生存素在恶性肿瘤诊治中的应用研究进展

生存素(Survivin)是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的新近成员,表达于胚胎组织和多种癌组织,在大多数终末分化的正常组织中未能检测出表达。Survivin的表达受细胞周期调控,在G2/M期有异常高的特异性表达。由于其独特的结构、特殊的组织分布及在细胞凋亡和细胞分裂调控中所起作用,引起了肿瘤研究工作者的浓厚兴趣,现将Survivin在恶性肿瘤诊治方面的研究进展作一综述。1 Survivin的生物学特性Survivin是1997年Altieri利用效应细胞蛋白酶受体1(effector cell protease receptor 1,EPR)筛选cDNA人基因组库获得的凋亡抑制蛋白。Survivin基因全长1…     

原发性肝癌细胞凋亡与端粒酶的表达研究

细胞凋亡和端粒酶都是近年来肿瘤基础研究的热点课题之一。了解两者的关系以及它们在肝癌生物学行为中的意义 ,有一定临床价值。1 资料与方法 :(1)一般资料 :原发性肝癌 (hepatocelluarcarcinoma,HCC)标本 4 5例 ,男 36例 ,女 9例。年龄 2 8～ 70岁。平均 4 5 2岁。术前均未行放疗和化疗。细胞凋亡检测标本采用石蜡包埋切片 ,另取旁组织作对照组。端粒酶检测标本于离体后 0 5h内采集 ,- 80℃冰箱内储存备测。HCC恶性程度按Edmondson分级标准 ,Ⅱ级 11例 ,Ⅲ级19例 ,Ⅳ级 15例。 (2 )方法 :细胞凋亡检测方法采用TUNEL法检测。试剂盒购…     

凋亡抑制蛋白Survivin在肝癌中的表达及其与临床特征的关系

Survivin是近年发现的凋亡抑制蛋白家族 (IAPs)中的一个成员 ,主要通过抑制caspase级联反应下游共同通路的caspase 3 ,7发挥其抗凋亡作用[1,2 ] 。Survivin在多种肿瘤组织中均有表达 ,我们采用免疫组织化学技术检测Survivin在肝癌和肝硬化组织中的表达 ,并探讨其表达与临床特征的关系。一、材料和方法1.标本来源 :收集武汉同济院肝脏外科中心 1999年 6月～ 2 0 0 0年 6月手术切除肝癌标本 3 8例 ,癌旁组织 2 7例 ,术前均未行放疗及化疗 ,其中男 3 3例 ,女 5例 ,平均年龄 47.3岁 ,门静脉高压性肝硬化 10例 ,所有标本均经病理证实。其中高…     

生存素和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3在肝癌中的表达及其关系

目的　探讨生存素 (Survivin)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3 (Caspase 3 )在原发性肝细胞癌 (HCC)组织中的表达及两者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系。方法　采用蛋白印迹和免疫组织化学法检测 43例肝癌组织、2 0例癌旁组织和 11例正常肝组织中Survivin和Caspase 3蛋白表达情况。逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测Survivin和Caspase 3表达情况。 结果　肝癌组织中Survivin表达率为 69.8% (3 0 /4 3 ) ,而除 1例癌旁组织外 ,其他癌旁组织和正常肝组织中未见表达 ;Caspase 3在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中表达率分别为 2 9.4% (18/4 3 )、75 .0 % (15 /2 0 )和 81.8% (9/11)。结论　Survivin在肝癌组织中高表达 ,并通过抑制Caspase 3而抑制肝癌细胞凋亡 ,两者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环。     

河南食管癌高发区人群食管癌和癌旁组织PTEN蛋白的表达

PTEN蛋白变化与人类多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关[1] ,本研究旨在通过观察食管癌和癌旁正常及各级病变组织中PTEN蛋白的变化,进一步了解食管癌发生发展的分子机制。一、材料和方法1.研究对象:43例食管癌伴淋巴结转移标本来自河南省林州市人民医院。患者年龄42～74岁,所有病例术前未接受化疗和放疗。从癌、癌旁上皮及淋巴结取材,置85 %酒精固定,常规组织学脱水、石蜡包埋,连续切片,片厚5 μm。2 .组织病理学诊断:根据细胞形态、组织结构及分化程度,将食管上皮分为:正常上皮(NOR)、基底细胞过度增生(BCH)、间变(DYS)、原位癌(CIS…     

人类细胞凋亡芯片筛选骨肉瘤凋亡相关蛋白

目的通过人类细胞凋亡芯片筛选骨肉瘤中表达异常的凋亡相关蛋白,为近一步深入功能机制研究奠定基础。方法应用人类细胞凋亡芯片,筛选骨肉瘤组织及癌旁组织中表达有差异的凋亡相关蛋白。应用ImageJ1.42图片处理软件求出每个孔的灰度值,进行统计分析。结果凋亡相关蛋白Bcl-2、cIAP-2、Clusterin、HSP27、Survivin在骨肉瘤组织中和癌旁组织中都有表达,且其在骨肉瘤组织中的表达水平大于癌旁组织（P〈0.05）。结论凋亡蛋白Bcl-2、cIAP-2、Clusterin、HSP27、Survivin在骨肉瘤组织中表达上调,可能参与骨肉瘤的发病机制。     

大肠癌胃泌素、生长抑素表达与细胞增殖和凋亡的关系

我们用免疫组织化学方法和DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)对 60例大肠癌手术切除的癌组织标本进行胃泌素 (GAS)、生长抑素(SS)、增殖细胞核抗原 (PCNA )、Ki 67表达状况和细胞凋亡情况的检测。以探讨大肠癌组织GAS、SS的表达与细胞增殖和凋亡状态的关系。一、材料与方法1.标本来源 :收集我院 1999年 8月～ 2 0 0 1年 10月手术切除的大肠癌标本60例 ,其中直肠癌 41例 ,结肠癌 19例 ;男 3 9例 ,女 2 1例 ,年龄 (5 0 .9± 7.8)岁。2 .标本处理及检测指标 :取手术切除的癌组织用 10 %中性福马林固定 ,石蜡包埋 ,厚 4μm连…     

Survivin基因在原发性胆囊癌中的表达及其与P53,PCNA蛋白表达的关系

目的: 探讨Survivin基因在原发性胆囊癌(PGC)中的表达情况,以及与P53,PCNA蛋白表达的相互关系.方法: 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测9例PGC新鲜癌组织Survivin mRNA表达,对38例PGC石蜡包埋组织应用免疫组织化学法检测Survivin,P53和PCNA蛋白的表达,并将结果进行相关分析.结果: 9例PGC新鲜癌组织中3例有Survivin mRNA表达.21例(55.2%)PGC Survivin蛋白表达阳性,而12例胆囊腺瘤中有2例表达,20例癌旁正常组织中则无表达.PGC Survivin蛋白表达阳性率显著高于胆囊良性病变和正常胆囊组织(P<0.01).Survivin蛋白在PGC中的表达与PCNA指数相关,与P53蛋白表达、PGC病理分级和Neiv分期无显著相关.结论: Survivin基因在PGC中存在高表达,Survivin基因表达上调通过不同的机制影响PGC细胞的凋亡和增殖,在PGC发生、发展过程中起作用.     

碳水化合物反应元件结合蛋白在肝癌中表达与作用

目的:探讨碳水化合物反应元件结合蛋白(Ch REBP)在肝癌(HCC)中的表达与生物学作用。方法:分别用q RT-PCR、免疫组化、Western blot法检测73例HCC组织与癌旁组织以及多种HCC细胞系与正常肝细胞系中Ch REBP的m RNA与蛋白表达;观察si RNA干扰Ch REBP表达后,HCC细胞周期、凋亡以及增殖的变化。结果:Ch REBP的m RNA与蛋白表达在HCC组织中表达均明显高于癌旁组织、在所有HCC细胞系中均明显高于正常肝细胞系(均P0.05)。干扰Ch REBP表达后,HCC细胞发生明显G1-S期阻滞、细胞增殖明显降低(均P0.05),但细胞凋亡未发生明显变化(P0.05)。结论:Ch REBP在HCC中表达升高,且可能通过调控细胞周期促进HCC细胞的增殖,从而在HCC的发展中起了重要的作用。     

Smac和Survivin基因在肝癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨Smac和Survivin在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及两者在肝癌细胞凋亡中的作用和关系。方法免疫组织化学法检测50例肝癌组织、20例癌旁组织和15例正常肝组织中Smac和Survivin蛋白表达情况。逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)检测Smac和SurvivinmRNA表达情况。结果50例HCC标本中表达Smac有21例(42.0%),而除2例癌旁组织外,其他癌旁组织和正常肝组织中均见Smac表达;Survivin在癌组织、癌旁组织和正常肝组织中分别有46例、2例和0例表达;50例肝癌组织中Smac阳性率为40.0%(20/50),肝癌组织和非肝癌组织中Smac的表达差异具有统计学意义,Survivin在肝癌组织、癌旁组织和正常组织中阳性率分别为90.0%(45/50)、10.0%(2/20)和0%(0/15),肝癌组织和非肝癌组织中Survivin的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论Smac在肝癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能是肝癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环。     

生存素在恶性肿瘤诊治中的应用研究进展

生存素（Survivin）是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的新近成员，表达于胚胎组织和多种癌组织，在大多数终末分化的正常组织中未能检测出表达。Survivin的表达受细胞周期调控，在G2／M期有异常高的特异性表达。由于其独特的结构、特殊的组织分布及在细胞凋亡和细胞分裂调控中所起作用，引起了肿瘤研究工作者的浓厚兴趣，现将Survivin在恶性肿瘤诊治方面的研究进展作一综述。     

输出蛋白5 的表达与肝细胞癌患者临床病理特征及预后的关系

目的:探讨输出蛋白5(XPO5)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法:用Western blot和免疫组化检测XPO5蛋白在92例HCC癌组织及癌旁组织手术标本中的表达,用统计学方法分析XPO5表达水平与HCC患者临床病理因素及预后的关系。结果:XPO5蛋白在HCC组织中的表达水平明显高于癌旁组织。XPO5蛋白表达与HCC患者肿瘤大小、分化程度、临床分期、远处转移及肝硬化有关(均P0.05)。XPO5高表达患者1、5年无瘤生存率以及1、5年总生存率均明显低于XPO5低表达者(46.8%vs. 78.5%、20.3%vs. 37.4%;75.9%vs.91.2%、36.1%vs. 58.8%,均P0.05)。XPO5高表达是HCC患者术后无瘤生存及总生存的独立危险因子(P=0.036;P=0.013)。结论:XPO5基因在HCC组织中高表达,且与HCC的恶性病理特征及患者的不良预后有关。     

肝细胞癌Period1 表达与预后的关系

目的：探讨Period1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及意义。 方法：用RT-PCR与Western blot法检测30例HCC组织与其癌旁肝组织及5例正常肝组织中Period1 mRNA与蛋白表达;甲基化特异性PCR检测HCC组织与癌旁肝组织中Period1启动子甲基化水平;免疫组化检测67例HCC组织及其癌旁肝组织石蜡切片中Period1蛋白的表达;分析Period1的表达与HCC患者临床病理特征及预后的关系。 结果：HCC组织Period1 mRNA和蛋白的表达水平均较癌旁肝组织与正常肝组织明显降低（均P<0.05）,而两者在癌旁肝组织与正常肝组织间差异无统计学意义（均P>0.05）;HCC组织Period1启动子甲基化水平较其癌旁肝组织明显增高（均P<0.05）。HCC组织石蜡切片中Period1阳性表达率为47.8%,而癌旁肝组织阳性表达率为83.6%,差异有统计学意义（P<0.05）;Period1表达与HCC分化程度、结节数目、有无静脉浸润有关（均P<0.05）;Period1阳性表达HCC患者中位复时间与中位生存时间均明显短于阳性者（均P<0.05）。 结论：Period1在肝癌中表达下调可能与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关;启动子甲基化可能是Period1表达下调的重要机制。     

Apaf-1基因在肝细胞肝癌中的表达和意义

目的 探讨凋亡蛋白活化因子1(apoptoic protease-activating factor 1,Apaf-1)基因mRNA及其蛋白在肝细胞肝癌(HCC)中的表达和意义.方法 采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化(SP)的方法 检测手术切除53例肝癌组织,53例癌旁组织和14例肝血管瘤组织中的Apaf-1基因mRNA及其蛋白的表达情况,同时结合临床病理资料分析其在肝细胞癌中发生、发展的意义.结果 在癌组织中Apaf-1基因mRNA及蛋白的表达率明显降低(分别为45.28%,32.07%),低于癌旁组织(90.56%,79.24%)和肝血管瘤组织(100%,92.85%),差异有统计学意义(P＜0.05);而癌旁组织和肝血管瘤组织之间的差异无统计学意义.且Apaf-1基因蛋白的表达缺失与患者的HBsAg、Edmondsor分级和有无门静脉癌栓有关,而与患者性别、肿瘤直径和AFP水平无关.结论 Apaf-1基因的表达异常可能对人HCC的发生和发展起着重要作用,可能对临床诊治和判断患者的预后有一定的参考意义.     

p21和p-gp在膀胱移行细胞癌中的表达及相关性研究

我们采用免疫组织化学方法检测ｐ2 1和 ｐ ｇｐ蛋白在膀胱移行细胞癌中表达的关系及意义。材料和方法　手术切除并经病理证实的膀胱移行细胞癌标本 40例。男 31例 ,女 9例。平均年龄 6 2岁。病理分级按照ＷＨＯ标准 :Ⅰ级 8例、Ⅱ级 14例、Ⅲ级 18例。ＵＩＣＣ .ＴＮＭ临床分期 :浅表性肿瘤 (Ｔｉｓ～Ｔ1) 11例 ,浸润性肿瘤(Ｔ2 ～Ｔ4 ) 2 9例。同时选取 10例正常膀胱粘膜组织作对照。所有患者术前未经放疗、化疗。标本经 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋 ,连续切片 3张 ,厚 4μｍ ,分别作免疫组织染色 (Ｓ Ｐ法 )和ＨＥ染色复诊。以已知ｐ2 1和 ｐ …     

Survivin mRNA表达对肝癌细胞凋亡和增殖及MDR-1影响的实验研究

目的　研究新的凋亡抑制因子survivinmRNA在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达 ,测定肝癌的细胞凋亡和增殖及多药耐药基因mRNA在HCC中的表达 ,探讨survivin表达对肝癌细胞凋亡和增殖的影响及其与HCC多药耐药之间的相互关系。方法　 31例HCC癌组织及癌旁组织标本取自 2 0 0 0年 8月至 2 0 0 1年 4月浙江大学医学院第二附属医院。用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)、TUNEL法和免疫组织化学法分别测定HCC癌组织及癌旁组织中survivinmRNA的表达情况、细胞凋亡指数和增殖指数及MDR 1mRNA的表达 ,分析在HCC中survivin表达与细胞凋亡和增殖之间的相互关系 ,探讨survivin表达在HCC发生发展中的作用及其与MDR 1mRNA表达之间的关系。结果　 31例肝癌组织中survivinmRNA阳性例表达率为 71% (2 2 / 31) ,阴性表达率为 2 9% (9/ 31) ;而癌旁正常组织中均无表达。肝癌标本中的凋亡指数为 :0 4 %～ 15 % ,平均值为 :(4 2 4± 3 92 ) %。Sur vivinmRNA阳性表达病例平均AI值为 (4 6 4± 4 30 ) % ,阴性表达平均AI值为 (3 36± 2 98) %。两者比较P >0 0 5 ,两组间无显著差异。肝癌标本中增殖指数为 :2 %～ 80 % ,平均值为 (2 6 2 1± 14 9) %。SurvivinmRNA阳性表达病例平均Ki 6 7LI值为 (30 32± 15 4     

肾细胞癌中X染色体相关的凋亡抑制蛋白的表达与细胞凋亡的关系

目的 :探讨X染色体相关的凋亡抑制蛋白 (XIAP)在肾细胞癌中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 :应用免疫组织化学技术和DNA原位末端标记技术 (TUNEL)检测 2 8例肾细胞癌中XIAP的表达与细胞凋亡。结果 :2 8例肾细胞癌XIAP阳性率为 5 7.1% ,9例正常肾组织XIAP阳性率为 11.1% ,差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。XIAP表达与肾细胞癌病理类型、病理分期和病理分级无明显相关 (P >0 .0 5 )。XIAP表达与AI呈负相关 (P <0 .0 1)。结论 :XIAP在肾细胞癌中表达对判断肾细胞癌的生物学特性无明显价值 ,但却为靶向XIAP的抗肾细胞癌治疗提供了理论依据。     

Survivin在结直肠癌中的表达及其意义

目的探讨Survivin基因在结直肠癌中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学(SP)法和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术原位观察48例结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织和正常组织中Survivin蛋白的表达和细胞凋亡。结果癌组织Survivin的阳性表达相对含量(PU)值(38.76±5.14)明显高于癌旁(25.17±7.26)和正常组织(0.57±0.03),差异有统计学意义(t=2.54,P<0.05),正常大肠黏膜中极少见Survivin蛋白表达;癌旁和癌组织凋亡指数(AI)分别为(7.51±2.63)%和(4.65±1.76)%,两者差异有统计学意义(t=2.18,P<0.05);Survivin蛋白的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P>0.05),与癌组织的分化程度、淋巴结转移和Dukes分期相关,低分化、有淋巴结转移和DukesC/D期的Survivin蛋白表达显著高于相关组别(P<0.05)。结论Survivin在结直肠癌组织中表达上调,Survivin表达可抑制结直肠癌的细胞凋亡,这可能是结直肠癌发生、发展的有关因素;Survivin的表达与结直肠癌的恶性生物学行为有关。     

原发性肝癌组织中HMGB1的表达及其与细胞侵袭力关系的研究

目的:探讨高迁移组蛋白1(HMGB1)在原发性肝癌(HCC)组织中的表达及其与肝癌细胞侵袭力的关系。方法:收集2008年1月—2012年2月在我院肝胆外科行手术切除且临床资料完整的HCC患者石蜡标本116例,另对2013年2月—2014年6月手术切除的42例HCC和配对癌旁组织标本进行取样,应用SP法免疫组化染色检测HMGB1蛋白在肝癌组织中的表达情况。质粒转染HepG2细胞系,利用细胞侵袭试验检测HMGB1对细胞侵袭力的影响,利用Westernblot检测相关蛋白表达情况。结果:新鲜HCC组织中HMGB1表达阳性率为66.7%,远高于癌旁组织的26.2%,差异具有统计学意义(P0.05);HMGB1阳性表达与肝内转移、淋巴结转移和TNM分期有关(P0.05);pEGFP-N1-HMGB1转染组侵袭细胞数显著高于pEGFP-N1转染组和未转染组(P0.001);pEGFP-N1-HMGB1转染组E钙蛋白和ABL2表达量均低于未转染组(P0.001),pEGFP-N1-HMGB1转染组MMP-9蛋白表达量高于未转染组(P0.001)。结论:HMGB1在HCC组织中呈高表达,过表达HMGB1可促进肝癌细胞的迁移和侵袭。     

FK506结合蛋白5在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨FK506结合蛋白5(FKBP5)在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:用q RT-PCR和Western blot法检测30对新鲜HCC及相应癌旁组织中FKBP5 m RNA和蛋白的表达;免疫组化法检测107例HCC患者石蜡标本中FKBP5的表达,并分析其与HCC临床病理特征及预后的关系。结果:30例新鲜HCC标本中,26例(86.7%)HCC组织FKBP5 m RNA的表达水平明显高于相应癌旁组织,HCC组织中FKBP5蛋白表达量明显高于其癌旁组织。石蜡标本分析显示,FKBP5蛋白在HCC组织中的高表达率明显高于癌旁组织(63.6%vs.28.0%,P0.001);FKBP5的表达水平与肿瘤大小(P=0.009)、肿瘤个数(P=0.018)、微血管侵犯(P=0.020)、TNM分期(P=0.009)和BCLC分期(P=0.024)有关,且FKBP5高表达患者术后总体生存率和无瘤生存率均明显低于低表达组(均P0.001);FKBP5高表达是HCC患者术后总体生存(HR=1.992,95%CI=1.127~3.522,P=0.018)和无瘤生存(HR=1.787,95%CI=1.067~2.992,P=0.027)的独立危险因素。结论:FKBP5在HCC组织中高表达,且与患者不良临床病理特征及预后密切相关,提示其是一个潜在的HCC预后分子标志物。