食管鳞癌组织GST-π和TOPO-Ⅱ表达及其相关性研究

目的:研究食管鳞癌组织谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TOPO-Ⅱ)表达及其相关性研究.方法:应用免疫组化SP法检测GST-π和TOPO-Ⅱ48例食管鳞癌组织和30例正常黏膜组织中的表达.结果:在正常食管黏膜和食管鳞癌组织中GST-π和TOPO-Ⅱ的阳性表达率分别为30.00%(9/30)、20.00%(6/30)和64.58%(31/48)、41.67%(20/48);食管鳞癌组织和正常食管黏膜比较差异均有统计学意义,P＜0.05.GST-π和TOPO-Ⅱ的表达与淋巴结转移无关;与分化程度有关;GST-丌与TOPO-Ⅱ的表达呈负相关(r=-0.787,P＜0.05).结论:联合检测GST-π和TOPO-Ⅱ可以作为判断食管癌浸润、转移能力的有效指标.同时可应用于预测患者临床化疗的敏感性,筛选出不具有耐药的联合方案,提高疗效.     

食管鳞癌形成中基因表达谱的研究

[目的]初步了解食管鳞癌形成中5个不同时期（正常、食管上皮不典型增生Ⅰ级、食管上皮不典型增生Ⅱ级、食管原位鳞癌和食管鳞癌）的基因表达谱,并探讨cDNA微点阵技术在肿瘤研究中的应用价值。[方法]收集上述5种不同病理类型的组织标本,提取总RNA,逆转录合成cDNA探针,分别与cDNA微点阵膜杂交,随机挑选8个EST片段,分别以杂交样品和配对组织标本总教育界模板完成RT-PCR以验证杂交结果的准确性,用专用软件分析得到各位点光密度值,将此数值标准化后进一步比较分析。[结果]对于杂交样品和配对组织标本,都是6个EST片段的RT-PCR结果与其杂交结果一致,数据分析显示,正常时期和其他各期相比分别有492,481,473和501个基因的表达改变了2倍及2倍以上,其中386个基因在4个异常时期均表达下调,而其他各期之间相比,大多数基因的表达无明显改变,还观察了一些已知的肿瘤相关基因在5个不同时期的表达状况。[结论]本实验再一次证实食管上皮不典型增生Ⅰ级是食管鳞癌形成的一个早期阶段。利用cDNA微点阵技术将有望发现导致食管鳞癌形成的关键基因,为临床早期诊断、治疗和预防提供新的线索。     

食管鳞癌组织中FANCA基因表达及其临床意义的研究

目的:探讨FANCA基因在食管鳞癌组织中的表达及意义.方法:采用RT-PCR检测36例食管鳞癌癌组织、相应的癌旁组织和正常黏膜组织中FANCA mRNA的表达情况.PCR产物经凝胶电泳,比较3种组织中FANCA与GAPDH条带的灰度值之比,半定量分析FANCA mRNA的表达水平.结果:36例癌组织中有9例(25.0%)FANCA mRNA检测到阳性表达,27例(75.0%) FANCA mRNA缺失表达,其阳性表达率显著低于相应的癌旁组织(P=0.006)和正常黏膜组织(P=0.001);癌组织中FANCA mRNA表达水平为0.46±0.16,显著低于相应的癌旁组织的0.71±0.12(q=6.32)和正常黏膜组织的0.77±0.11(q=10.78),P＜0.05.随着肿瘤分化程度的升高,FANCA mRNA在癌组织中的阳性表达率也明显增加,P高vs低=0.015,P高vs中=0.024.但FANCA mRNA的阳性表达与食管癌TNM分期、淋巴结有无转移和病理类型均差异无统计学意义,P>0.05.结论:FANCA基因在食管鳞癌的发生发展中可能具有抑癌基因的作用.     

食管癌癌前病变的发展趋势及对策

食管癌癌前病变的认识是漫长而曲折的过程。慢性食管炎、白斑症、Ｐｌｕｍｍｅｒ Ｖｉｎｓｏｎ综合症和Ｂａｒｒｅｔｔ食管等食管疾病曾被认为是癌前病变。但在我国食管癌高发区 ,其发病率并不高 ,同食管癌发病似无因果关系。 2 0世纪 80年代以前 ,人们集中精力关注细胞学研究 ,认为细胞学重度增生 (ＳＳＩＩ)是癌前病变。随着研究的深入 ,发现细胞学重度增生同组织学重度不典型增生不是同一概念。细胞学重度增生是不确定群体 ,观察 5～ 8年 ,15 %～ 2 0 %发展为癌 ;而组织学重度不典型增生比较稳定 ,3.5年的癌变率为 6 5 %。因而对癌前病变…     

食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1和MMP-2的表达及其相关性研究

目的 检测食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1和MMP-2蛋白的表达及其相关性,探讨二者与食管鳞状细胞癌浸润转移的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测62例食管鳞状细胞癌、31例癌旁不典型增生及62例正常食管黏膜组织中KiSS-1及MMP-2蛋白的表达.结果 食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率分别为56.5%、67.7%和90.3%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1蛋白阳性表达率与患者的性别、年龄及肿瘤的组织学分级无关(P>0.05),而与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05).食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中MMP-2蛋白的阳性表达率分别为71.0%、54.8%和22.6%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率与肿瘤的分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄无关(P>0.05).食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1及MMP-2蛋白的表达呈负相关(rs=-0.418).结论 KiSS-1对食管鳞状细胞癌的浸润及转移有抑制作用;MMP-2则对食管鳞状细胞癌的转移有促进作用,联合检测KiSS-1和MMP-2蛋白的表达有望成为判定食管鳞状细胞癌浸润及转移能力的重要指标之一.     

MiR-124对食管癌细胞增殖和侵袭的作用及机制研究

摘 要：［目的］检测miR-124及其靶基因CREB1在食管癌组织中的表达情况,探讨miR-124/CREB1在人食管鳞癌细胞KYSE-150体外增殖和侵袭中的作用及机制。［方法］ 通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测32例食管鳞状细胞癌(ESCC)组织及周围正常组织的miR-124和CREB1表达。Targetscan分析miR-124与CREB1的结合位点,荧光素酶基因报告实验验证miR-124 与CREB1是否结合;过表达或抑制miR-124后,采用Western blot检测KYSE-150细胞中CREB1的表达;在KYSE-150细胞中转染miR-124 mimic为miR-124 mimic或转染miR-124抑制剂为anti-mi-R124,转染后24h、48h、72h收集细胞计数,检测细胞增殖情况;转染24h后通过体外侵袭实验检测过表达或抑制miR-124对KYSE-150细胞侵袭的影响。在KYSE-150细胞中转染CREB1 siRNA后24h、48h、72h收集细胞计数,检测细胞增殖情况;转染CREB1 siRNA 24h后检测KYSE-150细胞侵袭能力的变化;在KYSE-150细胞中共同转染anti-miR-124和siCREB1,检测细胞增殖和侵袭能力变化情况。［结果］ MiR-124在食管癌组织表达降低(P<0.001),而CREB1在食管癌组织中表达升高(P<0.001);CREB1是miR-124下游分子,过表达miR-124抑制KYSE-150细胞中CREB1的表达(P=0.016),抑制miR-124促进KYSE-150细胞中CREB1的表达(P<0.001)。在食管癌细胞中,过表达miR-124抑制KYSE-150细胞的增殖和侵袭(P均<0.05),抑制miR-124促进KYSE-150细胞的增殖和侵袭(P均<0.05);敲低CREB1抑制KYSE-150细胞的增殖和侵袭(P均<0.05)。敲低CREB1可抑制anti-miR-124对KYSE-150细胞增殖和侵袭的促进作用(P均<0.05)。［结论］过表达miR-124通过靶向CREB1抑制食管癌细胞的增殖和侵袭。     

胸段食管癌淋巴结转移规律分析(附150例报告)

[目的]研究胸段食管癌淋巴结转移规律。[方法]对胸段食管鳞癌切除手术标本150例的淋巴结进行分组制片、光镜观察。[结果]150例病人有淋巴结转移者81例 ,转移率54 0 % ,病变长度≤5cm者 ,转移率为32 3% ,>5cm者为70 6%。淋巴结转移以局部转移多见 ,其次为连续性及跳跃转移 ,淋巴结转移呈向上、向下及双向转移的多方向性为又一特点。[结论]根据淋巴结的转移特性重视术中淋巴结的清扫及术后给以有目的综合治疗 ,可望提高中晚期食管癌的治疗效果。     

胸段食管癌淋巴结转移规律分析（附150例报告）

「目的」研究胸希食管癌淋巴结转移规律。「方法」对胸段食管癌切除手术标本１５０例的淋巴结进行分组制片、光镜观察。「结果」１５０例病人有淋巴结转移者８１例，转移率５４．０％，病变长度≤５ｃｍ者，转移率为３２．３％，〉５ｃｍ者为７０．６％。淋巴结转移以局部转移多风，其次为连续性及跳跃转移，淋巴结转移呈向上、向下及双向转移的多方向性为又一特点。「结论」根据淋巴结的转移特性重视术中淋巴结的清扫及术后给以有目     

EXPRESSION OF GST-π GENE IN HUMAN ESOPHAGEAL CARCINOGENESIS

Objective: To investigate the possible role of GSTπ in esophageal carcinogenesis. Methods: GST-πexpression at mRNA level was studied by in situ hybridization (ISH) and at protein level by immunohistochemistry (IHC). GST-π expression in normal epithelial cells (NC) of the esophagus,hyperplastic cells (HC), dysplastic cells (DC) from grade Ⅰ to Ⅲ, carcinoma in situ (CIS) and all the cells in squamous cell carcinomas (SCC) were examined in the same esophageal cancer specimens (n=48) which provided a model reflecting the process of esophageal carcinogenesis. Results: The positive rate of IHC staining was 87. 5% for NC, 95.3% for HC, 55.9% for DC (grade Ⅰ: 73.9%, grade Ⅱ: 47.4%, grade Ⅲ: 41.2%),36.4% for CIS and 45.8% for SCC. The positive rate of GST-π mRNA expression was 81.2% for NC, 94.4% for HC, 61.9% for DC (grade Ⅰ: 76.5%, grade Ⅱ: 61.5%,grade Ⅲ: 41.7%), 44.4% for CIS and 83.3% for grade ⅠSCC, 30.0% for grade Ⅱ SCC and 0% for grade ⅢSCC. There was no statistically significant difference in GST-π expression at the mRNA and the protein level.Conclusion: There is a decreasing tendency of GST-πexpression from dysplasia to CIS and SCC. The decrease in GST-π expression is an early event in esophageal carcinogenesis.     

Expression of GST-π gene in human esophageal carcinogenesis

Objective: To investigate the possible role of GST-π in esophageal carcinogenesis. Methods: GST-π expression at mRNA level was studied by in situ hybridization (ISH) and at protein level by immunohistochemistry (IHC). GST-π expression in normal epithelial cells (NC) of the esophagus, hyperplastic cells (HC), dysplastic cells (DC) from grade I to III, carcinoma in situ (CIS) and all the cells in squamous cell carcinomas (SCC) were examined in the same esophageal cancer specimens (n=48) which provided a model reflecting the process of esophageal carcinogenesis. Results: The positive rate of IHC staining was 87.5% for NC, 95.3% for HC, 55.9% for DC (grade I: 73.9%, grade II: 47.4%, grade III: 41.2%), 36.4% for CIS and 45.8% for SCC. The positive rate of GST-π mRNA expression was 81.2% for NC, 94.4% for HC, 61.9% for DC (grade I: 76.5%, grade II: 61.5%, grade III: 41.7%), 44.4% for CIS and 83.3% for grade I SCC, 30.0% for grade II SCC and 0% for grade III SCC. There was no statistically significant difference in GST-π expression at the mRNA and the protein level. Conclusion: There is a decreasing tendency of GST-π expression from dysplasia to CIS and SCC. The decrease in GST-π expression is an early event in esophageal carcinogenesis. This work was supported by a grant from the Key Project of Henan Province Science Foundation (No. 961001)     

热休克蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白（HSPs）HSP27、HSP60、HSPT0和HSP90d在食管鳞癌及其切缘正常食管黏膜中的表达及其意义。方法168例食管鳞癌和42例切缘正常食管黏膜制成组织芯片,应用免疫组化EnVision法及Westernbolt检测HSP27、HSP60、HSP70和HSP90α在组织中的表达情况,分析4种HSPs的表达与肿瘤位置、肿瘤长度、浸润深度、分化程度和淋巴结转移的关系。结果食管鳞癌和切缘正常食管黏膜中,HSP27的阳性率分别为62．0％和42．1％;HSP60的阳性率分别为92．7％和63．2％;HSP70的阳性率分别为57．9％和22．2％;HSP90α的阳性率分别为33．7％和18．5％。统计学分析结果表明,HSP60和HSP70在食管鳞癌的表达均高于切缘正常食管黏膜（P〈0．01）,HSP27和HSP90α在食管鳞癌与切缘正常黏膜的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。除HSP27的表达随着食管鳞癌分化程度的降低而降低（P〈0．05）外,其他3种HSPs的表达与食管鳞癌的临床病理特征无关（P〉0．05）。结论HSP27、HSP60、HSPT0和HSP90α在食管鳞癌和切缘正常食管黏膜中均有表达。HSP60和HSP70在食管鳞癌的表达高于切缘正常食管黏膜,可能与食管鳞癌的生物学行为有关;HSP27的表达随食管鳞癌分化程度的降低而降低,HSP27的高表达可能影响鳞癌的分化程度。     

CDC2在食管鳞状细胞癌及癌前病变中的表达与临床意义

目的 探讨细胞周期调控蛋白CDC2在食管鳞状细胞癌及癌前病变中的表达及临床意义.方法 利用组织芯片技术和免疫组织化学方法,检测了241例食管鳞状细胞癌及癌前病变组织中CDC2表达水平,分析蛋白表达模式与临床病理参数的相关性.结果 在正常食管黏膜鳞状上皮-低级别上皮内瘤变-高级别上皮内瘤变-浸润性癌序列病变中,CDC2阳...     

NY-ESO-1基因在人食管癌中的表达及其基因克隆

背景与目的：NY-ESO-1是从食管癌cDNA文库中筛选到的肿瘤抗原,但是该基因在食管癌组织中的表达情况尚未见报道。本文研究NY-ESO-1基因在食管癌中的表达率,以便于确定食管癌患者是否可以使用以NY-ESO-1抗原为基础的疫苗治疗。方法：采用RT-PCR方法检测了NY-ESO-1基因在30例食管癌组织和相应癌旁正常组织中的表达;采用分子克隆的方法从食管癌组织中克隆了NY-ESO-1cDNA。结果：NY-ESO-1基因在食管癌组织中的表达率为50%（15/30）,在30例相应癌旁正常组织中未见表达;克隆的NY-ESO-1cDNA序列与GenBank报道一致。结论：NY-ESO-1基因在食管癌中高频率表达,NY-ESO-1抗原可以被具有HLA-1类分子限制性CTL识别。     

p16基因抑制食管癌细胞生长的研究

目的 探讨ｐ１６基因对食管癌细胞生长的抑制作用,为食管癌致癌机理的研究和基因治疗提供理论基础。方法 我们采用基因转染技术,将全长野生型ｐ１６ ｃＤＮＡ转染到经亚硝胺诱发的人胎儿食管癌细胞系中,该细胞内源性ｐ１６基因已发生纯合性缺失。结果 转染ｐ１６基因的食管癌细胞生长受到抑制,其在软琼脂上克隆形成能力降低了大约４倍。对细胞周期分析表明,处在Ｇ０￣Ｇ１期的细胞由３３．７％增加到６８．６％。经Ｄｏｔ     

MAL基因在人食管癌中表达显著下调

研究ＭＡＬ基因在人食管癌中的表达下调状况。方法采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了ＭＡＬ基因在４１对配对的食管癌组织和相应癌旁食管粘膜中的表达;应用ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ方法分析了ＭＡＬ基因在３个食管癌细胞系ＥＣ１０９、ＥＣ８７１２和ＥＣ９７０６中的存在及其表达。     

kail和nm23基因在食管癌中的表达及其临床意义

目的观察食管癌组织中kail和nm23基因mRNA的表达及其与临床病理的关系,探讨两种基因在食管癌发生、发展中的作用。方法应用原位杂交方法检测kail和nm23基因mRNA在46例食管鳞癌组织和34例手术远端正常食管组织的表达情况。结果食管癌中kailmRNA表达阳性率为91．3％,明显高于癌旁组织的64．7％,差异有统计学意义（X^2=8．65,P=0．003）;nm23mRNA表达阳性率为43．5％,明显高于癌旁组织的5．9％,差异有统计学意义（X^2=13．86,P〈0．001）;nm23基因表达与肿瘤病理分期和淋巴结转移相关（r=～0．379,P=0．009;X^2=6．47,P=0．011）;食管癌组织中kail和nm23基因mRNA表达呈正相关（r=0．298,P=0．007）。结论nm23基因表达可能与食管癌的发生、发展及病理分期相关,kail和nm23联合检测可指导食管癌临床治疗。     

kai1和nm23基因在食管癌中的表达及其临床意义

目的 观察食管癌组织中kai1和nm23基因mRNA的表达及其与临床病理的关系,探讨两种基因在食管癌发生、发展中的作用.方法 应用原位杂交方法检测kai1和nm23基因mRNA在46例食管鳞癌组织和34例手术远端正常食管组织的表达情况.结果 食管癌中kai1 mRNA表达阳性率为91.3%,明显高于癌旁组织的64.7%,差异有统计学意义(χ2=8.65,P=0.003);nm23mRNA表达阳性率为43.5%,明显高于癌旁组织的5.9%,差异有统计学意义(χ2=13.86,P＜0.001);nm23基因表达与肿瘤病理分期和淋巴结转移相关(r=-0.379,P=0.009;χ2=6.47,P=0.011);食管癌组织中kai1和nm23基因mRNA表达呈正相关(r=0.298,P=0.007).结论 nm23基因表达可能与食管癌的发生、发展及病理分期相关,kai1和nm23联合检测可指导食管癌临床治疗.

Abstract：

Objective To investigate the expression of kai1 and nm23 mRNA in esophageal carcinoma, and to explore the clinicopathological significance of kail and nm23 mRNA in the progression of esophageal carcinoma. Methods To detect mRNA expression of kai1 and nm23 in 46 cases of esophageal carcinoma and 34 cases normal esophageal tissues closely adjacent to carcinoma by in situ hybridization.Results The incidence of kai1 (91.3 %＞64.7 %, χ2 =8.65, P =0.003) and nm23 (43.5 %＞5.9 %, χ2=13.86,P ＜0.001) in esophageal carcinoma was significantly higher than in normal esophageal tissues . The expression of nm23 was correlated with the pathological stages (r =-0.379, P =0.009) and lymph node metastasis (χ2 =6.47, P =0.011). The expression of mRNA had positive correlation between kai1and nm23 in esophageal carcinoma (r =0.298, P =0.007). Conclusion The expression of nm23 may play an important role in the occurrence, development and clinicopathological features of esophageal carcinoma. Combined detection of kai1 and nm23 may be helpful in further directing the clinical therapy of esophageal carcinoma.     

细胞周期蛋白A在舌癌中的表达及意义

[目的]研究不同级别的舌鳞状细胞癌中细胞周期蛋白A（cyclinA）基因和蛋白的表达及其意义。［方法］应用微波内免疫组化ABC法检测cyclinA蛋白及原位杂交技术检测cyclinAmRNA的表达情况。［结果〕免疫组化cyclinA多克隆抗体标记60.0％（18／30）显示cyclinA蛋白过度表达;cyclinA探针随机引物标记,经原位杂交后显示,cyclinAmRNA的阳性表达率为70.0％（21／30）。（结论］cyclinA在舌癌中有高水平的表达,且临床分期越晚,恶性程度越高,其表达率也较高,提示cyclinA的过度表达与舌癌的特性密切相关,cyclinA阳性检出率有助于判断舌癌恶性程度及预测肿瘤的转移,在舌癌的发生、发展中起着重要作用。