褪黑素对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用

目的 探讨褪黑素(MLT)对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用及其机制。方法 采用流式细胞术和荧光分光光度法在离体和整体条件下分别检测小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。在此基础上,腹腔注射MLT,观察2 Gy X射线全身照射后24 h小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量及胸腺细胞³H-TdR掺入率和Con A、LPS诱导的脾T、B淋巴细胞转化率的变化。结果 离体研究中,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞体外接受0.5~6.0 Gy照射后,凋亡小体百分率、DNA裂解率均呈剂量依赖性增加,而照射前预先加入2 mmol/L MLT,细胞凋亡小体百分率、DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低。整体研究中,2Gy全身照射前腹腔注射MLT,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率显著低于单纯照射组,接近或低于假照水平,MLT剂量在0.1~2.5 mg/kg范围内均有作用,但无明显剂量依赖性。小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量、胸腺细胞³H-TdR掺入率及有丝分裂原诱导的脾脏T、B淋巴细胞转化率在2 Gy全身照射后均显著低于假照组(P <0.001)。0.5~10 mg/kgMLT预先腹腔注射,胸腺、脾脏淋巴细胞数显著高于0 mg/kg体重组(单纯照射),其中0.5 mg/kg体重组增高最显著;胸腺细胞³H-TdR掺入率显著增高(P <0.01或P <0.001),以0.5 mg/kg体重组增高最显著;Con A诱导的T细胞转化率显著增高,也以0.5 mg/kg体重组为著;LPS诱导的B细胞转化率增高,以10mg/kg体重组最显著。结论 MLT在体内和体外均可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞损伤,对免疫功能具有保护作用。     

葡多酚对辐射引发胰腺细胞凋亡的抑制作用

目的　探讨葡多酚 (GPC)对辐射引发的细胞凋亡与增殖活性损伤的防护作用。方法　给口服不同剂量GPC的小鼠用 60 Co γ射线进行 1次全身性照射 ,照射后第 2天处死动物 ,取胰腺组织分别检测bcl 2和bax表达水平、细胞增殖活性及凋亡率等指标。结果　高剂量GPC组动物的细胞增殖率为 3.16 %± 0 .13% ,bcl 2表达水平为 4 9.8% ,均较辐射对照组 (分别为 0 .6 4 %± 0 .11%、2 9 .7% )高 ;而细胞凋亡率和bax表达水平则为 19.8%和 5 5 .0 % ,均低于辐射对照组 (35 .6 %、85 .7% )。各组间差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　GPC可抑制60 Co γ射线诱发的小鼠胰腺细胞凋亡及相关基因的异常表达 ,对辐射损伤有一定防护作用。     

葡多酚对骨髓细胞辐射损伤的保护作用

目的 研究葡多酚（GPC）对辐射诱发的小鼠骨髓细胞增殖活性损伤的保护作用。方法 体外实验：给予不同剂量GPC的小鼠骨髓细胞用60^Coγ射线进行一次性照射，用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖活性。体内实验：将经口灌胃给予不同剂量GPC的小鼠用60^Coγ射线进行全身性亚急性照射，取骨髓细胞用MTT法检测各组增殖活性，用流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡率，用免疫组织化学方法检测各组Bcl—2表达。结果 体外实验：辐射对照组放高GPC剂量组细胞增殖活性和Bcl—2表达水平升高，G0／G1期细胞比例下降，S、G2＋M期细胞比例有不同程度升高，凋亡率明显降低，2组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 GPC对辐射损伤引发的骨髓细胞增殖活性改变和凋亡具有明显保护作用。     

粗江蓠多糖对辐射损伤大鼠的影响

目的研究粗江蓠多糖(Gracilaria Gigas Harvey Polysaccharides,GHPS)对辐射损伤大鼠胸腺和脾细胞增殖的影响。方法在体外将131I(3.7×108Bq)与胸腺细胞和脾细胞混合培养导致细胞辐射损伤,通过3H-TdR掺入法测定不同浓度的GHPS对胸腺细胞自发增殖和丝裂原诱导的脾细胞增殖反应的影响。结果照射组胸腺细胞和脾细胞的增殖反应明显低于正常对照组(P<0.01);2.0~6.0 mg/ml GHPS加照射组胸腺细胞的自发增殖反应明显高于照射组(P<0.01);1.0~6.0 mg/ml GHPS加照射组脾细胞增殖反应明显高于照射组(P<0.05,P<0.01)。1.0~3.0 mg/ml-GHPS加照射组大鼠胸腺细胞和脾细胞增殖逐渐增加,而4.0~6.0 mg/ml GHPS加照射组的胸腺细胞和脾细胞增殖逐渐减少。结论3.7×108Bq的131I可以抑制大鼠胸腺细胞和脾细胞增殖,适当定浓度的GHPS对辐射损伤的大鼠胸腺细胞和脾细胞有保护作用。     

枸杞多糖对慢性辐射小鼠细胞凋亡及bc1-2基因表达的影响

目的:探讨枸杞多糖(LBP)对辐射小鼠细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法:以水提取-乙醇沉淀法制备枸杞多糖,并制成0.8%的饲料,给予受试小鼠(枸杞多糖组)。正常对照组、辐射对照组给予普通饲料。除正常对照组外,另两组均用60Coγ射线对动物进行全身性照射,每天照射1次,每天照射剂量为0.084Gy,每周照射5d,连续照射6w,照射总剂量为2.52Gy。检测骨髓微核率、睾丸精母细胞染色体畸变、精子畸形率、肝细胞caspase-3mRNA表达水平、细胞凋亡及凋亡相关基因bc1-2表达等指标。结果:LBP可使辐射引起的微核率、染色体畸变、及精子畸形率显著降低,骨髓细胞增殖活性提高,凋亡率降低,使辐射小鼠bc1-2基因表达提高、caspase-3mRNA表达水平降低。结论:枸杞多糖的抗辐射作用与其调控细胞bc1-2基因表达,影响细胞凋亡有关。     

β-胡萝卜素对小鼠肿瘤免疫的影响

<正> 流行病学调查发现,食用富含β-胡萝卜素的食物可明显降低某些肿瘤的发生率。我们将Lewis肺癌细胞(LLC)接种于已经口服β-胡萝卜素和盐藻提取物30周的纯系C57BL/6小鼠,观察β-胡萝卜素和盐藻提取物能否增强小鼠脾脏细胞和巨噬细胞的免疫功能,进而增强宿主的抗肿瘤活性。 1 材料与方法     

放射卫生

全脑照射后海马组织内氨基酸类神经递质含量的变化；信号因子对辐射诱导胸腺淋巴细胞凋亡的影响；电子射线照射大鼠胶原及自由基改变的研究；海生多糖肽对亚急性辐射损伤小鼠的防护作用；川芎嗪促进急性放射损伤小鼠骨髓造血修复作用的研究。     

枸杞多糖对慢性辐射小鼠细胞凋亡及bcl-2基因表达的影响

目的：探讨枸杞多糖(LBP)对辐射小鼠细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响。方法：以水提取-乙醇沉淀法制备枸杞多糖，并制成0．8％的饲料，给予受试小鼠(枸杞多糖组)。正常对照组、辐射对照组给予普通饲料。除正常对照组外，另两组均用^60Coγ射线对动物进行全身性照射，每天照射1次，每天照射剂量为0.084Gy，每周照射5d，连续照射6w，照射总剂量为2.52Gy。检测骨髓微核率、睾丸精母细胞染色体畸变、精子畸形率、肝细胞caspase-3 mRNA表达水平、细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达等指标。结果：LBP可使辐射引起的微核率、染色体畸变、及精子畸形率显降低，骨髓细胞增殖活性提高，凋亡率降低，使辐射小鼠bcl-2基因表达提高、caspase-3 mRNA表达水平降低。结论：枸杞多糖的抗辐射作用与其调控细胞bcl-2基因表达，影响细胞凋亡有关。     

果蔬发酵液体内外的抑癌作用及对免疫功能的影响

目的研究果蔬发酵液(VFFL)的抑瘤作用及对免疫功能的保护作用。方法采用ICR小鼠建立移植性肝癌小鼠模型,随机分为阴性对照组、阳性对照组和VFFL16.6、33.36、6.6 ml/(kg.d)三个剂量组,观察小鼠的瘤重、脾指数、胸腺指数;流式细胞仪检测细胞凋亡;MTT法检测VFFL对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用并用吖啶橙染色于荧光显微镜观察细胞核形态学变化并检测淋巴细胞转化能力、NK细胞活性。结果VFFL各剂量组对H22肿瘤细胞均有明显的抑制作用,抑制率为49.1%、35.0%和25.7%并可显著诱导细胞凋亡;VFFL作用3 d后呈剂量依赖性抑制SMMC-7721细胞增殖,5 d后作用显著,荧光显微镜下细胞核固缩、凝聚,呈浓染致密的颗粒块状并明显提高小鼠NK细胞活力(P<0.01)。结论VFFL具有抑制肿瘤细胞生长作用,其可能与诱导细胞凋亡及提高小鼠机体免疫功能有关。     

离子辐射和巨噬细胞对血管内皮细胞的作用

目的 观察在大剂量放射损伤条件下，内毒素活化的U937对脐静脉内皮细胞ECV304分泌的细胞因子及其生物学性状的作用。方法 将ECV304未照射组设为对照组，ECV304 12CV^60Co照射组和ECV304 U937 12Gy^60Co照射组设为实验组，照射后培养48h，测定细胞的存活率、细胞周期及凋亡方面的变化，运用ELISA法测定培养上清中的TGF-β1和VEGF的浓度变化，运用免疫荧光 流式细胞技术检测细胞表面血管内皮生长因子受体2表达水平，运用逆转录聚合酶链反应检测细胞KDR的mRNA水平。结果 大剂量辐射引起细胞增殖率降低，凋亡增加，G2／M期阻滞，促进ECV304分泌VEGF和TGF-β1，提高了KDR的表达，巨噬细胞可以缓解细胞增殖率的降低，减少细胞凋亡和G2／M期阻滞，进一步提高VEGF的分泌和KDR的表达，减少TGF-β1的分泌。结论 放射引起细胞增殖率降低，凋亡增加，G2／M期阻滞，部分与细胞加强分泌的TGF-β1的抑制作用有关；在放射损伤的情况下，巨噬细胞对内皮细胞是起着积极的保护性作用的。     

细菌防护液对~(60)Coγ射线照射小鼠骨髓细胞生物学效应的影响

探讨细菌防护液 (BPL)与受 6 0 Coγ射线照射小鼠骨髓细胞生物学效应的关系。应用流式细胞仪(FCM)检测细胞的凋亡指数和免疫参数 (CD4 、CD8 、NK)。结果显示 BPL能够降低细胞凋亡率 ,同时提高细胞的增殖率 (P<0 .0 1)。其作用机制可能与提高 NK细胞活性和 CD4 、CD8 数量有关。进一步证实 ,BPL对辐射损伤细胞有一定的保护作用。     

大豆异黄酮对电离辐射小鼠胸腺细胞周期、凋亡与增殖的影响

目的:研究大豆异黄酮(SI)对辐射小鼠免疫器官胸腺的影响。方法:90只雄性昆明小鼠,随机分为正常组、对照组和补充0.5%大豆异黄酮组,喂养2w后,4.0Gyγ-射线照射,于照射后12、24h和1w、2w杀死部分小鼠取胸腺,测定小鼠胸腺指数、胸腺细胞周期、细胞增殖指数及细胞凋亡率等指标。结果:辐射使小鼠胸腺明显萎缩,胸腺细胞凋亡率和G0-G1期细胞百分比明显增加(P<0.01),细胞G2-M期和S期的百分比及胸腺细胞增殖指数明显降低(P<0.05);补充SI,可使上述指标更接近正常组水平,使胸腺萎缩和胸腺细胞G0-G1期百分比比对照组明显减少(P<0.05),胸腺细胞的G2-M期百分比较对照组明显增加(P<0.05)。结论:膳食中补充0.5%大豆异黄酮可对免疫系统的胸腺起到辐射防护的作用。     

葡多酚对外周血淋巴细胞辐射损伤的保护作用

目的研究葡多酚(GPC)对人外周血淋巴细胞辐射损伤的保护作用。方法取14名健康女性的外周血,用直线加速器X射线一次性照射。设高、低剂量GPC组、阳性对照和阴性对照组,分别在培养24、48、72h后检测淋巴细胞凋亡率、增殖活性和淋巴细胞转化率等指标。结果照射后48h,阳性对照组的淋巴细胞凋亡率和增殖活性分别为(45.19±4.80)%和0.66±0.03;高剂量GPC组则为(36.26±6.77)%和0.86±0.05,差别有统计学意义(P<0.001)。结论GPC可降低X射线对淋巴细胞损伤的程度,对淋巴细胞辐射损伤有良好防护作用。     

水翁花对过氧化氢诱导神经细胞凋亡的影响

目的探讨水翁花对过氧化氢(H2O2)诱导神经细胞PC12凋亡的影响及其作用机制。方法构建PC12氧化应激损伤模型,不同浓度的水翁花干预H2O2诱导的PC12细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测细胞SOD水平。qRT-PCR法检测水翁花对miR-422a表达的影响;过表达miR-422a或抑制miR-422a表达对H2O2诱导的PC12细胞凋亡及SOD活性的影响。Western blot法测定细胞中Bcl-2、Bax的表达变化。结果 H2O2诱导的PC12细胞凋亡率升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),抑制miR-422a表达(P<0.05),而水翁花处理后,PC12细胞凋亡率降低(P<0.05),SOD活性增强(P<0.05),促进miR-422a表达(P<0.05),Bcl-2表达上调(P<0.05),Bax表达下调(P<0.05);过表达miR-422a可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡(P<0.05),增强SOD活性(P<0.05);抑制miR-422a表达可逆转水翁花对H2O2诱导的PC12细胞凋亡、SOD活性的影响。结论水翁花可通过上调miR-422a表达对H2O2诱导的PC12细胞损伤发挥保护作用,其可能作用机制与抗细胞凋亡及抗氧化作用相关。     

锌对体外培养小鼠骨髓造血细胞辐射防护作用研究

[目的]探讨锌对γ射线诱导的体外培养小鼠骨髓细胞辐射损伤的影响及可能机制。[方法]分离小鼠骨髓细胞并悬浮于RPMI1640培养基中。分别将锌按20、200、400、800μmoL／L终浓度加入细胞培养液中。5Gγ^60Coγ射线照射骨髓细胞后置于37℃、5％CO2细胞培养箱中培养，16h后终止培养，分别测定有核细胞数、细胞DNA含量、并采用流式细胞术和彗星试验测定细胞DNA损伤和细胞凋亡率。[结果]5Gγ^60Coγ射线照射体外培养的小鼠骨髓细胞后。骨髓有核细胞数、DNA含量均明显下降；细胞凋亡率和DNA损伤率增加。照射前在培养液中加入一定浓度的锌。细胞DNA损伤程度和凋亡率下降，DNA含量升高，有核细胞数增加，并在200～800μmoL／L的剂量范围内，存在剂量-反应关系。[结论]锌可能通过保护DNA大分子，抑制细胞凋亡而发挥其辐射防护作用。     

不同君药四君子汤辐射损伤防护作用的比较研究

目的研究不同君药四君子汤对受照人淋巴母细胞AHH-1及小鼠的辐射损伤防护作用,探讨不同君药及不同配比对四君子汤抗辐射活性的影响。方法使用CCK-8试剂盒检测不同终浓度的3种四君子汤作用48 h对AHH-1细胞的毒性作用,以及不同终浓度的四君子汤预处理AHH-1细胞2 h后对经4 Gy~(60)Coγ射线照射的细胞存活率的影响。使用6~8周的BALB/C小鼠120只,用随机数字表法分为阴性对照组、照射对照组以及人参四君子汤(10:9:9:6)组、人参四君子汤(2:2:2:1)组、党参四君子汤(2:2:2:1)组。3.5 Gy~(60)Coγ射线全身单次照射造成小鼠电离辐射损伤模型。照射后3 d和7 d,观察不同君药、不同配比的四君子汤对细胞、辐射损伤模型小鼠的体重、胸腺系数、脾脏系数、微核、脾细胞凋亡等活性指标的影响。结果 250μg/mL的党参四君子汤(2:2:2:1)可显著提高受照AHH-1的存活率(P0.05);人参四君子汤(2:2:2:1)、党参四君子汤(2:2:2:1)能够有效促进照后3d小鼠体重的恢复(P0.05);人参四君子汤(10:9:9:6)可显著提高照后7d小鼠的胸腺系数、显著降低照后3d的骨髓嗜多染红细胞微核率及照后3 d、7 d的脾细胞凋亡率。党参四君子汤(2:2:2:1)可显著降低照后3 d、7 d的脾细胞凋亡率及骨髓嗜多染红细胞微核率。人参四君子汤(2:2:2:1)可显著升高照后7d的胸腺、脾脏系数,显著降低照后3 d、7 d的脾细胞凋亡率及骨髓嗜多染红细胞微核率。结论相同配比下,人参作为君药,抗辐射药效优于党参;不同配比下,人参(2:2:2:1)抗辐射药效优于人参(10:9:9:6)。该实验结果验证了四君子汤方中人参作为君药以及药物配比为2:2:2:1的合理性,同时也验证了党参四君子汤及10:9:9:6的药物配比在辐射损伤防治方面也起到一定的作用。     

凹顶藻萜类化合物抑瘤作用及其机制研究

目的:观察凹顶藻萜类化合物(Laurencia terpenoid extract,LET)的抑瘤活性、免疫调节作用及对S180细胞凋亡的影响,初步探讨其抗癌作用机制。方法:采用Horn法检测其安全性(LD50)。建立S180荷瘤鼠动物模型,采用LET低、中、高剂量(25、50、100mg/kgbw)灌胃,空白对照组以大豆色拉油灌胃,每日一次,连续10d。测定抑瘤率;计算胸腺指数、脾指数;用MTT法测定脾淋巴细胞增殖活性;流式细胞术检测LET诱导的S180细胞凋亡和对细胞周期的影响。结果:LET的LD50>3160mg/kgbw属低毒。LET低、中、高三个剂量组的平均瘤重低于空白对照组(P<0.05),高剂量组的抑瘤率达39.1%。与空白对照组比较,LET低剂量组的胸腺指数上升、高剂量组的脾指数上升(P<0.05),LET低、中剂量组的脾淋巴细胞增殖率升高(P<0.05),高剂量组的脾淋巴细胞增殖率明显升高(P<0.01)。LET中剂量组S180细胞凋亡率高于空白对照组(P<0.05)。结论:LET使用安全,可明显抑制小鼠S180移植瘤的生长,其作用机制可能与其可提高机体的免疫功能,诱导S180细胞凋亡和阻断该细胞于G0/G1生长期有关。     

外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 首先建立了体内细胞凋亡模型,25只4周龄雄性小鼠腹腔注射地塞米松(25mg／kg)4、8、16、24h后取胸腺淋巴细胞进行细胞凋亡检测。确定建立体内细胞凋亡模型的条件为注射地塞米松(25mg／kg)后16h取小鼠胸腺细胞。外源核苷酸对小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响,60只小鼠分成阴性对照、阳性对照、核苷酸1组、核苷酸2组,共4组,每组15只小鼠,均饲喂半纯合饲料。对照组每天灌胃生理盐水,核苷酸1组和2组分别灌胃12．5mg和25mg的核苷酸,连续饲养14d后阳性对照组和核苷酸组小鼠腹腔注射地塞米松溶液,诱导小鼠胸腺淋巴细胞凋亡,阴性对照组注射等量的生理盐水,16h后分离脾脏和胸腺,测定脾脏及胸腺指数,并采用琼脂糖凝胶电泳和流式分析方法检测胸腺淋巴细胞凋亡情况以及细胞游离Ca^2 浓度([Ca^2 ]i)。结果 核苷酸1组和2组小鼠的增重分别为3．71、4．01g,阴性对照组小鼠增重为2．74g,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠的脾脏、胸腺重量以及脏器指数低于阴性对照,添加核苷酸对这些脏器指数没有明显影响;注射地塞米松后小鼠胸腺细胞DNA出现梯形条带,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠胸腺细胞内Ca^2 水平分别升高至167．37nmoL／L、191．16nmol／L、180．78nmol／L,高于阴性对照(103．76nmoL／L)。细胞凋亡率也分别由阴性对照组的0．31％升高到11．93％、9．82％、11．15％,补充核苷酸对细胞内Ca^2 水平和细胞凋亡率均没有显著影响。结论 外源核苷酸对地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡没有显著影响。     

富勒醇对小鼠γ射线辐射损伤的防护作用

目的研究C60衍生物富勒醇对小鼠~(60)Coγ射线辐射损伤的防护效果。方法ICR小鼠于照射前5d至照后7d连续腹腔注射富勒醇,~(60)Coγ射线全身均匀照射,照射剂量分别为5Gy和8Gy,照射剂量率1.0Gy/min,测定5Gyγ射线照射下小鼠体重变化,照后7d胸腺、脾脏指数外周血白细胞;8Gyγ射线照射下30d存活率和平均生存时间。结果富勒醇能减轻~(60)Coγ射线辐射所引起的外周血白细胞、血小板降低,胸腺和脾脏萎缩;提高小鼠生存率,延长存活时间。结论富勒醇对~(60)Coγ射线照射的小鼠具有一定的防护作用。     

β-乳球蛋白共轭亚油酸复合物对LoVo细胞凋亡的影响

目的研究β-乳球蛋白共轭亚油酸复合物(β-lactoglobulin conjugated linoleic acid complex,β-LG-CLA)对人结肠癌LoVo细胞的凋亡诱导作用。方法 WST-1法分析复合物对LoVo细胞增殖的影响;倒置显微镜观察复合物对细胞形态学改变;JC-1染色检测细胞线粒体膜电位变化;caspase-3蛋白活性测定。结果β-LG-CLA可抑制LoVo细胞增殖,抑制率呈时间剂量依赖性;β-LG-CLA作用于结肠癌LoVo细胞,使结肠癌细胞出现了细胞数量明显减少,体积缩小,皱缩变形,进一步有凋亡小体产生,随着β-LG-CLA浓度的增加,此现象更加明显;β-LG-CLA剂量组细胞线粒体膜电位降低,呈现浓度依赖性;β-LG-CLA剂量组细胞caspase-3蛋白活性含量比对照组高,且呈现剂量-时间反应关系。结论β-LG-CLA可诱导结肠癌LoVo细胞凋亡,表现为细胞内线粒体膜电位降低以及释放性蛋白caspase-3活性升高。