苦参碱联合伊马替尼对K562细胞红系分化的影响

目的探讨苦参碱联合伊马替尼对K562细胞红系分化的影响。方法分别用0．2g／L苦参碱与0．2μmol／L伊马替尼单独或联合作用K562细胞48h，观察联苯胺染色阳性细胞数，并利用RT—PCR检测转录因子GFi-1B表达。结果苦参碱可降低伊马替尼单独作用K562细胞的联苯胺染色阳性细胞数以及转录因子GFi-1B的表达。结论苦参碱联合伊马替尼作用K562细胞后对红系分化有一定抑制作用。     

苦参碱诱导K562细胞分化的基因组DNA甲基化模式变化

目的：我们在已建立的较稳定的苦参碱诱导人白血病K562细胞分化模型基础上，利用基因表达谱芯片扫描发现0．1mg／ml苦参碱作用K562细胞24小时后，277条基因表达下调，84条上调。为进一步探明苦参碱诱导K562细胞分化时基因表达变化发生机制，本文拟从表观遗传学角度研究苦参碱诱导K562细胞分化时基因组DNA甲基化模式的变化。方法：采用对5’-甲基胞嘧啶敏感的限制性核酸内切酶salI和SmaI以及不敏感的HaeⅢ分别消化K562细胞以及0．1mg／ml苦参碱作用24小时和96小时后细胞的基因组DNA，观察限制性核酸内切酶对对照组与药物处理组细胞DNA的不同酶切效果。结果：苦参碱作用K562细胞24小时后，基因组DNA对5’-甲基胞嘧啶敏感的限制性核酸内切酶的敏感性下降。提示苦参碱诱导K562细胞分化的基因表达变化同基因组DNA甲基化模式改变有关。     

伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病临床分析

目的　评估伊马替尼(格列卫)治疗慢性粒细胞白血病(CML)临床疗效及耐药性。方法　35例CML患者予格列卫治疗,其中CML慢性期予30 0～4 0 0mg/d ,CML急性期予4 0 0～6 0 0mg/d。结果　本组患者累计获完全血液学缓解(CHR) 31例占89% ,达CHR的中位时间2 8d。2 7例疗程>3个月的患者,在治疗第3个月时复查骨髓细胞染色体,获主要细胞遗传学缓解(MCR ,ph+ 细胞<35 % )共19例占5 4 %。结论　格列卫治疗CML安全有效,是治疗CML的首选药物。     

伊马替尼治疗慢性粒细胞性白血病疗效观察

目的观察伊马替尼(Imatinib)治疗慢性粒细胞性白血病(CML)的近期疗效和安全性。方法28例CML患者均予伊马替尼400或600 mg/d一次性餐后顿服,常规体检,用药后血液学取得完全缓解后择期复查骨髓、Ph染色体和/或BCR-ABL基因。结果随访结束时,血液学完全缓解率61%(17/28),部分缓解率11%,总有效率71%,绝大多数为轻度不良反应,多可耐受。结论伊马替尼治疗CML有效、安全,但远期疗效需进一步观察。     

慢性粒细胞性白血病应用伊马替尼治疗近期疗效观察

目的:分析探讨慢性粒细胞性白血病应用伊马替尼治疗的近期疗效。方法:使用伊马替尼来治疗25例不同时期慢性粒细胞性白血病患者,观察患者治疗后临床疗效与发生不良反应情况。结果:25例患者中16例患者实现血液学完全缓解,3例患者实现血液学部分缓解,患者出现的一种或者多种不良反应绝大多为轻度的不良反应,多可耐受,近期疗效良好。结论:慢性粒细胞性白血病应用伊马替尼治疗近期疗效比较好,且不良反应较轻,可以用作无法接受骨髓移植治疗的慢性粒细胞性白血病患者首选化疗的药物。其远期效果需要进行深入研究。     

复方丹参注射液联合伊马替尼治疗急性淋巴细胞白血病临床研究

目的：观察复方丹参注射液联合伊马替尼对急性淋巴细胞白血病患者造血及免疫功能的影响。方法：选择70 例急性淋巴细胞白血病患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组各35 例。对照组给予化疗+伊马替尼治疗,观察组在对照组基础上给予复方丹参注射液治疗。比较2 组临床疗效,检测治疗前后血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（BPC） 计数和血红蛋白（Hb） 水平的变化,检测外周血T 淋巴细胞亚群（CD3+,CD4+,CD8+及CD4+/CD8+） 水平的变化。结果：治疗前,2 组外周血WBC、RBC、BPC 计数及Hb 水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后,2 组外周血RBC、BPC 计数及Hb 水平较治疗前上升,WBC 计数较治疗前下降（P＜0.05）;且观察组WBC、RBC 及Hb 高于对照组（P＜0.05）。治疗前,2 组CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后,2 组CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平较治疗前降低（P＜0.05）,但是观察组降低程度小于对照组（P＜0.05）。结论：复方丹参注射液联合伊马替尼治疗急性淋巴细胞白血病具有较好的疗效,可以有效改善患者骨髓造血功能和免疫功能。     

伊马替尼用于慢性粒细胞性白血病治疗的药物经济学评价

伊马替尼是一种新型的抗慢性粒细胞白血病(CML)药物,其作用机制与常规药物不同,属酪氨酸激酶抑制剂,通过信号转导抑制功能,直接作用于导致CML的分子靶位.到目前为止的实验结果显示,伊马替尼较其他传统疗法,包括干扰素、羟基脲和白消安等,具有更好的疗效.     

解毒化瘀方联合伊马替尼对急性淋巴细胞白血病患者心血管功能及免疫功能的影响

目的:观察解毒化瘀方联合伊马替尼对急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)患者心血管功能及免疫功能的影响.方法:选取2017年10月～2019年9月在我院治疗的ALL患者62例.随机将患者分为对照组(n=31)和观察组(n=31),对照组采用常规药物化疗方案,同时给予伊马替...     

裴氏升血颗粒联合伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病临床研究

目的:观察裴氏升血颗粒联合伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病的临床疗效。方法:选取60例慢性粒细胞白血病患者,随机分为2组各30例,治疗组服用裴氏升血颗粒联合伊马替尼治疗,对照组只服用伊马替尼治疗,2组均治疗3月。观察2组患者临床表现、外周血象、骨髓象、免疫功能的变化以及不良反应的发生情况。结果:治疗3月后,治疗组缓解率(93.33%)高于对照组(76.67%),差异有统计学意义(P0.05)。2组CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值均较治疗前升高(P0.05),而治疗组CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。治疗组不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:裴氏升血颗粒联合伊马替尼治疗的效果优于单纯伊马替尼治疗,裴氏升血颗粒可以减轻伊马替尼的副反应,提高患者的生活质量。     

苦参碱对人白血病K562细胞胞内酪氨酸蛋白磷酸化的影响

目的：观察苦参碱作用K562细胞后胞内酪氨酸蛋白磷酸化变化，探讨苦参碱抑制K562细胞增殖和诱导其分化的胞内信号传导机制。方法：采用抗磷酸化酪氨酸单克隆抗体PY20对不同浓度苦参碱作用K562细胞12小时的胞内酪氨酸蛋白磷酸化水平进行Western blot检测分析。结果：0．1mg／ml苦参碱作用K562细胞12小时后。western blot灰度扫描显示有6条带密度发生变化，提示此过程中至少6种酪氨酸蛋白磷酸化水平发生改变，其中上调4种，下调2种。随着苦参碱作用浓度的增加，上调的4种酪氨酸蛋白磷酸化水平均有下降。此结果表明细胞信号传导通路中胞内酪氨酸蛋白磷酸化在苦参碱诱导K562细胞分化中起重要作用。     

苦参碱诱导白血病K562细胞抑癌基因RIZ1的表达

目的：探讨苦参碱对白血病K562细胞抑癌基因RIZ1的mRNA表达的影响。方法：利用半定量RT-PCR方法检测了0．1mg／ml苦参碱作用K562细胞不同时间后RIZ1基因mRNA水平表达的变化，并同0．2mg/ml苦参提取液与DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2＇-脱氧胞苷（5-aza-2＇-deoxycytidine，5-Aza-CdR）分别诱导的RLZ1因表达变化进行了比较。结果：K562对照组细胞低表达RIZ1，苦参碱和苦参提取液作用K562细胞24小时和72小时后，RIZ1表达明显升高，并呈时间依赖性；同样，5-Aza-CdR作用K562细胞后，RIZ1表达也明显增高。结论：苦参碱在苦参液诱导抑癌基因RIZ1表达中起了重要作用；二者诱导的RIZ1基因表达可能同RIZ1基因启动子去甲基化作用有关。     

苦参碱抑制慢性粒细胞白血病K562细胞生长和诱导凋亡作用研究

目的研究苦参碱在体外对人慢性粒细胞白血病(慢粒)K562细胞的生长抑制作用并探讨可能的分子机制。方法光学显微镜下观察苦参碱作用前后K562细胞的形态学改变;联苯胺染色观测K562细胞的红系分化趋势;MTT法检测苦参碱对K562细胞的增殖抑制效应;流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双标记法检测苦参碱对K562细胞的周期改变及早期凋亡作用。结果与阴性对照组相比,0.05,0.1和0.2 g/L苦参碱作用下的K562细胞均出现红系分化趋势,其中0.05 g/L的分化趋势最明显;MTT结果显示0.2,0.5及1.0 g/L苦参碱对K562细胞的生长抑制率分别为25.88%,46.96%和63.04%(P均<0.01),其中效作用浓度(IC50)为0.6 g/L;苦参碱可使K562细胞周期阻滞于S期,阻止细胞的有丝分裂,同时可诱导K562细胞凋亡:0.05,0.1和0.2 g/L苦参碱对K562细胞的早期凋亡率分别是11.60%,69.81%和44.12%,明显高于对照细胞的自发凋亡率(1.49%)(P均<0.01)。结论苦参碱对体外培养的人慢粒K562细胞具有显著抑制增殖作用,且可诱导细胞向红系分化和早期凋亡。     

苦参碱诱导K562细胞分化的差异表达基因的研究

目的研究苦参碱诱导人红白血病K562细胞分化的分子机制。方法应用改良的mRNA差异显示逆转技术(DDRT—PCR)筛选苦参碱诱导K562细胞分化相关的差异表达基因；对差异cDNA片段纯化、克隆、测序及Blast分析，采用逆转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)方法验证。进一步对其中的未知差异cDNA片段采用Northern杂交确定其转录本的大小及组织分布特性，进而充分利用多种生物信息学资源对差异片段进行结构和功能的预测。结果苦参碱诱导K562细胞前后存在明显的基因表达差异，筛选获得了17条差异条带。其中4个差异显著片段经RT—PCR验证后，在Genbank中分析，有3个为已知基因，1个可能为未知基因，暂命名为KH基因。Northern杂交证实KH基因转录本的大小为1．35kb，分布于正常人体脑组织中。结论苦参碱具有诱导K562细胞基因表达谱发生变化的作用，由苦参碱诱导的K562细胞分化是一个多基因参与的过程；KH基因可能是苦参碱作用K562细胞后表达量发生改变的未知基因，可能与细胞癌变有关。     

苦参碱诱导K562细胞酪氨酸激酶与磷酸酶的活性改变

目的 研究苦参碱诱导K562细胞分化的信号转导机制。方法 运用链亲和素-生物素放大系统结合的酶联免疫法，动态检测苦参碱作用于K562细胞后，K562细胞膜相与胞浆内的酪氨酸激酶与磷酸酶的变化。结果 结合特异性激酶抑制剂的使用，首次证实了在苦参碱对K562细胞的诱导分化过程中，有广泛性的蛋白酪氨酸激酶活性的短暂下降，同时伴有蛋白酪氨酸磷酸酶的活性变化。结论 在苦参碱诱导K562细胞分化的信号转导过程中，涉及到蛋白酪氨酸激酶的活性改变，膜相中蛋白酪氨酸激酶的活性改变先于胞浆中的改变，提示有一个信号的跨膜转运过程，同时伴有蛋白酪氨酸磷酸酶的活性变化。反映了胞内的蛋白酪氨酸残基磷酸化与去磷酸化的即时调节机制。     

灵芪胶囊含药血清对K562白血病细胞的诱导凋亡作用

[目的]观察灵芪胶囊含药血清在体外对K562白血病细胞凋亡的影响.[方法]采用血清药理学方法制备灵芪胶囊含药血清,以不同浓度的含药血清处理体外培养的K562白血病细胞,采用流式细胞仪(FCM)及DNA片段凝胶电泳观察和检测细胞凋亡情况.[结果]不同浓度灵芪胶囊含药血清能够诱导K562细胞的凋亡,且凋亡率随着剂量的增加而增大,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01);DNA琼脂糖凝胶电泳谱可见典型的DNA梯形带形成.[结论]灵芪胶囊含药血清具有诱导细胞凋亡的作用,其作用强度与时间-浓度呈正相关.灵芪胶囊含药血清对K562细胞发生细胞毒作用可能与诱导K562细胞凋亡有关.     

瘀毒清诱导慢性粒细胞白血病K562细胞株凋亡的研究

目的探讨瘀毒清对诱导慢性粒细胞白血病K562细胞株凋亡的作用。方法采用血清药理学方法,取慢性粒细胞白血病K562细胞株悬液分组,分别加入不含药血清（空白对照组）、含伊马替尼血清、含高剂量瘀毒清血清、中剂量瘀毒清血清、低剂量瘀毒清血清、含伊马替尼加高、中、低剂量瘀毒清血清,不加血清作为正常对照组。分别于干预后第12h、24h、48h和72h通过ArmexinV／PI双染法、流式细胞仪检测不同时间、不同药物组的细胞凋亡率。结果正常对照组的原代细胞有较低凋亡率,而空白对照组K562细胞的凋亡率更低,二者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。12h、24h内瘀毒清含药血清低、中、高组凋亡率与正常对照组、空白对照组比较存在统计学差异（P〈O．05）。药物组间相互比较亦有显著差异,并呈一定的时间剂量依赖性。瘀毒清高剂量组72h未见凋亡率（31．48±6．58）进一步升高,与48h比较无统计学差异,与瘀毒清中剂量组72h的诱导凋亡率（27．54±5．89）比较也无统计学差异（P〉0．05）。伊马替尼组12h开始即显示较高的凋亡率（23．80±6．94）,与空白对照组细胞的凋亡率相比有统计学差异（P〈0．05）。伊马替尼加瘀毒清各剂量组72h的凋亡率与伊马替尼组、瘀毒清低、中、高组的凋亡率比较均有明显差异（P〈0．05）。结论含瘀毒清血清对体外K562细胞有诱导凋亡作用,其作用呈一定时间、剂量依赖关系：瘀毒清与伊马替尼联合使用有增效作用。     

芒果甙对K562细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

目的:研究芒果甙对白血病K562细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响。方法:采用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)PCR-ELISA方法检测K562细胞经芒果甙作用前后端粒酶活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布。结果:经芒果甙作用后,K562细胞端粒酶活性下降,随药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用增强;芒果甙作用24小时后,K562细胞G2/M期细胞增多,S期细胞减少,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性。结论:芒果甙能抑制K562细胞的端粒酶活性,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关。     

川楝素提取物诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的探讨川楝素提取物对人白血病K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制。方法采用MTT法检测川楝素提取物对K562细胞增殖的影响;Wright′s染色观察细胞的形态学改变;流式细胞技术检测细胞周期与凋亡率的变化;Annexin V/PI双标记法检测细胞的早期凋亡变化;DNA琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段化;比色法检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9相对活性的改变;RT-PCR检测凋亡相关基因p21、bcr/abl、H-rasmRNA表达水平的改变。结果川楝素提取物显著抑制K562细胞的增殖,并呈剂量-时间依赖性,作用72h的IC50值为20nmol/L;处理组细胞可见典型的凋亡形态学改变;细胞周期和Annexin V/PI双标记检测表明川楝素提取物可诱导K562细胞凋亡,并呈剂量-时间依赖性;处理组细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现明显的DNAladder;处理组细胞Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性均显著增加;p21、H-ras mRNA表达上调,bcr/abl mRNA表达下调。结论川楝素提取物对K562细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与Caspase信号途径的活化有关。     

黑木耳多糖对人红白血病K562细胞周期和凋亡的影响

目的:观察黑木耳多糖(Auricularia auricula polysaccharide,AAP)体外对人红白血病K562细胞的抗肿瘤作用及其机制。方法:将K562细胞与AAP以及AAP作用于体外培养人外周血单个核细胞(PBMCs)的上清液培养,用MTT法检测K562细胞增殖和流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。结果:AAP对K562细胞没有显示直接的细胞毒作用,但AAP作用的PBMC上清液能显著抑制K562细胞的增殖,抑制率最大可达49.68%;AAP作用的PBMCs上清液能使G0/G1期细胞显著增加(P0.05,P0.01);200μg/mL到800μg/mL浓度AAP刺激的PBMCs上清液能显著诱导K562细胞凋亡(P0.05,P0.01),其凋亡率可达24.70%。结论:AAP通过激活免疫细胞抑制肿瘤细胞生长,诱导其凋亡并使细胞阻滞于G0/G1期。