重组arresten蛋白对自体移植静脉内膜增生的抑制作用

目的 观察原核表达人arresten重组蛋白对自体移植静脉内膜增生的抑制作用.方法 用pRSET原核表达系统表达并纯化人arresten重组蛋白.将Wistar大鼠颈外静脉移植于腹主动脉,建立大鼠自体静脉移植模型,实验分3组:假手术组、移植对照组和移植实验组.自术后第3天起,皮下注射给予arresten重组蛋白(每日4 mg/kg体重)处理.4周后取移植静脉组织标本,进行病理组织学观察与免疫组织化学染色分析.结果 移植组移植静脉均呈现典型的内膜增生、肥厚,导致血管管腔狭窄;新生内膜主要有过度增殖的α-SMA染色阳性平滑肌细胞组成.移植实验组移植静脉内膜增生受到明显抑制,新生内膜面积(0.12±0.07)mm2及新生内膜/中膜面积比(0.373±0.085)均显著低于对照组[(0.38±0.11)mm2,1.621±0.086,P<0.01];并且实验组移植静脉新生内膜细胞PCNA标记指数显著低于对照组[(15.62±3.97)%比(56.36±3.49)%,P<0.01].结论 重组arresten蛋白通过抑制新生内膜平滑肌细胞的增殖能有效抑制自体移植静脉内膜增生的发生发展,在防治血管重建术后再狭窄方面显示出良好的应用前景.     

体外诱导人骨髓间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化的实验研究

目的应用血小板衍生生长因子BB（platelet-derived growthfactor BB,PDGF-BB）,体外诱导人骨髓间充质干细胞（human bone marrowmesenchymal stemcells,hBMSCs）向血管平滑肌细胞表型分化,探讨该方法的可行性及诱导细胞作为组织工程血管平滑肌种子细胞的可行性。方法抽取健康成人志愿者骨髓,经密度梯度离心分离得单个核细胞,PDGF-BB（20ng/ml）诱导hBMSCs向血管平滑肌样细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）分化,观察细胞形态变化。免疫荧光检测细胞内血管平滑肌肌动蛋白α（vascular smooth muscleα-actin,SMα-actin）,血管平滑肌钙结合蛋白（vascular smoothmuscle calponin,SMcalponin）,血管平滑肌肌球蛋白重链（vascular smooth muscle myosin heavy chain,SMMHC）和细胞血管平滑肌钙结合相关蛋白（smooth muscle22α,SM22α）表达情况;反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测诱导后血管平滑肌细胞SMα-actin,SMcalponin,SMMHC和SM22α的mRNA表达。Western印记检测SM22α的表达。流式细胞分析技术（fluorescence activated cell sorter,FACS）分析诱导后细胞内SMα-actin,SMcalponin,SMMHC的表达。结果PDGF-BB20ng/ml诱导后可见单层培养的细胞形态呈“成纤维细胞样”。免疫荧光检测示SMα-actin,SMcalponin,SMMHC,SM22α表达阳性;RT-PCR检测SMα-actin,SMcalponin,SMMHC,SM22α的mRNA阳性表达。Western印迹检测SM22α的表达为阳性。FACS分析表明诱导后,SMα-actin,SMcalponin,SMMHC表达均增高,与未诱导组比较差异有统计学意义（P〈0.05,n=3）。结论人骨髓间充质干细胞在PDGF-BB的诱导下可向血管平滑肌细胞表型分化,有望成为血管组织工程血管平滑肌种子细胞的来源。     

靶向PIK3cb双位点shRNA干扰抑制血管移植术后再狭窄

目的 研究RNA干扰（RNAi）对大鼠血管平滑肌细胞磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）p110β亚单位（PIK3cb）基因表达的干扰效应。方法 雄性SD大鼠150只，均行白体颈外静脉-颈总动脉移植手术，随机数字分组法分为6组：空白对照组（25％空白Pluronic F-127）、shRNA-1组、shRNA-2组、1／2（shRNA-1＋shRNA-2）组、阴性对照组（无序质粒）和阳性对照组（渥曼青霉素），每组25只。3个转染组[shRNA-1组、shRNA-2组及1／2（shRNA-1＋shRNA-2）组]通过Pluronic F-127缓释系统将shRNA均匀喷涂于移植静脉周围。分别于术后1、3、7、14及28d各取5只大鼠取材，采用计算机图像分析法测量管腔内膜厚度及新生内膜面积，Western blot（术后3d）及免疫组化染色检测细胞增殖情况。结果 术后3、7、14及28d时，3个转染组血管内膜厚度均较空白对照组及阴性对照组明显减少（P〈0．05）；而新生内膜面积3个转染组（除shRNA-2组第3、7d）于术后1d起即开始明显减少（P〈0．05）。免疫组化染色结果示术后各时间点3个转染组PCNA阳性细胞面积百分比显著低于空白对照组及阴性对照组（P〈0．05）。Western blot检测结果示术后3d3个转染组PCNA蛋白表达明显低于空白对照组及阴性对照组（P〈0．05）。各时间点空白对照组与阴性对照组血管内膜增生情况及PCNA表达情况差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 shRNA真核表达载体转染入移植静脉后能有效抑制管壁平滑肌细胞增殖，是一种防治移植静脉狭窄的基因疗法。     

经外膜缓释雷帕霉素抑制兔同种异体移植血管内膜增生的研究

目的：探讨雷帕霉素抑制血管移植后再狭窄的作用机制.方法：健康雄性新西兰大耳白兔36只,随机选取其中18只切取腹主动脉,经20%甲醛浸泡48 h去除抗原活性.另18只动物随机分为3组,腹主动脉移植去抗原同种异体腹主动脉后给予不同处理.A组：血管移植后不予处理;B组：在移植血管外膜及吻合口周围涂抹20% pluronic F-127多聚凝胶0.5 ml;C组：在相同部位涂抹含0.5 mg雷帕霉素的20% pluronic F-127多聚凝胶0.5 ml.术后4周获取移植血管,HE染色观察移植血管内膜增生情况,计算机图像分析系统测量移植血管内膜厚度,免疫组化SP法检测移植血管α-actin、PCNA和p27kip1的表达.结果：术后4周,A、B组较C组内膜增生明显（P＜0.05）.增生的血管内膜均可见类似于血管平滑肌的α-actin阳性表达.各组移植血管增生的内膜均可见不同程度的PCNA、p27kip1阳性表达.C组α-actin和PCNA的表达较A、B组明显降低（P＜0.05）,而p27kip1的表达较A、B组明显增多（P＜0.05）.结论：对20% pluronic F-127多聚凝胶携带雷帕霉素涂抹移植血管外膜可有效抑制移植血管平滑肌细胞增殖.雷帕霉素抑制移植血管再狭窄的机制与其上调移植血管组织中p27kip1的表达而使细胞增殖周期受抑有关.     

SM22α和α-SMA在静脉曲张组织中的表达及其意义

目的 探讨下肢静脉曲张中平滑肌22α (smooth muscle 22 alpha,SM22α)及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达与下肢静脉曲张的关系.方法 收集下肢静脉曲张患者的曲张大隐静脉组织作为实验组,另收集冠脉搭桥术患者正常下肢大隐静脉组织为对照组.RT-PCR方法检测标本中SM22α mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测标本中SM22α及α-SMA的表达.结果 SM22α mRNA表达量在实验组和正常对照组中分别为0.2614±0.1168和0.5114±0.1554,差异有统计学意义(t=5.020,P＜0.01).免疫组化示:SM22α和α-SMA均表达于血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)胞质中.SM22α阳性蛋白累计吸光度(integrate optical density,IOD)值在实验组和对照组分别为10 055±3584和16226±3378,差异有统计学意义(t=4.991,P＜0.01),与PCR结果一致.α-SMA阳性蛋白IOD值在实验组和对照组分别为9746±3903和15 371±4318,两组比较差异有统计学意义(t=3.861,P＜0.05).结论 SM22α和α-SMA在曲张静脉中低表达表明曲张静脉发生了VSMC由收缩型向合成型的表型转换,进而导致静脉管壁的重塑和静脉曲张的发生.     

染料木黄酮对大鼠移植动脉血管平滑肌细胞的影响

目的研究染料木黄酮(Gen)对大鼠移植动脉血管平滑肌细胞的影响。方法以BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立腹主动脉移植模型,将受者随机分为3组。实验组(n=8):受者术后腹腔注射Gen 20 mg·kg~(-1)·d~(-1)×60 d;对照1组(n=8):受者术后腹腔注射溶剂二甲基亚砜0.5 ml×60 d;对照2组(n=6):受者术后不给予任何处理。腹主动脉移植后60 d取移植血管进行组织学观察,测量血管内膜厚度;免疫组织化学染色检测血管平滑肌细胞的增殖和迁移情况;酶联免疫(ELISA)法检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、γ-干扰素(INF-γ)的变化。结果实验组与两个对照组比较,内膜增厚不明显且巨噬细胞浸润减少;血管平滑肌细胞增殖和迁移减少(P均<0.01);两个对照组血清中VEGF、INF-γ表达显著高于实验组(P<0.01)。结论染料木黄酮在预防和治疗移植动脉硬化的过程中,对移植动脉血管平滑肌细胞的增殖和迁移有抑制作用,其机理可能与影响VEGF等的表达有关。     

反义c-myc和增殖细胞核抗原抑制移植血管狭窄研究

目的探讨血管移植后联合应用c-myc和增殖细胞核抗原(PCNA)反义寡核苷酸(AODN)抑制血管平滑肌增殖和防止移植血管狭窄的作用。方法选40只新西兰雄性白兔,随机分为对照组(A组)、c-myc-AODN组(B组)、PCNA-AODN组(C组)和c-myc—AODN加PCNA-AODN组(D组),每组10只;将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0 cm)对换移植,移植血管用c-myc-AODN和PCNA-AODN液浸泡转染;术后4周时B超观察移植血管通畅情况和内径,同时取移植血管制片显微镜下测量其内膜厚度、内膜面积和移植血管狭窄率,并用免疫组织化学染色计数c—myc和PC—NA阳性细胞数。结果D组的移植血管内膜厚度、内膜面积、管腔狭窄程度和c-myc阳性细胞及PCNA阳性细胞数均显著低于A组(P<0.01),而且亦明显低于B组或C组(P<0.05);其内径比A组(P<0.01)、B组和C组显著增大(P<0.05);B组和c组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合应用c-myc—AODN和PCNA-AODN能有效抑制VSMC增殖,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄。     

低能量红激光局部照射对自体移植静脉内膜增生的影响

目的探讨低能量红激光局部照射对自体移植静脉内膜增生的影响.方法取80只大鼠,随机分为单纯自体静脉移植组(对照组,n=40)和低能量红激光局部照射组(激光组,n＝40).两组大鼠分别于术后第3 d、7 d、14 d及28 d取移植静脉段(每时相组各l0只)固定,行HE染色、弹力纤维染色及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色,应用光学显微镜和计算机图像分析系统分析测定其内膜厚度和管腔面积.结果术后第3 d,两组管腔横截面积及内膜平均厚度差异无显著性意义(P＞0.05);激光组术后第7 d、14 d、28 d内膜平均厚度低于对照组(P＜0.05),管腔横截面积明显大于对照组(P＜0.05);PCNA免疫组化染色结果显示,激光组移植静脉平滑肌细胞(VSMC)增殖受到明显抑制(P＜0.01).结论低能量红激光局部照射可以抑制自体移植静脉内膜及VSMC的增生,减少再狭窄的发生.     

纳米粒子介导的p27kip1基因转染对静脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨以纳米粒子为载体的人p27kip1基因转染对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用.方法聚乳酸聚乙醇酸共聚物包载p27kip1基因,制备纳米级粒子混合物.转染培养的大鼠血管平滑肌细胞,流式细胞仪分析细胞周期.建立自体静脉移植动物模型,随机分成转基因组、空白载体对照组、单纯静脉移植组.分别于术后3、7、14、28 d取材,进行苏木素-伊红(HE)及Verhoeff 染色检测内膜厚度、Western blot检测p27kip1基因蛋白的表达、免疫组织化学法,检测外周血增殖细胞核抗原(PCNA)、E2F表达.结果转基因组表达蛋白,3、7、14 d较其他俩组明显增多(P<0.05);转基因组内膜平均厚度较其他组明显减少(P<0.01),对照组及单纯静脉移植组之间差异无统计学意义(P>0.05);转基因组PCNA的表达7～28 d较其他组明显降低(P<0.01),其E2F的表达7～14 d较其他组显著降低(P<0.01);对照组及单纯静脉移植组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论纳米粒子可以作为转基因载体,p27kip1抑癌基因的表达能够有效抑制自体静脉移植后内膜平滑肌细胞的增殖.     

大孔隙非限制性血管外支架抑制移植静脉内膜增生的实验研究

目的探讨大孔隙非限制性聚对二氧环己酮血管外支架抑制移植静脉内膜增生的实验效果及其作用机制。方法建立兔自体颈外静脉移植至颈总动脉动物模型,48只新西兰大白兔随机分为对照组(单纯静脉移植,n=24)和实验组(静脉移植 血管外支架,n=24)。于术后4周、12周分别取出移植静脉,行病理学检查测量内膜、中膜的厚度和面积,对增殖细胞核抗原行免疫组织化学检查计算细胞增殖率。结果48只兔无手术和术后死亡,移植血管全部通畅。实验组血管外支架与移植静脉壁之间形成富含毛细血管的"新生外膜"。术后4周和12周实验组管腔面积大于对照组,而中膜面积、内膜面积、中膜厚度和内膜厚度均小于对照组(P<0.05)。术后4周实验组细胞增殖率(22%±11%)低于对照组(37%±15%,P<0.05);术后12周实验组和对照组细胞增殖率均较术后4周降低,而实验组细胞增殖率(8%±5%)低于对照组(16%±9%,P<0.05)。结论大孔隙非限制性聚对二氧环己酮血管外支架通过刺激外膜滋养血管生成、改善静脉壁缺血和缺氧、减小移植静脉壁的轴向应力,而达到减轻内膜和中膜增生的作用。     

缺氧诱导基因-1α和gax基因共转染对移植静脉内膜重塑态的效应与分子机制

目的 探讨缺氧诱导基因(HIF-1α)和同源盒基因(gax)过表达对移植静脉内膜过度增生的影响及其机制.方法 自体静脉移植术大鼠28只均分为基因转染组和非基因转染组.于核酸、蛋白、细胞超微结构及细胞形态层次分析移植静脉中HIF-1α和gax基因表达与血管平滑肌细胞(VSMC)表型、中膜厚度等指标.结果 基因转染组与非基因转染组比较:HIF-1α和gax的mRNA及其蛋白表达增强(P＜0.05);增殖型VSMC和增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞减少(P＜0.05);TUNEL阳性细胞增多(P＜0.05);内皮修复较显著,较多肌-内皮连接结构形成;内膜过度增生程度有所减弱.结论 HIF-1α和gax基因联合转染对移植静脉内膜过度增生具有一定的抑制作用.     

体外分离培养兔阴茎海绵体平滑肌细胞的纯度分析

目的比较和评价不同条件下体外培养兔阴茎海绵体平滑肌细胞的纯度。方法应用胶原酶消化法和组织贴块法分离培养幼兔海绵体平滑肌细胞。差速贴壁法纯化海绵体平滑肌细胞。采用α-平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)和肌球蛋白(Myosin)免疫荧光鉴定海绵体平滑肌细胞,波形蛋白(Vimentin)衬染检测成纤维细胞。流式细胞仪检测海绵体细胞表达α-SM-actin的阳性率,比较不同培养条件下海绵体平滑肌细胞的纯度。结果体外培养的海绵体来源细胞在荧光显微镜下对α-SM-actin和Myosin仅有少量表达,随传代次数的增加,细胞表达α-SM-actin和Myosin的阳性率进一步降低。流式细胞仪检测酶消化法和贴块法原代培养的海绵体平滑肌细胞的纯度分别为16.91%和11.13%。经差速贴壁纯化后第1代海绵体平滑肌细胞的纯度分别提高到26.88%和21.98%。Vimentin免疫荧光检测到大量阳性表达。结论目前常规方法体外分离、培养的海绵体平滑肌细胞纯度较低,大量海绵体间质来源的成纤维细胞混杂生长,差速贴壁法可在一定范围内提高海绵体平滑肌细胞的纯度。     

血管外膜和胶原分布对内膜增生及血管重塑的影响

目的 动态观察移植静脉再狭窄动物模型中血管外膜和胶原的变化,以评价血管外膜和胶原对内膜增生和血管重塑的影响. 方法 长白猪18只,建立猪移植静脉再狭窄模型,术后随机分为3组,术后7d组,术后30d组和术后45d组,每组6只;未移植前的大隐静脉作为对照组.采用HE和Masson染色,观察各组血管成分结构、外膜细胞密度、增生指数和胶原的动态变化. 结果 术后7d组新生内膜形成并增厚,外膜厚度和细胞密度增大,外膜和新生内膜中胶原增多,血管腔面积减少,但与对照组比较差异无统计学意义(F=2.03,P=0.091),而剩余狭窄率逐渐增大(F=5.16,P=0.033),重塑指数和外弹力板围绕面积(EELA)稍有增大.术后30d组新生内膜明显增厚,外膜厚度和细胞密度达最大,新生内膜中含大量胶原,呈进行性增多趋势,外膜中胶原含量达最大,管腔面积和内膜弹力板围绕面积(IELA)明显减小,剩余狭窄率较对照组明显增大(F=6.63,P=0.018),重塑指数和EELA较术后7d组明显减小.术后45d组新生内膜增厚达最大,外膜细胞密度较术后30d组减小(F=6.91,P=0.015),新生内膜中胶原含量达最大,外膜中胶原含量较术后30d组减少,并见局部纤维化;管腔面积、重塑指数、IELA和EELA达最小,剩余狭窄率达最大. 结论 移植血管再狭窄是内膜增生和血管重塑共同作用的结果 .血管外膜的增厚、纤维化及胶原的重排对内膜增生和血管重塑起着重要作用,参与并促进了移植血管再狭窄的发生过程.     

诱导型一氧化氮合酶抑制剂防治大鼠腹主动脉移植术后慢性排斥反应

目的研究移植物慢性排斥反应血管变化的机制,评价新型诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂(FR260330)防治大鼠腹主动脉移植术后慢性排斥反应的作用。方法供者为ACI大鼠,受者为Lewis大鼠。采用原位腹主动脉移植,移植后2周和12周时分别处死受者,取其移植腹主动脉,用光学显微镜及计算机图像分析系统分析腹主动脉内膜、平滑肌及外膜的面积及内膜/内膜 中层比例。并以α肌动蛋白(αactin)免疫组织化学法进行内膜、中层细胞成份分析。术后分别单独或联合应用FR260330和他克莫司(FK506)抗排斥反应。结果移植后用iNOS抑制剂组3个月时血管内膜/内膜 中层比例明显小于不用药对照组;移植后不用药对照组及用FK506组的血管中层细胞均出现不同程度破坏;用iNOS抑制剂组的血管内膜比用FK506组更光滑,破坏情况也较少。结论iNOS抑制剂对慢性排斥反应有抑制作用。     

反义雷帕霉素靶蛋白基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响

目的:观察以纳米粒子为载体的反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响。方法:应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)和聚乙烯醇(PVA)包载mTOR基因,制备纳米级粒子混合物。检测其包埋率、体外释放情况及粒子大小。建立自体静脉移植模型,随机分成转基因组、空载体组、对照组。转基因组移植静脉转染以纳米粒子为载体的反义mTOR基因,空载体组单纯转染纳米粒子包载的空载体,对照组不予特殊处理。分别于术后3d、7d、14d、28d取材,常规HE、Verhoeff染色,RT-PCR、Westernblot检测mTOR基因的mRNA及蛋白的变化,TUNEL法观察血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的动态变化。结果:转基因组内膜中mTOR基因的mRNA及蛋白产物表达较其他两组明显减少(P<0.05);转基因组内膜增生厚度7d、14d、28d较其他组明显减少(P<0.01);转基因组凋亡细胞较其他组明显增高(P<0.05)。结论:纳米粒子可以作为转基因载体,反义mTOR基因的表达能够有效抑制自体移植静脉内膜的增生,促进VSMC的凋亡。     

人arresten基因的真核表达及其对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 真核表达人arresten蛋白,并观察其对血管平滑肌细胞体外增殖的影响.方法 用脂质体介导,将含有人arresten基因的重组质粒pSecTag2-AT转染COS-7细胞;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞目的 基因mRNA表达;收集浓缩转染48 h细胞上清液,Western blot检测目的 蛋白的表达.离体培养大鼠血管平滑肌细胞,用CCK-8法检测转染细胞上清液对平滑肌细胞体外增殖的影响.结果 重组质粒pSecTag2-AT转染的COS-7细胞有目的 基因mRNA的表达;转染细胞上清液中有arresten蛋白的表达.细胞体外增殖分析显示转染细胞上清液可显著抑制血管平滑肌细胞的体外增殖(F=40.154,P＜0.01).结论 真核表达的人arresten蛋白能有效抑制血管平滑肌细胞的体外增殖,为日后开展抑制血管新生内膜增生的基因治疗奠定了基础.     

人arresten重组蛋白对移植物动脉硬化的抑制作用

目的观察人arresten重组蛋白对移植物动脉硬化的抑制作用。方法用pRSET原核表达系统表达并纯化人arresten重组蛋白。建立腹主动脉移植大鼠模型，将受体鼠分为同系动脉移植组、异系移植对照组和异系移植实验组。自术后第3天起，皮下给予arresten重组蛋白（每日5mg／kg体重）处理。8周后取移植动脉组织标本，进行病理组织学观察与免疫组织化学染色，分析移植动脉新生内膜增生及新生内膜细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和PCNA的表达。结果异系移植组移植动脉新生内膜中α-SMA表达阳性平滑肌细胞大量增生，致动脉内膜增厚，管腔狭窄。异系移植实验组移植动脉内膜增生受到明显抑制，新生内膜面积（0．14±0．03）mm^2。及新生内膜／中膜面积比（0．807±0．073）均显著低于异系移植对照组[（0．33±0．07）mm^2，（1．794±0．089），P〈0．01]；并且异系移植实验组移植动脉新生内膜细胞PCNA标记指数（31．72±5．26）％显著低于异系移植对照组（69．53±4．38）％（P〈0．01）。结论人arresten重组蛋白能有效抑制移植物动脉硬化的发生发展，在抗移植物慢性排斥反应方面显示出良好的应用前景。     

β-转化生长因子抑制人血管平滑肌细胞生长和移行

用于自体血管移植的隐静脉,大约有25％在血管重建术后5年内堵塞,最常见的原因是术后出现的内膜增生,而内膜增生取决于血管损伤后平滑肌细胞(SMC)的增殖和移行。血管损伤后,释放β-转化生长因子(TGF-β),影响血管壁的愈合反应。研究此生长因子对人静脉     

大鼠颈静脉分支-颈动脉间置模型新生内膜细胞来源研究

目的探讨大鼠颈静脉分支-颈动脉间置模型新生内膜细胞来源。方法建立SD大鼠颈静脉分支-颈动脉间置模型,分别于术后1、3、7、14和28d取静脉移植血管,定量分析新生内膜厚度,并进行α-SM—actin和CD34免疫组织化学分析。结果新生内膜增生在28d时最明显,血管吻合部位狭窄最严重,增生厚度近端（65．2±4．6）μm,远端（64．7±5．3）μm,中段（63．5±5．6）μm。新生内膜细胞主要来源于内皮细胞、相邻动脉血管平滑肌细胞或循环祖细胞,以新生内膜腔面为著。结论静脉移植血管新生内膜细胞主要来源于静脉移植血管本身内皮细胞、相邻动脉血管平滑肌细胞或循环祖细胞,提示可于血管吻合完成后进行局部干预或术后尽早全身用药,以防止移植血管狭窄。     

32 P局部照射对移植静脉内膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究β射线局部照射对自体移植静脉内膜平滑肌细胞（VSMC）增生与凋亡的影响及可能机制。方法 建立80只大鼠自体静脉移植模型,随机分成^32P局部照射组、对照组,每组按3、7、14、28d随机分成4个亚组、每亚组10只。取材固定,弹力纤维染色,增殖细胞核抗原、p53、bcl-2、bax免疫组化测定,TUNEL法检测静脉平滑肌细胞的凋亡,计算机图象分析仪测量移植血管内膜厚度,计算细胞增殖及凋亡百分化。结果 术后2组移植静脉段的内膜平均厚度：7、14、28d,照射组明显 于对照组（t＝15．694,P＜0．05）;7、14d照射组VSMC增殖较对照组受到明显抑制（t＝60．157,P＜0．01）。凋亡指数14d照射组高于对照组（t＝56．176,P＜0．01）。p53的表达,2组间差异无显著性意义（t＝0．473,P＞0．05）,bax与bcl－2的表达,14d照射组高于对照组（t＝9．783,P＜0．05）。结论 ^32P局部照射可以抑制自体移植静脉的内膜增生及VSMC的增殖,促进VSMC的凋亡,可能是通过bax、bcl－2基因的表达实现的。