1建立实验性糖尿病模型。将成模DM大鼠随机分成:糖尿病模型组(DM组)、灯盏花素治疗组(Bre-L组,10 mg.kg-1.d-1;Bre-H组,20 mg.kg-1.d-1),同时设正常对照组(NC组)。治疗8周后检测各组大鼠血糖(FBG)、肾指数、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白排泄率(UAER)、HE染色光镜观察肾脏形态结构,采用免疫组化方法检测肾脏PKCα、TNFα表达情况。结果:与DM组比较,Bre组大鼠血糖无明显变化,但肾指数、Scr、BUN、UAER均明显降低,光镜下肾脏结构亦明显改善,肾组织PKCα、TNFα的表达显著减少。结论:Bre对糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,可能与其抑制糖尿病大鼠肾脏PKCα、TNFα表达有关。     

蛋白激酶C在肿瘤中的作用及其抑制剂研究进展

蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在肿瘤的发生、发展和转移中均发挥着重要作用,因此,PKC是开发治疗肿瘤疾病药物的潜在分子靶点。目前,几种PKC抑制剂已经进入临床研究阶段,但是同时也为靶向PKC抗肿瘤药物的研究开发带来了新的挑战。该文拟对近年来蛋白激酶C在肿瘤中的作用及其抑制剂研究进展作一综述。     

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白7的研究进展

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白7(CTRP7)是一种C1q家族的分泌蛋白,目前国内外对其功能研究较少.新近研究发现,肥胖人群中血清CTRP7水平升高,并与BMI、葡萄糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数、糖化血红蛋白和三酰甘油水平呈正相关,与高密度脂蛋白和脂联素水平呈负相关.还有研究显示,人类CTRP7中有2个单核苷酸多态性与儿...     

肿瘤坏死因子抑制剂的研究进展

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、节段性肠炎(Crohn′s disease,CD)等疾病具有类似的发病机制。肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)在这些疾病的发生发展中具有非常重要的作用。TNF分子在细胞因子免疫调节网络中位于中枢环节,是重要的炎症介质,过量的TNF导致炎症的发生。目前上市的TNF抑制剂种类繁多,治疗效果显著。然而随着TNF抑制剂广泛应用,这类药物的安全性逐渐受到重视。本文综述了TNF与疾病关系、上市的TNF蛋白抑制剂分子结构、临床应用等方面,重点关注药物潜在的不良反应,并对近期新型TNF抑制剂的研究开发进行总结。     

硒化卡拉胶对肿瘤坏死因子生成的影响(英文)

研究了硒化卡拉胶对小鼠腹腔巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的影响。研究结果表明在试管内硒化卡拉胶０．１～１０μｇ／ｍｌ促进脂多糖（ＩＰＳ）诱导巨噬细胞生成肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）。硒化卡拉胶０．１～１０μｇ／ｍｌ与巨噬细胞预培养８ｈ，亦能促进ＴＮＦ生成。但是在同一条件下硒化卡拉胶本身对靶细胞并无直接杀伤作用。培养系统中所含药物亦不影响靶细胞对重组ＴＮＰ的反应性。整体研究表明硒化卡拉胶口服４，１２，及３６ｍｇ／ｋｇｑｄ×１５能促进经卡介苗及ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ生成。     

Effect of quercetin on activities of protein kinase C and tyrosine protein kinase from HL-60 cells

目的：研究槲皮素（Ｑｕｅ）对ＨＬ６０细胞中细胞溶质和胞膜蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）、酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响．方法：活细胞数的计数用苔盼兰拒染法；用组蛋白ⅢＳ、［γ３２Ｐ］ＡＴＰ与ＰＫＣ酶液一起保温测定ＰＫＣ活性；用聚谷氨酸·酪氨酸（４∶１）多肽）、［γ３２Ｐ］ＡＴＰ与ＴＰＫ酶液一起保温测定ＴＰＫ活性．结果：Ｑｕｅ对ＨＬ６０细胞的增殖有抑制作用，呈剂量依赖关系，处理４８小时后，其ＩＣ５０为２９（２２－３７）μｍｏｌ·Ｌ－１；在体外，Ｑｕｅ能强烈抑制细胞溶质ＰＫＣ和胞膜ＴＰＫ活性，其ＩＣ５０分别为：３１（２０－４８）μｍｏｌ·Ｌ－１，２４（１３－４５）μｍｏｌ·Ｌ－１，但不影响胞膜ＰＫＣ和细胞溶质ＴＰＫ活性．结论：这为Ｑｕｅ对癌细胞的生长有抑制作用与其抑制ＰＫＣ和／或ＴＰＫ有关提供了直接证据．     

肿瘤坏死因子对溶血卵磷脂引起脑微血管平滑肌细胞增殖的影响及药物的保护作用

目的研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ α）对溶血卵磷脂（ＬＰＣ）引起脑微血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响及维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）,普罗布考（ＰＲＢ）的保护作用。方法用结晶紫染色测定密度（ＯＤ）值的方法观察ＴＮＦ α对ＬＰＣ引起牛脑微血管平滑肌细胞（ＢＣＭＳＭＣ）增殖作用的影响。结果ＴＮＦ α在２５×１０４～１×１０５Ｕ·Ｌ－１范围内能协同ＬＰＣ引起ＢＣＭＳＭＣ增殖,８ｈ时增殖率就明显增加,１６ｈ增殖率达峰值（６７２％）。ＶｉｔＥ２０,５０,１００μｍｏｌ·Ｌ－１,ＰＲＢ１０,２０,５０μｍｏｌ·Ｌ－１呈剂量依赖性地显著降低其增殖率,其最大抑制率分别为７４２％和４９７％。结论ＴＮＦ α对ＬＰＣ引起的ＢＣＭＳＭＣ增殖有协同作用,药物ＶｉｔＥ,ＰＲＢ可拮抗其增殖作用。     

硼替佐米辅助治疗老年骨肿瘤对患者血清肿瘤坏死因子-α水平的影响

目的 探讨硼替佐米辅助治疗老年骨肿瘤对患者血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的影响。方法 采用回顾性、抽样调查研究方法,2014年3月—2017年1月选择在重庆市开州区人民医院诊治的老年膝关节周围骨肿瘤患者118例作为研究对象,所有患者都给予人工假体置换治疗,对照组给予地塞米松和环磷酰胺辅助治疗,环磷酰胺200 mg/m²在治疗的第1~4 d静脉推注;地塞米松20 mg/d,在术后第1~2、4~5、8~9、11~12 d静脉滴注;观察组在对照组治疗的基础上辅助硼替佐米治疗,剂量为1.3 mg/m²,在治疗第1、4、8、11 d静脉推注,其他治疗方法同对照组。在术前与术后6个月进行膝关节主动屈曲活动度的评定,观察与记录关节退变、囊性变、关节面塌陷、坏死等并发症发生情况;在术前与术后6个月检测TNF-α的浓度;随访至今,对比两组的无进展生存时间。结果 观察组与对照组术后6个月膝关节主动屈曲活动度都显著高于术前（P<0.05）,观察组也显著高于对照组（P<0.05）。观察组术后6个月的关节退变、囊性变、关节面塌陷、坏死等并发症发生率显著低于对照组（P<0.05）。观察组与对照组术后6个月的血清TNF-α值都显著低于术前（P<0.05）,术后6个月观察组的血清TNF-α值也显著低于对照组（P<0.05）。随访至今,观察组与对照组的无进展生存时间（15.77±2.14）个月和（10.87±3.14）个月,观察组显著长于对照组（P<0.05）。结论 硼替佐米辅助治疗老年膝关节周围骨肿瘤能有效降低患者的血清TNF水平,促进膝关节功能的恢复,减少术后并发症的发生,从而延长患者的生存时间。     

人肿瘤坏死因子受体75在人肿瘤坏死因子α介导的细胞毒效应中的双重功能

目的：研究人肿瘤坏死因子受体75（hTR75）在hTNFα所引发的细胞毒效应中的功能。方法：用电脉冲将hTR75基因表达载体转入只有内源性hTR55表达的HEp-2细胞中构建了两种TNF受体同时表达的HEp-2-A75细胞株。通过定点突变构建及在大肠杆菌中高效表达,分离纯化出两种分别对hTR55以及hTR75受体具有选择结合活性的hTNFα突变体。野生型hTNFα及其这两种突变体对HEp-2以及HEp-2-A75细胞的细胞毒效应采用比色法测定并进行了比较。结果：RT－PCR以及间接ELISA的结果表明hTR75在RNA转录以及蛋白质翻译水平均获得了表达,其表达量由Scatchard分析确定。HEp-2细胞中hTR75的存在可以明显增强HEp-2细胞对hTNFα的敏感性。结论：hTR75受体在介导hTNFα的细胞毒活性中具有双重功能,即hTR75不但自身可介导部份hTNFα所引发的细胞毒效应,它对hTR55所介导的细胞毒效应还具有相当的协同作用。     

己酮可可碱与蛋白激酶C抑制剂对佛波醇酯诱导脑微血管内皮细胞表达细胞间粘附分子-1的影响

目的:研究佛波醇酯(PMA)诱导大鼠脑微血管内皮细胞(RBMEC)表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及PKC抑制剂H7与己酮可可碱(PTX)的抑制作用。方法:采用ELISA方法测定培养RBMEC表达ICAM-1.结果:PMA在10-100nmol·L~(-1)范围内剂量依赖性地诱导RBMEC表达ICAM-1;在4-16h范围内时间依赖性诱导RBMEC表达ICAM-1。H7和PTX分别在5-50μmol·L~(-1)和1-100μmol·L~(-1)范围内剂量依赖性抑制PMA诱导的RBMEC表达ICAM-1。PTX 100μmol·L~(-1),H7 50μmol·L~(-1)时,抑制作用达最大[吸光度分别从(0.410±0.014)降至(0.175±0.022)和(0.182±0.013),P<0.01]。结论:PKC抑制剂及己酮可可碱能抑制PMA诱导RBMEC表达ICAM-1,表明PKC参与RBMEC ICAM-1表达调控。     

Mitigation of tumor necrosis factor alpha cytotoxicity by aurintricarboxylic acid in human peripheral B lymphocytes

The aims of this study were to ascertain whether aurintricarboxylic acid (ATA), an endonuclease inhibitor, known to interfere, with the actions of cytokines such as interferons, is able to antagonize the toxic effects produced by tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha) in human healthy peripheral B lymphocytes and try to elucidate the molecular machinery through which this possible antagonism takes place. Results evidenced that the balance of survival signals of human B lymphocytes in the presence of TNF-alpha was altered by the interaction of TNF-alpha with a salicylate compound, ATA. Apoptosis effected by TNF-alpha alone was suppressed in the presence of ATA, and this effect appeared essentially characterized by: (i) phosphorylation of phosphatidylinositol-3 kinase (PI-3K), influencing in turn protein kinase B/Akt (Akt) and Bad phosphorylation; (ii) nuclear translocation of the nuclear factor kappa B (NF-kappaB) and (iii) nuclear translocation of protein kinase C zed (PKCzeta). Reversal of TNF-alpha/ATA effects occurred in the presence of the PI-3K specific inhibitors wortmannin or LY294002 in the culture medium and was coincident with inhibition of the translocation of PKCzeta in the nucleus, while NF-kappaB was less affected. These results indicate, therefore, that PI-3K-mediated activation and nuclear transfer of PKCzeta might be essential steps of ATA antagonism against TNF-alpha, suggesting that possible ATA pharmacological applications might be taken into account for staving off systemic or local toxic effects produced by TNF-alpha.     

肿瘤坏死因子在肝缺血-再灌注损伤中的作用及左旋精氨酸的干预

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF)在肝缺血 -再灌注损伤 (HIRI)中的作用及左旋精氨酸 (L Arg)对其影响。方法 :选择HIRI实验兔及肝癌手术患者 ,观察血浆TNF含量、谷丙转氨酶 (ALT)活性、肝形态学的变化及L Arg对上述指标的影响。结果 :HIRI期间 ,TNF和ALT明显升高 (P <0 .0 1) ,两者呈显著正相关 (实验兔r =0 .912 ,P <0 .0 1;患者r =0 .5 35 ,P <0 .0 1) ,肝形态学发生异常变化。使用L Arg后 ,上述指标的异常变化显著减轻 (P <0 .0 5和P <0 .0 1)。结论 :TNF是HIRI的重要发病因素 ,L Arg可通过降低TNF减轻HIRI。     

褪黑素对内毒素血症大鼠TNF-α表达的影响

目的探讨褪黑素(MT)对脂多糖(LPS)诱导的内毒素血症大鼠循环血和血管组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法雄性SD大鼠,分组如下:(1)溶剂对照组;(2)LPS组;(3)LPS+MT组;(4)MT组。应用酶联免疫吸附法检测血清TNF-α含量;应用RT-PCR和免疫组织化学法检测TNF-α在血管组织的表达。结果与对照组相比,LPS组大鼠血清TNF-α含量、血管TNF-α mRNA水平均增高(P<0.01),TNF-α蛋白在血管内皮和平滑肌细胞阳性表达增多;而给予LPS前后应用MT干预治疗,可显著降低血清TNF-α含量、血管TNF-α mRNA生成,与同时间点LPS组比较均差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MT降低内毒素血症大鼠TNF-α生成和表达。