大鼠前脑星形胶质细胞和神经元对一侧胫、腓骨骨折的反应及其相互关系

目的　研究大鼠前脑内星形胶质细胞 (ASs)及神经元 (Ns)对一侧胫、腓骨骨折的反应及相互关系。方法　应用细胞免疫组织化学方法观察前脑内胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)、Fos蛋白以及酪氨酸羟化酶 (TH)在左侧胫、腓骨骨折后的表达变化。　结果　 1 一侧胫、腓骨骨折后 ,前脑GFAP阳性表达的ASs有明显的核团定位。在缰外侧核内侧区 (LHb)、下丘脑室旁核 (Pa)、视上核 (SON)、视交叉上核 (SCh)、终纹床核 (BST)、杏仁中央核 (Ce)和内侧杏仁核 (Me)及皮层等脑区内均可观察到有GFAP阳性ASs分布 ,且两侧分布无明显差异。 2 Fos阳性Ns的分布与GFAP阳性ASs上述分布部位基本一致 ,两者关系密切。 3 Pa等部位有大量Fos TH双标Ns,四周是密集的GFAP阳性ASs包围 ,形成以神经元为中心 ,周围包绕ASs,共同构成神经元 星形胶质细胞复合体 (N ASC)。　结论　上述核团的ASs参与了下肢骨折伤害性刺激的应激反应及其调节过程 ,且与Ns关系密切 ,可能主动地影响Ns的活动。     

星形胶质细胞在大鼠下丘脑的分布

目的:观察星形胶质细胞在正常大鼠下丘脑的分布。方法:利用免疫组织化学技术,观察胶原纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)在下丘脑的表达。结果:GFAP阳性细胞在第三脑室室周区、视上核、下丘脑室旁核外侧大细胞部、正中隆起大量分布;下丘脑其他区域或核团,如前区、外侧区、前外侧核、视交叉上核、室旁核小细胞部、弓状核、腹内侧核等内分布稀疏。结论:星形胶质细胞在正常大鼠下丘脑的分布有明显区域性,可能与其相应区域的生理活动与调节功能有关。     

高渗刺激诱导大鼠视上核与孤束核内神经元-星形胶质细胞复合体反应

目的 探讨大鼠接受高渗刺激后,视上核和孤束核内神经元-星形胶质细胞复合体(N-ASC)反应.方法 成年雄性SD大鼠50只,随机分为光镜组(n=40)和电镜组(n=10).采用多重免疫荧光标记法,在光镜下观察高渗刺激(9%氯化钠,5.5ml/kg尾静脉注射)后15、45、90和180 min,视上核内胶质纤维酸性蛋白(GFAP,标记星形胶质细胞)、催产素(OXT,标记视上核神经元)、Fos(标记神经元胞核)和孤束核内GFAP、酪胺酸羟化酶(TH,标记神经元)、Fos表达的时程变化.采用双重免疫电镜法,观察高渗刺激后视上核N-ASC内星形胶质细胞(用Cx43标记)与神经元(用Cx32标记)之间接触处的超微结构.结果光镜下在视上核和孤束核可分别观察到3种N-ASC,即:由 GFAP阳性星形胶质细胞与 OXT(或TH)阳性神经元形成的N-ASC;由GFAP阳性星形胶质细胞与Fos阳性神经元形成的N-ASC;由GFAP阳性星形胶质细胞与Fos和OXT(或TH)双阳性神经元形成的N-ASC.高渗刺激后 N-ASC的数量明显增加.抗Cx43和抗Cx32的双重免疫电镜显示,高渗刺激后Cx43阳性星形胶质细胞突起(即Cx43半通道)以及Cx32和Cx43形成的异型缝隙连接(HGJ)的数量明显增加.结论视上核和孤束核内的N-ASC参与渗透压调节反应.     

红藻氨酸诱发大鼠复杂部分性癫痫发作后延髓内脏带内FOS蛋白、GFAP与TH的共同表达

目的:观察大鼠癫痫发作后延髓内脏带内神经元和星形胶质细胞活性变化的时空效应及与儿茶酚胺类递质的关系。方法:以红藻氨酸诱导大鼠复杂部分性发作为癫痫模型,利用免疫组织化学三重染色技术,显示癫痫发作后30min至6h不同时点延髓内脏带区域同一部位FOS蛋白与胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）及酪氨酸羟化酶（TH）的表达变化与相互关系及分布规律。结果:癫痫发作后延髓内脏带内c-fos表达与GFAP阳性细胞分布基本一致,且癫痫诱发后30min GFAP开始增多,1h达高峰;FOS阳性产物1h开始增多,3h达高峰;部分FOS阳性神经元为TH阳性,周围有GFAP免疫反应产物包绕。结论,在癫痫病理状态下,延髓区域星形胶质细胞的反应略早于神经元,二者不但分布上具有一一对应的关系,它们之间可能存在着复杂的信息通讯,形成神经元-胶质细胞复合体,共同对各种刺激做出反应。     

大白鼠下丘脑外侧区的传入性联系

应用HRP的微量注射和微电泳方法,采用经皮质直刺与经小脑斜刺二种途径,研究了大白鼠下丘脑外侧区的传入联系。HRP 注射于下丘脑外侧区,在下丘脑前核、室旁核、中缝背核、蓝斑和室周灰质内均有标记神经元存在。多数例子在伏隔核、隔外侧核、终纹床核、视前内侧核、视前外侧核、视上核、下丘脑腹内侧核、杏仁内侧核、杏仁中央核、连合核、脚间核、臂旁背侧核、臂旁腹侧核及孤束核内也有标记细胞。少数例子在内侧隔核、斜角带核、丘脑内侧核的内侧部、乳头体上核、中缝中央核也发现标记细胞。Gudden 氏被盖背侧核、迷走神经背核仅在个别例子显现标记细胞。上述核团中蓝斑、室旁核、视上核和臂旁背侧核的标记为双侧性的。其余均为同侧性的。     

大鼠束缚后脑内星形胶质细胞的反应

为了探讨束缚后大鼠脑内星形胶质细胞的反应,本实验将大鼠束缚于小的塑料桶内1、3或6 h,于解束后30 min处死,正常大鼠不被束缚作为对照。脑组织进行抗glial fibrillary acidic-protein(GFAP)免疫组织化学染色。结果显示:在正常大鼠脑内有少数散在静止状态的星形胶质细胞,表现为胞体小、突起细、GFAP淡染,缺乏机能定位分布特点;束缚后脑内星形胶质细胞表现为胞体肥大、突起变粗、GFAP深染、形成激活状态,其分布有明显的机能定位特点,表达于与应激反应调节相关的核团,主要有(1)端脑:扣带回、新皮质(尤其是第Ⅲ和V层)、隔外侧核、杏仁中央核;(2)间脑:丘脑室旁核、外侧膝状体、内侧膝状体、下丘脑的视上核、室旁核、第三脑室室周区、弓状核;(3)脑干:中脑的上丘浅层、中脑导水管周围灰质、下丘的皮质部;脑桥的臂旁外侧核、蓝斑、A5区;延髓的耳蜗核、延髓内脏带(MVZ)等处。反应性星形胶质细胞表达的时程变化是束缚1 h最高,3 h次之,6 h最少。本文结果表明,大鼠被束缚后全脑多处核团的星形胶质细胞发生不同程度的改变,随着束缚时间的延长,动物产生适应性,星形胶质细胞表达减少。     

不同温度热应激时大鼠下丘脑内胶质原纤维酸性蛋白的表达变化

目的 探讨不同温度下,大鼠下丘脑内胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.方法 将成年SD大鼠40只置于24℃、34℃、38.5℃、42℃(10只/每组温度),相对湿度为60%的实验仓内,60min后取出,常规方法灌流固定取脑,下丘脑恒冷箱制片(30μm),应用抗GFAP免疫组织化学标记法和抗GFAP与Fos双重免疫组织化学标记方法,观察大鼠急性热应激后,星形胶质细胞在下丘脑内的形态、分布和数量的变化.结果 24℃时,下丘脑内GFAP阳性细胞较少;34℃时,GFAP在下丘脑内各个核团(下丘脑前区、室旁核、弓状核、视交叉上核和视上核)表达增加,38.5℃时,GFAP表达明显增加,达到峰值;42℃时又降低,并且出现了Fos阳性的星形胶质细胞.结论 星形胶质细胞参与了热应激的病理生理过程.     

大鼠侧脑室注射甘珀酸后下丘脑视上核星形细胞和神经元对高渗刺激反应的影响

目的 观察大鼠侧脑室注射甘珀酸后下丘脑视上核星形细胞和神经元对高渗刺激反应的影响。方法 经侧脑室注射缝隙连接阻断剂甘珀酸(carbenoxolone,CBX)及尾静脉注射9％NaCl溶液后，用放射性免疫分析法测定大鼠血浆中加压素(VP)含量，免疫组织化学方法观察下丘脑视上核(SON)神经元的：Fos和星形细胞的Fos以及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化。结果 1．未注射CBX组大鼠在高渗刺激后45min，血浆中VP的含量明显升高；SON中观察到GFAP／Fos阳性的星形细胞和Fos阳性神经元；2．GFAP／Fos阳性星形细胞高峰的出现早于Fos阳性神经元；3．向侧脑室注射CBX2h后，经尾静脉注射9％NaCl溶液，45Bin后血浆中的VP含量未升高，SON中GFAP／Fos阳性星形细胞的表达与未注射CBX组相同，Fos阳性神经元则显著减少。结论 SON的星形细胞对高渗刺激发生反应早于神经元，并可能通过缝隙连接影响神经元对渗透压的调节功能。     

内脏伤害性刺激后Fos在大鼠脑内NOS阳性神经元内的表达

目的：观察一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元在内脏伤害性信息传递通路上的分布。方法：给予大鼠内脏伤害性刺激后，采用Fos免疫组织化学(ABC法)和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学双重染色的方法，观察脑内NOS和Fos阳性神经元的分布。结果：脑内Fos／NOS双标阳性神经元主要分布在孤束核，中缝背核，丘脑室旁核，下丘脑室旁核、室周核、背内侧核，中脑导水管周围灰质腹外侧部、背外侧部，臂旁内侧核，内侧缰核，杏仁复合体内侧部等部位。结论：NO是内脏伤害性信息传递和调控通路上的神经递质之一。     

大鼠延髓至下丘脑室旁核的儿茶酚胺能投射神经元在胃伤害性刺激后的FOS表达

用ＨＲＰ注入下丘脑室旁核逆行追踪与抗Ｆｏｓ和抗酪氨酸羟化酶（ＴＨ）双重免疫细胞化学相结合的三重标记方法，对大鼠孤束核和延髓腹外侧区至下丘脑室旁核的儿茶酚胺能投射神经元对胃伤害性刺激后的ｃ－ｆｏｓ表达进行了观察，发现孤束核和延髓腹外侧区有７种不同的标记细胞：ＨＲＰ、Ｆｏｓ、ＴＨ单标细胞，Ｆｏｓ／ＨＲＰ、Ｆｏｓ／ＴＨ、ＨＲＰ／ＴＨ双标细胞，Ｆｏｓ／ＨＲＰ／ＴＨ三标细胞。上述７种标记细胞主要分布在延髓中、尾段孤束核的内侧亚核、连合亚核和延髓腹外侧区以及两者之间的网状结构。ＨＲＰ标记细胞以注射侧为主，对侧有少量分布。本文结果证明，大鼠孤束核和延髓腹外侧区至下丘脑室旁核投射的部分儿茶酚胺能神经元可能参与胃伤害性刺激的传导和调控。     

8-精加压素免疫反应阳性神经元在兔脑内的分布

用纯种新西兰兔,向侧脑室内注入秋水仙素(300μg/3μl),48h后用免疫组织化学方法观察了加压素(VP)免疫反应阳性神经元在兔脑内的分布。实验结果表明,在室旁核有较密集的VP样免疫反应阳性神经元分布,胞体直径约为15—20μm。在下丘脑另一些部分、视前区、杏仁核和蓝斑均有VP样免疫反应阳性的神经元,但细胞不如室旁核的密集,在蓝斑的阳性细胞则较小。另外,室周灰质和臂旁核也发现有少量VP样免疫反应阳性的细胞。本工作还首次报道了在蓝斑的小血管壁上有VP样免疫反应阳性神经末梢分布,推测这些神经末梢可能参与VP调节血压的中枢机制。     

正常生活状态下的大鼠脑中 FOS的基础表达

用免疫组织化学 ABC方法普查了正常生活状态下大鼠全脑内 FOS的基础表达。结果显示在正常生活状态下大鼠脑中有广泛而恒定的 FOS表达 ,出现于许多核团 ,如 :孤束核的连合核、内侧亚核 ,脑桥核 ,臂旁外侧核及 KF核 ,下丘 ,丘脑室旁核 ,下丘脑乳头体上核、视交叉上核以及中央杏仁核 ,新皮质等处。另外 ,在外侧网状核 ,三叉神经脊束核尾侧亚核 ,A1区 ,舌下神经前置核 ,小脑皮质颗粒层 ,中央灰质腹外侧部 ,腹侧被盖区 ,顶盖前区 ,下丘脑后区 ,外侧膝状体腹侧核 ,外侧缰核 ,尾壳核 ,屏状核 ,视上核 ,隔外侧核 ,扣带回皮质和嗅结节等处也有恒定的 FOS表达。面部皮下注射甲醛后 ,在部分脑区如三叉神经脊束核尾侧亚核 、 层及下丘脑室旁核等处 FOS表达增多 ,而脑内大部分核团 FOS表达模式未变。本文作者推测 ,这些正常生活状态下的 FOS表达可能与机体的基础代谢以及内脏、躯体功能活动 ,外界刺激如光线、声音等感觉传入活动有关。在分析实验刺激引起的 F OS表达变化时应注意区分     

Extra-hypothalamic afferent inputs to the supraoptic nucleus area of the rat as determined by retrograde and anterograde tracing techniques

To detect neuronal cell bodies whose axon projects to the hypothalamic supraoptic nucleus, small volumes (10-50 nl) of 30% horseradish peroxidase or 2% fast blue solutions were pressure-injected into the area of one supraoptic nucleus of rats. Both dorsal and ventral approaches to the nucleus were used. In animals where the injection site extended beyond the limits of the supraoptic nucleus, retrogradely labelled cell bodies were found in many areas of the brain, mainly in the septum, the nucleus of the diagonal band of Broca and ventral subiculum in the limbic system; the dorsal raphe nucleus, the locus coeruleus, the nucleus of the dorsal tegmentum, the dorsal parabrachial nucleus, the nucleus of the solitary tract and the catecholaminergic A1 region in the brain stem; in the subfornical organ and the organum vasculosum of the lamina terminalis, as well as in the median preoptic nucleus. In contrast, when the site of injection was apparently restricted to the supraoptic nucleus, labelling was only clearcut in the two circumventricular organs, the median preoptic nucleus, the nucleus of the solitary tract and the A1 region. Injections of wheat germ agglutinin coupled with horseradish peroxidase (60-80 nl of a 2.5% solution) made in the septum and in the ventral subiculum anterogradely labelled fibers coursing in an area immediately adjacent to the supraoptic nucleus but not within it. In contrast, labelling within the nucleus was found following anterograde transport of tracer deposited in the A1 region and in an area that includes the nucleus of the solitary tract. Neurones located in the perinuclear area were densely labelled by small injections into the supraoptic nucleus; they may represent a relay station for some afferent inputs to the supraoptic nucleus. These results suggest that the supraoptic nucleus is influenced by the same brain areas which project to its companion within the magnocellular system, the paraventricular nucleus.     

异丙酚诱导大鼠中枢FOS核蛋白表达的研究

目的　通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢FOS核蛋白的表达 ,明确静脉全身麻醉的中枢作用位点。方法　 2 1只Wistar大鼠随机分成 3组 :对照组 (C组 )腹腔注入生理盐水 2ml,异丙酚组 (P组 )腹腔注入异丙酚 10 0mg kg ,异丙酚作用后断尾刺激组 (S组 )。 1h后应用FOS蛋白免疫组织化学法 (ABC法 ) ,检测FOS免疫反应 (FOS IR ,immunityreactionofFOS)阳性神经元在大脑的分布。结果　C组可见部分散在FOS IR阳性神经元分布 ,P组FOS IR阳性神经元数比C组明显增多 (P <0 .0 1) ,并呈核特异性分布 ,S组在杏仁基底外侧核、丘脑室旁核、外侧缰核及海马回嗅觉小岛等核团发现FOS IR阳性神经元较P组分布增多 (P <0 .0 1)。结论　异丙酚在大鼠中枢神经系统有与其静脉麻醉作用相关的神经核团。     

Fos蛋白在LPS免疫激发大鼠脑内的分布

目的 研究与神经免疫调节有关的功能神经元在大鼠脑内的分布。方法 以腹腔注射脂多糖（ＬＰＳ）为免疫激发模型,采用免疫组织化学ＡＢＣ方法,观察Ｆｏｓ蛋白在脑内的分布情况。结果 Ｆｏｓ阳性产物多集中分布在大脑额顶皮质、边缘前脑（扣带皮质、梨状皮质、外侧隔核和中央杏仁核等）、丘脑室旁核、下丘脑室旁核、弓状核、视上核、视交叉上核、下丘脑外侧区、中脑导水管周围灰质腹外侧部、外侧臂旁核和延髓内脏带,小脑内无明显     

大鼠下丘脑内的一氧化氮合酶与雌激素受体双标神经元

目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)和雌激素受体(ER)在下丘脑诸核团的分布及共存,为揭示雌激素与一氧化氮之间的内在联系提供形态学依据。方法:采用NADPH-d组织化学法并结合免疫组织化学技术,观察雌性大鼠下丘脑内NOS阳性神经元、ER阳性神经元以及NOS/ER双染神经元的形态及分布。结果:NOS阳性神经元主要分布在下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和室周核;ER阳性神经元在下丘脑诸核团的表达不及NOS阳性神经元广泛;NOS与ER双染神经元主要分布在下丘脑的室旁核、视上核、下丘脑外侧区及室周核;其他区域可见散在分布的双染神经元。结论:NOS与ER双染神经元主要集中分布在视上核的背内侧和背外侧部及室旁核小细胞部腹内侧区,在下丘脑外侧区分布较广但比较分散,室周核呈散在分布。     

大鼠束缚后脑内Fos蛋白的表达

目的探讨大鼠束缚后对大鼠脑内Fos蛋白表达的影响。方法将大鼠束缚于小的塑料桶内1、3或6h,于解束后30min处死,脑组织进行Fos蛋白免疫组织化学染色。结果Fos阳性神经元表达于1．前脑：扣带回、新皮质(尤其是第3和5层)、外侧隔核、杏仁中央核;2．间脑：下丘脑视前区、下丘脑外侧区、视上核、室旁核、第三脑室室周区、弓状核、丘脑室旁核、外侧膝状体、内侧膝状体;3．脑干：中脑的上丘视性层、中脑导水管周围灰质、下丘的皮质部;脑桥的臂旁外侧核、蓝斑、A5区;延髓的耳蜗核、延髓内脏带(MVZ)等处。Fos表达的时问规律是束缚1h最高,3h次之,6h最少。结论大鼠被束缚后全脑多处核团的神经元发生不同程度的Fos反应,随着束缚时间的延长,动物产生适应性,Fos表达减少。     

Comparative distribution of NADPH-diaphorase activity and tyrosine hydroxylase immunoreactivity in the diencephalon and mesencephalon of the domestic chicken (Gallus domesticus)

We described the distribution of NADPH-diaphorase-containing neurons in relation to tyrosine hydroxylase immunoreactivity in the diencephalon and mesencephalon of the chicken. In the diencephalon, both markers were found in the lateral hypothalamus, dorsal hypothalamic area, hypothalamic periventricular nucleus, paraventricular nucleus and mamillary area. A close examination showed that the fine distribution of these markers differed slightly, so that they were never observed in the same neurons. In the mesencephalon, NADPH-diaphorase and tyrosine hydroxylase immunoreactivity were found in the ventral pedunculopontine area (nucleus tegmenti pedunculopontinus pars compacta, adjacent areas surrounding the quintofrontal tract and the nucleus mesencephalicus profundus ventralis), the coeruleus complex (locus coeruleus, ventral and dorsal subcoeruleus nuclei), the ventral tegmental area and the central gray. The majority of these neurons contained either diaphorase or tyrosine hydroxylase. Nevertheless, in a few cases both markers appeared to colocalize in the same neuron, typically in large perikarya of the ventral pedunculopontine area.Abbreviations AVT Ventral tegmental area of Tsai - DAB diaminobenzidine - DHA dorsal hypothalamic area - DMA anterior dorsomedial thalamic nucleus - DMP posterior dorsomedial thalamic nucleus - DSV ventral supraoptic decussation - GCt central gray - ICH intercalated hypothalamic nucleus - IH inferior hypothalamic nucleus - LHy lateral hypothalamic area - LoC locus coeruleus - ML lateral mamillary nucleus - MM medial mamillary nucleus - MPv ventral part of the deep mesencephalic nucleus - nI interstitial nucleus of Rendahl - NADPH-d NADPH-diaphorase - NGS normal     

磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶1/2在正常小鼠脑内的免疫细胞化学定位

细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1/2是重要的信号转导分子。现已知在正常动物的中枢神经系统内有其活化形式即磷酸化的ERK1/2(pERK1/2)分子的存在,但其在小鼠脑内的分布目前还没有全面的观察。本研究用免疫组织化学技术(ABC法)研究了pERK1/2样免疫反应阳性产物在脱臼处死的正常小鼠全脑内的分布。结果发现pERK1/2在正常小鼠脑内有广泛的表达,阳性产物主要存在于神经元,亦见于个别白质内的胶质细胞,脑膜及室管膜细胞也有表达。强阳性表达的核团主要有:岛皮质、视听皮质、边缘前皮质、扣带前皮质、海马垂直部、弓状核、蓝斑和小脑Purkinje细胞;中等阳性表达的核团主要有:感觉运动皮质、外侧隔区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和外侧杏仁核、丘脑室旁核前部、视交叉上核、穹隆下器、终板血管器、前腹侧视前核和下丘脑背内侧核;弱阳性表达的核团主要有:视上核、下丘脑室旁核大细胞部、下丘脑后区、顶盖前区、室周灰质腹外侧柱、A5区、孤束核和延髓腹外侧网状结构等。本文结果观察到pERK1/2在正常小鼠脑内广泛存在,提示pERK1/2作为重要的信号转导分子,可能参与许多脑区在正常状态下的功能活动,揭示其分布特点为了解其在脑内的多样性功能提供了形态学依据。