百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性 BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组（100 mg/kg）、大蒜素组（40 mg/kg）、百合多糖低剂量+大蒜素组（50 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖中剂量+大蒜素组（100 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖高剂量+大蒜素组（150 mg/kg+40 mg/kg）、正常组、模型组和环磷酰胺组（30 mg/kg）。处理7 d后,观察小鼠的肿瘤重量,计算抑瘤率;胸腺、脾脏称重,计算胸腺指数和脾脏指数;ELISA法检测血清免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平及促血管生长因子VEGF水平。结果:大蒜素组、百合多糖中剂量+大蒜素组、百合多糖高剂量+大蒜素组抑瘤率分别为27.27%、34.68%和30.64%。百合多糖中剂量+大蒜素组和百合多糖高剂量+大蒜素组胸腺指数明显高于模型组(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-18水平(P<0.01)。百合多糖中剂量+大蒜素组TNF-α水平高于模型组(P<0.05)。百合多糖中剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-2水平(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组降低VEGF水平(P<0.05)。结论:百合多糖联合大蒜素能抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数,并促进小鼠分泌免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IL-2,减少分泌VEGF。     

消化腺提取物对肿瘤细胞的抑制作用

背景与目的:研究消化腺提取物对小鼠移植瘤模型的抑制作用.材料与方法:将肝癌H22、肉瘤S180和人胃癌MGC-803细胞株移植到小鼠或裸鼠体内,建立荷瘤动物模型,连续灌胃给予消化腺提取物(EDG)后,分期测量肿瘤体积和瘤重.结果:给予EDG后,荷瘤鼠的瘤体生长速度明显减慢,相对肿瘤体积明显缩小(P＜0.01);肿瘤增殖率均未超出60%;肿瘤体积抑制率达到43.7%以上;EDG各剂量组的瘤体重量明显减轻.结论:消化腺提取物对荷瘤小鼠具有明显的抑制肿瘤生长作用.     

金银花多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用与机制研究

[目的]研究金银花多糖对S180肉瘤的抑制作用与机制。[方法]建立小鼠S180实体瘤模型,分别给予低、中、高剂量金银花多糖,测定各组小鼠肿瘤生长抑制率、脾脏指数和胸腺指数;采用免疫组织化学法测定肿瘤组织中Bax和Bcl-2蛋白表达;酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定小鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量。[结果]中、高剂量的金银花多糖对S180肉瘤的抑制率分别为23.95%和30.02%,与模型组比较有显著性差异(P<0.05);高剂量的金银花多糖可以显著提高荷瘤小鼠的脾脏指数;金银花多糖可以上调肿瘤组织中的Bax、Bcl-2蛋白表达;中、高剂量的金银花多糖实验组小鼠血清TNF-α的含量显著高于模型组小鼠(P<0.05)。[结论]金银花多糖具有抑制肿瘤生长的作用,并且对荷瘤小鼠的生长和免疫功能没有明显不良影响;其抑瘤的机制可能与调节Bcl-2/Bax凋亡通路及促进TNF-α的分泌有关。     

不同微生物佐剂S-180瘤苗的免疫效应和抑瘤作用

 目的　比较肿瘤主动特异性免疫治疗中具有佐剂作用的白色念珠菌、李斯特菌及卡介苗的免疫调节效应和抑瘤作用。方法　选择白色念珠菌、李斯特菌、卡介苗各自联合小鼠S-180肿瘤疫苗,皮下免疫接种荷瘤小鼠,检测小鼠脾细胞IL-2、IFN-产生水平,腹腔MTNF-α产生水平,观察荷瘤小鼠瘤体重量和存活期。结果　三种微生物佐剂均能协同瘤苗增强免疫小鼠IL-2、IFN-和TNF-α的产生能力(P<0.01,0.05),有效抑制足垫部移植瘤的生长,抑制率在62.8%～75.8%之间,显著高于单独注射瘤苗组(P<0.01),延长腹腔植瘤小鼠平均存活期7～14天,白色念珠菌、李斯特菌协同提高腹腔植瘤小鼠存活率20%。结论　白色念珠菌和李斯特菌与卡介苗具有同样的佐剂效应,能够协同瘤苗有效抑制肿瘤生长。     

熊果酸抗小鼠H22肝癌移植瘤及对免疫功能的影响

[目的]研究熊果酸(UA)对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用及免疫功能的影响。[方法]采用移植性H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组(对照)、氟尿嘧啶(5-Fu)处理组、UA高、低剂量组,分别连续腹腔注射5-Fu(25mg/kg)、UA(50mg/kg、25mg/kg)14d后,处死小鼠,计算抑瘤率、外周血白细胞数、脾脏指数、胸腺指数、白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等指标,分析UA对小鼠H22肝癌移植瘤的生长抑制作用及免疫功能的影响。[结果]与模型组相比,UA高、低剂量组能显著减少移植瘤瘤重,其抑瘤率分别为51.03%、32.54%,差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。UA高剂量组与5-Fu组抑瘤率(71.33%)比较,差异没有显著性(P>0.05)。UA各组可不同程度地升高荷瘤小鼠的外周血白细胞数和脾脏指数、胸腺指数,同时还能提高荷瘤小鼠血清中TNF-α的水平(P<0.05)。[结论]熊果酸能明显抑制H22荷瘤小鼠的肿瘤生长,其作用可能与增强机体的免疫功能有关。     

半枝莲多糖的抗肝癌作用及其机制的研究

目的探讨半枝莲多糖（SPS）的抗肝癌作用及其机制。方法建立小鼠移植瘤模型,采用荷瘤小鼠抑瘤率检测SPS对H22肝癌小鼠的抗肿瘤作用;制备荷瘤小鼠脾细胞悬液,检测SPS对脾淋巴细胞增殖和脾细胞分泌IL-2和TNF-α的影响。结果SPS在50-200mg／（kg-d）范围内可抑制小鼠H22肝癌的生长,促进荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖,提高脾细胞分泌IL-2和TNF-α的水平。结论SPS可能是通过增强机体免疫功能达到治疗肿瘤的功效。     

芍药软肝方对22肝癌、S180肉瘤荷瘤小鼠抑瘤作用研究

[目的]探讨芍药软肝方对H22肝癌、S180肉瘤荷瘤小鼠的抑瘤作用,并初步探索其作用机制。[方法]采用H22肝癌、S180肉瘤移植瘤小鼠模型,分荷瘤阴性对照组(生理盐水)、芍药软肝方低、中、高剂量组和阳性对照组(环磷酰胺,CTX),观察芍药软肝方对两种荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用以及芍药软肝方对H22肝癌荷瘤小鼠生存时间的影响;并运用荧光定量RT-PCR法评价芍药软肝方对H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织cyclinD1表达的作用。[结果]芍药软肝方低、中、高剂量组和CTX组对移植性荷H22肝癌小鼠的抑瘤率分别为17.72%、33.99%、23.73%、43.95%;与生理盐水组相比,芍药软肝方低、中、高剂量组和CTX组瘤重均有显著性差异(P<0.01)。芍药软肝方低、中、高剂量组和CTX组对移植性荷S180肉瘤小鼠的抑制率分别为29.59%、31.34%、11.17%、53.92%;与生理盐水组相比,低剂量组和中剂量组瘤重均有显著性差异(P<0.05)。芍药软肝方各给药组对H22肝癌腹水瘤小鼠均有一定的生命延长作用,中剂量组与生理盐水组生存天数相比(18.42±2.50vs15.75±2.42),具有显著差异(P=0.014)。芍药软肝方能下调H22肝癌小鼠肿瘤组织cyclinD1 mRNA的表达水平,低剂量组或中剂量组与生理盐水组相比有显著差异(P=0.031,P=0.012),高剂量组与生理盐水组相比差异非常显著(P=0.004)。[结论]芍药软肝方对H22肝癌、S180肉瘤荷瘤小鼠有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能与下调肿瘤组织cyclinD1mRNA表达水平有关。     

α-生育酚琥珀酸酯对S180荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究

背景与目的:探讨α_生育酚琥珀酸酯(α_Tocopherylsuccinate,α_TOS)对S180 荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及对免疫功能的影响。材料与方法:建立小鼠克洛氏(S180)肉瘤动物模型,以α_TOS40mg/kg和80mg/kg剂量肌肉注射连续5d ,同时设肿瘤模型对照组、环磷酰胺阳性对照组和阴性对照组,观察肿瘤抑制率和各组实验动物血像变化;以乳酸脱氢酶法检测α_TOS对实验动物NK(Naturekiller,NK)细胞杀伤活性的影响;采用流式细胞术检测各实验组动物T淋巴细胞亚群,计算CD4 /CD8 比值。结果:α_TOS40mg/kg和80mg/kg剂量组对S180 荷瘤小鼠肿瘤抑制率分别为32.38 %和38.92 %;血液白细胞含量均明显高于阳性对照组;NK细胞杀伤活性高于肿瘤模型对照组;与肿瘤模型对照组相比较,α_TOS处理组CD3 百分率显著增高,差异有统计学意义,CD4 /CD8 比值接近于阴性对照组。结论:α_TOS能抑制S180 荷瘤小鼠肿瘤的生长,无降低白细胞的副作用,并能缓解和改善S180 荷瘤小鼠免疫力低下和免疫紊乱状态,提示α_TOS可能成为一种有效的肿瘤化学治疗药物。     

三氧化二砷治疗原位移植肝癌的药效学研究

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对原位移植小鼠肝癌抑制作用及免疫功能的影响.并探讨As2O3对小鼠肿瘤细胞H22的抑制机理.方法:建立小鼠H22肝原位移植模型,考察As2O3对小鼠原位肝癌抑制率的影响,对免疫器官指数一脾指数(SI)、胸腺指数(TI)的影响,流式细胞术检测对细胞周期和免疫因子的影响,HE染色进行病理学评价,并作综合评价.结果:As2O3高剂量和低剂量的抑瘤率分别为44.60%和26.98%;流式细胞术检测可见As2O3使小鼠肝癌细胞阻滞在S期,从而影响癌细胞的增殖,同时As2O3可调节荷瘤动物IL-2、TNF-a的水平,而对IL-12无明显影响.结论:As2O3能够抑制小鼠原位移植肝癌的生长,抑制移植小鼠肿瘤细胞H22的增殖,改善荷瘤动物的免疫功能.     

复方水蛭素提取物对动物S180肿瘤和th1/th2类细胞因子的影响

目的:探讨复方水蛭素提取物(COSZSEX)对小鼠移植性肿瘤和th1/th2类细胞因子的作用机制,为临床用药提供理论依据。方法:1)COSZSEX体内抑瘤实验:取小鼠40只,随机分组,均接种S180瘤细胞。阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予5-FU,实验组分别给予大小剂量的COSZSEX,连续用药14 d,比较各组肿瘤生长情况,并计算抑瘤率。2)检测th1/th2类细胞因子:取荷瘤鼠组织标本,提取细胞总RNA,紫外分光光度计测出A260及A280值。逆转录(RT)反应,聚合酶链反应(PCR),电泳鉴定。将凝胶电泳图像输入美国Kodak凝胶分析系统,应用1D I mage Analysis Software进行表达强度分析。结果:COSZSEX对小鼠移植性肿瘤具有明显的抑制作用,大小剂量组抑制率分别为49.06%和35.53%,大剂量组优于小剂量组。荷瘤鼠用药后,IL-2和IFN-γ细胞因子升高,IL-10和IL-4细胞因子降低。结论:COSZSEX对小鼠移植性肿瘤具有显著的影响,同时使荷瘤鼠低下的Th1类细胞因子增多,提高了免疫应答能力。     

蚕丝蛋白肽对S180荷瘤小鼠免疫调节作用的研究

目的:探索蚕丝蛋白肽(silk fibroin peptide,SFP)在肿瘤环境下的免疫调节作用,为临床应用提供药理学基础.方法:构建小鼠S180皮下移植瘤模型,分为空白对照组(生理盐水),阳性对照药胸腺五肽组(TP-5,1 mg/kg),蚕丝蛋白肽低剂量组(SFP-L,300 mg/kg)和蚕丝蛋白肽高剂量组(SF...     

黄芪多糖对气阴两虚Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长、转移及细胞周期的影响

目的 观察黄芪多糖抑制气阴两虚Lewis肺癌荷瘤小鼠的生长、转移及对肺癌细胞周期的影响。方法 体外培养Lewis肺癌细胞,随机分为对照组和中药组,流式细胞术检测细胞周期;C57BL/6J小鼠90只,设空白组10只,余80只刨花烟熏并灌胃温热性的中药,移植Lewis肺癌实体肿瘤建立气阴两虚荷瘤小鼠模型并随机分为8组,比较各组小鼠抑瘤率及q值,计数外周血细胞及骨髓细胞,ELISA测定血清IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-10、HIF-1α、VEGF、MMP-2的含量。结果 黄芪多糖将Lewis 肺癌细胞阻滞于S期,随着药物浓度的增加,细胞凋亡逐渐增加;联合用药各组的抑瘤率高于黄芪多糖各组和顺铂组,q值均在0.85~1.15之间;与顺铂组比较,联合用药中、高剂量组小鼠外周血细胞及骨髓细胞的数量,IL-2、INF-γ、TNF-α均显著升高,IL-10、 HIF-1α、VEGF、MMP-2均显著降低（P<0.05, P<0.01）。结论 黄芪多糖在体外对Lewis肺癌细胞有抑制作用,体内与顺铂联合能抑制气阴两虚Lewis荷瘤小鼠肺癌细胞的生长、转移,提高外周血细胞和骨髓细胞的细胞数量,提高IL-2、INF-γ、TNF-α的含量,减少IL-10、HIF-1α、VEGF、MMP-2的含量。     

Preparation of Selenium-enriched Bifidobacterium Longum and its Effect on Tumor Growth and Immune Function of Tumor-Bearing Mice

In this study, we demonstrated selenium (Se) accumulation in Bifidobacterium longum strain (B. longum)and evaluated the effect of Se-enriched B. longum (Se-B. longum) on tumor growth and immune function intumor-bearing mice. Analysis using high-performance liquid chromatography-inductively coupled plasmamass spectrometry (HPLC-ICP-MS) revealed that more than 99% of Se in Se-B. longum was organic, the maincomponent of which was selenomethionine (SeMet). In the in vivo experiments, tumor-bearing mice (n=8) wereorally administrated with different doses of Se-B. longum alone or combined with cyclophosphamide (CTX).The results showed that the middle and high dose of Se-B. longum significantly inhibited tumor growth. WhenSe-B. longum and CTX were combined, the antitumor effect was significantly enhanced and the survival time oftumor-bearing mice (n=12) was prolonged. Furthermore, compared with CTX alone, the combination of Se-B.longum and CTX stimulated the activity of natural killer (NK) cells and T lymphocytes, increasing the levels ofinterleukin-2 (IL-2) and tumor necrosis factor-α (TNF-α), and the leukocyte count of H22 tumor-bearing mice(n=12).     

黄连素改善小鼠结肠腺癌恶病质实验研究

目的通过小鼠结肠腺癌恶病质模型实验探索传统中药提取物黄连素改善恶病质状态的作用及机制。方法将40只BALB/c小鼠随机分成5组,每组8只。即非荷瘤健康对照组、肿瘤恶病质组、黄连素低剂量干预组、黄连素中剂量干预组、黄连素高剂量干预组,使用小白鼠结肠腺癌细胞株CT-26皮下注射BALB/c小鼠,构建荷瘤小鼠肿瘤恶病质模型。黄连素低、中、高剂量干预组小鼠分别给予黄连素12.5 mg/（kg·d）、25 mg/（kg·d）、50mg/（kg·d）灌胃,连续15天。健康对照组、肿瘤恶病质组给予等量生理盐水灌胃。观察低、中、高剂量黄连素对恶病质小鼠的体质量、摄食量、饮水量以及血清中三酰甘油、血糖及总蛋白、白蛋白水平的影响,并比较各组肿瘤组织炎性细胞因子白细胞介素1（interleukin-1,IL-1）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平以及肝、肾组织形态。观察不同剂量黄连素纠正恶病质的疗效及对肝肾的保护作用。结果与肿瘤恶病质组比较,黄连素干预各组能抑制癌症恶病质小鼠体质量下降,增加小鼠的摄食量、饮水量（均P〈0.05）;可升高血中总蛋白、白蛋白、血糖浓度,降低血清中三酰甘油的异常升高（均P〈0.05）;可降低肿瘤组织中的IL-1、IL-6及TNF-α表达水平（均P〈0.05）;可改善肝、肾组织形态。结论黄连素能有效改善小鼠结肠腺癌恶病质状态,以黄连素中、高剂量组疗效更佳,其机制可能与其有效降低细胞因子（IL-1、IL-6及TNF-α）表达相关。     

S180骨肉瘤细胞TLRs表达及其与肿瘤耐受的相关性

目的探讨TLRs在诱导S180骨内瘤细胞免疫耐受中的作用,为肿瘤临床的免疫治疗提供新的思路。方法建立S180腹水癌早晚期模型,采用RT-PCR方法检测体外S180骨肉瘤细胞和荷瘤鼠体内早晚期S180骨肉瘤细胞TLR1-9 mRNA的表达水平,以及LPS体外刺激S180骨肉瘤细胞前后TGF-β和IL-10 mRNA表达变化,ELISA方法检测LPS体外刺激S180骨肉瘤细胞前后肿瘤上清液中TGF-β蛋白分泌的含量。结果体外S180骨肉瘤细胞表达TLR1-7和TLR9,TLR8不表达。荷瘤鼠体内早晚期S180骨肉瘤细胞TLRs的表达不同,TLR4、9表达早期高于晚期,其中TLR4的高表达有统计学意义（P<0.05);TLR1、2、3、5、6和7表达晚期高于早期,但差异无统计学意义(P>0.05)。10μg/ml 的LPS在不同时间点体外刺激S180骨肉瘤细胞后IL-10 mRNA表达水平均上调,且有时间依赖关系,TGF-β在mRNA和蛋白水平也均有增加。结论体外S180骨肉瘤细胞表达多种TLRs,荷瘤鼠体内早晚期S180骨肉瘤细胞TLRs表达的不同在肿瘤发展的不同时期可能发挥不同的作用,S180骨肉瘤细胞TLR4信号通路活化后可能通过促进TGF-β和IL-10的分泌从而参与肿瘤的免疫耐受。     

肉苁蓉苯乙醇总苷抗肝癌作用的实验研究

目的：研究肉苁蓉苯乙醇总苷（CPhGs）的抗肝癌作用,并探讨其可能的作用机制。方法：采用前肢右侧腋部皮下注射法建立小鼠肝癌H22荷瘤模型,实验设空白对照组、肝癌H22荷瘤模型组、肝复乐阳性治疗组（1 351.5 mg/kg）、CPhGs高剂量组（500 mg/kg）、中剂量组（250 mg/kg）、低剂量组（125 mg/kg）,共6组,每组10只。除空白对照组和模型组外,其余各组分别灌胃给予肝复乐或CPhGs,连续10 d。期间监测小鼠的一般状况,观察各组H22荷瘤小鼠瘤体生长情况,实验结束时,摘眼球取血,酶联免疫（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和甲胎蛋白（AFP）含量;分离脾脏、肝脏,称质量,计算脏器系数;完整剥取瘤体,计算各组小鼠的肿瘤抑制率;HE染色观察瘤体病理组织学变化。结果：荷瘤模型组动物腋下肿瘤出现早且生长最快,CPhGs低、中剂量组次之,高剂量组和阳性治疗组瘤体生长较慢。与模型组比较,CPhGs中、高剂量组瘤质量均明显降低（P < 0.05）,各剂量组抑癌率随CPhGs剂量增加依次升高（P < 0.05）;阳性治疗组和CPhGs各剂量组脾脏系数均明显升高及肝脏系数均明显降低（P < 0.05）;CPhGs中、高剂量组和阳性治疗组IL-2含量均明显升高（P < 0.05）,而AFP含量均明显降低（P < 0.05）;CPhGs各剂量组和阳性治疗组TNF-α含量均明显降低（P < 0.05）。病理结果发现CPhGs各剂量组小鼠肝癌细胞生长受到抑制、数目较少、异质性降低、并伴有大量坏死细胞。结论：CPhGs能降低肝癌H22荷瘤小鼠肝脏损伤,并对其肿瘤生长有抑制作用,可能与CPhGs降低荷瘤小鼠血清中AFP含量及提高荷瘤小鼠免疫能力有关。     

Solanum Nigrum Polysaccharide (SNL) Extract Effects in Transplanted Tumor-bearing Mice - Erythrocyte Membrane Fluidity and Blocking of Functions

Background: Solanum nigrum L. has been used in traditional Chinese medicine because of its diuretic andantipyretic effects. The present research concerned effects of crude polysaccharides isolated from Solanum nigrumL. on erythrocyte membranes of tumor-bearing S180 and H22 in mice. Materials and Methods: Fluorescencelabeledred blood cell membranes were used with DPH fluorescence spectrophotometry to examine erythrocytemembrane fluidity, and colorimetry to determine degree of erythrocyte surface membrane blocking. Extentof reaction by tumor-bearing mice with the enzyme erythrocyte membrane bubble shadow detection of redcell membrane variation in the degree of closure before and after administration. Results: Solanum nigrumpolysaccharide could significantly improve the S180 and H22 tumor-bearing mice erythrocyte membrane fluidity,compared with the control group, the difference was significant (p<0.01), SNL can significantly improve the redblood cell membrane and then S180 tumor-bearing mice sealing ability, compared with the negative control group,the difference was significant(p<0.05, p<0.01). H22 tumor-bearing mice can increase red cell membrane and thensealing ability, the difference was significant (p<0.05). Solanum nigrum polysaccharide degree of fluidity andblocking two transplanted tumors in mice restored the ability to raise the red cell membrane has a significanteffect. Conclusions: Solanum nigrum L.-type mice transplanted tumor can affect the red blood cell membranefluidity and re-closed, through the red cell membrane of red blood cells to enhance the immune function of thepossibility of erythrocyte immunity against tumor formation garland provide experimental basis.     

Immunological Characteristics of the Effector Cells Induced by a Combination Therapy with Cyclophosphamide and Allogeneic Lymphocytes

A significant inhibition of tumor growth was observed when sarcoma 180 (S180)-bearing ICR strain mice were treated by a combination therapy, with a low dose of cyclophosphamide (CY) and an inoculation of allogeneic lymphocytes collected from C57BL/6 mice. The growth-inhibitory effect was significantly increased by an inoculation of a relatively lower dose of allogeneic lymphocytes (1 × 10⁵ cells) and CY. The effector cells induced in the mice treated with CY and allogeneic lymphocytes expressed the Lyt 1.2, Lyt 2.2, IL-2R antigens on their membrane surface and did not express the H2KbDb (donor H-2) antigen, and they showed a specific cytostatic activity against S180 cells. These results strongly suggested that a combination therapy with a low dose of CY with an inoculation of allogeneic lymphocytes augmented an induction of specific cytotoxic T lymphocytes in the tumor-bearing recipient mice.