UVA1照射对人工皮肤分泌MMP-1影响的初步研究

目的：探讨不同UVA1剂量照射对人工皮肤分泌MMP-1的影响,明确光致人工皮肤损伤的UVA1剂量。方法：通过ELISA法检测不同剂量的UVA1（0～90J/cm^2）对人工皮肤表达MMP-1分泌的变化。结果：与0J/cm^2相比,UVA1剂量为10J/cm^2时MMP-1的分泌量无明显变化（P〉0.05）,当UVA1剂量大于20J/cm^2时人工皮肤分泌MMP-1的量逐渐增高（P〈0.05,P〈0.0001）,UVA1剂量在小于50J/cm^2以前呈剂量依赖性增高,至70J/cm^2以后分泌量较前有所降低。结论：引起人工皮肤光损伤的初始UVA1照射剂量为20J/cm^2。     

大鼠牙齿移动牙周组织中Ⅰ型胶原和MMP-1及TIMP-1的表达

目的：观察大鼠正畸牙齿移动过程中I型胶原和MMP-i、TIMP-1在上颌第-磨牙牙周组织中的表达和变化。方法：建立大鼠正畸磨牙移动模型，分为对照组和术后1、3、5、7、10、14天组，用免疫组织化学方法观察各组中Ⅰ型胶原和MMP-1、TIMP-1表达的变化。结果：I型胶原和MMP-1、TIMP-1在大鼠正畸牙周组织中的阳性表达明显强于对照组，且有时间依赖性。结论：Ⅰ型胶原在牙周组织改建中具有重要的作用，MMP-1、TIMP-1参与了正畸牙周组织细胞外基质的代谢过程。     

MMP-1和MMP-2在肝纤维化组织中的表达和意义

目的:探讨MMP-1和MMP-2在肝纤维化组织中的作用及其机制。方法:应用免疫组化法并用图像分析技术定量检测28例手术切除的肝纤维化组织标本中MMP-1和MMP-2的表达。结果:正常肝组织与肝纤维化组织MMP-1表达无显著性差异(P>0.05),而MMP-2的表达在肝纤维化组织中明显高于正常肝组织(P<0.01)。结论:MMP-1和MMP-2可能在肝纤维化的发生和发展中有重要作用。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾组织中MMP-9和TIMP-1表达的影响

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组Zn^2＋依赖性内肽酶，主要参与细胞外基质的降解、转运、组织重塑，MMP-9是MMPs家族中最大的成员，主要降解Ⅳ型胶原，在一定的病理条件下对细胞的迁移、侵袭、活化及动脉硬化的形成，血管重塑起重要作用。特别是MMPs与金属蛋白酶组织抑制因子（TIMPs）的平衡状态（MMPs／TIMPs）决定了人体的生理及某些疾病的发生和发展 .     

MMP-2、MMP-9、TIMP-1在血管成形术后再狭窄中的表达及其意义的实验研究

目的观察PTA后MMP-2、MMP-9和TIMP-1在血管壁各层随时间的演变规律,探讨其在血管再狭窄过程中的表达及意义。方法48只大鼠制作成颈动脉再狭窄动物模型,选取30只内膜增生满意的标本,分别代表动脉损伤后1、3、7、14、28、42天6个观察时间点,对胶原纤维进行Masson染色。MMP-2、TIMP-1、PCNA进行免疫组织化学染色,MMP-9进行免疫组织化学和原位杂交两种染色。分析它们的表达与内膜增生和血管重塑的关系。结果正常血管不表达MMP-9mRNA及蛋白,损伤后第3天中膜、外膜mRNA表达达高峰,第7天内膜表达达高峰。MMP-9蛋白第7天内膜表达达高峰,且阳性细胞率高于中膜和外膜。第14、28天,血管壁各层表达逐渐下降至基线水平,内膜的阳性细胞主要集中在新生内膜靠近管腔的一侧。内膜MMP-2表达高峰出现晚至第14天,且近内弹力板处MMP-2也有明显的表达。正常血管壁不表达TIMP-1,损伤后第3天,中膜和外膜表达达高峰。第7天,新生内膜表达达高峰,中膜和外膜仍有较高水平表达。结论MMP-9、MMP-2、TIMP-1参与再狭窄,内膜MMP-9表达与早期增殖的细胞向内膜迁移形成新生内膜有关。MMP-2表达与晚期内膜形成、内膜重塑有关。TIMP-1的表达对内膜增生和重塑没有直接作用,其表达升高是机体为适应MMPs升高做出的代偿反应,在维持自身平衡中起作用。     

内皮素1对人肾小球基质金属蛋白酶3及其组织抑制剂1表达的影响

内皮素1(ET-1)是一种强烈的缩血管活性肽，能够促进肾小球系膜细胞增殖及多种细胞外基质(ECM)组分的合成，但ET-1对ECM降解代谢的影响还不甚清楚。基质金属蛋白酶3(MMP-3)是一种基质溶解酶，能够降解多种ECM组分，活性受其组织抑制物1(TIMP-1)所抑制。本实验通过研究ET-1与MMP-3／TIMP-1的关系探讨ET-1对肾小球ECM降解代谢的影响。     

白介素-1β对髓核细胞MMP-1、2、9、13表达的影响

目的探讨IL-1β对人椎间盘髓核细胞表达基质金属蛋白酶MMP-1、2、9、13的作用。方法分离人椎间盘髓核细胞进行单层培养并利用甲苯胺蓝、番红O染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色进行鉴定,而后分别用10ng／ml和50ng／ml重组人IL—1β刺激体外培养的髓核细胞,RT-PCR检测基质金属蛋白酶-1、2、13的表达,定量PCR检测基质金属蛋白酶-9的表达。结果10ng／ml和50ng／ml重组人IL-1β均可促进髓核细胞基质金属蛋白酶-1、2、9、13的表达（P〈0．05）;基质金属蛋白酶-9、13表达随IL-1β浓度升高而升高（P〈0．05）。结论IL—1β可以促进人椎间盘髓核细胞表达基质金属蛋白酶-1、2、9、13,其加速了椎间盘基质分解的作用亦可能通过上述细胞因子的介导。     

黄芪、太子参对大鼠肾小球系膜细胞MMP-2及TIMP-2-mRNA表达的影响

目的：观察黄芪、太子参对大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）及基质金属蛋白酶抑制剂-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）-mRNA表达的影响。探讨黄芪、太子参对肾小球硬化的防治作用。方法：（1）应用血清药理学方法,制取中药的药理血清。（2）采用血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖。（3）应用反转录多聚酶链反应技术（RT-PCR）观察各组间MMP-2及TIMP-2m-RNA表达的情况。结果：黄芪、太子参对TIMP-2有显著地抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。对MMP-2的影响差异无统计学意义。结论：黄芪、太子参通过抑制TIMP-2的基因表达,从而达到延缓肾小球硬化的作用。     

MMP-2,-9及其抑制物TIMP-1在多囊卵巢综合征患者黄素化颗粒细胞上的表达

目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者黄素化颗粒细胞上基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)及其组织抑制物TIMP-1的蛋白及mRNA在不同培养时间的表达水平,了解与细胞外基质合成、降解相关的MMPs/TIMPs系统参与PCOS的病理生理机制。方法收集2011年9月到2012年1月行体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的PCOS患者30例,对照组为同期行IVF或ICSI治疗的不孕症患者30例。密度梯度法获得卵巢黄素化颗粒细胞,细胞贴壁培养,分别在培养24、48和72h收集颗粒细胞。采用Western blotting方法检测颗粒细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的蛋白表达;RT-PCR检测颗粒细胞中MMP-2、MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果 (1)PCOS组黄素化颗粒细胞MMP-2,-9蛋白表达在各培养时间点(24、48、72h)均显著高于对照组(P均0.05);且MMP-2蛋白表达水平在48、72h相对于24h的比值,以及MMP-9蛋白表达水平在72h相对于24h的比值,PCOS组均显著高于对照组(P均0.01)。(2)PCOS组MMP-2mRNA在24、48、72h的表达,MMP-9mRNA在48、72h的表达均高于对照组,差异有统计学意义(P均0.05);MMP-2,-9mRNA表达水平在48、72h相对于24h的比值,PCOS组高于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05)。(3)PCOS组TIMP-1蛋白及mRNA表达在24、48、72h与对照组比较无统计学差异(P0.05)。结论 PCOS患者黄素化颗粒细胞中MMP-2和MMP-9的表达升高,其MMPs/TIMPs的平衡状态向蛋白酶的活性增强方向移动,可能与PCOS患者黄体功能不足有关。     

公英解毒洗剂对下肢静脉性溃疡患者血清 MMP-3及 TIMP-1表达的影响的研究

目的:研究下肢静脉性溃疡患者血清中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)及超敏-C反应蛋白(hs-CRP)的表达水平,探讨公英解毒洗剂治疗下肢静脉性溃疡的机制。方法:选取下肢静脉性溃疡患者75例,随机分为对照组25例,复方黄柏液组25例,公英解毒洗剂组25例。于治疗的第1、7、14天抽取患者足背静脉血,检测血清中MMP-3、TIMP-1及hs-CRP表达情况并比较,计算并比较三组的创面愈合率。结果:治疗第7天,创面愈合率和TIMP-1由高到低依次为:公英解毒洗剂组>复方黄柏液组>对照组,差异均有统计学意义;治疗第14天,公英解毒洗剂组和复方黄柏液组的创面愈合率和TIMP-1均高于对照组,差异有统计学意义,但公英解毒洗剂组与复方黄柏液组差异无统计学意义。治疗第7天,血清中hs-CRP和MMP-3水平由高到低依次为:对照组>复方黄柏液组>公英解毒洗剂组,差异均有统计学意义;治疗第14天,复方黄柏液组和公英解毒洗剂组的血清hs-CRP和MMP-3均低于对照组,差异有统计学意义,但公英解毒洗剂组与复方黄柏液组差异无统计学意义。结论:通过对创面的观察及MMP-3、TIMP-1和hs-CRP表达的动态监测,证实公英解毒洗剂有较强的抗菌消炎的功效,值得临床推荐。     

P物质缓释系统对正畸大鼠牙周破骨细胞数目的影响

目的:探讨P物质纳米缓释微球的生物活性及对正畸牙周改建中破骨细胞数目变化的影响.方法:将P物质-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米缓释微球(SP-PLGA NP)注射入正畸大鼠第一磨牙根尖水平龈下,分别在加力后1,3,7,14天后采用HE染色观察牙用组织变化和压力侧破骨细胞数目,并和单纯用p物质以及空白对照组比较.结果:加力后1天,三组间牙周都未发现有破骨细胞;加后3天,破骨细胞数量表现为P物质组＞缓释纳米微球组＞对照组,与对照组有显著性差异(P＜0.05);加力后7天,表现为缓释纳米微球组＞P物质组＞对照组,与对照组有显著性差异(P＜0.05);加力14天后,三组破骨细胞数量都有减少,但缓释纳米微球组数量最多.结论:P物质能促进正畸中牙周破骨细胞形成,而SP-PLGA NP能在较长时间维持这种作用.     

脾切除贲周血管离断术对肝硬化患者术后血清MMP-1、TIMP-1及肝纤维化指标的影响

目的探讨脾切除贲周血管离断术对慢性乙型肝炎肝硬化门静脉高压症患者肝纤维化指标及肝硬化病程的影响和可能机制。方法选择20例:HBsAg(+)、HBV-DNA(-)门静脉高压症患者,其中肝功能Child-Pugh A级14例,Child-Pugh B级6例。分别于脾切除贲周血管离断术前后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TMP-1);化学发光免疫法测定透明质酸(HA)、三型前胶原N端肽(PC-Ⅲ)、四型胶原(Ⅳ-C)、层粘连蛋白(LN)。结果 (1)血清TIMP-1及肝纤4项指标较术前明显下降(p0.05),MMP-1较术前缓慢升高(P0.05)。(2)TIMP-1与肝纤四项指标的变化成正相关关系(r=0.458~0.783,P0.01/0.05),MMP-1与肝纤4项指标的变化呈负相关关系(r=-0.545~-0.873,P0.01/0.05)。结论脾切除贲周血管离断术可使肝纤维化血清学指标和TIMP-1含量下降、MMP-1含量缓慢升高,有利于减缓肝硬化患者的病情进展。     

放疗对前尿道狭窄模型兔iNOs和MMP-2的影响

目的建立前尿道狭窄模型兔动物模型,研究局部放疗对尿道移行上皮下的结缔组织中与瘢痕修复密切相关的组织型一氧化氮合酶（iNOs）基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达的影响。方法建立电刀灼热伤所致的前尿道狭窄兔动物模型,随机分为放疗2周组,放疗4周组和未放疗组。当灼热伤后,在尿道内镜下可见到灼伤处黏膜苍白,周围血管扩张时,放疗组应用铱192γ射线对灼伤处上下0.5cm进行内照射,1.25Gy/次,隔日一次,共5Gy/次。当放疗结束后两周,同时处死放疗组,未放疗组兔。将前尿道狭窄段及上下0.5cm进行取材;当放疗结束后4周,同时处死放疗组,未放疗组兔。将前尿道狭窄段及上下0.5cm进行取材。免疫组化法检测尿道移行上皮下的组织中组织型一氧化氮合酶（iNOs）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达。结果 2周和4周的取材标本中,放疗组的iNOs和较未放疗组表达降低（P〈0.05）;而基质金属蛋白酶（MMP-2）较未放疗组表达增强（P〈0.05）。结论放疗增强了前尿道狭窄兔动物模型尿道组织中基质金属蛋白酶（MMP-2）的表达;降低了组织型一氧化氮合酶（iNOs）的表达,为临床联合运用冷刀尿道瘢痕切开术后于早期安全剂量的放疗以及细胞因子靶向治疗,预防尿道狭窄复发提供了实验依据。     

强脉冲光对大鼠皮肤MMP-1表达的影响

目的观察强脉冲光对大鼠皮肤金属蛋白酶-1（MMP-1）表达的影响，探讨光子嫩肤的分子生物学机制。方法选择15只SD大鼠，每只选3个部位用强脉冲光照射，采用同一照射参数，能量密度34J／cm^2，分为3个脉冲，脉宽各为4、5、6ms，脉冲延时为20ms及25ms。照射后第1、3、5、7、15、30天分别于照射及非照射部位切取皮肤样本，免疫组化染色，光镜下观察。结果照射后第1天MMP-1即见表达，第7天表达至高峰，第15天表达开始减弱，第30天皮肤全层的表达处于较低水平，非照射部位染色阴性。结论强脉冲光照射大鼠皮肤后可引起MMP-1表达的增加，提示MMP-1在光子嫩肤过程中对皮肤的重塑起到一定的作用。     

eNOS在大鼠正畸牙周组织中的早期介导作用

目的：观察大鼠正畸牙齿移动过程中上皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）在牙周组织内的表达分布，从而探讨一氧化氮（nitric oxcide，NO）及eNOS在正畸牙齿移动中的意义。方法：建立大鼠正畸实验动物模型，取其受力牙及牙周组织做免疫组化切片。结果：eNOS随牙齿移动时间的不同其表达分布发生变化，在加力第一天牵张侧的eNOS表达明显增强。结论：NO及eNOS在正畸牙齿移动中发挥作用，eNOS在牙齿移动的早期起了重要的介导作用。     

大鼠上颌第一磨牙正畸移动中牙周膜神经PGP9.5的表达

目的：建立大鼠正畸牙移动模型,观察PGP9.5在牙周膜（PDL）神经中的表达及变化,探讨正畸力转化成神经元的反应的细胞调控机制。方法：成年雄性SD大鼠25只,随机分为5组：加力0、3、7、14、21天组,每组5只。上颌第一磨牙（URM1）施加50g近中向的拉力,按实验期限,分别取不同组大鼠含磨牙及其周围牙槽骨的组织块切片,进行PGP9.5免疫组化染色。镜下观察牙齿压力侧牙周膜神经纤维PGP9.5免疫阳性的变化情况,并进行灰度值分析、统计学方差分析和t检验。结果：压力侧的神经纤维的密度增加。在第7天牙槽骨表面出现类骨质的沉积;第21天根吸收陷窝处可见免疫阳性的牙周神经纤维。第3、7天牙周膜神经纤维PGP9.5的表达最强（P〈0.05）,之后神经的表达开始下降,牙周膜神经密度也逐渐恢复。结论：正畸加力使大鼠牙周膜神经中PGP9.5表达增强,PGP9.5调控神经肽的合成和分泌,可能是神经元细胞调控的重要机制。牙周膜神经在调节骨细胞活性和促进类骨质的形成,以及牙根吸收和修复等过程中可能也发挥重要作用。