Studies on the Isolation of Cryptococcus Neoformans from Fruits and Vegetables: Untersuchungen zur Isolierung von Cryptococcus neoformans von Früchten und Gemüsen

Summary: The occurrence of Cryptococcus neoformans was studied in 254 vegetables and 186 fruit samples collected from different markets of Delhi during 1978 to 1980. Cryptococcus neoformans was isolated from five (1.1%) of the 440 fruits and vegetables material examined. The varieties of fruits and vegetables which yielded C. neoformans were apple, guava, papaya, carrot and potato. The isolates were tested for their pathogenicity in Swiss mice and were found pathogenic as confirmed by mycological and histopathological techniques. Laboratory experiments were conducted to study the suitability of three varieties of fruits and two types of vegetables to support the growth of C. neoformans. Luxurient growth of the yeast could be obtained after cultures were inoculated onto sliced and autoclaved vegetables and fruits. However, the unsterilized vegetables and fruits failed to support the growth of C. neoformans because of their easy contamination with rapidly growing molds and bacteria. As far as could be ascertained there seems to be no report on the isolation of C. neoformans from the Carrot (Daucus carota). the Guava (Psidium guajava) and the Papaya (Carica papaya). Zusammenfassung: Das Vorkommen von Cryptococcus neoformans wurde an 254 Proben von Gemüse und 186 Früchten, die von verschiedenen Märkten in Delhi stammten, während der Jahre 1978 bis 1980 untersucht C. neoformans konnte bei fünf der insgesamt 440 Proben (1,1%) nachgewiesen werden. C. neoformans wurde dabei auf einem Apfel, einer Guava-Frucht, einer Papaya-Frucht, einer Karotte und einer Kartoffel gefunden. Im Tierversuch an Mäusen war die Pathogenität der Stämme nachzuweisen. In vitro zeigte C. neoformans gutes Wachstum auf verschiedenen autoklavierten Früchten und Gemüseproben. Dagegen wurde das Wachstum auf unsterilisierten Proben durch Kontamination mit Schimmelpilzen und Bakterien verhindert. Die Autoren stellen fest, daß der Nachweis von C. neoformans auf Karotte, Guava-Frucht und Papaya-Frucht hiermit zum ersten Mal geführt wurde.     

Detection of Cryptococcus neoformans in Biopsy Specimens from the Spleen and the Liver of AIDS Patients: Critical Comments: Nachweis von Cryptococcus neoformans in Biopsiematerial von Milz und Leber AIDS-Kranker: Eine kritische Stellungnahme

Summary: This article was prompted by a publication describing the use of fluorochrome for rapid detection of Cryptococcus neoformans in the spleen of an AIDS patient In two AIDS patients including the above-mentioned one, cryptococcosis was diagnosed by the author on the basis of biopsy specimens from spleen and liver. The rapid microscopic diagnosis of the pathogen in histological sections stained with HE and PAS as well as in the unstained native preparations was without problems; for this reason, additional methods were found to be unnecessary. Subsequently, in both cases a disseminated cryptococcosis was confirmed miroscopically, culturally and serologically. It is pointed out that for the diagnosis of cryptococcosis in AIDS patients, invasive methods such as spleen and liver biopsy should not be used but recognized cultural and serological methods at an early stage of the fungal infection. Nevertheless, for such mycological diagnosis, special knowledge of differentiating methods is required. Attempts of performing a rapid diagnosis using fluorescence microscopy are considered as dispensable. Zusammenfassung: Anlaß zu vorliegendem Beitrag war eine Veröffentlichung in dieser Zeitschrift, in der die Verwendung von Fluorochrom zur Schnelldiagnose einer Cryptococcus-neoformans-Infektion in der Milz eines AIDS-Patienten, die bereits vom Autor gestellt worden war, beschrieben wurde. Der Autor konnte in Milz- und Leberstanzzylindern von diesem und beim Leberstanzzylinder eines weiteren AIDS-Patienten aus derselben Klinik eine Cryptococcusneoformans-Infektion nachweisen. Die mikroskopische Schnelldiagnose des Erregers in mit HE und PAS angefárbten histologischen Schnitten wie auch in ungefärbten Nativpräparaten bot keine Schwierigkeiten; somit erübrigte sich die Anwendung weiterer mikroskopisch-diagnostischer Verfahren. In beiden Fällen wurde mikroskopisch, kulturell und serologisch eine disseminierte Kryptokokkose festgestellt Invasive Verfahren wie Milz-und Leberpunktion sind somit entbehrlich, denn bewährte kulturelle und serologische Verfahren ermöglichen eine Schnelldiagnose bereits im Frühstadium der Infektion.     

Schleimkapselbildung in vitro von Cryptococcus neoformans: Mucoid Encapsulation in vitro of Cryptococcus neoformans

Zusammenfassung:  Die Schleimkapselbildung in vivo von Cryptococcus neoformans ermöglicht häufig das Erkennen einer Cryptococcosis bereits bei der Direktuntersuchung (Liquor cerebrospinalis, histologische Präparate). Auf herkömmlichen festen oder flüssigen Medien bleibt die Kapselbildung zumeist aus. Deshalb wurde ein neues Medium formuliert, das die Kapselbildung besonders begünstigt. Hierdurch wird die Bestimmung von Cryptococcus neoformans erleichtert.
Summary:  The formation of a mucoid capsule of Cryptococcus neoformans cells in vivo often is helpful in the histological diagnosis of a cryptococcosis or when samples of cerebrospinal fluid are studied by direct microscopy. In cultures on conventional solid or liquid media encapsulation frequently does not occur. For this reason, a new medium has been developed which stimulates capsule formation and thus facilitates the identification of Cryptococcus neoformans.     

Serotyping of Cryptococcus neoformans isolates from environmental and clinical sources in extreme southern Italy (Calabria and Sicily, central Mediterranean area)

Summary. Ninety-seven environmental and four clinical isolates of Cryptococcus neoformans from several localities in extreme southern Italy were serotyped. All proved to be Cr. neoformans var. neoformans serotype A. The homogeneity of the serotypes suggests that geographical climatological conditions may play a role in Cr. peoformans serotype diffusion. It was furthermore revealed that, unlike the data reported for the serotypes of Cr. neoformans in mainland Italy, Cr. neoformans serotype D was not present in the examined sites in extreme southern Italy.
Zusammenfassung. Vier klinische Isolate von Cryptococcus neoformans sowie 97 Isolate aus der Umgebung verschiedener Orte im äußersten Süden Italiens wurden serotypisiert. Sämtliche Isolate erwiesen sich als Cr. neoformans var. neoformans Serotyp A. Die Homogenität dieser Serotypen deutet darauf hin, daß geographische klimatische Bedingungen in der Verbreitung von Cr. neoformans -Serotypen eine Rolle spielen. Es ergab sich ferner, daß—im Gegensatz zu den Cr. neoformans -Sero-typen auf dem übrigen italienischen Festland—der Serotyp D an den untersuchten Orten des äußersten Südens Italiens nicht vorhanden war.     

Feline meningitis due to Cryptococcus neoformans var. neoformans and review of feline cryptococcosis

Summary. Cryptococcus neoformans var. neoformans was ascertained as the prime cause of fatal meningitis in a young-adult female domestic cat who was suspected of rabies. The pathogen was isolated in heavy growth from the infected brain specimen on simplified sunflower seed ( Helianthus an-nuus ) medium at 30 C. Periodic acid-Schiff stained impression smear revealed numerous cryptococcal cells. Histologically, pia-arachnoid showed thickening along with many circular yeast cells with and without budding morphologically consistent with Cr. neoformans . The detailed typing of the strain indicated that it belonged to serotype AD and Filobasidiella neoformans var. neoformans mating type 'α'. The emphasis is given on early diagnosis by immunological and mycological techniques and prompt chemotherapy to avert the fatal consequences of this enigmatic mycosis.
Zusammenfassung. Cryptococcus neoformans var. neoformans wurde als Erreger einer tödlichen Meningitis einer jung erwachsenen weiblichen Hauskatze mit Tollwutverdacht nachgewiesen. Der Pilz lieiß sich mit reichem Wachstum aus dem infi-zierten Gehirn auf vereinfachtem Helianthus an-nuus -Samen-Agar bei 30 C anzüchten. PAS-ge-färbte Quetschpräparate zeigten zahlreiche Cryp-tococcus -Zellen. Histologisch war die Hirnhaut im Arachnoidalbereich verdickt mit vielen kugeligen Hefezellen mit und ohne Knospungen, die morpho-logisch mit Cr. neoformans vereinbar waren. Die Stammtypisierung ergab die Zugehörigkeit zum Se-rotyp AD und zum Mating-Typ a von Filobasi-diella neoformans var. neoformans . Die Notwendig-keit der Frühdiagnose durch immunologische und mykologische Techniken und des frühen Therapie-beginns wird betont, urn die fatalen Folgen dieser oft übersehenen Mykose abzuwenden.     

Sproßpilze im Kot von Zoovögeln, freilebenden einheimischen Vögeln und verwilderten Tauben (Untersuchungen zum Vorkommen von Cryptococcus neoformans bei Vögeln)

Mit dem Ziel, Cryptococcus neoformans nachzuweisen, wurden 357 Vogelkotproben auf Sproßpilzbefall untersucht. Es handelte sich um 117 Proben von Freilandvögeln, 147 von verwilderten Tauben und 103 von Vögeln des Zoologischen Gartens. Als Züchtungs-medium diente Negersaat-Kreatinin-Antibiotika-Diphenyl-Agar nach Staib und See-liger . Hefepilze konnten in 94,9 % aller untersuditen Materialien aufgefunden werden, der Nachweis von Cryptococcus neoformans gelang jedoch nicht. Die insgesamt 762 kulturell erfaßten Mikroorganismen verteilten sich vorwiegend auf die Gattungen Rhodotorula (19,7 %), Torulopsis (18,4 %), Candida (15,6 %), Geotrichum (11,5 %). Häufigste Pilzarten waren Rhodotorula minuta, Geotrichum candidum, Aureobasidium spec, Torulopsis famata, Trichosporon pullulans, Candida albicans, Torulopsis glabrata, Torulopsis can-dida, Kloeckera apiculata und Candida krusei. Dabei wies die Hefeflora der Wildvögel das artenreichste Spektrum auf. Candida albicans züchteten wir einmal aus Taubenmist, 7mal von Zoovögeln und 14mal von freilebenden einheimischen Vögeln. Ein Vergleich der intestinalen Hefebesiedlung bei Vögeln, Säugetieren und beim Men-schen zeigte, daß Vögel zwar keine spezifische Kotflora aufweisen, den Vertretern der Gattungen Debaryomyces, Rhodotorula, Kloeckera und Cryptococcus jedoch offenbar günstigere Ansiedlungsbedingungen bieten. Für fast alle der isolierten Mikroorganismen sind Standorte auch außerhalb des Warm-blüterorganismus in der unmittelbaren Umwelt des Vogels bekannt geworden. Neben Candida albicans konnten folgende für den Menschen fakultativ pathogene Sproßpilze nachgewiesen werden: Candida pseudotropicalis (Sacch. fragilis), Candida parapsilosis, Candida krusei (Pichia fermentans), Candida guilliermondii und Torulopsis glabrata. Die Bedeutung dieser Funde für die Epidemiologie humaner Hefepilzerkran-kungen wird diskutiert.     

Effects of Aspergillus sulphureus mycotoxins on Cryptococcus neoformans

Summary. Many studies have evaluated the toxicity of mycotoxins to mammals, but there is little information on their action against fungal cells, even although mycotoxins are frequently active against fungi in nature. A crude extract of Aspergillus sulphureus was tested for its growth-inhibitory effect on Cryptococcus neoformans . The reduction in cell growth of Cr. neoformans caused by the extract was dose dependent. Using a liquid medium containing 2% A. sulphureus extract, the RNA content of Cryptococcus amounted to about 60% of that of non-treated cells. Capsule thickening, demonstrated biochemically and with cytological stains, occurred at doses that had minimal effect on cell growth and RNA content. Our results suggest that the virulence of Cr. neoformans may increase in cases of coenobiosis with A. sulphureus , which is theoretically possible in places where corn-fed pigeons are numerous.
Zusammenfassung. Es gibt viele Studien über die Toxizität der Mykotoxine bei Säugetieren, aber nur wenige Informationen über deren Wirkungen auf Pilzzellen, die oft in der Umwelt zustandekommen dürften. Ein Rohextrakt aus Aspergillus sulphureus wurde bezüglich seiner Hemmwirkung an einer Cryptococcus neoformans -Kultur getestet. Die durch die Mykotoxine verursachte Reduktion des Zellwachstums war direkt proportional der Dosis. Bei Verwendung eines Flüssigmediums mit 2% A. sulphureus -Extrakt betrug der Cryptococcus -RNA-Gehalt etwa 60% der unbehandelten Kontrollen. Die Kapselverdickung, mittels biochemischer Methoden und zytologischer Färbungen demonstriert, kam schon mit minimalen Dosen zustande. Dies legt die Vorstellung nahe, Cr. neoformans könnte im Falle einer Zönobiose mit A. sulphureus an Virulenz gewinnen. Eine solche Zönobiose erscheint an Orten denkbar, wo von Mais ernährte Tauben zahlreich sind.     

Isolation of specific DNA probes for detection of Cryptococcus neoformans

Summary. We report the construction of a genomic library and isolation of repetitive DNA probes from Cr. neoformans that are species- and variety-specific. The inserts of the genomic library were in a range of 0.3–1.8 kb, which were in normal distribution in length. Among 592 clones of the genomic library, there were 400(67.6%) clones inserted repetitive DNA sequence and 192(32.4%) inserted single copy DNA sequence of the Cr. neoformans genome. From the library, three specific probes were identified. Clone pCNIIA6 was serotype A-specific, pCNIIB5 species-specific, and pCNIIIG1 varietv-specific (var. neoformans ). On the basis of the high specificity and sensitivity of the signals observed by hybridization, we suggest that these probes provide a means for both biotyping and early diagnosis of Cr. neoformans .
Zusammenfassung. Es wird über den Aufbau einer Genomdatenbank und über die Isolierung repetitiver art- und varietätsspezifischer DNA-Sonden von Cryptococcus neoformans berichtet. Die eingegebenen Fragmente lagen im Bereich von 0.3–1.8 kb. Unter 592 Klonen der Genombank waren 400 (67.6%) Klonfragmente repetitiver DNA und 192 (32.4%) DNA-Einzelkopiefragmente. Aus der Datenbank wurden 3 spezifische Sonden identifiziert. Klon pCNIIA6 war Serotyp-A-spezifisch, pCNIIB5 war artspezifisch, pCNIIIG1 erwies sich als varietätspezifisch var. neoformans ). Im Hinblick auf die hohe Spezifität und Sensitivität der Hybridisierungssignale wird angenommen, daß diese Sonden Hilfsmittel sowohl zur Biotypisierung wie auch zur Schnelldiagnostik von Cr. neoformans eingesetzt werden können.     

Zur Pathogenese der Tinea pedis, insbesondere bei peripheren Durchblutungsstörungen

Nach einem einleitenden Überblick über die Verbreitung der Fußpilzinfektionen sowie einer kurzen Erörterung ihrer Ursachen wurde zu der Frage des Zusammenhanges zwischen Tinea pedis und peripheren arteriellen Durchblutungsstörungen Stellung genommen. Zu diesem Zweck untersuchten wir 116 Patienten mit arteriellen Durchblutungsstörungen der unteren Extremitäen auf Fußpilzerkrankungen. In 47,4 % konnte eine Tinea pedis nachgewiesen werden. Es zeigte sich, daß der Pilzbefall an den Fußnägeln den anderer Lokalisationen an den unteren Extremitäten übertraf. Mit dem Grad und der Zeitdauer der Durchblutungsstörung sowie durch die Kombination mit einer venösen Insuffizienz nimmt die Tinea pedis deutlich zu. Bei den kulturellen Untersuchungen wuchsen 32mal Trichophyton rubrum, 7mal Trichophyton mentagrophytes und 5mal Hefen an. Ob in einem Terrain, welches durch eine arterielle Durchblutungsstörung gekennzeichnet ist, eine Pilzinfektion besser angeht als in einem gefäßgesunden, sollte durch Inokulationsversuche mit Trichophyton rubrum und Trichophyton mentagrophytes an unteren und oberen Extremitäten von Patienten mit arteriellen Durchblutungsstörungen und gefäßgesunden Patienten geprüft werden. Wir fanden, daß die Rate der durch Inokulation angegangenen Pilzinfektionen an Patienten mit arteriellen Durchblutungsstörungen höher und die Abheilungstendenz der Infektion deutlich verzögert war im Vergleich zu der infizierten gesunden Patientengruppe. Ausgehend von der Beobachtung, daß sich bei Patienten mit einer Durchblutungsstörung der unteren Extremitäten häufig eine Tinea unguium findet, wurde abschließend eine Methode erarbeitet, auf Nagelspänen von Patienten mit einer Durchblutungsstörung der unteren Extremitäten und auf Nagelspänen von gefäßgesunden Patienten Dermatophyten (Trichophyton rubrum und Trichophyton mentagrophytes) anzuzüchten. Es konnte gezeigt werden, daß auf dem Nagelmaterial durchblutungsgestörter Patienten ein intensiveres Wachstum der Dermatophyten erfolgte. Die hohe Inokulationsrate und das bessere Wachstum von Dermatophyten auf Nagelspänen durchblutungsgestörter Patienten wird auf das durch eine Durchblutungsstörung besonders pilzgef ährdete und abwehrgeschwächte Terrain zurückgeführt. Darüber hinaus vermuten wir eine das Pilzwachstum fördernde Änderung in der Zusammensetzung des Nagelkeratins.     

Osteomyelitis durch Cryptococcus neoformans

Zusammenfassung. Ein 43jähriger Patient kam zur stationären Aufnahme mit der Verdachtsdiagnose Knochentumor im linken Oberschenkel, stattdessen wurde Cryptococcus neoformans als Erreger einer Osteomyelitis kulturell nachgewiesen. Anamnestisch war als prädisponierender Faktor eine Corticosteroiddauertherapie aufgrund einer Sarkoidose bekannt. Die Therapie der Osteomyelitis erfolgte mit Fluconazol (200 mg/d p.o.) über 3 Monate. Darunter wurde der Patient beschwerdefrei.
Summary. A fortythree-year old patient suspected of having a bone tumor in his left femur, was submitted to the hospital. However, osteomyelitis caused by Cryptococcus neoformans has been demonstrated by culture. The history of the patient revealed a long-term therapy with corticosteroids due to sarcoidosis. The osteomyelitis was treated with fluconazole (200 mg daily p.o) for three months. Under this therapy the infection resolved.     

Diagnosis of Cryptococcosis: Comparison of Various Methods to Detect Cryptococcus Neoformans

Summary: The diagnosis of cryptococcal meningitis may be difficult to establish when few organisms are present in the cerebrospinal fluid. For this reason, we determined which of several different visual and cultural methods were the most sensitive for the detection of Cryptococcus neoformans. Gram stain and India ink preparations required that 10⁵ organisms per ml be present before these methods were reliably positive; centrifugation increased the sensitivity of these assays 10-fold. Culturing a loopful of the sample required that 10³ organisms per ml be present to yield growth; centrifugation of the sample enhanced the sensitivity of the culture by 100-fold. Clearly the most sensitive assays, both detecting fewer than 1 organism per ml, were culture of a membrane filter through which the entire sample had been passed and culture of the entire sample in a flask using biphasic medium. Zusammenfassung: Die Diagnose der Crytococcus-meningitis kann Schwierigkeiten bereiten, wenn nur wenige Erreger im Liquor cerebrospinalis vorhanden sind. Aus diesem Grunde wurden Untersuchungen durchgeführt urn festzustellen, welche optische oder kulturelle Methode die höchste Nachweisempfindlichkeit für Cryptococcus neoformas besitzt. Die Gramfärbung und die Aufschwemmung in chinesischer Tube benötigen 10⁵ Zellen/ml um verläßlich positive Befunde zu ergeben. Durch Zentrifugierung des Liquors konnte die Empfindlichkeit auf das 10-fache gesteigert werden. Bei der Abimpfung einer vollen Impföse war es erforderlich, daß das Untersuchungsmaterial mindestens 10³ Organismen/ml enthielt, damit in der Kultur Wachstum entstand. Mit der Zentrifugierung des Materials wurde die Empfindlichkeit bei dieser Methode auf das 100-fache erhöht. Als empfindlichste Nachweismethoden erwiesen sich die Membranfiltermethode, bei der die gesamte Probe filtriert und anschließend kultiviert wird, sowie die Kultivierung der gesamten Probe in einer Kulturflasche mit biphasischem Nährmedium. Mit beiden Methoden lassen sich weniger als ein Organismus/ml entdecken.     

Effect of Different Media on the Synthesis of Capsular Material in Cryptococcus neoformans: Die Wirkung verschiedener Nährmedien auf die Synthese von Kapselmaterial bei Cryptococcus neoformans

Summary: Effect of different media in common use for isolation and identification of C. neoformans was studied with regard to degree of encapsulation on 4 strains. The degree of encapsulation seemed to be influenced variably according to the medium used and incubation temperature. Enrichment of conventional media with blood and/or yeast extract or the use of a combination of more than one medium such as brain-heart infusion dextrose peptone blood agar stimulated a higher percentage of encapsulated cells. The effect of incubation temperature on capsule formation is not a constant variable and the range of its stimulating effect depends on the media used. It was noticeable that the degree of encapsulation is not greatly correlated to the rate of growth.
Zusammenfassung: Der Effekt verschiedener Nährböden, die für die Isolierung und die Identifizierung von Cryptococcus neoformans in Gebrauch sind, auf den Grad der Kapselbildung wurde bei 4 Stämmen untersucht. Der Grad der Kapselbildung schien in unterschiedlicher Weise von der Art des Mediums und der Bebrütungs-temperatur beeinflußt zu werden. Die Anreicherung herkömmlicher Nährmedien mit Blut und/oder Hefeextrakt oder die Verwendung einer Kombination von mehr als einem Medium, wie z. B. Hirn-Herz-Dextrose-Pepton-Blut-Agar rief einen höheren Prozentsatz von Zellen mit Kapselbildung hervor. Die Wirkung der Inkubationstemperatur auf die Kapselbildung ist keine konstante Größe und das Ausmaß ihres stimulierenden Effektes hängt von den benutzten Medien ab. Es war festzustellen, daß der Grad der Kapselbildung mit der Wachstumsrate nicht korreliert.     

Diagnosis of Cryptococcosis and Monitoring of Chemotherapy

Summary: Despite great variation in the clinical symptoms and routine CSF findings, diagnosis of cryptococcosis of the CNS is quite easy thanks to high reliability of direct microscopy Indian ink and culture of cryptococcosis neoformans in the CSF and of the test for cryptococcal antigen. The crucial point is just to think of cryptococcosis. Monitoring of chemotherapy is more difficult, and this is particularly true for the decision when to discontinue treatment with a minimum risk of relapse. The absolute requirement is a negative CSF culture in 3 consecutive samples taken at weekly intervals. The other parameters such as antigen titer, Indian ink, CSF glucose and cerebral foci in CT, are not reliable taken alone. If, however, 2 or more of the respective findings are still pathological, this must remind us to go beyond the before-mentioned minimum Oeriod. Patients receiving long-acting corticosteroids generally need prolonged treatment only hydrocortisone should be used to combat the “acute” adverse reactions to amphotericin B. The standard period of a given chemotherapy e.g., 6 weeks in the case of the combination of amphotericin B and flucytosine should be considered a rough guide, whilst the actual length must depend on the conditions of the individual patients. Zusammenfassung: Trotz großer Variabilität der klinischen Symptome und der meisten Liquorbefunde ist die Diagnose einer Cryptococcose des Zentralnervensystems verhältnismäßig einfach. Dies dank der hohen Zuverlässigkeit des direktmikroskopischen und kulturellen Befundes von Cryptococcus neoformans im Liquor und des Nachweises von Cryptococcus-Antigen. In den meisten Fällen geht es hauptsächlich darum, an die Möglichkeit einer Cryptococcose zu denken. Die Beurteilung des Heilungsverlaufs unter Chemotherapie, besonders der Behandlungsdauer, ist bedeutend schwieriger. Die Mindestanforderung für ein Absetzen der Behandlung ist ein negativer Kulturbefund in mindestens drei aufeinanderfolgenden, wöchentlichen Liquorproben. Die übrigen Parameter wie Direktmikroskopie, Antigentiter, Liquorzucker und zerebrale Herde in der Computertomographie sind, jeder für sich allein, nicht entscheidend, mahnen aber zu einer Verlängerung der Behandlung, wenn zwei oder mehr der betreffenden Befunde noch pathologisch sind. Patienten, die langwirkende Corticosteroide erhalten haben, benötigen eine verhältnismäßig lange Chemotherapie. Zur Bekämpfung der “akuten” Nebenwirkungen von Amphotericin B sollte ausschließlich Hydrocortison verwendet werden. Die Standarddauer einer gegebenen Chemotherapie z. B. sechs Wochen im Falle der Kombination Amphotericin B plus 5-Fluonytosin sollte eher als Minimum betrachtet werden und nicht als starre Regel.     

Tödliche Meningoenzephalitis durch Cryptococcus neoformans var. neoformans bei einem Mädchen ohne schwerwiegende Immundefekte

Zusammenfassung. Es wird der Verlauf einer Meningoenzephalitis durch Cryptococcus neoformans bei einer 14jährigen Patientin dargelegt. Die mykologischen Untersuchungsbefunde wiesen anfangs einen massiven Befall des Liquors mit Cryptococcus neoformans (ca. 10000 Hefezellen/ml) und wochenlang sehr hohe Cryptococcus -Antigentiter (maximal 1:2048) aus. Eine HIV-Infektion oder andere schwerwiegende Immundefekte konnten ausgeschlossen werden. Die Behandlung der Cryptococcose erfolgte mit der Dreifachkombination Amphotericin B, Flucytosin und Fluconazol. Der Liquor konnte saniert werden. Trotzdem kam es zu erheblichen Läsionen am Gehirn. Die Patientin ist an den Folgen der Pilzinfektion am 74. Behandlungstag verstorben. Der geschilderte Krankheitsverlauf ist Anlaß, auf die Differentialdiagnose, Cryptococcus neoformans -Infektion"bei der chronischen lymphozytären Liquorpleozytose, verbunden mit Hirndruck- und Augensymptomen, hinzuweisen.
Summary. Case report on a lethal meningo-encephalitis due to Cryptococcus neoformans in a 14-year-old girl without serious immunodeficiency inclusive HIV-infection. The detection of high quantities of cells of Cryptococcus neoformans (about 10000/ml) and high levels of Cryptococcus antigen (up to 1:2048) in the cerebrospinal fluid are remarkable. The patient was treated with a triple combination of amphotericin B, flucytosine and fluconazole. After 18 days the cerebrospinal fluid was sterile. Nevertheless considerable lesions of the brain arised. The patient died from the Cryptococcus infection on day 74 of the antimycotic therapy. Cryptococcosis should be included into the differential diagnosis of the chronic lymphocytic pleocytosis of the cerebrospinal fluid connected with symptoms of intracranial pressure and ocular symptoms.     

Die Häufigkeit des durch Sproßpilze bedingten Vaginalfluors in Tatabánya und über seine lokale Behandlung mit Pimafucin-Vaginaltabletten*

Im Ausfluß von 578 nicht schwangeren, an Fluor albus leidenden Frauen wurden Sproßpilze in 232 Fällen (40,1%) gezüchtet, die in 70% der vorgefundenen Stämme sich als C. albicans erwiesen. In Fällen von positiven Züchtungen ergaben die mikroskopischen Untersuchungen nur in der Hälfte der Fälle positive Resultate. Bei 35 an vaginaler Candidose leidenden Frauen wurden gute Ergebnisse mittels täglicher kurmäßiger Verwendung von Pimafucin-Vaginaltabletten erreicht. Laut der täglichen Pilzzüchtungen konnten Sproßpilze schon nach dem sechsten Behandlungstag in keinem Fall nachgewiesen und die schnelle Rückentwicklung der klinischen Symptome beobachtet werden. Nebenwirkungen von dem Mittel wurden nicht bemerkt. Aus dem Gesichtspunkte der Beurteilung von Behandlungsergebnissen wird die Bedeutung des Zeitfaktors betont, da die Möglichkeit einer frühen Reinfektion sehr groß ist. Die Verabreichung von lokalen antifungalen Mitteln wird unter bestimmten Bedingungen für notwendig gehalten, um eine optimale Genesung zu erreichen. Im Interesse eines erhöhten Schutzes von Neugeborenen muß eine größere Aufmerksamkeit auf die Scheiden-Candidose der Schwangeren gerichtet, und die Kranken müssen noch vor der Entbindung einer entsprechenden Behandlung zugeführt werden. Es wird auch die Wichtigkeit der strengen Beachtung der allgemeinen hygienischen Vorschriften und der Mitbehandlung des Partners betont.     

Immunologie der Kryptokokkose*

Die Immunologie der menschlichen Kryptokokkose zeigt noch manche Unklarheiten. Recht häufig sind spezifische agglutinierende, präzipitierende oder komplementbindende Antikorper — selbst in fortgeschrittenen Fällen — nicht oder nur in geringfiigigen Titern nachweisbar. Analog fehlen Kapselreaktionen zwischen Patientenserum und korpusku-lären Kapselantigenen praktisch immer. Unter anderem wird die Immunologie der Kryptokokkose von folgenden Umständen beeinflußt:

• 1 der relativ geringen Immunogenitat der bekapselten Zellen von Cryptococcus neo-formans an Versuchstieren und beim infizierten Menschen;
• 2 der Unterdrückung der Phagozytose durch die Kapselsubstanz von C. neoformans und dadurch verminderte bzw. fehlende Stimulierung des Antikörper-bildenden Systems;
• 3 dem langsamen und unauffälligen Beginn der Krankheit mit geringen oder gar keinen Entzündungserscheinungen (ausgenommen Infektionen durch schwach bekapselte Zellen, die zur Entwicklung granulomatöser Veränderungen führen);
• 4 den bevorzugten Befall von Gehirn und Hirnhäuten, d. h. Gewebe mit nur schwacher Antikörperbildungsaktivität;
• 5 dem Erscheinen und Verweilen von Antikörper-bindendem Kapselmaterial in den Ge-weben und Körperflüssigkeiten des Befallenen in Mengen, die oft die geringe Zahl von spezifischen Serumantikörpern abfangen und damit, vor allem in fortgeschrittenen Fällen, maskieren;
• 6 den möglichen Status einer, ?immunologischen Paralyse”, verursacht durch eine über-große Dosis von Kapselmaterial; und
• 7 der möglichen Schwächung des Immunitätssystems beim Infizierten infolge einer pri-mären Grundkrankheit, z. B. Leukämie, Morbus Hodgkin, Krebs usw.

     

Zur Schnelldiagnose der Cryptococcus-Meningitis mittels der Liquorpräzipitation

Es wird über die Beobachtung einer Cryptococcus neoformans-Meningitis bei einer 36jährigen Patientin berichtet. Nach den klinischen Symptomen war zunächst an eine tuberkulöse Meningitis oder einen raumverdrängenden Prozeß im rechten Scheitellappen zu denken. Aus sieben von insgesamt neun angelegten Liquorkulturen gelang der Nachweis von Cryptococcus neoformans . Die Liquorpräzipation mit Cryptococcus neoformans -Serum war im Liquor der Patientin stark positiv, in den Liquores von zwanzig Patienten mit anders-artigen Erkrankungen stets negativ. Die Patientin starb trotz intensiver Be-handlung mit Supronal, Actidion und Novex. Es wird auf die Vorteile der Liquorpräzipitation mit Cryptococcus neoformans -Serum (Spezifität und Schnelligkeit) für die Diagnose der Cryptococcus neoformans -Meningitis hin-gewiesen.     

Mycological-diagnostic assessment of the efficacy of amphotericin B + flucytosine to control Cryptococcus neoformans in AIDS patients

Abstract: Optimal diagnostic data (microscopy, culture and serology) on 15 cases of Cr. neoformans infection in AIDS patients served as a basis for the preliminary subdivision of the stages of cryptococcosis: Primary (minor involvement of the lungs only) and secondary (hematogenous dissemination with involvement of various organs) stages. Cr. neoformans counts in body fluids and antigen titres in serum and CSF proved to be useful criteria to assess the stage of infection. The efficacy of the combination therapy with amphotericin B + flucytosine seems to be related to the stage of infection. From the mycological point of view, the standard combination of 0.3–0.5 mg/kg BW/d amphotericin B and 150 mg/kg BW/d flucytosine proved to be effective. Data on sensitivity of the agent to amphotericin B and flucytosine are presented in a summarized form. The subjects of duration of therapy, relapse and resistance to flucytosine are commented by means of examples. It should be the aim of an optimal therapy of cryptococcosis to diagnose this mycotic disease in its primary stage. Zusammenfassung: Anhand von 15 Fällen wird versucht, die Cr. neoformans-Infektion AIDS-Kranker in das Primärstadium (alleiniger und geringer Befall der Lunge) und das Sekundärstadium (hämatogene Dissemination mit Befall verschiedener Organe) einzuteilen. Die Keimzahl von Cr. neoformans in Körperflüssigkeiten und der Cr. neoformans-Antigentiter in Serum und Liquor dienten hierbei als die beiden wesentlichen Kriterien zur Einschätzung des Stadiums der Infektion und seiner Therapierbarkeit. Aus mykologischer Sicht erwies sich die Standardkombination von Amphotericin B (0,3–0,5 mg/kg KG täglich) + Flucytosin (150 mg/kg KG täglich) als wirksam. Anhand von Beispielen wird zu den Themen: Dauer der Therapie, Rezidiv und Flucytosin-Resistenz Stellung genommen. über die Empfindlichkeit der Cr. neoformans-Stämme gegen Amphotericin B und Flucytosin (Ancotil ) wird zusammenfassend berichtet. Voraussetzung für eine optimale Therapierbarkeit der Kryptokokkose scheint die Diagnostik dieser Mykose in ihrem Primärstadium zu sein.     

Cryptococcus-Sepsis

Wir berichten über einen Fall von Cryptococcus-Sepsis, die zum Tode einer 34-jährigen Frau führte. Die Patientin war wegen eines Erythematodes visceralis rnit kardialer Beteiligung mehrere Jahre mit Antibiotika und Steroiden behandelt worden. Die Kryptokokkose wurde erst nach dem Auftreten septischer Temperaturen 8 Tage vor dem Tode diagnostiziert. Bei der Sektion wurde Cryptococcus neoformans aus allen Organen isoliert. Die Behandlung mit Amphotericin B und Miconazole war erfolglos. Der isolierte Stamm war zunächst kapsellos und bildete erst nach 6 bis 8 Passagen auf Glukosepepton-Agar Schleimkapseln aus. Der isolierte Stamm zeigte keine auffälligen Eigenschaften.

Summary

We report about a case of Cryptococcus-sepsis that led to the death of a 34 years old woman. For several years the patient had been treated because of Erythematodes visceralis with cardiac involvement with different kinds of antibiotics and steroids. The cryptococcosis had been diagnosed only 8 days before death after the occurence of general septic temperatures. At the autopsy Cryptococcus neoformans was isolated from all organs. The therapy with miconazole and amphotericin B had been unsuccessful. First this isolated strain was without a capsule. Only after 6–8 passages on neopeptone glucose agar the typical capsule form developed. The isolated strain didn't show any abnormalities.