颅脑伤时生长抑素mRNA表达及电针对其影响

目的：探讨电针对颅脑伤的作用机理。方法：采用原位杂交组织化学技术，观察了实验性颅脑伤大鼠脑内生长抑素(SS)变化，并观察了电针治疗颅脑伤时对SS mRNA表达的作用。结果：电针可增加下丘脑室周核SS mRNA表达，而在海马则降低SS mRNA表达。结论：颅脑伤时，电针与SS可能在缓解疼痛方面起协同效应，并且电针可能对海马神经元起保护作用。     

睫状神经营养因子对颅脑伤大鼠下丘脑生长抑素mRNA及加压素表达的影响

目的：观察下丘脑生长抑素(SS)和精氨酸加压素(AVP)在睫状神经营养因子(CNTF)治疗颅脑伤时的变化。方法：建立颅脑伤模型并用CNTF进行治疗,采用SS原位杂交和AVP免疫组织化学双标法进行观察。结果：颅脑伤时,下丘脑室周核SS神经元数目减少,视上核SS与AVP共存的阳性神经元数目减少,经CNTF治疗均明显增多。结论：提示及时给予CNTF治疗颅脑伤,有利于神经元的恢复,进而促进SS与AVP的作用。     

应用半定量原位杂交组化和免疫组化观察老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元

应用半定量原位杂交组化和免疫组化观察了老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元的变化.结果表明:老年大鼠下丘脑室周核生长抑素mRNA阳性神经元明显减少(P<0.001).每一神经元的mRNA的相对含量变化不显著;生长抑素免疫反应阳性神经元数目也明显下降(P<0.05).正中隆起处生长抑素免疫反应阳性神经纤维变化不明显.提示老年大鼠下丘脑室周核生长抑素神经元功能活动低下,细胞丢失,合成分泌生长抑素的功能紊乱.     

Leptin长型受体与生长抑素共存于猪前脑内

目的：研究三元杂交猪和梅山猪仔猪前脑内Leptin长型受体(Ob-Rb)mRNA与生长抑素(SS)免疫反应阳性物质的共存关系。方法：用原位杂交与免疫组织化学相结合的方法。结果：Leptin长型受体mRNA和生长抑素免疫反应阳性神经元分布于下丘脑室周核、背内侧核、腹内侧核、室旁核、海马杏仁核及大脑皮质。上述结构内一些表达Leptin长型受体mRNA的神经元也含有生长抑素免疫反应阳性物质。结论：两种猪前脑内Ob-Rb mRNA与SS免疫反应阳性物质的共存情况无明显差异。Leptin可直接作用于下丘脑的生长抑素免疫反应阳性神经元调节动物的能量代谢生长和繁殖等活动。     

拟血管性痴呆小鼠海马CA1区细胞定量分析及电针的影响

目的 :观察拟血管性痴呆小鼠海马CA1区细胞数目变化及电针的影响。方法 :复制拟血管性痴呆小鼠模型 ,给予电针肾俞、膈俞、百会穴和药物喜德镇治疗 15d ,运用高清晰度病理图文分析系统对海马CA1区细胞数目做定量分析。结果 :模型组海马CA1区的场数目、面数密度、面密度均显著减少 ,电针和药物可明显增加以上各参数 ,且以电针作用为优。结论 :电针肾俞、膈俞、百会穴可显著抑制海马CA1区细胞坏死、脱失 ,抑制其细胞数目减少 ,可能为针刺有效治疗血管性痴呆的作用机制之一。     

大鼠中枢神经系统肾母细胞瘤过度表达基因mRNA神经元的发育原位杂交与RT-PCR研究

目的研究大鼠CNS肾母细胞瘤过度表达基因(nov)mRNA神经元的发育. 方法原位杂交组织化学和逆转录PCR. 结果 P0～P4:原位杂交方法最早检测到nov mRNA神经元是P0,P0～P4阳性信号均较弱,分布于脑桥和脊髓等.P5:丘脑部分核团和海马锥体细胞层观察到阳性神经元.P8:nov mRNA神经元数目增多,边缘系统及丘脑明显阳性;大脑皮质和下丘脑阳性较弱.P15:丘脑、下丘脑和大脑皮质nov mRNA神经元增多,其余核团稳定在P8水平.P30:在脑干观察到强烈的阳性信号,大脑皮质强阳性,海马、丘脑和下丘脑标记较强.P60:脑桥和延髓的标记仍然很强,大脑皮质、丘脑和下丘脑的阳性信号稳定在P30水平.P300:nov mRNA神经元显著减少,阳性信号明显减弱.逆转录PCR检测结果与原位杂交所得结果基本相符,在出生前2d检测到nov mRNA,其表达高峰出现在P30～P60之间,随之下降,P150和P300表达弱. 结论 nov基因与其他早期反应基因不同,其表达高峰不是在胚胎发育早期,而是在近性成熟时期,提示nov基因主要在神经系统发育、分化及功能活动中起作用.     

电针对慢性应激大鼠海马神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨电针（electroacupuncture,EA）对慢性应激海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响。方法30只雌性SD大鼠随机分成3组：模型组、电针组和对照组。每组10只。模型组大鼠连续接受21d各种不同的应激,平均每种应激使用2～3次。电针组模型建立后中止刺激,给予电针“三阴交”穴和“百会”穴．连续电针21d。对照组不给予刺激和电针。第42天将3组大鼠处死取脑。利用免疫组织化学方法检测海马区nNOS的表达情况。结果模型组大鼠海马nNOS阳性神经元的数量减少（P〈0．05）,染色变淡;电针后海马nNOS阳性神经元的数量有所增加（P〈0．05）。结论电针可上调nNOS在大鼠海马内的表达。     

拟血管性痴呆小鼠海马CA1区细胞定量分析及电针的影响

目的：观察拟血管性痴呆小鼠海马CA₁区细胞数目变化及电针的影响。方法：复制拟血管性痴呆小鼠模型，给予电针肾俞、膈俞、百会穴和药物喜德镇治疗15 d，运用高清晰度病理图文分析系统对海马CA₁区细胞数目做定量分析。结果：模型组海马CA₁区的场数目、面数密度、面密度均显著减少，电针和药物可明显增加以上各参数，且以电针作用为优。结论：电针肾俞、膈俞、百会穴可显著抑制海马CA1区细胞坏死、脱失, 抑制其细胞数目减少，可能为针刺有效治疗血管性痴呆的作用机制之一。     

创伤后应激障碍小鼠海马恐惧记忆消退相关神经元的异常激活

目的:分析创伤后应激障碍(PTSD)小鼠恐惧记忆消退过程中海马各亚区神经元的激活及差异。方法:使用两种即刻早期基因蛋白标记策略,对PTSD小鼠条件性恐惧记忆消退相关神经元进行标记。第一组利用免疫荧光染色技术,使用野生型小鼠对海马区域神经元Arc蛋白进行标记并观察;第二组使用Fos-CreER^T2;Ai9转基因小鼠,在恐惧记忆消退前23 h注射他莫昔芬诱导荧光蛋白表达,标记相关神经元并观察。通过对标记的海马神经元数量及树突分支结构进行分析,对比海马神经元激活水平和神经元树突的可塑性变化。结果:两组实验观察发现Arc和Fos阳性神经元主要分布在背侧海马,其中Arc蛋白显色在CA3和DG亚区呈富集分布,CA1、CA2亚区的分布则较为散在,而Fos阳性神经元在海马DG亚区表达富集,散在分布于CA1、CA2和CA3亚区。与对照组对比,PTSD组海马各亚区表达Arc蛋白神经元数目没有明显差异;而PTSD组海马中CA1、CA3、DG亚区的Fos阳性神经元数量显著增加(P<0.01)。利用Fos-CreER^T2;Ai9小鼠对两组小鼠海马区域神经元树突分...     

原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法的研究

介绍一种用原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法在同一切片中显示生长抑素ｍＲＮＡ和相对应的生长抑素。同时还比较了六种不同固定液对原位杂交组织化学和原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法的影响。结果表明Ｚａｍｂｏｎｉ氏固定液用于原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法最佳，而４％多聚甲醛磷酸缓冲液用单纯原位杂交最佳。原位杂交组织化学与免疫组织化学结合法显示的下丘脑室周核生长抑素免疫反应阳性神经元均含有相应生     

大鼠海马与前皮质N4 mRNA神经元的发育--原位杂交与RT-PCR研究

目的 研究大鼠N4 mRNA神经元在前皮质与海马的时空表达模式。方法 地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学和逆转录PCR技术。结果 E13-E16：原位杂交方法最早检测到N4 mRNA神经元，在海马与前皮质呈强阳性信号。P0～P2：N4 mRNA阳性信号在海马开始减弱，在前皮质仍维持较高的水平。P7：N4 mRNA阳性信号在海马明显减弱，仅在海马的齿状回见部分阳性神经元，在前皮质的水平轻度减低。P14：N4 mRNA神经元数目增多，主要位于海马齿状回的颗粒细胞层；P21-P28：N4 mRNA在海马的齿回呈强阳性信号，在CA3区呈中等程度的阳性信号，CA1区、CA2区及下托可见部分阳性神经元，前皮质可见Ⅱ／Ⅲ层的锥体细胞层呈强阳性信号。P90～P150：在海马的齿状回、CA3区，CA1区、CA2区及下托见中等强度的N4 mRNA阳性信号。P300：N4 mRNA神经元在海马与皮层的表达明显减少，仅见部分散在的阳性神经元。逆转录PCR检测结果与原位杂交所得结果基本相符，在胚胎期N4 mRNA表达最强，生后减弱，P7降至最低，P21～P28为生后的表达高峰，随之下降，P300表达弱。N4基因在不同发育时期皮层的表达，在胚胎期信号最强，生后略微减弱，组间差异不明显。结论 N4基因特异的表达于海马，并在海马的形成期表达最高，可能对海马的传入通路的发育有重要作用。     

急性缺氧小鼠海马CA1区NOS活力和nNOS蛋白表达的时程变化

目的观察急性缺氧小鼠海马CA1区一氧化氮合酶(NOS)和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的时程变化,探讨NO在脑缺氧中的作用并为抗脑缺氧提供依据.方法复制小鼠急性缺氧模型,采用NADPH-d组织化学和nNOS免疫组织化学方法,研究急性缺氧后不同时程点小鼠海马CA1区NADPH-d和nNOS阳性神经元数量的变化.结果与正常对照组相比较,急性缺氧后0.5h组小鼠海马CA1区NADPH-d和nNOS阳性神经元的数量无明显变化,差异无显著性(P＞0.05),3h、6h和12h组逐渐增多并于12h升高达到最高峰,差异有显著性(P＜0.05),而于24h后开始降低,48h恢复正常.结论急性缺氧后早期海马CA1区NOS和nNOS水平明显增多,NO在缺氧所致早期脑损伤中起重要作用.     

拟血管性痴呆小鼠海马CAl区细胞定量分析及电针的影响

目的：观察拟血管性痴呆小鼠海马CAl区细胞数目变化及电针的影响。方法：复制拟血管性痴呆小鼠模型，给予电针肾俞、膈俞、百会穴和药物喜德镇治疗15d，运用高清晰度病理图文分析系统对海马CAl区细胞数目做定量分析。结果：模型组海马CAl区的场数目、面数密度、面密度均显著减少，电针和药物可明显增加以上各参数，且以电针作用为优。结论：电针肾俞、膈俞、百会穴可显著抑制海马CAl区细胞坏死、脱失，抑制其细胞数目减少，可能为针刺有效治疗血管性痴呆的作用机制之一。     

吗啡依赖小鼠海马神经元c-fos的表达

目的:探讨吗啡依赖小鼠海马不同亚区神经元c-fos表达的差异。方法:以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,腹腔注射纳洛酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度。采用免疫组织化学法显示吗啡依赖小鼠和正常对照组小鼠海马神经元c-fos的表达。结果:吗啡依赖组海马CA1区和齿状回Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),CA3区无明显改变(P>0.05)。纳洛酮催促戒断组海马CA1和CA3区Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),齿状回Fos阳性神经元数目增加更为明显(P<0.01)。吗啡依赖组与纳洛酮催促戒断组CA3区阳性神经元数目有显著性差异(P<0.05)。结论:海马神经元c-fos的表达增强可能与吗啡依赖对神经元的损伤有关。     

Alzheimer病模型大鼠海马生长抑素神经元变化

目的：检测早老型痴呆(Alzheimer,AD)模型大鼠海马内生长抑素(Somatostatin,SS)神经元变化。方法：模型组用D-半乳糖和鹅膏蕈氨酸(Ibotenic acid,IBO)损毁Meynert核联合造模。运用免疫组化ABC法结合图像分析,检测并统计2组大鼠海马SS阳性神经元数目、截面积和灰度值。结果：模型组大鼠海马生长抑素神经元数目减少明显,灰度值增加明显,组间差异显著;生长抑素神经元胞体截面积无明显变化。结论：D半乳糖合并IBO损毁双侧Meynert核所致AD大鼠海马生长抑素神经元衰退明显。     

植物雌激素对去卵巢大鼠海马NOS阳性神经元及学习记忆的影响

目的 :观察植物雌激素对去卵巢大鼠海马NOS阳性神经元及学习、记忆的影响 ,对中枢神经系统的保护作用。方法 :采用NADPH d酶组化观测各组大鼠海马各功能亚区NOS阳性神经元数目和Morris水迷宫行为学方法。结果 :定位航行实验显示各组大鼠的平均逃避潜伏期无明显差异 ,而空间探索实验显示植物雌激素组平台象限的游泳距离百分比和穿台次数均高于去卵巢对照组。在海马CA1和齿状回 (DG) ,植物雌激素组NOS阳性神经元数目较去卵巢对照组明显增多 (P <0 .0 5 )。结论 :植物雌激素能增加海马神经元NOS的表达 ,改善去卵巢大鼠的学习记忆能力 ,提示对中枢神经系统退行性病变具有保护作用。     

不同剂量贫铀污染对大鼠皮层及海马结构生长抑素阳性神经元的影响

目的：探讨贫铀污染对大鼠皮层及海马结构SS阳性神经元的影响。方法：采用不同剂量贫铀颗粒气管灌注大鼠3个月后,观察大鼠皮层及海马结构各区SS阳性神经元形态和数目的变化情况。结果：DU1mg组、DU3mg组和DU5mg组大鼠皮层SS阳性神经元染色较浅,阳性神经元数目与NS组比较均明显减少。海马结构各区DU3mg组和DU5mg组SS阳性神经元染色较浅,阳性神经元数目与NS组比较也明显减少。结论：贫铀污染能引起大鼠皮层和海马结构SS阳性神经元数目减少,并可能通过此途径引起脑功能障碍。     

高原低氧对大鼠下丘脑生长抑素和γ-氨基丁酸含量的影响

目的：观察高原低氧大鼠下丘脑前生长抑素原（ＰＰＳ）ｍＲＮＡ和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）含量变化。方法：应用大鼠高原低氧模型及原位杂交技术和氨基酸测定法,检测下丘脑前ＰＰＳ－ｍＲＮＡ神经元数量和ＧＡＢＡ的含量。结果：高原低氧组大鼠下丘脑ＧＡＢＡ的含量明显增多,室周核、室旁核、弓状核ＰＰＳ－ｍＲＮＡ阳性神经元数目增加,而ＧＡＢＡ受体拮抗剂荷包牡丹碱使高原低氧大鼠下丘脑ＰＳ－ｍＲＮＡ阳性元数目增多更为显著     

雄性大鼠下丘脑雄激素受体蛋白及其mRNA表达的探讨

为了观察雄激素受体 ( AR)蛋白及其 m RNA在大鼠下丘脑的表达 ,本研究采用免疫组织化学和原位杂交方法观察了成年 ( 3月龄 )雄性大鼠下丘脑 AR阳性神经元的存在及其表达。结果显示 ,雄激素受体阳性神经元广泛分布于下丘脑诸核 ,尤其是弓状核、腹内侧核、背内侧核、室周核、室旁核 ,阳性神经元多为小细胞。同时在基因水平证实部分下丘脑神经元能合成 AR,提示雄激素可能作用于以上区域。     

不同条件下NOS阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的表达

目的　探讨不同条件下一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的分布及数量变化 ,分析脊髓中央管周围灰质与针刺镇痛的关系。方法　应用NADPH d法 ,观察在正常情况下、疼痛刺激下、电针刺激下、疼痛加电针刺激下NOS阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的表达。结果　正常情况下 ,脊髓中央管周围灰质有少量NOS阳性细胞 ;疼痛刺激后 ,NOS阳性细胞数目增多 (P <0 .0 1) ;单纯电针刺激下 ,NOS阳性细胞较正常组无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;疼痛刺激加电针刺激后 ,NOS阳性细胞数较疼痛刺激组明显减少 (P <0 .0 1) ,而与正常组相比无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论　抑制疼痛刺激引起的NOS阳性细胞数目增多 ,可能是电针镇痛的机制之一