胃癌患者PBMCs中CD4+CD25+T细胞体外增殖及对CD4+CD25-T细胞增殖的影响

目的:探讨胃癌患者外周血单个核细胞（PBMCs）中的CD4+CD25+T细胞体外增殖及对CD4+CD25-T细胞增殖的影响。 方法:以免疫磁性分离方法 （MACS）分选出胃癌患者外周血单个核细胞中的CD4+CD25+T及CD4+CD25-T细胞后，用流式细胞仪分析细胞的纯度及活力；再以小鼠抗人CD3单抗、小鼠抗人CD28单抗及rh IL-2作为共刺激因子，观察与CD4+CD25-T细胞共培养时，CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制效应。 结果:（1）分选后健康对照组及胃癌患者PBMC 中CD4+CD25+ T细胞纯度分别为83.8%±1.84%、84.13%±2.77％，两者相比，无显著差异（P＞0.05）;(2)经MACS 分选后正常对照组与胃癌患者CD4+CD25+ T细胞活力分别为98.52%±0.72%、97.80%±0.95%，两者相比，无显著差异（P＞0.05）；(3)无论是健康对照还是胃癌患者的CD4+CD25+T均具有明显抑制效应性T细胞如CD4+CD25-T细胞的增殖，随着CD4+CD25+T细胞数的增加，这种抑制增殖的能力也相应增加，当CD4+CD25+∶〖KG-*2〗CD4+CD25-T达 1∶〖KG-*2〗1时，抑制率最大达到50％。 结论:MACS分选法能够分选出高纯度及活力的CD4+CD25+T细胞，分选后CD4+CD25+T细胞在体外均能抑制CD4+CD25-T细胞增殖，且这种抑制效应呈一定效靶比关系。     

喘可治延长小鼠异基因移植皮片存活时间与CD4+CD25+调节性T细胞相关性研究

目的：研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4+CD25+ 调节性T细胞（CD4+CD25+Tr）变化的相关性。 方法： 建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型，通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响，并利用3色免疫荧光标记和流式细胞术分析受鼠外周血CD4+CD25+ Tr变化规律。 结果： 同种异基因移植CKZ组的移植皮片存活时间显著长于同种异基因移植对照组，分别为（195±23）d和（102±22）d，P＜001；在同种异基因皮片移植后，受体外周血CD4+CD25+ Tr占CD4+T细胞百分率明显升高，术后8 d达到高峰（P＜001），然后出现下降趋势，其中同种异基因移植对照组在术后13 d时已回落至正常水平，而同种异基因移植CKZ组在术后23 d时仍维持在高于移植前水平；在同基因皮片移植后，CKZ组与对照组外周血CD4+CD25+ Tr水平均无明显升高（P＞005）。 结论： 喘可治可延长小鼠同种异基因移植皮片存活时间，通过升高CD4+CD25+ Tr水平而发挥免疫抑制效应可能是其机制之一。     

支气管哮喘患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞变化及其尘螨过敏状态的测定

目的通过对支气管哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平变化和尘螨过敏状态的测定,探讨调节性T细胞在过敏性支气管哮喘发病中的作用。方法用流式细胞仪测定CD4+CD25+Tr占CD4+T细胞的比例,采用过敏原皮试点刺方法测定支气管哮喘患者的尘螨过敏状态。结果 25例正常对照组和支气管哮喘发作组患者外周血CD4+CD25+Tr水平分别为8.66%±1.61%和4.81%±2.76%,两组有显著差异(P<0.01)。14例粉尘螨或屋尘螨(+～++)阳性组和11例粉尘螨或屋尘螨(+++)及以上阳性组的CD4+CD25+Tr水平分别为6.45%±2.08%,和2.73%±2.03%,两组有显著差异。结论哮喘患者体内存在Tr细胞免疫功能平衡失调,CD4+CD25+Tr细胞处于低水平,CD4+CD25+Tr数量和抑制功能减弱或呈低反应性可能是导致支气管哮喘发病的原因之一。粉尘螨或屋尘螨重度过敏患者的外周血CD4+CD25+Tr水平明显低于轻度过敏者,提示CD4+CD25+Tr可能与支气管哮喘的过敏状态有关。     

NOD小鼠自然状态下CD4~+CD25~+T细胞的动态变化及意义

研究自发的1型糖尿病雌鼠模型(NOD)在自然状态下发生1型糖尿病过程中CD4+CD25+T细胞的动态变化,旨在初步探讨调节性T细胞参与1型糖尿病发病的可能机制。采用雌性NOD小鼠作动物模型,每2周尾静脉采血1次,采用三色流式细胞术测定NOD小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞(CD3+CD4+CD25+)的百分率。在32周时,对比发生糖尿病和未发生糖尿病NOD小鼠不同脏器中的CD4+CD25+T细胞阳性率。HE法检测胰岛炎。结果显示:(1)自第6周起NOD小鼠CD4+CD25+T细胞百分率逐渐降低。发生糖尿病NOD小鼠CD4+CD25+T细胞比率低于未发病NOD小鼠对照组(外周血分别为0.94%±0.21%、1.62%±0.23%,P=0.01;脾脏2.09%±0.14%、2.77%±0.36%,P=0.019),提示糖尿病NOD小鼠外周血中存在异常比例的CD4+CD25+T细胞;(2)32周龄糖尿病NOD小鼠与未发病NOD小鼠的CD4+CD25+T细胞抑制功能减低,与阳性对照组有显著性差异;(3)HE染色结果示糖尿病NOD小鼠胰岛结构完全破坏,胰岛炎程度较未发病NOD小鼠严重。该结果提示NOD小鼠发生糖尿病时免疫功能紊乱与CD4+CD25+T细胞参与调节及T细胞亚群变化相关,糖尿病的发生受致病性T细胞和调节性T细胞的调节。     

新生儿缺氧缺血性脑病患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血的改变,及其在HIE疾病进程中的意义。方法用流式细胞术分析HIE组患儿92例和对照组31名外周血CD4+CD25+T细胞的变化,及其细胞内foxp3的表达变化。结果轻度、中度和重度HIE组患儿外周血CD4+CD25+T细胞比例分别为(9.26±1.18)%、(6.51±1.35)%和(5.36±1.54)%,对照组为(8.42±2.02)%。轻度HIE组患儿外周血CD4+CD25+T细胞较对照组有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);中度和重度HIE组患儿CD4+CD25+T细胞明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度、中度和重度HIE组患儿外周血CD4+CD25+foxp3+T细胞分别为(1.36±1.14)%、(1.21±0.94)%和(1.09±0.54)%,对照组为(1.30±1.17)%。轻度HIE组患儿CD4+CD25+foxp3+T细胞较对照组有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。中度和重度HIE组患儿CD4+CD25+foxp3+T细胞明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中度和重度HIE组患儿CD4+CD25+foxp3+T细胞明显减少,这些调节性T细胞可能参与HIE的病理进程。     

重症肌无力患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义

研究CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞在重症肌无力 (MG )发病中的作用。本文采用三色流式细胞术对 2 9例MG患者和 2 3例健康对照者外周血中CD4 + CD2 5 + T细胞 (CD3+ CD4 + CD2 5 + )的百分率进行测定。结果显示病情未能很好控制的MG患者外周血CD4 + CD2 5 + T细胞比率略低于健康对照组 (分别为 3 79%± 1 4 0 %、 4 5 3%± 0 96 % ,P =0 12 ) ,病情稳定或缓解的MG患者CD4 + CD2 5 + T细胞比率 (8 4 5 %± 1 96 % )显著高于健康对照组 (P =0 0 0 0 1) ;胸腺切除的MG患者CD4 + CD2 5 + T细胞比率 (8 4 4 %± 2 39% )显著高于非胸腺切除的MG患者 (5 88%± 2 89% ,P =0 0 38)和健康对照组 (4 5 3%± 0 96 % ,P =0 0 0 3)。提示MG患者外周血中存在异常比例的CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞 ,可能参与疾病的发生与发展。     

II型胶原蛋白对CIA大鼠外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞的影响

目的:观察Ⅱ型胶原蛋白对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)的影响。方法:建立Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型。采用流式细胞术分别检测正常对照组、模型组、Ⅱ型胶原蛋白治疗组和雷公藤多苷组大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠外周血CD4+T细胞亚群中CD25+FOXP3+Treg的水平明显下降(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Ⅱ型胶原蛋白治疗组大鼠外周血CD25+FOXP3+Treg显著升高(P<0.05或P<0.01);而CD25+FOXP3-T细胞和CD25-FOXP3+T细胞的水平则明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:II型胶原蛋白治疗CIA大鼠的可能途径是升高外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。     

树突状细胞扩增抗原特异性CD4+ CD25+调节性T细胞研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)是同时具有免疫低反应性和免疫抑制性功能两大特征的T细胞.研究证实,CD4+ CD25+ Tr在抑制器官特异性自身免疫性疾病及GVHD是抗原特异性的,因此,应用器官特异性而不是多克隆性的Tr将大大促进以Tr为基础的免疫治疗.而具有调节活性的CD4+ CD25+ Tr仅占人类外周血CIM+ T细胞的1%～2%,因此,研究体外大量扩增的方法 对于以Tr基础的治疗至关重要.研究表明,树突状细胞(DC)作为机体强有力的专职抗原递呈细胞可以扩增具有抗原特异性的CD4+ CD25+ Tr且能增加后者的抑制活性,这为治疗自身免疫性疾病及GVHD提供了新的治疗前景.     

类风湿关节炎患者外周血和滑液中CD4~+CD25~+调节性T细胞的水平变化

了解具有抑制功能的CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在类风湿关节炎(RA)中的水平变化。分离32例RA患者及35例正常对照者外周血和15例RA关节滑液中的单个核细胞,用荧光抗体标记细胞膜表面CD4、CD25分子和细胞内Foxp3转录因子,进行流式细胞分析,同时用RT-PCR方法测定单个核细胞中Foxp3 mRNA水平。实验发现RA外周血中CD4+CD25hT细胞比例(1.90±1.68)与健康人(1.81±1.79)无明显差异,而RA关节滑液中CD4+CD25+和CD4+CD25hT细胞含量却明显增高(14.98±12.52,8.94±9.67,P<0.01)。RA患者外周血单个核细胞中Foxp3+/CD4+T细胞比值(2.35±2.06)较正常人(7.25±3.98)明显降低(P<0.01),RA外周血中Foxp3 mRNA含量较正常人Treg减少,而RA关节液中Foxp3 mRNA含量较RA外周血更为低下(P<0.01)。RA患者存在CD4+CD25+Treg的异常改变,其外周血和关节液中具有抑制作用的Treg含量明显降低提示RA患者Treg数量减少及抑制功能下降可能是RA自身免疫反应亢强不能控制的原因之一。RA关节液中CD4+CD25hT细胞增高考虑与RA炎症反应造成T细胞过度活化有关。     

结核性胸膜炎患者外周血及胸水中CD4~+ CD25~+ CD127~-调节性T细胞表达水平的临床意义

目的:探讨结核性胸膜炎外周血和胸水中CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞表达水平及其临床意义。方法:收集住院收治的初治结核性胸膜炎患者30例和非结核性胸膜炎患者20例,另选择健康体检人员20例为正常对照组。流式细胞术检测外周血及胸水中CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞的百分率。结果:结核性胸膜炎组外周血中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比显著高于正常对照组和非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结核性胸膜炎组胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比明显高于非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结核性胸膜炎组患者在规则治疗1、3、7、14 d时,外周血和胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比均逐渐下降,外周血中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+ T细胞总数的百分比于治疗3 d时显著低于入院时水平(P<0.05),胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+ T细胞总数的百分比于治疗7 d时显著低于入院时水平(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞参与了结核性胸膜炎的发病机制,且可作为判断肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察的指标。     

重症肌无力患者外周血CD5~+B细胞和CD4~-CD8~-T细胞的变化

研究重症肌无力 (MG )患者外周血CD5 + B细胞和CD4 CD8 T细胞的变化 ,以探讨这两种细胞与MG的关系。采用流式细胞仪分析MG患者和对照组外周血中CD5 + B细胞和CD4 CD8 T细胞的频率 ,同时以ELISA方法检测这些患者的血清AchR、PsmR抗体水平。结果 :2 8例MG患者的CD5 + B细胞为 19 75 %± 10 8% ,高于对照组的 15 4 %± 9 6 7% (P <0 0 1) ;胸腺未切除MG患者的CD5 + B细胞为 2 2 31%± 7 4 7% ,显著高于对照组 (P <0 0 0 1) ;两种抗体阳性MG患者的CD5 + B细胞为 2 4 96 %± 13 1% ,显著高于对照组 (P <0 0 0 1) ;以上各组MG患者的CD4 CD8 T细胞与对照组均无显著区别 ;两种抗体阴性组的CD5 + B细胞和CD4 CD8 T细胞亦与对照组均无显著区别 ;两种抗体阴性组的CD5 + B细胞和CD4 CD8 T细胞亦与对照组无明显差异。本研究提示MG患者外周血的CD5 + B细胞频率增高 ,与胸腺切除与否以及突触前后膜抗体的阳性程度密切相关 ,而CD4 CD8 T细胞是否与MG有关还需进一步研究证实。     

CD4+CD25+调节性T细胞与系统性红斑狼疮病情活动性关系的研究

目的：检测系统性红斑狼疮患者外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD8^＋调节性T细胞亚群，探讨其与疾病活动性、肾脏损伤、血清抗ds-DNA抗体及免疫球蛋白和补体C3含量的关系。方法：采用流式细胞术检测北京协和医院住院和门诊SLE患者（n=37）外周血CD4^＋CD25^＋T、CD4^＋CD8^＋T细胞群比例，以15例RA和15例SS组成自身免疫性疾病对照，30例健康体检者作为正常对照，观察调节性T细胞亚群与SLE患者疾病活动性指标SLEDAI、IgG、C3及血清抗ds-DNA抗体的关系。结果：①疾病活动期SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞群比例显著低于正常对照组（P〈0.01），疾病稳定期和风湿性疾病对照组与正常对照组结果差异无统计学意义。疾病活动期和稳定期SLE患者CD4＋CD8＋T细胞群比例都略高于正常对照组，但未发现结果差异有统计学意义（P〉0.05）。②疾病活动期SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞比例及CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值显著低于稳定期患者（P〈0.01）。SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值与SLEDAI、补体C3呈低度相关（r分别为-0.491、0.368，P〈0.05），CD4^＋CD25^＋T细胞数量与SLEDAI呈负相关（r=-0.578，P〈0.05）。③SLE并发肾病组外周血CD4^＋CD25^＋T细胞群比例及CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值显著低于非肾病组（P〈0.01；P〈0.05）。同一SLE患者治疗前后CD3^＋CD4^-CD8^-细胞和NK细胞降低，CD4^＋CD25^＋细胞、CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值及CD8^＋T细胞增加，但未发现这些结果差异有统计学意义。本次研究未发现NK细胞、CD4^＋CD8＋T细胞、CD4^＋CD25^＋T细胞群比例在ds-DNA＋组与ds-DNA-组之间结果差异有统计学意义。结论：SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞群比例与SLEDAI成负相关，与肾脏的损害也有密切关系，但与血清抗ds-DNA抗体产生的关系不明显。活动期SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞减少，稳定期CD4^＋CD25^＋T细胞比例回升，因此推测CD4^＋CD25^＋T细胞的变化可能是导致疾病发生和病情发展及相关器官（如肾脏）损伤的关键环节之一。     

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4~+T细胞中miRNA-155表达调控的研究

目的:探讨糖皮质激素对哮喘小鼠CD4~+ T细胞中微小RNA-155(miRNA-155)表达调控的影响。方法:使用糖皮质激素对卵清蛋白诱导的小鼠哮喘模型进行治疗,观察糖皮质激素对哮喘小鼠肺组织病理学、肺组织及CD4~+ T细胞中miRNA-155表达和支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子含量的影响。结果:RT-qPCR结果显示,哮喘小鼠肺组织和脾脏CD4~+ T细胞中miRNA-155表达显著升高,随着接触过敏原时间的增加,CD4~+ T细胞中miRNA-155水平显著升高(P0.01)。HE和PAS染色显示,与对照组相比,模型小鼠肺组织中炎性细胞浸润显著增加,给予糖皮质激素治疗后可明显减轻支气管周围和血管周围炎症,减少增生杯状细胞的黏液分泌。糖皮质激素治疗后哮喘小鼠肺组织中的miRNA-155水平显著降低,CD4~+ T细胞中的miRNA-155水平显著下调。糖皮质激素治疗可抑制哮喘小鼠的脾脏中CD4~+ CD8~-细胞比例的增加,减少哮喘小鼠肺组织中CD4~+ T细胞的聚集。糖皮质激素治疗后BALF中白细胞介素4(IL-4)、IL-5和IL-13水平下降,干扰素γ水平显著增加。结论:糖皮质激素可抑制哮喘小鼠肺组织中CD4~+ T细胞的聚集,并可降低肺组织和脾脏中CD4~+ T细胞的miRNA-155的表达。     

急性期川崎病Foxp3基因甲基化改变及意义初探

目的 探讨急性期川崎病(KD)Foxp3基因甲基化状态及其在KD免疫发病机制中的作用.方法 急性期KD患儿30例,正常同年龄对照组18例,KD患儿分别于静脉丙种球蛋白(IVIG)治疗前后直接取血备检.甲基化特异性定量PCR(MSQP)检测CD4+T细胞Foxp3基因启动子、调节性T细胞(Tr)特异性甲基化区(TSDR)CpG岛甲基化状态;流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Tr的比例;荧光定量PCR检测CD4+T细胞Foxp3、CTLA4、GITR、LAG3、CCR8、UBD、LGALS3等基因mRNA表达.结果 (1)急性期KD患儿CD4+T细胞Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平明显低于同年龄对照组(P＜0.01),经IVIG治疗后明显升高(P＜0.01);TSDR区CpG岛非甲基化水平各组间差异无统计学意义(P＞0.05);(2)急性期KD患儿CD4+CD25+Foxp3+Tr细胞比例及CD4+T细胞Foxp3 mRNA表达水平明显低于正常对照组(P＜0.01),且与Foxp3基因启动子CpG岛非甲基化水平呈正相关(CD4+CD25+Foxp3+Tr:r=0.76,P＜0.01;Foxp3:r=0.89,P＜0.01),IVIG治疗后显著上升(P＜0.01);(3)急性期KD患儿CD4+CD25+Foxp3+Tr细胞相关因子CTLA4、GITR、LAG3和CCR8等基因mRNA水平显著降低(P＜0.01),IVIG治疗后均有不同程度的恢复(P＜0.01);Foxp3依赖性分子UBD和LGALS3表达水平亦低于正常对照组(P＜0.01),IVIG治疗后基本恢复至正常水平(P＜0.01).结论 急性期KD患儿Foxp3基因启动子非甲基化水平低下可能与KD免疫调节功能紊乱有关.     

类风湿关节炎CD4+CD28-T细胞与淋巴细胞凋亡的相关性研究

目的: 研究类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4⁺CD28^-T细胞比例与淋巴细胞凋亡异常的相关性。方法: 采用流式细胞术三色分析法检测50例患者和50例健康志愿者的外周血淋巴细胞中CD4⁺CD28^-T细胞比例;通过加入PHA孵育检测RA病人外周淋巴细胞和正常对照的淋巴细胞对激活诱导细胞死亡(AICD)易感性差异;分析CD4⁺CD28^-T细胞比例与外周血淋巴细胞凋亡率的相关性。结果: RA组CD4⁺CD28^-T细胞比例的均数明显高于健康对照组(7.79%±3.52% vs 1.89%±1.78%,P<0.05)。RA组病人外周血淋巴细胞的AICD凋亡率低于健康对照组(11.38%±5.73% vs 19.46%±6.32%,P<0.05)。Spearman相关分析结果显示CD4⁺CD28^-T细胞比例与外周血淋巴细胞AICD凋亡率负相关(r=-0.433,P<0.01)。结论: RA患者外周血中CD4⁺CD28^-T细胞比例增多,活化淋巴细胞生存期延长,这可能参与RA的发病机制。     

CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞抑制肺结核患者特异细胞免疫

  目的 了解结核患者外周血中CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞在抑制结核患者结核特异细胞免疫反应中的作用。 方法 使用细胞分离、流式细胞分析、细胞增殖和细胞因子测定等方法,比较结核患者及健康正常人群外周血中CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞的量及功能特征的差异。 结果 结核患者外周血中CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞数占CD4+细胞总数的比例显著高于健康正常人群;在BCG及ESAT-6的刺激下,结核患者外周血单个核细胞增殖能力和产生γ-干扰素的能力比健康正常人群明显增强。在BCG刺激下,结核患者外周血CD4-细胞产生γ-干扰素(1289.62±519.01)及白介素-10(1045.40±534.12)的能力比结核患者外周血BPMCs细胞产生γ-干扰素(624.50±261.13)及白介素-10(377.00±249.56)的能力显著增强(均p<0.05);在BCG及ESAT-6的刺激下,结核患者外周血CD4+CD25+调节T细胞显著抑制结核患者外周血CD4+CD25-细胞产生γ-干扰素及白介素-10。 结论 结核患者CD4+CD25+FoxP3+调节T细胞数量增多,抑制结核患者结核特异细胞免疫反应功能增强,可能与结核的发生、发展及转归有密切关系。     

MOG诱导小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎及其对CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的： 探讨采用分子克隆技术诱导表达出的含硫氧还蛋白基团的髓鞘少突胶质细胞糖蛋白细胞外Ig样结构域(MOGIgd-TrxA)融合蛋白免疫C57BL/6小鼠,建立多发性硬化的动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎的可行性;通过检测模型小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞的数量,初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎发病机制中的作用。方法: (1)分子克隆技术合成MOGIgd-TrxA融合蛋白,纯化、超滤浓缩后Bradford法测定蛋白浓度。(2)动物实验:C57BL/6小鼠,随机分为4组：MOGIgd-TrxA组（MOG组）、豚鼠脊髓匀浆组、硫氧还蛋白（TrxA）组及生理盐水正常对照组,每组动物12只,各组以相应抗原乳剂免疫小鼠制作EAE模型后评估其临床神经功能、组织病理(HE染色和髓鞘luxol fast blue染色)并评价模型质量。(3)流式细胞仪(FACS)检测小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞的百分比。结果:(1)纯化浓缩后MOGIgd-TrxA蛋白纯度达98%左右,浓度约2.3 g/L。(2)MOG组小鼠与豚鼠脊髓匀浆组小鼠在临床神经功能评分等方面无显著差异(P>0.05)。2组发病动物组织切片HE染色和髓鞘染色均有不同程度的病理改变。(3)CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞比例MOG组为(4.71±1.61)％,豚鼠脊髓匀浆组为(1.44±0.65)％,均明显低于生理盐水正常对照组（9.22±1.24）％和硫氧还蛋白（TrxA）组（8.97±1.20）％(P<0.01)。结论: (1)分子克隆技术合成的MOGIgd蛋白免疫C57BL/6小鼠能够成功诱导出EAE模型,且模型稳定、发病率高,为进一步研究MS免疫发病机制并采取有效治疗措施奠定基础;(2)CD4+CD25+调节性T细胞数量减少可能与EAE小鼠临床表现相关。