丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流变化的影响

目的:探讨丹参注射液对模拟缺血预适应引起兔心室肌细胞动作电位和ATP敏感性钾电流(IK(ATP))变化的影响,试图揭示其保护心肌缺血-再灌注损伤,抗缺血性心律失常作用的离子机制。方法:采用酶解法分离兔左心室细胞,按先后顺序,用正常Tyrode液和模拟缺血液以及模拟缺血液加丹参(750 mg.L-1)灌流,利用膜片钳全细胞记录技术记录不同条件下动作电位和IK(ATP)前后变化。结果:①模拟缺血液灌流后动作电位时程(APD)复极化的50%(APD50)和90%(APD90)分别缩短(与正常组相比P<0.05,n=12);模拟缺血液加丹参灌流,APD50和APD90缩短更加明显,分别缩短了80.46%和71.87%(与正常组相比P<0.01,与模拟缺血液组相比P<0.05,n=12)。静息电位和动作电位幅值无明显改变;②经模拟缺血液灌流,引起IK(ATP)通道的开放,膜电流显示外向性直线形,发生率为58.33%(7/12,P<0.05)。模拟缺血液加丹参,更容易引起IK(ATP)开放,膜电流曲线完全成为直线,诱发率为91.67%(11/12,与正常组和模拟缺血液组相比P<0.05);③Glibenclimide能使这种外向性直线形膜电流恢复为“N”形,证明这种膜电流为IK(ATP);经丹参作用后,改用正常Tyrode液冲洗,心肌细胞上结合的丹参可以被洗脱以及从模拟缺血液中得到恢复。结论:丹参能产生类似心肌缺预适应的病理生理过程,起到了ATP敏感性钾通道开放剂效应,这可能是丹参对心肌缺血预适应的保护作用具有增强效应电生理基础。     

THE EXPRESSION OF HCN4 GENE AND ACTION POTENTIAL IN ATRIAL FIBRILLATION PATIENTS WITH MITRAL STENOSIS OF RHEUMATIC HEART DISEASE

目的:通过分析风湿性心脏病二尖瓣狭窄(风心二狭)患者心房肌组织HCN4基因表达及动作电位与心房颤动发生的关系,为风心二狭房颤发生机制的研究提供理论依据.方法:取手术患者心耳组织100 mg,提取RNA后应用半定量逆转录—PCR方法检测mRNA含量,并对PCR产物测序分析;以HCN4基因mRNA和内参β-actin含量的比值作为评价HCN4基因mRNA表达水平指标;采用急性分离心肌细胞的方法将其分为MS房颤(atrial fibrillation,AF)组和窦律(Sinus rhythm,SR)组,记录两组的动作电位(AP),观察两组心肌细胞动作电位时程( APD)的改变.结果:风心二狭房颤组及对照组HCN4基因mRNA与β-actin含量的相对表达值比值分别为0.696±0.257和0.125±0.010,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).房颤病人心房肌APD、APD复极至50％的时程(APD50)及APD复极至90％的时程(APD90)较窦性心律组明显缩短,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:房颤心肌细胞HCN4基因的过度转录表达及APD缩短可能共同参与了调控风心二狭房颤的发生过程,揭示了风心二狭房颤发生的分子机制及电流学机制.     

辅酶Q_(10)和复方丹参对心肌线粒体呼吸链的保护作用

目的　制备异丙基肾上腺素对心肌损伤模型 ,探讨辅酶Q10 和复方丹参对心肌线粒体呼吸链的保护作用。方法　采用In cheolKim法和Lucile Smith法分别测定对照组 ,异丙肾损伤组 ,丹参保护组和辅酶Q10 保护组的琥珀酸脱氢酶比活力 ,心肌线粒体辅酶Q10 含量等多项指标。结果　复方丹参组和辅酶Q10 组心肌线粒体琥珀酸脱氢酶比活力 ,心肌线粒体辅酶Q10 含量都显著高于异丙肾组。结论　辅酶Q10 和复方丹参对心肌线粒体呼吸链有明显地保护作用。     

糖尿病大鼠心肌电学的改变与腺苷的作用

目的:探讨糖尿病心肌病的心肌电生理改变以及腺苷(ADO)对其电生理的可能作用.方法:以SD雄性大鼠复制糖尿病模型,选择健康成年SD雄性大鼠作为对照组,6周时记录大鼠体表心电图和右心室乳头肌跨膜电位,观察ADO对跨膜电位的影响.结果:大鼠糖尿病成模后第6周,体表心电图QT间期和右室乳头肌动作电位时程(APD)各水平均明显长于对照组大鼠(P＜0.01);而静息膜电位(RP)、动作电位幅度(APA)和超射值(OS),以及0期去极化最大速率(Vmax)均无明显变化.经10～400 μmol/L ADO灌流,糖尿病组大鼠和对照组大鼠右心室乳头肌跨膜电位各参数均无明显作用,当ADO浓度增加到500 μmol/L时,对照组大鼠右心室乳头肌APD30、APD50、APD70及APD90轻度缩短(P＜0.05),而对糖尿病组大鼠APD无明显影响.结论:糖尿病大鼠右室乳头肌动作电位时程和QT间期明显延长,而ADO(10～500 μmol/L)对糖尿病大鼠过长的ADP无明显缩短作用.     

丹参对缺血心肌细胞离子通道的作用

目的丹参系传统的活血化瘀中药,有抗心肌缺血、抗血小板、抗血栓形成、调血脂、抗氧化及抗动脉粥样斑块形成等作用.但是其对缺血心室肌细胞的直接作用目前尚不清楚.该实验旨在通过模拟心肌细胞的缺血环境,采用全细胞膜片钳技术,观察丹参对缺血心室肌细胞动作电位(AP)、L-型钙电流(ICa-L)、ATP敏感性钾血流(IK(ATP))以及瞬时外向钾电流(Ito的影响,从而进一步阐明其对缺血心肌细胞保护作用的机制.方法采用酶解加机械分离的方法,取得具有正常生理活性的耐钙心室肌细胞,通过、N2饱和的去除葡萄糖的细胞外液灌流,另加入20 mmol/L的乳酸,模拟缺血环境,应用全细胞膜片钳技术观察丹参对缺血心室肌细胞AP、ICa-L、IK(ATP)以及It.的影响.结果①丹参可明显缩短正常及缺血心室肌细胞的动作电位时程(APD),对动作电位幅值(APA)、静息膜电位(RP)以及O期最大除极速率(Vmax)均无明显影响.②丹参可明显抑制正常及缺血心室肌细胞的ICa-L,并且对缺血细胞的ICa-L的抑制作用没有对正常细胞强.③丹参能够增加缺血引起的IK(ATP),具有ATP敏感性通道的开放作用.④丹参能够增加缺血心室肌细胞的Ito,促进早期复极.结论①丹参能够缩短心室肌细胞的动作电位,主要是由于对ICa-L的抑制,因此,丹参阻Ca2+内流,减轻钙超载,减少ATP的分解,降低异常物质在细胞内的堆积,对缺血心肌有保护作用.②丹参能够减少缺血心室肌细胞APD的不均一性以及缓解此时出现的钙超载现象,因而可能减少因折返或自律性增高所导致的心律失常的发生.③丹参具有ATP敏感性钾通道的开放作用,能够增加缺血心室肌细胞的Ito,两者的临床意义有待于进一步探讨.     

风心二狭房颤患者心房组织的HCN4基因表达及动作电位的研究

目的:通过分析风湿性心脏病二尖瓣狭窄(风心二狭)患者心房肌组织HCN4基因表达及动作电位与心房颤动发生的关系,为风心二狭房颤发生机制的研究提供理论依据。方法:取手术患者心耳组织100mg,提取RNA后应用半定量逆转录-PCR方法检测mRNA含量,并对PCR产物测序分析;以HCN4基因mRNA和内参β-actin含量的比值作为评价HCN4基因mRNA表达水平指标;采用急性分离心肌细胞的方法将其分为MS房颤(atrial fibrillation,AF)组和窦律(Sinus rhythm,SR)组,记录两组的动作电位(AP),观察两组心肌细胞动作电位时程(APD)的改变。结果:风心二狭房颤组及对照组HCN4基因mRNA与β-actin含量的相对表达值比值分别为0.696±0.257和0.125±0.010,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。房颤病人心房肌APD、APD复极至50%的时程(APD50)及APD复极至90%的时程(APD90)较窦性心律组明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:房颤心肌细胞HCN4基因的过度转录表达及APD缩短可能共同参与了调控风心二狭房颤的发生过程,揭示了风心二狭房颤发生的分子机制及电流学机制。     

自体冷血心脏停搏液对未成熟心肌细胞三磷酸腺苷及二磷酸腺苷的影响

目的通过对比自体冷血心脏停搏液与含血停搏液、St.Thomas液、HTK液对未成熟心肌细胞三磷酸腺苷(ATP)及二磷酸腺苷(ADP)含量的影响,提示自体冷血心脏停搏液对未成熟心肌细胞的保护作用。方法年龄≤12个月行体外循环室间隔缺损修补术的患儿80例,随机分成自体冷血停搏液组(A组)、冷血停搏液组(B组)、St.Thomas液组(C组)和HTK液组(D组),每组各20例。于主动脉阻断前、主动脉开放后30 min取右心耳标本50 mg,用HPLC法测定心肌ATP、ADP含量。结果主动脉阻断前各组患儿心肌ATP与ADP含量无统计学差异(P0.05);各组患儿主动脉开放后30 min心肌ATP与ADP含量均较阻断前显著减少(P0.01);A组患儿主动脉开放后30 min心肌ATP与ADP含量较B组显著增高(P0.01)。结论自体冷血停搏液可显著提升体外循环心内直视手术术后未成熟心肌细胞ATP含量,效果明显优于含血停搏液、St.Thomas液以及HTK液。     

三碘甲腺原氨酸对心肌细胞能量代谢的影响及其在心肌保护中的作用

目的 研究不同甲状腺功能状态下,三碘甲腺原氨酸（T3）对大鼠缺血再灌注（I/R）心肌细胞能量代谢的影响,探讨T3在心肌保护中的作用。方法 将实验大鼠分为甲状腺功能正常（A组）和甲状腺功能减退（甲减,B组）组,两组又随机分成空白缺血组、单纯灌注液组、T3灌注液组;建立离体心工作模型;利用反相高效液相色谱法测定各组心肌细胞ATP、ADP、AMP含量。结果 甲减状态心肌细胞ATP、ADP、AMP含量均明显降低（P<0.01）;I/R过程中,A、B两组ATP、ADP、AMP含量均大幅度下降,然而,T3灌注液组ATP含量显著高于单纯灌注液组：A组（1.03±0.02）vs（0.62±0.02）(mol/g,B组（0.85±0.02）vs（0.40±0.01）(mol/g,P<0.01。结论 甲减或I/R损伤使心肌细胞的能量合成及利用受到严重损害,T3可明显增加心肌细胞ATP的合成量与储备量,具有良好的心肌保护作用。     

依达拉奉对鼠氧自由基心肌损害和人病毒性心肌炎的治疗研究

目的研究依达拉奉对鼠氧自由基（OFR）心肌损害和人病毒性心肌炎（VMS）的治疗作用。方法检测大鼠心肌细胞培育液的心肌细胞存活力（CMV）,超氧化物歧化酶（SOD）,丙二醛（MDA）,肌钙蛋白T（cTnT）指标以对比依达拉奉、维生素C和辅酶Q10对经氧自由基预处理的心肌细胞的保护作用。检测治疗前后血清SOD、MDA、cTnT指标以对比依达拉奉、维生素C和辅酶Q10对VMS患者的治疗作用。结果①大鼠实验示：依达拉奉组CMV高于维生素C组（P〈0.05）和辅酶Q10组（P〈0.05）,SOD活性高于维生素C（P〈0.05）;MDA低于维生素C组（P〈0.05）及辅酶Q10组（P〈0.05）;cTnT低于维生素C组（P〈0.05）及辅酶Q10组（P〈0.05）。②VMS研究示：经治疗,依达拉奉组患者SOD活性上升高于维生素C组及辅酶Q10组（均为P〈0.05）;MDA和cTnT下降高于维生素C组及辅酶Q10组（MDA均为P〈0.01,cTnT均为P〈0.05）;结论依达拉奉在VMS的抗氧化治疗中有明显效果。     

黄芪甙Ⅳ对豚鼠心电图及心室肌动作电位的影响

目的 观察黄芪甙Ⅳ对豚鼠心电图(ECG)及心室肌动作电位的影响.方法 分别在麻醉豚鼠和Langendoff心脏灌流模型上记录体表ECG和离体心脏ECG,采用细胞内微电极技术记录豚鼠右心室乳头肌的动作电位.结果 黄芪甙Ⅳ能延长豚鼠体表ECG和离体心脏ECG的RR间期,这一效应具有剂量依赖性.黄芪甙Ⅳ还能缩短动作电位的时程(APD),但对静息电位、动作电位幅度和最大去极速度没有明显影响.结论 黄芪甙Ⅳ具有负性变时作用,能缩短心肌细胞APD,其作用机制可能与慢钙通道有关.     

丙泊酚预处理对兔心肌缺血再灌注损伤能量代谢的影响(英文)

目的观察丙泊酚预处理对兔心肌缺血再灌注损伤（MIRI）能量代谢的影响。方法实验用新西兰雄性大白兔40只，随机分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IP组）和丙泊酚预处理组（PP组）。采用高效液相色谱（HPLC）法测定心肌组织中高能磷酸化合物三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）和总腺苷酸量（TAN）、能荷（EC）的含量。检测心肌组织Na＋／K＋-ATPase，Ca^2＋／Mg2＋-ATPaSe和血清乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸激酶（CK）的活性。结果IP组和PP组较IR组的ATP、ADP、AMP、TAN和EC含量明显增加，ATPase活性显著升高，LDH、CK-MB含量明显降低（P〈0．05，P〈0．01）。而IP组与PP组比较，各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论丙泊酚预处理同缺血预处理一样可改善缺血再灌注损伤时的心肌能量代谢，其作用机制可能与增加缺血区的心肌能量储备。保护ATPase活性，改善能量代谢障碍有关。     

益气温阳方对心力衰竭大鼠心脏血流动力学及心肌能量代谢的影响

目的:观察益气温阳方对冠状动脉结扎致充血性心力衰竭大鼠心脏血流动力学及心肌能量代谢的影响。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、曲美他嗪对照组及益气温阳方高、中、低剂量组,通过冠状动脉结扎法制备充血性心力衰竭大鼠模型。药物灌胃干预4周后采用电生理仪记录血流动力学变化,高压液相色谱法测定心肌细胞中ATP、ADP、AMP含量变化。结果:益气温阳方组心率、左室内压最大上升和下降速率(±dp/dt max)均高于模型组(P<0.01),左室舒张末压(LVEDP)低于模型组(P<0.01),益气温阳方高、中剂量组略优于曲美他嗪组;益气温阳方组大鼠心肌组织ATP含量显著高于模型组(P<0.01),ADP、AMP含量显著低于模型组(P<0.01),三组疗效略差于曲美他嗪组。结论:益气温阳方可以有效改善心肌梗死后心力衰竭大鼠模型心脏功能,同时提高心衰大鼠心肌能量代谢产物ATP含量,减少AMP、ADP的含量,有效调节心肌梗死后心衰大鼠心肌能量代谢紊乱。     

辅酶Q_(10)对大鼠离体灌流心脏缺氧—复氧损伤的保护作用

在 Langendorff 大鼠离体心脏灌流模型上,辅酶 Q_(10)(CoQ_(10))10mg/kg 缺氧灌流明显增强心肌组织对缺氧的耐受,减轻心肌缺氧—复氧损伤、抑制心肌脂质过氧化物的产生,降低心肌组织蛋白的漏出。结果提示 CoQ_(10)对防治心肌再灌注损伤是有益的。     

Effects of Ropivacaine and Bupivacaine on Rabbit Myocardial Energetic Metabolism and Mitochondria Oxidation

Summary:To compare the cardiotoxicity induced by ropivacaine and bupivacaine and to investigatethe mechanism of cardiotoxicity,24 mature New Zealand rabbits were divided randomly into controlgroup(group C),ropivacaine group(group R)and bupivacaine group(group B).Hearts were drawnout rapidly from the anesthetized animals and cardiac perfusion was performed immediately.Ropiva-caine 500 ng/ml(group R)or bupivacaine 500 ng/ml(group B)was added to the perfusion solution.Ventricular myocardial ATP,ADP and AMP were measured with high performance liquid chro-matogram.The ability of myocardial mitochondria oxidation to pyruvate or palmitoylcarnitine wasdetected with Clark electrode.Our results showed that myocardial ATP and ADP decreased signifi-cantly(P<0.05)in group R and most significantly(P<0.01)in group B as compared with groupC.Myocardial ATP and ADP decreased most significantly(P<0.01)in group B as compared withgroup R.The changes of myocardial AMP revealed significant difference among three groups.Thecha     

注射用复方荭草冻干粉针剂对大鼠血小板聚集及小鼠耐缺氧能力的影响

目的：观察注射用复方荭草冻干粉针剂（Compound Hongcao Freeze-dried Powder,CHCFD）对大鼠血小板聚集功能和小鼠耐缺氧能力的影响。方法：采用比浊法观察CHCFD高、中、低剂量对二磷酸腺苷（ADP）诱导的大鼠血小板聚集率的影响;采用盐酸异丙肾上腺素皮下注射致小鼠心肌缺氧模型,观察CHCFD高、中、低剂量对小鼠存活时间的影响。结果：与对照组比较,CHCFD高、中剂量可明显抑制大鼠血小板聚集率,抑制率分别为18.25%和20.69%（P〈0.05）;与盐酸异丙肾上腺素组比较,CHCFD高、中剂量可明显延长小鼠的存活时间,延长率分别为15.27%和18.80%（P〈0.05）。结论：CHCFD对ADP诱导的大鼠血小板聚集具有抑制作用,CHCFD显著提高小鼠常压耐缺氧能力。     

肾上腺素、异丙肾上腺素及三磷酸腺苷对大鼠心肌细胞Cl-/HCO-3交换的增强作用及其意义

研究肾上腺素、异丙肾上腺素及三磷酸腺苷对大鼠心肌细胞阴离子交换蛋白Ｃｌ＾－／ＨＣＯ＾－３交换活性的影响,探讨其病理生理意义,方法计算机辅助微量荧光检测法测定培养的正常及心衰心肌细胞Ｃｌ＾－／ＨＣＯ３＾－交换活性。结果心衰心肌细胞ｐＨｉ的恢复斜率大于正常心肌细胞,肾上腺素、异丙肾上腺素及三磷酸腺苷对碱负载的正常及心衰心肌细胞ｐＨｉ的恢复斜率均分别显著大于对照。结论心衰心肌细胞Ｃｌ＾－／ＨＣＯ＾－３ｕ     

拳参-413对心肌肥厚大鼠心肌电学的影响

目的：探讨拳参-413抗心肌肥厚大鼠心律失常可能的作用机制.方法：取清洁级SD雄性大鼠32只,体质量200~260 g,随机分成 ①生理盐水对照组;②心肌肥厚模型组;③ 0.5 mmol/kg的拳参-413组;④ 1.0 mmol/kg的拳参-413组.②③④组大鼠每天背部皮下注射1.0 mg/kg异丙肾上腺素,共10天.对照组每天注射相同体积的生理盐水.10天后给药组每天给予不同浓度的拳参-413,连续7天.观察拳参-413治疗前后大鼠左心室重量指数以及乳头肌跨膜电位的变化.结果：实验结果显示,拳参-413（高、低剂量）治疗后,左心室重量指数明显降低,各组心肌肥厚大鼠右心室乳头肌动作电位时程（APD）复极化各水平均不同程度地长于正常对照大鼠,拳参-413高剂量组APD较模型组比较明显缩短（P〈0.05;P〈0.01）.而去极化最大速率（Vmax）、超射值（OS）和动作电位幅度（APA）以及静息膜电位（RP）水平均无明显变化.结论：心肌肥厚大鼠右心室乳头肌动作电位时程明显延长,拳参-413能够有效的缩短APD减轻心肌肥厚,说明拳参-413具有良好的抗心肌肥厚作用.     

舒胸片对垂体后叶素和异丙肾上腺致心肌损伤的影响

目的:观察舒胸片(SXT)对垂体后叶素(PIT)和异丙肾上腺素(ISO)致大鼠心肌损伤的影响。方法:采取大鼠股静脉注射PIT和皮下注射ISO致急性心肌损伤模型,观察SXT及有效成分组(ECGs)对大鼠注射PIT后不同时间J点和T波抬高情况,以及在两个模型中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果:SXT能明显抑制PIT引起的大鼠心电图J点和T波的抬高,在两个模型中SXT能明显提高大鼠心肌组织SOD活性、降低心肌组织MDA水平,降低心肌组织或血清中CK、LDH的水平。等效剂量给药时,SXT与ECGs具有相同的作用效果。结论:SXT对PIT和ISO致大鼠心肌损伤模型具有明显保护作用,这一作用可能与其抗氧化作用有关,并验证了SXT保护心肌作用的有效成分组。