是间日疟原虫多核亚种，还是灵长类疟原虫？

间日疟原虫多核亚种和灵长类的诺氏疟原虫的红内期形态十分相似，仅靠传统的形态学鉴定方法和患者的临床症状难以区分。虽然诺氏疟原虫感染人的病例少有报道，但并不应忽视。利用分子诊断方法，根据不同种疟原虫基因组内相对保守的序列，设计特异性核酸序列进行鉴定，可以明确诊断。     

是间日疟原虫多核亚种,还是灵长类疟原虫?

间日疟原虫多核亚种和灵长类的诺氏疟原虫的红内期形态十分相似,仅靠传统的形态学鉴定方法和患者的临床症状难以区分。虽然诺氏疟原虫感染人的病例少有报道,但并不应忽视。利用分子诊断方法,根据不同种疟原虫基因组内相对保守的序列,设计特异性核酸序列进行鉴定,可以明确诊断。     

间日疟原虫对磺胺多辛?乙胺嘧啶抗药性 相关基因的研究进展

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛?乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗，同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛?乙胺嘧啶产生抗药性与编码二氢叶酸还原酶（DHPS）和二氢蝶酸合酶（DHFR）的基因发生点突变相关，而药物选择压力亦可导致间日疟原虫上述两个基因发生突变。本文就抗疟药磺胺多辛?乙胺嘧啶的发现、应用、作用和间日疟原虫对其抗性机制及抗性相关基因研究进展作一综述，旨在为抗疟策略的制定提供参考依据。     

间日疟原虫氯喹抗性研究进展李

疟疾仍然是一个严重危害人类健康的公共卫生问题, 尤其多见于发展中国家。随着认识的深入, 间日疟也获得 越来越多的重视。有效的药物治疗是控制疟疾甚至消除疟疾的基石, 近年来已有越来越多的间日疟原虫氯喹抗性报道, 间日疟原虫氯喹抗性已成为间日疟防治中一个备受关注的问题。本文就间日疟原虫氯喹抗性的分布现状、 体内外检测方 法和分子检测标志物研究进展进行初步总结。     

间日疟原虫对磺胺多辛?乙胺嘧啶抗药性相关基因的研究进展

疟疾是一种严重威胁人类生命健康的寄生虫病。磺胺多辛?乙胺嘧啶可用于儿童和孕妇疟疾间歇性预防性治疗,同时其也作为以青蒿素及其衍生物为基础的联合疗法的一种复方成分而被用于疟疾治疗。恶性疟原虫对磺胺多辛?乙胺嘧啶产生抗药性与编码二氢叶酸还原酶（DHPS）和二氢蝶酸合酶（DHFR）的基因发生点突变相关,而药物选择压力亦可导致间日疟原虫上述两个基因发生突变。本文就抗疟药磺胺多辛?乙胺嘧啶的发现、应用、作用和间日疟原虫对其抗性机制及抗性相关基因研究进展作一综述,旨在为抗疟策略的制定提供参考依据。     

复式PCR检测恶性疟原虫与间日疟原虫的研究

目的： 建立在同一次扩增中即可鉴别患者感染的疟原虫虫种的复式ＰＣＲ检测方法。方法： 根据恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）中度重复基因序列ｐＢＲＫ１－１４ 和间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）线粒体细胞色素Ｃ氧化酶基因ＣＯＩＩＩ合成引物,采用经优化的ＰＣＲ反应体系, 对疟原虫ＤＮＡ模板进行扩增。结果： Ｐ．ｆ．与Ｐ．ｖ．分别被扩增出２０６ 和３７０ ｂｐ 大小的ＤＮＡ片段,与人白细胞ＤＮＡ 无交叉;用该反应体系至少可检测出原虫血症为５×１０－ ７的Ｐ．ｆ．感染和１．０２×１０－ ６ Ｐ．ｖ．感染; 自云南疟疾流行区采集的７８３份滤纸干血滴样本中, 复式ＰＣＲ法阳性检出率为８５．８％ , 误诊率为０, 漏诊率为０．１％ , 而镜检法依次分别为８４．９％ 、３．１％ 和１．０％ , 两者符合率为９５．８％ 。结论： 本复式ＰＣＲ检测疟原虫较镜检敏感、特异, 适用于我国恶性疟与间日疟混合流行区的疟疾诊断、流行病学调查、药物的疗效考核和献血员的筛选等。     

DNA探针检测间日疟原虫的初步研究

由于间日疟原虫目前尚不能体外培养,抗原制备困难,使间日疟的流行病学调查及诊断受到限制。本文报道以间日疟原虫红内期基因组DNA库0.24kb DNA片段为探针,用~(32)P标记后进行点杂交试验检测间日疟原虫的初步结果。 材料与方法 含间日疟原虫红内期基因组DNA库亚克隆VPL101/5 0.24kb DNA片段的重组质粒pUC19由澳大利亚昆士兰医学研究所Kidson赠送。按文献方法进行感受态细胞JM 109的制备、重组质     

间日疟原虫和恶性疟原虫可溶性抗原免疫反应性比较

目的分析和比较间日疟原虫(Plasmodiumvivax,P.v)和恶性疟原虫(P.falciparum,P.f)可溶性抗原与间日疟感染者混合血清和单克隆抗体(McAb)M26-32免疫反应性的差别,以期寻找潜在的疟疾诊断抗原。方法取P.v感染者血样,用Plasmodipur滤器分离去除白细胞,经60%Percoll浓集其中的感染红细胞(i RBC)。分别制备P.v、P.f和正常红细胞(nRBC)可溶性抗原,应用P.v感染者、正常对照混合血清和M26-32单抗与相应的抗原进行免疫印迹分析。结果免疫印迹分析表明,P.v感染者能特异性识别26k、33、49、115kDaP.v抗原;100、102、110、150、175kDaP.f抗原;能够交叉识别的条带有:31、59、63、70、120kDa。M26-32单抗能识别P.f、P.v抗原中31kDa等抗原条带。结论P.v感染者能特异识别间日疟抗原组份,并能交叉识别P.f抗原,其中31kDa抗原组分具有较强的免疫原性,同时能被M26-32单抗识别,其作为P.v特异性诊断抗原的价值有待于进一步研究。     

Plasmodium vivax resistance to chloroquine in Dawei, southern Myanmar

Objective  To assess the efficacy of chloroquine in the treatment of Plasmodium vivax malaria in in Dawei District, southern Myanmar.
Methods  Enrolled patients at Sonsinphya clinic >6 months of age were assessed clinically and parasitologically every week for 28 days. To differentiate new infections from recrudescence, we genotyped pre- and post-treatment parasitaemia. Blood chloroquine was measured to confirm resistant strains.
Results  Between December 2002 and April 2003, 2661 patients were screened, of whom 252 were included and 235 analysed. Thirty-four per cent (95% CI: 28.1–40.6) of patients had recurrent parasitaemia and were considered treatment failures. 59.4% of these recurrences were with a different parasite strain. Two (0.8%) patients with recurrences on day 14 had chloroquine concentrations above the threshold of 100 ng/ml and were considered infected with chloroquine resistant parasites. 21% of failures occurred during the first 3 weeks of follow-up: early recurrence and median levels of blood chloroquine comparable to those of controls suggested P. vivax resistance.
Conclusions  Plasmodium vivax resistance to chloroquine seems to be emerging in Dawei, near the Thai-Burmese border. While chloroquine remains the first-line drug for P. vivax infections in this area of Myanmar, regular monitoring is needed to detect further development of parasite resistance.     

Chloroquine resistant Plasmodium vivax malaria in India

In India, 1·2-1·5 million new cases of Plasmodium vivax occur each year. These cases are successfully treated with 600 mg chloroquine (adult dose). We report the results of malaria treatment of a 13-year-old girl from the Indian Oil Corporation (IOC), Mathura, India who contracted P. vivax infection. The infection failed to respond to 2 cycles of standard chloroquine therapy. The concentrations of chloroquine were monitored with high performance liquid chromatography (HPLC). The plasma and whole blood chloroquine concentrations were 260 and 106 ug/1 respectively, while a 15 µg/1 plasma concentration is considered lethal to P. vivax. Resistance in P. vivax to chloroquine was found at the IOC, Mathura.     

Artemisinin or chloroquine for blood stage Plasmodium vivax malaria in Vietnam

Chloroquine-resistant Plasmodium vivax has not yet occurred in Vietnam. The efficacy of artemisinin for P. vivax was not established. We conducted a double-blind randomized study involving 240 inpatients with P. vivax malaria who received artemisinin (40 mg/kg over 3 days) plus placebo chloroquine (Art) or chloroquine (25 mg/kg over 3 days) plus placebo artemisinin (Chl). Patients were followed up with weekly blood smears for 28 days. In each group 113 cases were analysed. All patients recovered rapidly. The median (range) parasite clearance time of regimen Art was 24 h (8-72) and of Chl 24 h (8-64; P = 0.3). Parasites reappeared in two cases in each group on day 14, in eight cases in each group (7%) on day 16 and in 25 (23%) and 18 (16%) cases, respectively, at the end of 4-week follow-up (P = 0.3). The population parasite clearance curve followed a mono-exponential decline. The parasite reduction ratio per 48 h reproduction cycle was 2.3 x 104 for both regimens. We conclude that artemisinin and chloroquine are equally effective in the treatment of P. vivax infections in Vietnam. Reappearance of parasites before day 16 (7%) suggests the emergence of chloroquine resistance. Three days of artemisinin monotherapy does not prevent recrudescence.     

多重PCR快速检测恶性疟和间日疟的研究

目的 建立一种简便快速、能同时检测恶性疟和间日疟的核酸检测方法。方法 针对两种疟原虫18S rRNA基因设计2对(3条引物),优化引物浓度与退火温度,建立可扩增出两种疟原虫基因片段的多重PCR。并进行最低检测限确定和临床标本检测,以镜检法为金标准分析灵敏度和特异度等指标。结果 该方法可扩增出431 bp(恶性疟原虫)和341 bp(间日疟原虫)基因片段,最低检测限为10²copies/反应,检测临床标本的结果与镜检法无差别(P＞0.05),敏感度为93.55%,特异度为70.83%,阳性预测值为89.23%,阴性预测值为80.95%。结论 所建立的多重PCR方法可快速检测疟疾感染并鉴别分型,灵敏度高,值得推广。     

复式PCR检测间日疟原虫和恶性疟原虫的现场应用

目的探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值。方法根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值。结果间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6×10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染。与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54%,漏诊率为0.8%,误诊率为0,而镜检法依次分别为53%、1.7%和3.4%。结论复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值。     

间日疟原虫荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立

目的　建立间日疟原虫荧光定量聚合酶链式反应 (FQ -PCR)检测方法 ,为快速、准确定量检测间日疟原虫奠定基础。方法　根据间日疟原虫SSURNA基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针 ,将PCR扩增的间日疟原虫SSURNA基因片段克隆入载体 ,对重组质粒进行筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的判定和样品检测。结果　应用重组质粒制作的定量曲线 ,循环阈值与模板浓度具有良好的线形关系 ,12 7份疟区血样和 30份正常血样的检测 ,显示此法有较高的灵敏度和特异度 ,定量检测结果与镜检感染率呈直线相关 ,相关系数为 0 95 9。结论　建立了间日疟原虫的荧光定量PCR检测方法     

中缅边境间日疟原虫环子孢子蛋白基因分型

根据间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因设计特异分型引物,利用巢式PCR技术(Nested-PCR)对采自中缅边境的间日疟患者血样作分型鉴定。检出的174份血样中,PV-I型热带族占54.6%(95/174)、温带族占35.6%(62/174)、PV-II型占2.9%(5/174)、混和感染占6.9%(12/174)。表明中缅边境的间日疟原虫存在4种基因型,以热带族为优势虫株,缅甸拉咱与云南腾冲间日疟原虫CSP基因型构成无差异(χ2=3.381,P0.05)。     

标签引物-套式/多重PCR检测恶性疟原虫和间日疟原虫的研究

目的 建立简便、灵敏、低本底、可同时检测恶性疟原虫和间日疟原虫的套式/多重聚合酶链反应（PCR）系统。 方法 应用标签引物扩增技术、Primer Premier 5.0软件、美国生物信息中心(NCBI-BLAST)网络资源和矩阵试验法优化套式/多重PCR，检测疟疾患者滤纸血样并与镜检结果进行比较。 结果 新建立的标签引物套式/多重PCR，检测模拟现场滤纸血样的敏感性为恶性疟原虫1～2个虫/μl血，间日疟原虫5～10个虫/μl血。检测71份现场采集的镜检疟原虫阳性滤纸血样（恶性疟24份和间日疟47份）的结果与镜检结果的符合率分别为87.5%和100%。 结论 通过标签引物扩增技术优化的套式/多重PCR系统，适用于检测现场采集的滤纸血样，其检出低原虫血症的敏感性和鉴定虫种的准确性均优于镜检法，是很有潜力的疟疾诊断技术。