FTA/PCR检测加入饮料中的隐孢子虫

用建立的FTA/PCR方法检测饮料样品中隐孢子虫,可检测到隐孢子虫卵囊1.0个/ml,且在6 h内完成。该方法敏感性较高,省时,是检测饮料样品中隐孢子虫的较好方法。     

应用FTA/PCR检测粪便中隐孢子虫的实验研究

目的 建立用FTA/PCR检测粪便中隐孢子虫的技术,并与常用的商业化的粪便DNA抽提试剂盒进行比较.方法 选择经病原学检测已经确诊的隐孢子虫阳性和阴性粪便,分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA,进行巢式PCR扩增,对PCR阳性产物进行测序并利用BLAST在NCBI上与GenBank数据库进行比对,做同源性分析,确定虫种.结果 应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA,无论是否反复冻融破壁,2个阳性对照样本扩增出目的 片段,另3个阳性样本未扩增出特异性条带.样本纯化后应用FTA卡抽提DNA进行PCR检测,所有阳性粪样均扩增出830 bp左右的目的 片段,通过测序和比对,其中2个为贝氏隐孢子虫,1个为火鸡隐孢子虫.结论 应用FTA进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点,可以应用于粪便中隐孢子虫的检测.     

水源性隐孢子虫的PCR检测

水源性隐孢子虫病暴发是一大公共卫生问题 ,且水中的隐孢子虫抵抗力强 ,因其含量少 ,不易检测。PCR技术快速、简便、准确、高度敏感与高度特异。该文就当前在水源性隐孢子虫的PCR检测文献资料进行综述     

水源性隐孢子虫的PCR检测

水源性隐孢子虫病暴发是一大公共卫生问题，且水中的隐孢子虫抵抗力强，因其含量少，不易检测。PCR技术快速、简便、准确、高度敏感与高度特异，该文就当前在水源性隐孢子虫的PCR检测文献资料进行综述。     

聚合酶链反应检测隐孢子虫

微小隐孢子虫 (Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｐａｒｖｕｍ ,Ｃｐ)是引起人类腹泻的重要原因之一[1 3] ,获得性免疫缺陷综合征(ＡＩＤＳ)患者也常易感染。现有微小隐孢子虫病的诊断方法中 ,粪便涂片染色查找卵囊可因粪中卵囊太少、染色剂放置过久、操作方法不熟练或因非特异性嗜酸性颗粒出现而漏诊、误诊。免疫学试验欠敏感 ,体外培养周期太长 ,且难以控制。应用核酸杂交技术检测微小隐孢子虫灵敏、特异 ,但耗时、烦琐、技术要求高和价格昂贵 ,不适宜于临床应用。近年报道聚合酶链反应 (ＰＣＲ)对检测微小隐孢子虫具有高度特异性和灵敏性…     

TaqMan探针实时荧光PCR方法检测粪便中微小隐孢子虫卵囊

以微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)特异性DnaJ-like蛋白基因的保守序列为模板,设计和合成特异性引物和荧光标记探针,通过检测微小隐孢子虫卵囊DNA和加标模拟样品进行敏感性分析,建立标准曲线,并对其特异性和干扰性进行评价。结果显示,该方法只对微小隐孢子虫卵囊进行特异性扩增,其他常见的肠道原虫和肠道病原菌均不能扩增;微小隐孢子虫纯卵囊基因组DNA检测的灵敏度为26个/ml;对加标粪样可检测至2 600个/ml卵囊。提示本研究建立的实时荧光PCR检测微小隐孢子虫卵囊方法具有快速、特异性和敏感性高等优点。     

隐孢子虫病分子检测技术进展

隐孢子虫病是由隐孢子虫引起的一类严重的机会致病性人兽共患寄生虫病.隐孢子虫卵囊很小,在光镜下观察缺乏明显的特征,检测相当困难.为寻找高效的检测方法,近年来在隐孢子虫分子检测方面进行了大量的研究,该文对各种PCR以及基因芯片检测技术作一综述.     

贝氏隐孢子虫PCR检测试剂盒的研制

目的研制禽类贝氏隐孢子虫的PCR检测试剂盒。方法根据贝氏隐孢子虫18SrRNA和ITS-1序列,选取遗传标记位点最多的一段核苷酸序列作为特异PCR引物的靶序列,设计、合成了一对针对贝氏隐孢子虫的特异性引物(YJWF:5’-ACTGATATACAATACCACGG-3’和YR:5’-GCGGATAAAGTTCAGGTTC-3’),对PCR反应条件进行了一系列优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、稳定性、重复性和保存期等进行了系列研究。结果该试剂盒能特异性地扩增出贝氏隐孢子虫基因组中相应片段,与安氏隐孢子虫,微小隐孢子虫,柔嫩艾美尔球虫等相关原虫基因组DNA无交叉反应;最低能检测到3.48个卵囊;反复冻融50次对试剂盒没有影响;室温条件下至少可保存4个月。结论该试剂盒的各项指标达到了贝氏隐孢子虫的检测要求。     

牛隐孢子虫多重PCR方法的建立及应用

摘要：目的 为寻求一种牛源隐孢子虫的快速检测手段。方法 根据牛隐孢子虫COWP基因和ITS-1基因,设计合成两对特异性引物,用以特异性扩增牛微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫,扩增长度分别为1033bp和263bp。通过反应条件的优化,特异性试验及扩增片段的序列测定的验证,建立多重PCR方法。结果 应用该方法对采集自广西不同地区的1613份牛粪样进行牛隐孢子虫检测,安氏隐孢子虫阳性粪样为189份,微小隐孢子虫阳性粪样1份,与常规隐孢子虫分离鉴定结果一致。结论 表明该方法可用于隐孢子虫的流行病学调查及临床诊断。     

4种方法检测牛奶等样品中微量隐孢子虫卵囊的比较

目的评价4种方法检测牛奶等样品中隐孢子虫卵囊污染情况的应用价值。方法利用Nested PCR、PCR、饱和蔗糖溶液漂浮及金胺酚-改良抗酸染色4种方法，分别对36份牛奶、73份奶牛粪便及10份污水样品中鼠隐孢子虫卵囊进行检测。结果Nested PCR方法的检出率分别为11．11％、23．29％和0，均高于其他3种方法。结论4种检测方法中，Nested PCR敏感性最高、特异性强、稳定性好，可用于微量隐孢子虫卵囊检测。     

基于SYBR Green检测微小隐孢子虫的实时荧光定量PCR方法的建立及应用

目的建立一种方便快捷的检测微小隐孢子虫的实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法。方法根据GenBank公布的微小隐孢子虫18s rRNA基因序列设计1对引物,通过质粒DNA和卵囊检测标准曲线的绘制及特异性和重复性的研究,建立检测微小隐孢子虫的基于SYBR Green的Real-time PCR方法,进而对奶牛粪便进行检测。结果建立的Real-time PCR法对检测微小隐孢子虫具有很高的特异性,质粒DNA和卵囊的检测阈值分别达到1个拷贝和10个卵囊,奶牛粪便阳性率为25.93%（21/81）,高于普通PCR检测率20.99%（17/80）。结论建立的Real-timePCR方法简便、快速,特异性强,敏感度高,可用于微小隐孢子虫的快速定量检测。     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.     

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展

隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病,可通过食源和水源等途径传播,主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻,有重要的公共卫牛意义.免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点,应用广泛.该文主要介绍了免疫荧光榆测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法,并初步分析了各种方法的优、缺点.