一种霉菌染色的新方法

一种霉菌染色的新方法张海，张谷一、材料与方法１．试剂配制（１）５０％硝酸银溶液：取４ｇ硝酸银溶解于８ｍｌ的蒸馏水。（２）０．５％甲酸—明胶溶液：取２ｇ明胶溶解于１００ｍｌ的蒸馏水，加０．５ｍｌ甲酸。（３）改良银染工作液：（１）和（２）以体积２：１均匀...     

从小量样品中同时提取高分子量DNA和RNA

基本原理 目前,提取DNA和RNA的方法有多种,但多为分别提取而不能由同一样品同时提取。常使需要同时研究同一样品中DNA和RNA的工作既浪费样品,又增加了操作步骤,耗物耗时,还易使所得之DNA和RNA产生一定程度的相互污染。特别在样品的来源有限或样品量少的情况下,用分别提取的方法来获得高分子量的DNA和RNA常顾此失彼,不能同时得到足够     

一种从子宫内膜高质量提取总RNA的方法

总RNA的提取是分子生物学研究常用技术之一,本文简要介绍了TR Izol法改良后一种用于小鼠子宫内膜总RNA提取的方法,实验证明该方法重复性好、所获得的RNA纯度高、完整性好,表明该方法切实可行。     

一种检测特异DNA序列的新方法

最近在Yale大学医学院的David Ward实验室报道了一种新的检测特异DNA序列的方法,它的基本思想是:将一个生物素标记的核苷酸结合到一个核苷酸探针中去,然后用抗生物素抗体(由兔产生)与此探针结合,再将荧光标记或酶(如辣根过     

一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法

目的建立从甲醛固定石蜡包埋组织中高效、快速提取基因组DNA的方法。方法将一片10μm厚石蜡包埋大肠癌组织切片直接浸入150μl消化液中,56℃孵育0.5h、1h和2h,灭活蛋白酶K后离心取上清即为DNA提取物。琼脂糖凝胶电泳检测所提取DNA的片段分布,紫外分光光度法测定DNA的产量及纯度。以提取的DNA为模板,PCR扩增不同长度产物片段并进行产物的直接测序以评价提取方法。结果该提取方法能够获得较长片段的基因组DNA,从一片10μm厚石蜡切片中即可获得大约60μg的DNA,在0.5h消化条件下获取的模板DNA,即可实现对152bp、293bp、392bp和541bp等4种不同片段的100%扩增,1h消化组的PCR产物可直接用于DNA测序。结论建立了一种简单、快速地从甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法,只需一步消化即可获得满足普通PCR及测序需要的基因组DNA。     

一种新的DNA提取方法TLS法

从不同组织、细胞或外周血中制备高分子ＤＮＡ，是进行分子水平研究的先决条件。ＤＮＡ以核蛋白形式存在于细胞核中，制备ＤＮＡ的原则是既要将蛋白质、脂质、多糖及小分子杂质分离干净，又要得到高分子量ＤＮＡ。近年来采用蛋白酶Ｋ水解的方法，使这一问题得到较好的解决...     

一种碘化钾提取外周血基因组DNA的方法

目的　建立外周血基因组DNA 的快速提取方法。方法　用碘化钾直接从外周血中提取基因组DNA。结果　用该方法提取的DNA 为大分子量DNA;A260/A280为1.85,A260/A230为2.2;提取效率大于90% ;DNA 体外扩增结果良好。结论　该方法简便、快速、经济,可用于大量临床标本的研究。     

一种视觉假体的视觉显著图提取新方法

目的 一幅图像或场景的显著性区域代表它们的主要内容（显著目标）.由于视觉假体可植入电极的数量有限,只有低分辨率的图像对其才有用,因此提取显著性区域有助于视觉假体捕捉到场景中的显著目标.方法 Itti模型是一个显著性检测模型,它检测到的显著性区域与人的视觉感知有差异,显著目标的边界不明确.笔者去除了Itti模型提取的方向和色彩特征,将红（R）、绿（G）、蓝（B）三基色（RGB）图像转换到对应于HSI颜色空间上的色调（H）、纯度（S）、亮度（I）3个新特征分量,对hti模型进行优化改进.在显著图中,将落在显著目标内的显著点面积与总显著点面积的比值定义为显著图精确度;以显著图精确度为提取显著图方法的测度,对改进前后2种方法进行比较.结果 利用改进方法提取的显著图比Itti模型显著图精确度提高了约20％;在检测显著性区域时所用时间减少近50％.结论 提出了一种用于人工视觉的获取显著目标的方法,本算法可以得到更加精确的显著性结果,且可缩短运行时间.     

一种改进的质粒DNA提取及回收方法

一种改进的质粒ＤＮＡ提取及回收方法李和伟，王志永，刘彤华（北京协和医院病理科，北京１００７３０）目前已有多种方法从细菌中提取质粒ＤＮＡ￣［１］，其中最常用的是碱裂解法￣［２］，该方法操作简便，所提取质粒ＤＮＡ产量和纯度均较满意。我们在该方法基础上进行...     

介绍一种简便,实用的提取滴虫DNA方法

介绍一种简便、实用的提取滴虫ＤＮＡ方法吴杰，陆晓林，刘忠湘本文所报道的方法适用于提取滴虫的ＤＮＡ，经反复试验结果稳定。所获ＤＮＡ的质和量均较高，可用于ＤＮＡ多态性，构建ＤＮＡ文库等研究。方法①离心收集无菌培养４８ｈ的阴道毛滴虫，ＰＢＳ（ＰＨ７．４，４...     

一种可用于PCR和RAPD分析的基因组DNA单管快速提取法

PCR技术是一种非常有用的遗传操作技术，但它在群体分析中常常因从大量样品中提取基因组DNA的繁重劳动而受限制．理想的DNA提取方法应该可以应用于各种组织，减少处理时的工作量和提取费用，尽量缩减用于分析的组织样品量，并且不应产生对环境有害的废弃物。我们发现了一种新的组织DNA单将快速提取法．提取的DNA经大量稀释后仍能用于PCR反应。这种方法不需要离心，每天可提取6000个样品，每个样品中提取的DNA可完成4000次PCR扩增，而且这种方法可广泛用于提取动物、植物和微生物中的DNA．这种快速提取法包括两个步骤：DNA样品的…     

一种用广义模糊扩散法提取生理曲线的新方法

提出一种用线性变换的广义模糊扩散法，对扫描进计算机的生理曲线图象进行增强、去噪处理，以达到去除坐标栅格和污迹，最后完整地提取出生理曲线的目的。本算法比轮廓搜索法与双结构元法具有算法简单快捷、不依赖于纸张扫描位置的优点，对提取出的生理曲线还进行了误差分析。实验结果表明：本算法适宜大规模的生理曲线提取，是广义模糊算子(GFO)的又一个成功应用。     

人免疫缺陷病毒DNA正链可编码一种新的蛋白质

Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-Ⅰ)在逆转录过程中已发现DNA负链中含有8个开放间读框(ORFs)分别编码不同的产物。作者用计算机对HIV-Ⅰ进行了分析,发现一个以前尚未证实的ORF。这个新发现的ORF位于DNA正链上,与DNA负链中的env     

几种有关DNA解旋和解链的酶

大肠杆菌(E.coli)的染色体含有约4×10~6个碱基对(bp),约40分钟即可完成复制。因为有两个复制叉,故在每个复制叉DNA合成速率为5×10~4bp/min,亦即解旋速率为5000r/min,这是一个很惊人的转速,但DNA分子不可能在细胞内如此旋转的。目前认为有几种蛋白质(或酶)在DNA复制时参与双螺旋的解旋和解链过程.国外文献对同一种酶有不同的命名,加之国内译名不一,以致比较混乱。本文主要就这些酶的名称、种类及作用机理简述如下。     

几种线粒体DNA提取方法的比较

目的将提取线粒体DNA的碱变性法、Triton法、改进高盐沉淀法加以比较,以得到最方便快速提取线粒体DNA的方法.方法采用健康成年雄性Wistar大鼠,取回肠上皮细胞样本18份,每份含3×10?6细胞,每6份分别用碱变性法、Triton法、改进高盐沉淀法提取线粒体DNA,紫外分光光度法定量.再用琼脂糖凝胶电泳和线粒体ATPase6亚基基因PCR扩增产物鉴定所提取的线粒体DNA.结果3种方法提取线粒体DNA量差别明显改进高盐沉淀法量最多,为(1.26±0.23)μg;碱变性法次之,为(0.52±0.18)μg;Triton法为(0.31±0.16)μg.A260/A280均大于1.7.说明改进高盐沉淀法提取线粒体DNA具有操作简单,产量多的优点.将改进高盐沉淀法提取线粒体DNA用于PCR扩增,测定出了线粒体DNAATPase8亚基基因序列,说明该法所提取mtDNA可用于mtDNA测序.讨论和结论线粒体在细胞凋亡,衰老及程序化死亡中发挥重要作用.已在多种疾病中发现mtDNA突变.对线粒体疾病的分子遗传机理的研究可以进一步阐明这些疾病的病因,并为治疗提供理论指导.胡义德、Tamura和Palva等用碱变性法提取了人血白细胞、心肌等组织中mtDNA;戴纪刚等建立的Triton法先除去细胞核,再分离提取胞浆中mtDNA.而高盐沉淀法通过SDS(十二烷基硫酸钠)破坏细胞膜、核膜,使蛋白质变性,从而游离出核酸,EDTA抑制细胞中DNA酶的活性,蛋白酶K进一步将蛋白质降解成小肽,加入饱和乙酸钠后,绝大部分线性大分子量DNA和蛋白质在SDS作用下变性形成沉淀,环状mtDNA仍为自然状态,通过高速离心,即可得到mtDNA.3种方法各有优缺点碱变性法操作时间较短,要求条件比较严格,不易重复;Triton法通过核质分离提取mtDNA操作时间短,但产量低,易降解.而高盐沉淀法操作简单,易重复,产量多,可依需用量扩大反应体系,使mtDNA质量得以容易控制.     

一种从琼脂糖凝胶中分离DNA的快速方法

本文介绍一种冷冻挤压离心法从琼脂糖凝胶中分离ＤＮＡ片段，适合从０．５％￣１．８％的凝胶中分离几十到几万ｂｐ的不同ＤＮＡ，ＤＮＡ回收率与凝胶浓度、ＤＮＡ大小有关，介于２５％￣８０％。本方法快速、简单、经济、重复性好，值得推广应用。     

从陈旧血液标本中提取DNA的方法

在临床诊断和研究中,常需要收集到足够的标本后,才开始进行DNA提取,此时需要保障标本的DNA提取完整和足够的量才不会对诊断和研究造成影响[1].     

一种拍摄幻灯片的新方法

随着计算机在各个领域里的应用，许多传统的生产、制作方式被淘汰，用于科技信息交流的幻灯片制作方法也将面临着一次大的改革，下面将介绍一种利用计算机显示屏拍摄幻灯片的新方法。１拍摄前关掉显示屏正面及斜上方的照明灯，保持室内光线暗淡。调整显示器，使屏面与地面...     

一种快速补液的新方法

快速补液的能力大小往往与创伤患者能否存活有关。作者研制了一种快速补液的新方法,该法应用一些常用技术,且只需一条管路就可输给病人。作者描述了一种输液装置,所提供的输液速度比通用的经皮装置约大4倍。该装置包括:①一根特制的14号法式导管,内径为4.5mm,容积2ml,长17.1 cm,该导管用下述材料制成:高密度和低密度聚乙烯、硫酸钡(供放射检查用)和二氧化钛。应用0.038英寸的导线在密封装置上引入导管,该导线能穿过一根16号针经皮引入中心静脉。②导管与特别设计的集液腔相连接,从5个不同的静脉输注袋同时流入集液腔,再经一条通路输入病人体内.