葡萄糖调节蛋白78在子宫内膜癌中的研究进展

<正>子宫内膜癌在发达国家女性生殖系统恶性肿瘤中排名首位,其发病率持续上升,尽管总体生存率有所提高,但在过去20年中,子宫内膜癌的相关死亡率上升了20%~([1])。公认的子宫内膜癌危险因素包括多囊卵巢综合征、他莫昔芬药物治疗、无孕激素拮抗的雌激素治疗、无生育史或不孕症、月经周期不正常、高血压、肥胖和糖尿病,但具体发病机制未完全阐明。从分子水平上研究发病机制对识别和验证新的治     

葡萄糖调节蛋白78抵抗宫颈癌细胞衰老的相关机制研究

目的:探讨顺铂诱导宫颈癌细胞衰老过程中葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)的作用及相关机制。方法:用亚凋亡剂量顺铂诱导宫颈癌细胞衰老;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况;GRP78诱导剂A23187诱导Hela细胞高表达GRP78;siRNA反义抑制GRP78表达;Western blot检测相关蛋白表达情况。结果:亚凋亡剂量顺铂诱导绝大多数宫颈癌细胞发生衰老;A23187上调GRP78表达后顺铂诱导Hela细胞衰老率降低,GRP78表达被反义抑制后顺铂可重新诱导Hela细胞衰老;P53表达被抑制及Cdc2表达增多与GRP78抗衰老作用有关。结论:GRP78蛋白高表达能够抵抗顺铂诱导宫颈癌细胞发生衰老,可作为逆转肿瘤细胞化疗耐药的新靶点。     

宫颈病变组织中葡萄糖调节蛋白78与衰老相关蛋白HP1-γ的表达研究

目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein,GRP78)与细胞衰老在宫颈癌发生、发展过程中的相关性。方法:免疫组化法检测宫颈癌组织芯片中衰老相关异染色质灶标志蛋白HP1-γ及GRP78蛋白表达情况。结果:正常宫颈组织中HP1-γ蛋白及GRP78蛋白均呈低表达,而在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ-Ⅲ组织中HP1-γ蛋白及GRP78蛋白表达均逐渐升高。随着宫颈癌恶性程度的升高,GRP78表达明显升高,呈强阳性表达,而HP1-γ蛋白表达逐渐降低至较低水平。结论:GRP78蛋白可能通过抑制细胞衰老从而导致宫颈细胞由正常向恶性转化。     

中医药干预葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达在糖尿病周围神经细胞凋亡的实验研究进展

<正>糖尿病周围神经病变是威胁糖尿病患者健康的重要隐患。在多民族成人2型糖尿病的一项INTERPRET-DD研究中,该病的总体患病率为26.71%^[1];据统计,2017年世界范围内糖尿病患者大约有4.51亿,预计到2045年被确诊患有糖尿病的人将增长到6.93亿^[2]。患者出现手足部麻木、痛觉过敏、或对称性烧灼感等与周围神经功能障碍相关的临床表现,甚至双足溃烂,最终可能导致截肢,     

锰对新生大鼠神经细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白表达的影响

目的 研究不同浓度锰对大鼠神经细胞凋亡及内质网应激信号分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)mRNA与蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)蛋白表达的影响.方法 以出生4～7 d的SPF级Wistar大鼠脑片为模型,分别用0(对照)、25、100、400 μmol/L锰暴露24h.检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,神经细胞凋亡率以及神经细胞内GRP78、CHOP mRNA和蛋白及caspase-12蛋白的表达.结果 与对照组比较,100和400 μ,mol/L锰暴露组培养液中LDH的释放量均较高,而各浓度锰暴露组大鼠神经细胞凋亡率均较高,差异有统计学意义(P＜O.01);且随着锰暴露浓度的升高,培养液中LDH的释放量和大鼠神经细胞凋亡率均呈逐渐升高的趋势.与对照组比较,100和400 μmol/L锰暴露组神经细胞内GRP78mRNA及各浓度锰暴露组大鼠神经细胞内CHOP mRNA的表达均较高,而100、400 μmol/L锰暴露组神经细胞内GRP78和CHOP蛋白及各浓度锰暴露组大鼠神经细胞内caspase-12蛋白的表达也均较高,差异有统计学意义(P＜0.01);且随着锰暴露浓度的升高,大鼠神经细胞内GRP78、CHOP mRNA和蛋白及caspase-12蛋白的表达均呈逐渐升高的趋势.结论 锰可促使大鼠神经细胞凋亡及GRP78和CHOP表达升高.     

GRP78蛋白在胰腺癌中的表达及对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响研究

目的：检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在胰腺癌组织中的表达,探讨GRP78蛋白与胰腺癌发生、发展的相关关系.观察GRP78基因表达下调对胰腺癌细胞凋亡和增殖的影响,为以GRP78基因为靶基因治疗胰腺癌提供理论依据.方法：利用免疫组织化学技术检测93例胰腺癌组织及58例胰腺良性病变组织中GRP78蛋白的表达情况;Sh GRP78和Sh Neg克隆人真核表达载体,经脂质体转染胰腺癌细胞系BXPC-3,G418筛选阳性克隆,半定量RT-PCR检测GRP78 mRNA表达,Western blot检测GRP78蛋白表达.采用流式细胞仪、磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测各组细胞增殖和凋亡情况.结果：GRP78蛋白在正常胰腺组织表达率为10.8％,在胰腺良性病变组织的表达率为41.4％,在胰腺癌组织中阳性率为88.2％,3组之间差异显著.建立了2组稳定转染细胞系：BXPC-3 sh GRP78和BXPC-3 sh Neg,BXPC-3 sh GRP78细胞中GRP78 mRNA和蛋白表达显著下调.GRP78基因表达抑制后BXPC-3细胞的增殖明显受到抑制,凋亡显著增加.结论：GRP78蛋白在正常胰腺组织,胰腺良性病变组织及胰腺癌组织中的表达水平依次升高;GRP78基因高表达是细胞组织恶性转化的重要标志物.     

葡萄糖转运蛋白1、3在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glucose transporter,Glut 1）和3（Glut 3）在肺癌及肺良性病变中的表达以及两者在肺癌发生发展过程中的关系.方法收集68例肺癌和17例肺良性病变组织,采用单克隆抗体Glut 1、Glut 3的免疫组化ABC法进行检测.结果68例肺癌组织中58例Glut 1阳性,表达率为85.3%;其中鳞癌100.0%表达,腺癌70.5%,Gluf 1在肺癌组织染色阳性率与分化程度、TNM分期及淋巴结转移等显著相关;Glut 3有18例在肺癌中染色阳性,表达率23.5%,其中鳞癌41.2%表达,腺癌11.8%,Glut 3在肺癌组织中表达与分化程度、TNM分期及淋巴结转移等无明显差异,Glut 3染色阳性对应的标本Glut1都染色阳性.在肺良性病变组织均未检测到Glut 1、Glut 3的表达.结论Glut 1在非小细胞肺癌中过度表达,且与肿瘤的分期、淋巴结转移、分化程度等密切相关,参与非小细胞肺癌的发生发展;Glut 3在少数非小细胞肺癌中存在过度表达,其表达发生在Glut 1过度表达之后.     

上皮性卵巢癌中AIB1蛋白的表达及其临床意义

目的研究AIB1蛋白在卵巢癌细胞株SKOV3，上皮性卵巢癌组织中的表达，探讨其在卵巢肿瘤发生发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测卵巢癌细胞株SKOV3。检测本组20例正常卵巢组织、30例卵巢良性肿瘤及74例上皮性卵巢癌中AIB1蛋白的表达情况，并与临床病理特征相比较。结果卵巢癌细胞株SKOV3中，AIB1蛋白呈高表达状态。卵巢癌组织中，AIB1蛋白的阳性表达率明显高于正常卵巢和卵巢良性肿瘤。随着肿瘤分化程度的逐渐降低，AIB1蛋白的阳性表达率呈不断升高的趋势（P=0．018）。随着肿瘤临床分期逐渐升高，AIB1的表达亦明显升高（P=0．006）。结论AIB1蛋白的表达与上皮性卵巢癌的发生发展、细胞分化程度、临床分期密切相关。     

姜黄素对2型糖尿病大鼠心肌内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78、caspase-12表达的影响

目的探讨姜黄素对2型糖尿病大鼠心肌内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase-12,caspase-12)表达的影响。方法采用高脂饲料喂养大鼠4周,并一次性腹腔注射35 mg/kg链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。造模成功大鼠随机分为模型对照组,姜黄素200、400 mg/kg剂量组和卡托普利(60 mg/kg)组,给药组连续灌胃给药12周。测定各组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平及心重指数、心电图;HE染色观察心肌病理变化;Masson染色观察心肌胶原纤维表达水平;免疫组化法检测心肌组织GRP78与caspase-12蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清FBG、LDH水平升高,心重指数增大,形态学观察发现心肌细胞肥大、细胞间胶原纤维增多,心肌组织中GRP78、caspase-12蛋白表达增加(P<0.05)。与模型组比较,姜黄素400 mg/kg组大鼠FBG、LDH水平降低,心重指数降低,细胞间胶原纤维明显减少,心肌组织中GRP-78、caspase-12蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素对2型糖尿病大鼠心肌组织具有保护作用,其机制可能与降低血糖,并减少GRP78、caspase-12蛋白表达,阻断内质网应激启动的相关凋亡有关。     

骨膜蛋白在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

探讨骨膜蛋白在骨肉瘤、骨软骨瘤病理组织中表达的差异性及其临床意义。方法：用免疫组织化学SP方法检测28例骨肉瘤及28例骨软骨瘤中的骨膜蛋白表达情况。结果：骨肉瘤组织中骨膜蛋白的阳性率为82.1%,骨软骨瘤标本中未见骨膜蛋白表达,两组比较有显著性差异（P〈0.01）;骨膜蛋白的表达与骨肉瘤患者的3年无转移生存期有关。结论：骨膜蛋白可能参与了骨肉瘤的浸润、转移等进程,检测骨膜蛋白可早期预测骨肉瘤的转移风险和预后。     

P-糖蛋白和肺耐药蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及肺耐药蛋白(Lung resistance protein,LRP)在原发性上皮性卵巢癌(POEC)中表达及与化疗的关系。方法:采用免疫组化法对56例POEC、15例卵巢良性肿瘤和12例正常卵巢组织石蜡标本中P-gp及LRP的表达进行测定,并分析56例POEC患者的临床病理资料。结果:①P-gp与LRP在卵巢癌组织中阳性表达率均显著高于正常卵巢组织及卵巢良性肿瘤;②POEC组织中P-gp及LRP的表达与患者年龄、组织学类型、临床分期均无关,LRP的表达与腹腔积液有关;③P-gp与LRP在术前有化疗者阳性率高于初治POEC(P<0.01);④P-gp、LRP表达阳性患者对化疗反应差。结论:①P-gp、LRP在POEC组织中表达率高于正常卵巢;②化疗可增加POEC组织中P-gp及LRP表达的阳性率;③P-gp及LRP表达可预测上皮性卵巢癌对铂类联合化疗的近期疗效。     

乳腺癌扩增基因1与上皮细胞钙黏蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 检测乳腺癌扩增基因1(AIB1)与上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)在卵巢癌组织中的表达,并确定其表达与卵巢癌临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学EnVision二步法染色检测50例卵巢癌组织和13例正常卵巢组织中AIB1、E-cadherin、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)与Ki-67等的表达.结果 卵巢癌组织中AIB1阳性表达率[68％(34/50)]显著高于正常卵巢组织[8％(1/13)](P＜0.01),E-cadherin表达下调率为60％(30/50).AIB1阳性表达率在国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ期(P=0.036),有淋巴结转移高于无淋巴结转移(P=0.027),Silverberg分期G3期高于G1+G2期(P=0.003),浆液性腺癌高于非浆液性腺癌(P=0.049),ER阳性高于ER阴性(P=0.000),Ki-67阳性高于Ki-67阴性(P=0.009);E-cadherin表达下调率在FIGO分期Ⅲ+Ⅳ期高于Ⅰ+Ⅱ期(P=0.044),浆液性腺癌高于非浆液性腺癌(P=0.002),ER阳性高于ER阴性(P=0.021),Ki-67阳性高于Ki-67阴性(P=0.035).AIB1与E-cadherin表达呈负相关(P=0.026).结论 卵巢癌组织中AIB1与E-cadherin表达情况及临床分期密切相关,可能是参与卵巢癌发展的重要分子.     

缺氧诱导因子-1α在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α在卵巢癌中的表达及临床意义。方法:选取2005年1月～2006年12月承德医学院附属医院卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢的蜡块组织145例,利用免疫组织化学S-P方法对卵巢组织HIF-1α表达情况进行检查。结果:与正常卵巢和良性卵巢肿瘤相比,交界性卵巢肿瘤及卵巢癌组织HIF-1α表达相对较高(P<0.05);卵巢癌组织HIF-1α表达与病理分级间具有正相关关系(P<0.01)。结论:卵巢癌初期HIF-1α表达水平开始增加,随着病情发展水平逐渐上升,以HIF-1α为靶点的治疗对于卵巢癌治疗具有重要意义。     

上皮性卵巢癌组织中PLGF蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨胎盘生长因子(PLGF)在上皮性卵巢癌中的表达及与卵巢癌发生、发展的关系和临床意义。方法:采用免疫组化方法,检测PLGF蛋白在52例卵巢癌原发灶、15例良性卵巢上皮性肿瘤及10例正常卵巢组织中的表达;结合病例的临床病理及预后资料,分析卵巢癌中PLGF蛋白表达的临床意义。结果:卵巢癌、良性卵巢上皮性肿瘤、正常卵巢组织中的PLGF过表达率分别为46.15%(24/52)、20.00%(3/15)与0%(0/10)。卵巢癌组的PLGF过表达率高于良性卵巢上皮性肿瘤组(P=0.027,OR=4.286,95%CIforOR:1.11~16.60)。PLGF蛋白过表达与卵巢癌分化程度密切相关,组织分化为G3级的卵巢癌病例其PLGF过表达率高于G1+G2级(P=0.012,OR=5.077,95%CIforOR:1.35~19.17)。PLGF过表达的卵巢癌病例其中位生存时间为34月,短于表达正常者的47月,差异具有统计学意义(Log Rank=4.887,P=0.008)。结论:在卵巢癌变过程中,PLGF过度表达水平随着卵巢病变程度的加重而上升,提示PLGF过度表达与卵巢肿瘤的发生相关;PLGF过度表达与卵巢癌恶性临床表型及不良预后密切相关。PLGF可能成为有效预测卵巢癌发生及预后的分子标记物。     

HER-2/neu在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究HER-2/neu在卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达,探讨其与卵巢癌发病的关系及其与临床病理参数的关系及临床意义。方法:收集60例卵巢病理标本。卵巢癌30例,卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织各15例,采用组织芯片技术及免疫组织化学法(SP)检测卵巢癌中HER-2/neu的表达情况。结果:HER-2/neu在卵巢癌组织中的表达率为93.3%,与正常卵巢组织(6.7%)及卵巢良性肿瘤组织(26.7%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);HER-2/neu在手术-病理分期为Ⅲ、Ⅳ期的卵巢癌组织中阳性表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);不同组织学类型及组织学分级中卵巢癌组织中HER-2/neu蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HER-2/neu在卵巢癌组织中呈高表达,HER-2/neu的阳性表达与卵巢癌的手术-病理分期有关联,与组织学类型及分级无关。     

卵巢上皮性癌中mTOR信号通路蛋白的表达及其临床意义

目的:研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路蛋白在人卵巢上皮性癌中的表达及其临床意义。方法:选取武汉同济医院妇产科2005～2008间手术切除并经病理证实的人卵巢上皮性癌63例,其中Ⅰ级12例、Ⅱ级15例、Ⅲ级23例、Ⅳ级13例,应用免疫组织化学法检测卵巢上皮性癌组织中mTOR信号通路关键蛋白pm-TOR、pAKT的表达,分析其与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果:pmTOR在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ级41.7%(5/12)、Ⅱ级53.3%(8/15)、Ⅲ级65.2%(15/23)、Ⅳ级69.2%(9/13),pAKT在各级卵巢上皮性癌中的阳性率分别为:Ⅰ级33.3%(5/12)、Ⅱ级40.0%(6/15)、Ⅲ级52.2%(12/23)、Ⅳ级53.8%(7/13);各阳性表达率间无统计学差异(P>0.05),但其表达水平均随着卵巢上皮性癌病理级别的增高而升高,而与病理类型无关。结论:mTOR信号通路蛋白在卵巢上皮性癌的发生发展中起重要的作用,可能是卵巢癌治疗的潜在靶点。     

Glil蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Hedgehog信号中的Glil蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法我院2008年5月一2010年6月收集的64例乳腺癌组织以及52例癌旁正常乳腺组织,采用免疫组化S—P方法测定乳腺癌组织中Glil蛋白的表达情况。结果通过免疫组化分析,正常乳腺组织细胞中的Glil蛋白无明显表达,而在乳腺癌组织中表达明显,二组比较有显著性差异（Y2=82．4731,P〈0．01）;G1il蛋白在乳腺癌患者腋窝淋巴结有无转移中的表达有显著差异（x2=23．3903,P〈0．01）,在Ⅲ期乳腺癌中的阳性表达率高于I一Ⅱ期乳腺癌（x2=12．9067,P〈0．01）。结论乳腺癌组织的发生演变的过程中Hedgehog信号在传导的通路中表现活跃,与乳腺癌的发生有密切的关系。     

卵巢癌组织中凋亡相关蛋白8的检测及其临床意义

目的 检测卵巢癌组织中凋亡相关蛋白8(THAP-8)的表达,探讨其相关的临床意义.方法 选择卵巢癌患者86例,分别取卵巢癌组织和癌旁组织,采用荧光定量聚合酶链反应法检测THAP-8基因的表达量,免疫组织化学法检测THAP-8蛋白的表达量.结果 在卵巢癌组织和癌旁组织中THAP-8基因表达量分别为0.304±0.104和0.615±0.152,THAP-8蛋白表达量分别为30.16±12.34和67.34±22.37,卵巢癌组织均显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.01).中、低分化卵巢癌组织中THAP-8基因和蛋白表达量显著低于高分化卵巢癌组织(0.216±0.085比0.457±0.124、24.22±9.21比46.24±17.52),有淋巴结转移卵巢癌组织中显著低于无淋巴结转移卵巢癌组织(0.247±0.087比0.476±0.133、23.44±8.57比49.60±18.35),临床分期Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中显著低于临床分期Ⅰ、Ⅱ期卵巢癌组织(0.232±0.114比0.424±0.125、25.64±8.12比44.78±16.84),差异均有统计学意义(P＜0.01或＜0.05).结论 THAP-8的失活参与了卵巢癌的发生、发展,可以作为卵巢癌患者肿瘤分级和预后评估的一个指标.     

CA125及HE4蛋白在卵巢癌组织及血清中的表达及其临床意义

目的:探讨HE4(人类附睾蛋白4)、CA125在卵巢癌组织及血清中的表达及其临床意义.方法:选择2010年12月～2012年7月海南医学院附属医院收治的卵巢癌60例、良性卵巢肿瘤60例和正常卵巢组织35例,采用免疫组化法检测不同卵巢组织中的HE4和CA125的蛋白表达情况;应用酶联免疫吸附法检测术前、术后血清HE4及CA125的浓度,综合分析各参数之间的临床相关性.结果:HE4及CA125的蛋白表达卵巢癌组高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组(P＜0.000 1);HE4及CA125的血清水平卵巢癌组均高于良性卵巢肿瘤组和正常卵巢组(P＜0.000 1).血清HE4和CA125联合检测对卵巢癌的诊断敏感性均高于两者单项检测,为90％,特异性高于CA125单项检测,低于HE4单项检测.卵巢癌组术前血清CA125及HE4的表达水平明显高于术后,差异有统计学意义(P ＜0.000 1).结论:HE4、CA125在卵巢癌组织中的蛋白表达与血清水平联合检测是卵巢癌早期诊断、疗效评价及预后评估的敏感综合指标,可为临床个性化防治提供科学实验依据.     

MIF及VEGF在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:研究MIF和VEGF在上皮性卵巢癌组织及转移淋巴结和大网膜标本中的表达与临床病理的关系。方法:运用免疫组织化学法检测18例正常卵巢组织、24例良性卵巢肿瘤组织、42例上皮性卵巢癌组织(其中6例有淋巴结转移,16例有大网膜转移)及转移癌组织中MIF和VEGF表达情况。结果:卵巢癌组织MIF和VEGF阳性表达率与临床分期、组织学分级、远处转移有关,与病理类型无关。转移癌组织和原发癌灶中两者表达均无差异。MIF阳性表达率与VEGF阳性表达率呈现出一致的相关性。结论:MIF和VEGF参与了卵巢癌发生、发展、转移过程。MIF和VEGF表现出一定的正相关性,在卵巢癌发生和发展中呈协同一致作用。通过监测MIF和VEGF表达,可以判断肿瘤恶性程度。