溶脲脲原体感染对精液质量影响的临床研究

溶脲脲原体（ureaplasma urealyticum,Uu）是男性泌尿生殖系统感染的常见病原体,溶脲脲原体感染引起的非淋菌性尿道炎（NGU）治疗不彻底,可蔓延到前列腺、睾丸、附睾等,引起相应炎症,导致男性不育。本文就溶脲脲原体对男性精液质量影响做一临床研究,现报告如下。     

溶脲脲原体感染对精卵结合相关分子硫酸半乳糖甘油酯的影响

目的 :研究溶脲脲原体 (Uu)感染对精卵结合相关分子硫酸半乳糖甘油酯 (SGG)的影响。　方法 :取成熟小鼠附睾精子制成精子悬液 ,随机分为 4组 :Uu组 (与Uu悬液共孵育 )、培养液组 (与Uu培养液共孵育 )、正常组和免疫前血清 (PRS)组。间接免疫荧光法检测SGG在精子膜表面的定位以及Uu对精子膜表面SGG的影响。　结果 :SGG主要位于附睾精子头部相当于顶体区的质膜上。与Uu培养液共孵育的精子 ,其表面SGG的阳性率达82 .0 % ;而与Uu悬液共孵育的精子 ,其表面SGG的阳性率下降至 39.0 % (P =0 .0 0 1)。　结论 :Uu能与精子膜SGG结合 ,SGG可能是Uu在哺乳动物精子膜上的受体 ,Uu封闭精卵结合相关分子SGG可能是Uu感染引起男性不育的分子机制之一。     

生殖系溶脲脲原体的研究

溶脲脲原体是从人体中分离出的能自身繁殖的 13种支原体之一。Shephard[1] 1954年首先从非淋菌性尿道炎患者的泌尿生殖道中分离到类似肺炎支原体样微生物 ,因其培养所形成的菌落微小被称为 T株 (tiny strain)。 1974年国际支原体协会按其有脲酶 ,能分解尿素的特征 ,命名为溶脲脲原体 (ureaplasmaurealyticum,UU)。UU可感染各种哺乳类、鸟类及家禽等。有人从它们的上下生殖道及呼吸道粘膜分离出了 UU。已发现 UU至少有 14个血清型 ,即 1～ 10、K2、U2 4、U33和 U2 6型 ,并发现 UU与非特异性尿道炎 (NSU) [2 ] 、非淋菌性尿道炎、赖特…     

人精子与溶脲脲原体的共同抗原

溶脲脲原体(UU)是人泌尿生殖道的常见病原体,男性感染者又常伴有抗精子抗体,并可致不育。本实验证实了人精子与UU有共同抗原。① ELISA方法抗 UU抗体不仅可与UU抗原起反应,也可与人精子或精子膜发生反应;抗人精子抗体同样也可与UU抗原发生反应;②10％不连续SDS-PAGE可见人精子、精子膜提取物与UU有相同的蛋白电泳区带;③免疫印迹技术证明抗UUIgG对转移到硝基纤维薄膜上的人精子、精子膜和UU的电泳条带,在分子量 61KDa处发生特异性的交叉反应。     

男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染对精液质量影响的研究

目的:了解男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染情况,探讨男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染对精液质量、附属性腺功能的影响及可能机制。方法:本研究对202例确诊的男性不育患者的精液标本进行溶脲脲原体培养,对精液参数及精浆α-葡萄糖苷酶、酸性磷酸酶和果糖进行检测,分析生殖道溶脲脲原体感染对精液参数及精浆生化指标的影响。结果:男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染率为33.7%;生殖道溶脲脲原体感染阳性组和阴性组间精液量相差不显著[(2.93±1.32)mlvs(2.86±1.52)ml,P=0.774];阳性组精子密度较阴性组患者明显偏低[(84.37±52.92)×106/mlvs(101.90±43.90)×106/ml,P=0.025];阳性组精子活率较阴性组患者明显偏低[(44.62±22.13)%vs(51.83±19.88)%,P=0.036];阳性组患者精子活力明显低于阴性患者[(38.40±15.61)%vs(44.45±15.47)%,P=0.020];两组精液pH值均在正常值范围内,但阳性组明显高于阴性组(7.32±0.10vs7.19±0.29,P=0.003);阳性组与阴性组除侧摆幅度、向前运动、直线运动和摆动性等4项指标相差不显著外,对曲线运动性、直线速度、平均路径速度、平均移动角度)和鞭打频率等5项指标均有影响;阳性组精浆α-葡萄糖苷酶较阴性组明显降低[(40.0±18.7)U/mlvs(47.9±21.0)U/ml,P=0.026],Uu感染阳性组α-葡萄糖苷酶降低的相对危险性是阴性组的2.12倍;两组间精浆酸性磷酸酶和果糖水平无统计学差异(P均>0.05)。结论:在男性不育患者中,生殖道溶脲脲原体感染是精液质量下降的重要危险因素;生殖道溶脲脲原体感染可导致附睾分泌α-葡萄糖苷酶下降,但对前列腺酸性磷酸酶及果糖无明显影响,而这种感染对前列腺和精囊危害相对有限。     

溶脲脲原体感染对精液质量的影响

溶脲脲原体(ureaplasma urealyticum,Uu)是男性泌尿生殖道感染最常见的病原体,可寄生于男性睾丸及附属性腺中,引起生精小管病变、精子生成异常等,是引起男性不育的重要因素之一[1].我们检测了男性不育患者精液Uu感染情况,探讨Uu感染与精液质量的关系.     

溶脲脲原体引起男性不育的机理研究——Ⅱ.对精子运动的影响

本研究观察了正常生育男性与精液溶脲脲原体培养阳性的不育男性的精子运动。用比浊法比较了两组男性精液中快速运动精子的百分率与其平均速度。此外,用血清型4溶脲脲原体人工感染正常生育男性的精子。结果表明,不育男性快速运动精子的百分率与平均速度均显著低于正常生育男性;而正常生育男性的精子受血清型4溶脲脲原体感染后,精子的活率及活力的下降。提示溶脲脲原体(血清型4)对人精子的运动具有抑制作用,可能是造成男性不育的一个因素。     

溶脲脲原体引起男性不育的机理研究——Ⅲ.对精子穿卵能力的影响

本文观察了不同血清型溶脲脲原体对人精子穿透去透明带金色仓鼠卵试验(SPA)的影响。用血清型9(Vancouver)和血清型12(JsL-U24-CX3)溶脲脲原体按20～40 CCU/精子的浓度感染正常生育男性的精子。结果表明:部分感染的精子尾部有绒毛状附着物;血清型12感染的精子活率及活力明显下降,血清9型感染的精子活率及活力无明显改变;血清型9与血清型12均使SPA明显降低(分别为10.45％和6.40％),对照组SPA为49.33％。提示溶脲脲原体不仅可影响精子活力,而且可能影响到精卵相互作用乃至融合过程。溶脲脲原体的致病力与其血清型密切相关。     

精液液化异常与溶脲脲原体、沙眼衣原体感染以及抗精子抗体相关性研究

目的研究精液液化异常与生殖道溶脲脲原体、沙眼衣原体感染以及精浆抗精子抗体的关系。方法男性不育患者350例,根据液化时间分为精液不液化组、液化不全组和液化正常组,观察精液液化状态与UU、CT感染率和精浆AsAb阳性率之间的关系。结果精液不液化组、液化不全组的UU、CT感染率和AsAb阳性率均明显高于液化正常组;而液化不全组和不液化组的UU、CT感染率和AsAb阳性率无明显差异(P>0.05)。结论精液液化异常与生殖道UU、CT感染以及精浆AsAb有关。     

不育妇女溶脲脲原体感染432例分析

溶脲脲原体 (ureaplasma urealyticum,UU)是女性生殖泌尿道常见的致病病原体 ,与盆腔炎、不育症、自然流产有关 [1,2 ] 。作者对我所诊治的 4 32例不育妇女生殖道 UU感染情况进行了分析。一、资料与方法1.资料来源 :1994～ 1995年 5月 ,因不育就诊妇女 4 32例 ,其中原发不育 2 58例 ,继发不育 174例。年龄在 2 4～ 39岁。每例病人均进行妇科检查 ,并将妇科检查结果分为两组。一组为正常盆腔 ,另一组为异常盆腔 ,包括阴道炎、宫颈糜烂、慢性盆腔炎。2 .实验方法 :外阴消毒 ,用无菌棉拭子取宫颈分泌物立即接种于 UU培养基。另取阴道分泌物…     

复方积雪草合剂对IgA1诱导的大鼠系膜细胞增殖及IL-6与TGF-β1表达的影响

目的：探讨复方积雪草合剂对IgA1诱导的大鼠系膜细胞（MsC）的增殖及分泌白细胞介素-6（IL-6）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。方法：用体外实验的方法,将MsC经培养及传代,分成正常组、模型组,复方积雪草合剂高、中、低组,泼尼松组及代文组;经IgA1诱导后分别予以上述各药含药血清;用计数板对MsC进行计数、用RT-PCR及ELISA法分别检测IL-6 mRNA、TGF-β1 mRNA及其蛋白质的表达。结果：实验显示,复方积雪草合剂能抑制IgA1诱导的MsC增殖（与模型组比较P〈0.05）,且高、中剂量组明显优于其他治疗组;同时复方积雪草合剂能使MsC分泌IL-6 mRNA、TGF-β1 mRNA及其蛋白质下降（与模型组比较P〈0.05）,并呈一定的量效关系,尤其对IL-6的抑制作用更明显。结论：复方积雪草合剂可抑制IgA1诱导的MsC增殖,并减少IL-6 mRNA、TGF-β1 mRNA及其蛋白质的表达。     

Mahoganoid基因在小鼠精子发生中的动态表达及对雄鼠生殖力影响

目的探讨Mahoganoid（Md）基因在小鼠精子第一发生波中的动态表达以及其基因缺失对雄性小鼠生殖力的影响。方法采用荧光实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）相对定量法检测MahoganoidmRNA在7、14、21、28、35、60d龄C3H／HeJ雄鼠睾丸中的表达;对Md基因缺失纯合子（Md^nc）及C3H／HeJ雄鼠精子密度,精子活力,异常精子形态百分率分析,并通过交配实验观察其使正常雌鼠受孕分娩情况。结果MahoganoidmRNA在7d龄C3H／HeJ雄鼠睾丸有低表达,14d表达开始上调,21d上升趋势明显,35d时表达水平为60d91％;Md^nc可以与雌鼠交配,但无幼鼠出生,Md^nc雄鼠精子快速前向运动百分比明显低于C3H／HeJ雄鼠精子（P〈0．01）。结论Mahoganoid基因与精子发生相关,Mahoganoid基因缺失会导致雄性小鼠精子活力下降,影响其生殖能力。     

联合注射外源性IFNγ和IGF-1治疗小鼠骨骼肌损伤

目的：观察局部联合注射外源性人胰岛素样生长因子-1（human insulin-like growth factor-1，hlGF-1）和人γ干扰素（human interferon γ，hIFNγ）对于小鼠急性钝挫伤骨骼肌修复过程中再生和纤维化的影响。方法：64只8周龄雄性C3H小鼠，制作右侧腓肠肌钝挫伤动物模型，随机分为4组，即A组（注射hIFNγ）、B组（注射hIGF-1）、C组（联合注射hIFNγ和hIGF-1）、D组（注射生理盐水）。挫伤后第10天，A、B、C、D组小鼠，腓肠肌损伤处分别注射不同药物进行干预。于干预前（伤后7d），和干预后4、18、32d，各组随机抽取4只小鼠进行损伤腓肠肌取材，以荧光定量PCR和免疫荧光化学染色方法检测不同时点Ⅱb型肌球蛋白重链（myosin heavy chain—Ⅱb，MHC—Ⅱb）及波形蛋白（Vimentin）的表达。结果：④干预后各时点，B、C组小鼠损伤骨骼肌局部MHC—Ⅱb表达较A、D组明显高；（爹干预后各时间点A、B、C组小鼠损伤骨骼肌局部Vimentin表达较D组低，其中以A组和B组更明显。结论：④骨骼肌急性损伤后，局部注射hIGF-1有明显促进骨骼肌纤维再生，和一定程度抑制纤维化的作用。②局部注射hIFN3,仅表现出抑制纤维化的作用，且比hlGF-1更加明显。⑧联合应用hlGF-1和hIFNγ，能够同时促进骨骼肌再生和抑制纤维化，有效地促进损伤骨骼肌的愈合。     

急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70表达的影响

目的:探讨急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响。方法:将32只8周龄雄性小白鼠随机均分为4组,饲养7d后,进行热应激处理,温度控制在(39±0.5)℃,时间分别为0.5、1和3h。应激后立即采血,分离血清测定谷草转氨酶(GOT)含量。一侧附睾制备精子悬液,用于计算精子密度和顶体畸形率;另一侧附睾、睾丸、输精管用于免疫组化研究。结果:应激后,小鼠体重、睾丸系数、顶体畸形率变化不显著(P>0.05),附睾系数和精子密度有不同程度的下降,GOT含量急剧升高(P<0.01)。随着应激时间的延长,小鼠精子密度呈递减趋势,顶体畸形率呈上升趋势。应激时间最短的0.5h组小鼠体重、睾丸系数、附睾系数的降幅反而最大。免疫组化法观察发现,HSP70在性成熟小鼠睾丸、附睾、输精管中均有表达。正常状态下,HSP70在睾丸组织间质细胞中少量表达,应激后分布于间质细胞核,此外在精母细胞核与精子细胞核中也有大量分布;附睾中HSP70主要分布于主细胞质,基细胞和亮细胞中没有表达,应激后附睾体的纤毛细胞中也发现大量棕色颗粒;输精管中HSP70主要定位在基细胞质,主细胞中不表达。随着应激时间的延长,HSP70在睾丸、附睾中的表达量明显升高,而在输精管中的增幅不明显。结论:急性热应激对性成熟雄性小鼠的生殖系统造成了损伤;HSP70在睾丸、附睾、输精管中的表达与定位具有区域特异性和细胞特异性,提示其可能参与精子的发生与成熟;HSP70在应激状态下表达量大幅上升的作用可能在于保护细胞免受高热损伤。     

表皮生长因子和干细胞因子对小鼠生精细胞增殖与分化的作用

目的:观察表皮生长因子(EGF)和干细胞因子(SCF)体外促小鼠生精细胞增殖、分化的效应。方法:对7~8日龄雄性昆明小鼠生精细胞进行混合细胞体外培养,在培养液中分别添加不同浓度(5、10、20、40、100 ng/ml)的EGF和SCF,并进行EGF和SCF的交互实验,观察生精细胞的存活率和形态学变化,并对粗线期精母细胞特异性磷蛋白基因(P19)、单倍体精子细胞特异性转化蛋白基因(TP1)及染色体倍性进行检测。结果:加入EGF或SCF 2~4 d,各组均可见不同程度的细胞增殖,细胞呈团或族状,以20 ng/ml EGF组和40 ng/ml SCF组最为明显;培养第7天,单一添加20 ng/ml EGF或40 ng/ml SCF组生精细胞数和存活率显著高于与其它各组(P0.05),且40 ng/ml SCF组P19/TP1基因表达显著低于其它各组,单倍体细胞率显著高于其它各组(P0.05)。EGF与SCF配伍时,可显著增加体外培养后生精细胞数(P0.05)。结论:在混合生精细胞体外培养体系中,添加一定浓度的EGF和SCF可显著提高生精细胞数和存活率,而且SCF可提高单倍体精子的形成率;两者交互实验时,对细胞增殖有一定的叠加效应。     

虫草多糖对单侧输尿管梗阻小鼠肾小管上皮-间充质转化的影响

目的：观察虫草多糖对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾小管上皮一间充质转化（EMT）的影响。方法：建立小鼠UUO模型，虫草多糖干预7d。观察模型及治疗组在第7天时肾间质纤维化程度及肾小管α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、肾小管上皮表型标记物（E—cadherin）、整合素连接激酶（integrin—linked protein kinase，Iu〈）的表达分布。结果：治疗组的肾间质纤维化程度明显改善，同时α—SMA、ILK蛋白的表达显著低于对照组（P〈0.01）。而E—cadherin的表达显著高于对照组（P〈0．01）。结论：虫草多糖可显著减轻E—cadherin的丢失和α—SMA的表达，并明显抑制ILK的表达，提示其可能通过下调ILK，抑制EMT，从而减轻肾小管间质纤维化。     

FasL基因转染树突状细胞在抑制实验性自身免疫性葡萄膜炎中的作用

目的:探讨FasL基因转染的抗原特异性树突状细胞(DC)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用.方法:用携带FasL基因的腺病毒转染DC和负载自体抗原——光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)R16肽段的DC,制备FasL转染的DC(FasL-DC)和抗原负载FasL-DC(“杀伤性”DC).检测FasL基因...     

shRNA-CTGF重组质粒对瘢痕疙瘩Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的 构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-CTGF重组质粒（简称shRNA-CTGF）,通过RNA干扰（RNAi）技术对结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）进行体内、体外干预,分析其对瘢痕疙瘩Ⅰ型胶原蛋白（collagen-Ⅰ,COL-Ⅰ）表达的影响.方法 设计并构建特异性shRNA-CTGF重组质粒,RNAi转染体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞（keloid fibroblast,KFB）,检测CTGF基因沉默情况及KFB分泌的COL Ⅰ量;将shRNA-CTGF重组质粒对构建的裸鼠瘢痕疙瘩动物模型进行体内转染,检测CTGF基因沉默情况及COL-Ⅰ基因、蛋白表达水平.结果 成功构建了CTGF重组质粒,其在体内、体外环境下均可成功沉默CTGF表达,其抑制率为86.8％和54.1％;RNA体外干扰KFB定向沉默CTGF的同时可显著抑制COL-Ⅰ表达,其mRNA、蛋白水平抑制率分别为76.8％和65.6％;RNA体内干预实验也可显著降低COL-Ⅰ表达,其mRNA、蛋白水抑制率分别为52.7％和48.0％.结论 shRNA-CTGF重组质粒在体外及体内环境下均可成功沉默CTGF基因表达,沉默CTGF能显著降低瘢痕疙瘩中COL-Ⅰ蛋白含量,提示CTGF基因是病理性瘢痕治疗的潜在靶点.     

血管生长抑素基因抑制胰腺癌裸鼠移植瘤血管生成的实验研究

目的:探讨人血管生长抑素基因对胰腺癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法:建立人胰腺癌细胞株BXPC-3裸鼠移植瘤模型,应用人血管生长抑素基因质粒转染胰腺癌裸鼠移植瘤,观察移植瘤生长情况。采用免疫组织化学技术检测肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)表达情况和微血管密度(MVD)差异,透射电子显微镜观察肿瘤细胞情况。结果:治疗组肿瘤体积明显小于空白对照组和空质粒组(P<0.01),VEGF主要表达在肿瘤细胞的胞质内,治疗组、空白对照组和空质粒组平均灰度分别为179.57±5.22、150.87±3.44和163.40±3.54;阳性单位分别为14.94±2.26、31.26±2.72和29.21±2.95;MVD分别为10.60±74.56、19.33±2.52和18.67±5.29,治疗组与空白对照组和空质粒组比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。电子显微镜下治疗组可见大量肿瘤细胞坏死。结论:人血管生长抑素基因能明显抑制胰腺癌裸鼠移植瘤血管生成,促进肿瘤细胞坏死,进而抑制肿瘤生长。     

NK4基因转染对前列腺癌DU145细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

研究HGF拮抗剂NK4在前列腺癌中的作用。将包含NK4cDNA的表达载体pBudCE4．1-EGFP-NK4转染到DU145细胞中。体外实验检测白分泌的NK4对肿瘤细胞增殖、迁移、转移及凋亡的影响。体内实验裸鼠分为三组,分别皮下种植DUl45、空质粒转染的Dul45和NK4转染的DUl45细胞,检测皮下肿瘤的大小、细胞凋亡及细胞增殖情况。体外实验结果显示转染NK4的DUl45细胞可以分泌NK4蛋白。自分泌的NK4抑制HGF诱导的肿瘤细胞增殖、迁移及转移,促进凋亡（P〈0．01）。NK4可以调节HGF受体c－Met及其下游ERKl与Akt1／2蛋白的活性。体内实验显示,NK4转染DUl45细胞组的肿瘤生长及细胞增殖受到抑制,同时肿瘤细胞凋亡增加。本实验显示包含NK4cDNA的表达载体转染前列腺癌细胞可以有效地调节肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡。NK4作用于HGF／c－Met可以作为前列腺癌治疗的一个有效靶点。