血浆钙调素微量测定方法

用依赖于环核苷酸的磷酸二酯酶的放射酶法,测定了年龄20～62岁正常人及大鼠血浆钙调素(Calmodulin,CaM)含量。测量的变异系数C.V.为5.4％,回收率为94.7±11.5％。正常人血浆不同时间测定的重复性良好,C.V.为4.1％。这个方法简便。特异,所需血量少,双管测定只需20微升血浆。正常人和大鼠血浆CaM含量分别为623.4±78.7(n=16)和243.4±28.2(n=19)ng/mL。     

抗钙调素抗体的测定与临床应用

<正> 钙调素(Calmodulin,CaM)参与细胞内钙离子介导的多种生理过程,与免疫功能有密切关系。Ikeda等发现某些自身免疫病患者(肝炎、SLE等)体内存在抗CaM抗体,推测这种自身抗体与胞内CaM结合后可干扰后者对免疫活性细胞的调节作用。我们建立了检测血清抗CaM抗体的ELISA技术,并进行了初步临床观察。     

介绍一种大量纯化钙调素的方法

本文介绍了一种适于大量制备钙调素的简易实用方法。，我们用该方法从２．５ｋｇ猪脑组织中一次纯化了１５０ｍｇ，经鉴定，所提ＣａＭ的纯度在ＳＤＳ ＰＡＧＥ中呈一区带，分子量为１９ｋＤ，等电点为４．３８。并对ＰＤＥ有明显的激活作用，该作用可被特异性抑制剂ＴＦＰ抑制。     

钙调素结合蛋白定位研究进展

钙调素是生物体中一种重要的调控物质 ,它广泛存在于各种原核、真核生物中 ,在不同的组织和细胞内 ,通过与不同的 Ca MBPs结合参与不同功能的调控。因此 ,特定组织和细胞中 Ca MBPs的定位 ,特别是生理、病理条件下对其分布变化的研究 ,对于阐明 Ca M的调控机制及生物体的生理机能、发病机制具有重要意义。本文对近些年在这方面的研究方法和有关工作进行了简要概述。     

一种心肌磷酸化肌球蛋白轻链的测定方法

测定组织内磷酸化肌球蛋白轻链(P-MLC)有多种方法,如放射免疫法、层折或不断改变抽提条件和~(32)P放射自显影等,以上方法精确度虽高,但试剂要求也高,且不适宜于小样品分析。因此,我们研究一种将等电聚焦、银染、凝胶光密度扫描相结合的技术可满意地测定心肌中P-MLC,现将实验报告如下。     

高血压患者血清钙调素测定及其与钙拮抗剂的相关探讨

高血压病是心血管疾病中最常见的病种。钙拮抗剂是能有效减低细胞内钙含量,松弛血管平滑肌,扩张周围血管,从而治疗高血压的药物。钙调素(Camodulin,CaM)作为钙离子主要的细胞内受体,调节着高血压发生过程中许多酶的活性及细胞反应过程,是一种重要的钙结合蛋白,因此近年来在高血压病的诊治中受到越来越多的重视。本文根据部分患者服用钙拮抗剂(心痛定)的不同情况分组测定了82例高血压患者的血浆CaM水平,用以探讨钙拮抗剂与CaM的关系,现报告如下。     

心肌细胞内游离钙检测方法的研究进展

人们早就了解Ca~(2 )在心肌细胞的生化代谢、收缩功能及电生理特性中的作用。近几年来,人们发现许多药物作用机理如洋地黄类、抗心绞痛和抗心律失常类药物的作用与Ca~(2 )有关;并发现细胞内游离Ca~(2 )浓度([Ca~(2 )]_i)与依赖Ca~(2 )的酶的激活、ATP的消耗及细胞膜的结构和功能完整性、心肌细胞间电耦联     

钙调素与细胞增殖周期的调控

钙调素在Ｇ１／Ｓ交界处优先合成，增高的钙调素水平缩短细胞周期的时程。钙调素可能系通过ＤＮＡ合成与修复、微管解聚、细胞周期依赖基因的表达、有丝分裂刺激因子的活性及环核苷酸代谢等调节细胞的增殖。     

钙调素特异性免疫复合物的测定与意义

在研制出钙调素（ＣａＭ）和抗钙调素（抗ＣａＭ）血清的基础上，建立了检测ＣａＭ特异性免疫复合物（ＣａＭ－ＩＣｓ）的ＥＬＩＳＡ法．经检测２６名ＳＬＥ、２８名类风湿性关节炎（ＲＡ）、１５名甲亢、２６名慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）患者及１００名正常人血清中ＣａＭ－ＩＣｓ阳性率分别为６１．５％、６７．９％、４６．７％、６９．２％和０％．患者ＣａＭ－ＩＣｓ的出现常与抗ＣａＭ自身抗体的出现同步（ｘ２＝６０．１２，Ｐ＜０．００１）。     

钙调素放免分析法的建立与应用

高血压病是心血管疾病中最常见的病。钙拮抗剂是能有效减低细胞内钙含量，松弛血管平滑肌，扩张周围血管，从而冶疗高血压的药物。钙调素（ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）作为钙离子的主要细胞内受体，调节着高血压发生过程中许多酶的活性及细胞反应过程，是一种重要的钙...     

缺氧预处理对自发性高血压大鼠心肌细胞内钙的影响

目的:探讨缺氧预处理对后继缺氧再给氧所致心肌细胞内钙超载的影响及蛋白激酶C(PKC)和百日咳毒素(PTX)敏感的G-蛋白在缺氧预处理的作用.方法:循环灌流法分离自发性高血压大鼠(SHR)肥大心肌细胞,用Fu ra-2AM测定钙浓度.结果:[Ca2+].为1.0 mmol/L时,预处理组缺氧再给氧后其心肌细胞内游离钙浓度[Ca2+]i为(194.0±24.8) nmol/L,未预处理组为(297.5 ±24.5) nmol/L;无外钙预处理组缺氧再给氧后其心肌细胞[Ca2+]i为(162.0 ±30.7) nmol/L,未预处理组为(236.5±28.3) nmol/L,提示缺氧预处理可减少缺氧再给氧所致心肌细胞内钙释放及外钙内流.在[Ca2+].为1.0 mmol/L组,于预处理前分别预先给予PKC拮抗剂Staurosporine(10 nmol/L)及Gi-蛋白失活剂百日咳毒素(PTX,200 ng /L),可见经后继缺氧再给氧后其心肌细胞[Ca2+]i分别为(264.8±19.3)及(25 8.0±27.7) nmol/L,高于缺氧预处理组但低于未预处理组.结论:SH R肥大心肌细胞,缺氧预处理可减轻后继缺氧再给氧所致心肌细胞内钙超载;PKC及PTX敏感的G- 蛋白可能部分参与缺氧预处理的保护作用.     

淋巴细胞中钙调素结合蛋白的研究

应用~(125)I—钙调素(CAM)覆盖(Overlay)技术,从家兔阑尾(B细胞)、肠系膜淋巴结(T、B细胞)和脾脏(T、B细胞)淋巴细胞胞浆中分别检测到19、20和16种钙调素结合蛋白(CaMBP),其中均含有80、78、70、63、50、41、36、22、17和13.5KD CaMBP,以17KD和13.5KD CaMBP含量最为丰富,且与CaM结合呈部分钙依赖性。     

抗钙调素抗体对中性粒细胞功能的影响

兔抗钙调素（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）抗体或人抗ＣａＭ抗体均可进入人的中性粒细胞（Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ，ＮＴＬ），但进入后对ＮＴＬ的吞噬、杀菌功能无显著影响。作为对照，ＣａＭ拮抗剂三氟拉嗪（ＴＦＰ）虽不影响ＮＴＬ的杀菌功能．但可显著抑制其对白色念珠菌的吞噬。     

一种简便实用的IL-1测定方法

本文对比了透析前后和在制备IL-1时加消炎痛对LPS诱导的腹腔细胞产生IL-1活性的影响。结果发现,在用LPS诱导巨噬细胞产生IL-1时,加入消炎痛可有效地去除IL-1上清中的环氧化酶代谢产物类抑制因子,且对IL-1检测系统无明显影响。此法简便实用,尤其适用于大量样品的检测。     

抗钙调素抗体对淋巴细胞分泌γ干扰素功能的影响

以钙调素（ＣａＭ）拮抗剂三氟拉嗪（ＴＦＰ）和环陈孢素Ａ（ＣｓＡ）为对照，观察抗ＣａＭ对淋巴细胞分泌ＩＦＮ－γ功能的影响，ＩＦＮ－γ水平用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定。结果表明，含抗ＣａＭ人血清和ＴＦＰ、ＣｓＡ－样，均可显著抑制人淋巴细胞分泌ＩＦＮ－γ，这可能是引起自身免疫病患者免疫功能紊乱的原因之一。     

神经肽Y诱导大鼠心肌细胞内游离钙重分布研究

目的: 观察神经肽Y(NPY)对大鼠心肌细胞胞浆钙浓度和肌浆网(SR)内钙含量的影响。方法: 用100 nmol·L^-1 NPY刺激Sprague-Dawley乳鼠心肌细胞24 h, 用荧光染料Fluo-4 AM负载胞浆钙, 记录静息状态下心肌细胞胞浆钙浓度，并用咖啡因诱导的胞浆钙瞬变幅度来反映肌浆网内总钙负荷；用荧光染料Fluo-5N AM 直接标记心肌细胞肌浆网内游离钙离子。所有钙影像均由Leica SP2激光共聚焦显微镜记录。结果: 100 nmol·L^-1 NPY刺激24 h后，心肌细胞胞浆游离钙浓度明显高于对照组（P<0.05）；心肌细胞肌浆网内游离钙含量明显低于对照组 (P<0.01)；咖啡因诱导下钙瞬变幅度也低于对照组。结论: 24 h NPY刺激可导致心肌细胞内游离钙出现空间分布的变化，即胞浆钙浓度增高而肌浆网内钙负荷减少。     

大豆不同亚型钙调素抗原表位的分析

目的 探讨制备抗不同亚型大豆钙调素单克隆抗体的可能性。方法 借助于微机，对５种大豆不同亚型ＣａＭ分子的抗原表位进行预测和分析。结果 大豆ＣａＭ分子存在６个抗原表位，其中至少有１个表位（氨基酸序列７４～８６）可刺激小鼠产生抗大豆不同亚型ＣａＭ分子的单克隆抗体（ｍＡｂ），另外，在序列６，７，９６及１２２，１２３附近也有可能是研制小鼠ｍＡｂ的大豆不同亚型ＣａＭ分子抗原表位所在。结论 为研制抗大豆不同亚型