钙离子浓度对鼠白血病WEHI-3细胞 Caspase-3、Caspase-12和Bcl-2表达的影响

目的：研究细胞内钙离子浓度[Ca^2 ]i的升高对鼠白血病WEHI-3细胞株中Caspase-3、Caspase-12和Bel-2表达的影响。方法：在体外培养下，经不同浓度Econazole处理的WEHI-3细胞株用荧光指示剂Fura-2／AM于双波长荧光分光光度仪上测定[Ca^2 ]i。用western blot方法检测Caspase-3、Caspase-12和Bcl-2的表达。结果：随着[Ca^2 ]i提高，Caspase-12表达逐渐增加，Bcl-2表达逐渐减弱，而Caspase-3表达不变。结论：[Ca^2 ]i的升高对WEHI-3细胞株可诱发不通过Caspase-3途径的细胞凋亡。     

Ca2+与Ryanodine受体在心肌收缩中作用的研究现状

Ca^2 与Ryanodine受体在心肌兴奋－收缩偶联过程中都起着重要的作用，本文就Ryanodine受体的结构，功能与其调节以及Ca^2 与Ryanodine受体在心肌收缩中作用的研究现状作一综述。     

Junctophilin-2表达下调介导心肌细胞兴奋—收缩耦联结构与功能的重塑

目的阐明横管(T-tubule,TT)与肌质网(sarcoplasmic reticulum,SR)耦联关键蛋白junctophilin-2(JP2)的表达下调对心肌细胞二联体超微结构以及兴奋-收缩耦联功能的影响。方法通过构建JP2特异性shRNA腺病毒敲减成年大鼠心肌细胞中JP2的表达后,采用透射电子显微镜观测心肌细胞横管和肌质网二联体结构的形态变化,并进一步采用全细胞膜片钳结合激光共聚焦钙成像技术检测心肌细胞兴奋收缩联联功能的变化。结果通过腺病毒敲减心肌细胞JP2表达后,心肌细胞内总TT数目、TT与SR耦联的二联体结构数目以及单个耦联子内耦联SR的TT长度占TT周长的百分比均显著降低;与此同时,JP2表达下降后心肌细胞钙瞬变幅度降低,收缩功能减弱,表现出与心力衰竭类似的表型。结论心肌细胞JP2表达下降引起心肌细胞兴奋-收缩耦联结构与功能的损伤,为心力衰竭病理情况下心肌细胞结构与功能的调控机制提供了直接有力的实验证据。     

Ca2+依赖性信号通路与心肌肥大研究的进展

心肌肥厚是心脏对强体力活动的生理性反应．而在许多心血管疾病．它又是共有的病理生理过程．也是心力衰竭发生的结构基础。因此研究心肌肥厚具有重要的理论和临床意义。目前细胞内信号转导通路是生命科学研究的热点．仅就心肌肥大而言．已知心肌细胞内Ca^2 的变化是触发心肌肥大相关信号转导的始动因素。近年来有关心肌细胞内的Ca^2 依赖性信号通路调控心肌肥大机制的研究有明显进展．现综述如下。     

在抢救心跳骤停者时,心电图能否作为检查心脏是否有收缩活动的唯一指标?

细胞兴奋可以引起自身的种种反应,如神经传导、肌肉收缩和腺体分泌等。在肌肉中,兴奋引起收缩的过程就是细胞膜上动作电位引起细胞内部收缩蛋白发生反应的过程,这个过程称为兴奋-收缩偶联,其需要     

非洛地平缓释片及缬沙坦对感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠的降压作用及其机制探讨

目的 观察非洛地平缓释片、缬沙坦对感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠的作用,探讨其作用机制及该模型形成的机制。方法新生Wistar大鼠皮下注射辣椒辣素(50mg／kg),对照组大鼠注射对照液,哺乳期后挑选出雄性大鼠分成5组分别给予含盐不同的饮食及非洛地平、缬沙坦(30mg／kg每天,灌胃)干预4周,检测鼠尾收缩压、体重、淋巴细胞胞浆游离钙([Ca^2 ]i)、血浆降钙素基因相关肽、血管紧张素Ⅱ、内皮素浓度和24h饮水量、尿量、尿钠、尿钾。结果非洛地平及缬沙坦干预组鼠尾收缩压、淋巴细胞[Ca^2 ]i明显低于辣椒辣素 高盐组;缬沙坦干预组血浆血管紧张素Ⅱ浓度明显高于其余各组,鼠尾收缩压低于非洛地平干预组;非洛地平干预组淋巴细胞[Ca^2 ]i低于缬沙坦干预组,肾排钠量高于辣椒辣素 高盐组及缬沙坦干预组。结论非洛地平及缬沙坦干预能阻止辣椒辣素处理大鼠在高盐饮食时血压及淋巴细胞[Ca^2 ]i升高,提示该模型的形成可能与肾素血管紧张素系统及细胞内钙超载有关,而与肾素血管紧张素醛固酮系统关系可能更密切。     

感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠新模型的建立及其细胞内游离钙的变化

目的 建立一种新的感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型，并探讨该模型细胞内游离钙([Ca^2 ]i)的变化。方法新生Wistar大鼠皮下注射辣椒辣素(50mg／kg)，对照组则皮下注射对照液，哺乳期后挑选出雄性大鼠分成4组分别给予含盐不同的饮食4周，检测鼠尾收缩压、体重、淋巴细胞[Ca^2 ]i和24h尿量、饮水量、尿钠、尿钾。结果辣椒辣素处理的新生大鼠在高盐饮食时鼠尾收缩压、淋巴细胞[Ca^2 ]i明显增高，肾排钠和水功能降低。结论新生大鼠辣椒辣素敏感性感觉神经损伤可使大鼠在盐负荷时血压显而持久地升高、细胞[Ca^2 ]i明显升高及肾排钠和水功能受损。     

镁离子对原代培养猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

目的：应用膜片钳单通道技术研究镁离子(Mg^2 )对原代培养猪冠状动脉平精肌细胞钙澈活钾通道(KCa)的影响.方法：选择培养5天后的单个棱形平精肌细胞，用二步拉镐经热抛光尖端直径约1～2gμm，充灌液体后阻抗约5～7MΩ的微吸管进行高阻封接，在对称性高钾溶液下采用内面向外式膜片记录电流。单通道电流信号经膜片钳放大器放大，滤波(3KHz)后，经12位A／D，D／A转换器在pClamp6．0．2专用软件支持下输入并储存在计算机内，然后进行分析处理。结果：猪冠状动脉平滑肌细胞KCa单通道电导值为135±15pS，[Ca^2 ]i为10^-7mol，膜电位为-40mV，向膜内侧液加入Mg^2 至1和4mmol，通道活度(NPO)显著增加;并发现随着[M^2 ]i从0．5mmol依次增加至14mmol，Mg^2 对KCa通道可产生浓度依赖性激活作用；而且用一定浓度的EGTA把[Ca^2 ]螯合到很小时(<10^-9 mol)，再向膜内侧加入Mg^2 (4mmol)仍对通道有激活作甩。结论：[Mg^2 ]i对KCa通道可产生浓度依赖性激活作用，且在膜内侧相对无Ca^2-的情况下仍可激活KCa通道，这可能是Mg^2 舒张血管平滑肌的作用机制之一。     

心脏T型钙离子通道

心肌细胞膜存在两种不同的Ca2＋通道（L型和T型）。1953年Fatt和Katz首次发现电压依赖性Ca2＋内流这种重要生理特征,1975年Hagiwara等人经研究又进一步证实。心脏电压依赖性Ca2＋通道被认为与细胞膜去极化过程中调控Ca2＋内流和参与细胞的兴奋、收缩、激素分泌及相关基因转录相关。20世纪80年代,在心肌细胞中第一次记录到两种不同的Ca^2＋通道：L型和T型Ca^2＋通道。     

敲除心脏肌球蛋白结合蛋白C加速小鼠蜕膜心肌细胞的牵张激活

心脏肌球蛋白结合蛋白C(cMyBP-C)是与肌球蛋白紧密结合的粗肌丝元件蛋白,尽管有证据显示 cMyBP-C基因突变常常导致肥厚型心肌病,但cMyBP-c在心肌中的作用相对所知甚少。早期研究表明,牵张激活在心脏收缩中可能有重要作用,基于此,我们在野生型小鼠和我实验室培育的cMyBP-C基因敲除小鼠纯合子(cMyBP-C-／-)的蜕膜心室中,检测了cMyBP-C在牵张激活反应中的作用。在最大或次于最大的 Ca2 活性期对蜕膜心肌细胞的突然牵张,导致收缩力的瞬时升高,该力迅速降为最小,延迟后,力量回复(牵张活化)到大于牵张前力量水平。敲除cMyBP-C显著改变了牵张激活反应,例如,与野生型小鼠心肌相比, 力衰减和延迟性力瞬变速率加快。这些结果提示,cMyBP-C正常抑制了肌球蛋白横桥的空间位置,并轮流限制了横桥与肌动蛋白间的相互作用速率和范围。我们假设敲除cMyBP-C移除了这些约束,增加了横桥与肌动蛋白结合的可能性,提高了牵张后延迟性力回复的速率。不考虑特殊的机制,cMyBP-C-／-心肌细胞中横桥周期的加快可以将这种小鼠中收缩射血的减少解释为心室心肌不成熟牵张激活的一个直接结果。     

丹参酮ⅡA抑制血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心肌肥大的机制

目的 在原代培养的新生大鼠心肌细胞的基础上，观察丹参酮ⅡA磺酸钠盐（STS）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌细胞肥大的影响，以探讨STS在钙调神经磷酸酶（CaN）依赖的信号通路心肌肥大中的作用。方法 以培养的原代心肌细胞为模型，用AngⅡ刺激细胞外Ca^2＋内流，丹参酮ⅡA及钙离子拮抗剂维拉帕米（Ver）进行干预。检测心肌细胞[Ca^2＋]i及钙调神经磷酸酶（CaN）、丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）和蛋白激酶C（PKC）活性江。[^3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白质合成速率作为心肌细胞肥大的指标。结果 AngⅡ刺激组[Ca^2＋]i水平及蛋白核酸合成速率明显增高，与对照组相比差异显著（P〈0．01），而STS能有效地降低南AngⅡ刺激引起的[Ca^2＋]i增高（P〈0．01VSAng1组）。明显抑制AngⅡ诱导的蛋白质合成速率的增加（P〈0．01 VS AngⅡ组）。AngⅡ刺激组CaN、PKC活性与对照组相比差异有显著性（P〈0．05、P〈0．01）。STS及Ver抑制AngⅡ介导的心肌细胞CaN、PKC活性的增高。结论 CaN通路在AngⅡ刺激的心肌细胞肥大中起重要作用；STS具有Ca^2＋阻滞剂的特点，能有效地降低由AngⅡ刺激引起的[Ca^2＋]i增高，导致CaN活性降低阻滞心肌肥大的发生和发展。     

AngⅡ对人心房细胞内游离钙浓度的影响及大蒜素的拮抗作用

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人心房细胞[Ca2+]i的影响以及AngⅡ受体拮抗剂大蒜素的拮抗作用。方法急性分离单个人心房肌细胞,实验分4组:对照组、AngⅡ组(加入终浓度为0.1μmol/L的AngⅡ)、大蒜素组(加入终浓度为50μmol/L的大蒜素)和AngⅡ+大蒜素组(大蒜素50μmol/L和AngⅡ0.1μmol同时加入)。以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入干预药物后即刻与15min检测[Ca2+]i变化。结果对照组和大蒜素组人心房肌细胞内荧光强度和光密度值较低。AngⅡ加入后即刻光密度值开始增加,15min后荧光强度和光密度值显著增高,差异有显著性意义(P<0.05)。而AngⅡ+大蒜素组光密度值低于AngⅡ组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论AngⅡ可引起人心房肌细胞内钙超载,大蒜素能显著减轻AngⅡ诱导的人心房肌细胞内Ca2+超载。