大鼠中缝大核下行投射纤维与三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑投 …

本研究分别用逆行和顺行追踪相结合及逆行追踪与免疫组织化学反应相结合 标记技术对中缝大核下行投射纤维和５－ＨＴ样阳性终末在三叉神经脊束核属侧亚核内的分布及其与向丘脑投射神经元之间的突触联系进行了观察。将ＨＲＰ注往后在脑腹后内侧核,证明ＨＲＰ逆标神经元主要见于三叉神经脊束核尾侧亚的Ⅰ,Ⅱ层;将顺行标记物ＰＨＡ－Ｌ注入中缝大核,证明ＰＨＡ－Ｌ顺标纤维和终末也主要见于尾侧亚核的Ⅰ层, 内仅有少量ＰＨＡ－Ｌ     

大鼠中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核通路的电镜研究

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴树突触。另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内其它神经元之间形成多种突触联系。本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行投射的终末与中缝大核内的神经元成分之间还形成比较复杂的突触联系，并对之进行了讨论。     

大鼠中脑导水管周围灰质—中缝大核—三叉神经脊束核尾侧亚核通…

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴－树突触，另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内它神经元之间形成多种触联系，本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅱ层内CB样、PV样阳性终末与向臂旁核投射神经元的突触联系

为了观察三叉神经脊束核尾侧亚核 层神经元与向臂旁核投射神经元的突触关系 ,选用 Calbindin D-2 8k和 Parvalbu-min作为标志物 ,采用 HRP逆行追踪与免疫组织化学技术相结合的双重反应技术对 层内的 Calbindin D-2 8k样和 Parvalbumin样阳性神经元与三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射神经元之间的突触联系进行了观察。HRP注入臂旁核后 ,逆标神经元主要位于同侧三叉尾侧亚核 层至 层。Calbindin D-2 8k和 Parvalbumin样阳性胞体、纤维和终末主要集中在 层内侧带。电镜下观察 ,此二者的阳性反应产物呈弥散分布 ;两者的阳性终末与 HRP逆标神经元的胞体和树突之间主要形成轴 -树突触 ,偶见轴 -体突触 ;Calbindin D-2 8k样阳性终末与 HRP逆标神经元的树突形成的非对称性突触占 83% ,Parvalbumin样阳性终末与 HRP逆标神经元的树突形成的对称性突触占 85 %。此外 ,还观察到参与突触小球组成的初级传入纤维终末与 HRP逆标神经元的树突形成突触联系。以上结果提示 :(1)三叉神经脊束核尾侧亚核 层的 Calbindin D-2 8k样或 Parvalbumin样阳性神经元可通过突触传递机制对三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神经元进行调控 ,影响外周伤害性信息向上位脑结构的传递 ;(2 )三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投?     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅱ层内CB样、PV样阳性终末与向臂旁核投身射神经元的突触联系

为了观察三叉神经脊束核尾亚核Ⅱ层神经元与向臂旁核投射神经元的突触关系,选用Calbindin D-28k和Parvalbu-min作为标志物,采用HRP逆行追踪与免疫组织化学技术相结合的双重反应技术对Ⅱ层内的Calbindin D-28k样和Parvalbumin要位于同侧三叉尾侧亚核Ⅰ屋至Ⅲ层。Calbindin D-28k和Parvalbumin样阳性胞体、纤维和终末主要集中在Ⅱ层内侧带,电镜下观察,此二者的阳性反应产物呈弥散分布;两者的阳性终末与HRP逆标神经元的胞体和树突之间主要形成轴－树突触,偶见轴体突触;CalbindinD-28k样阳性终末与HRP逆标神经元的树突形成的对称性触占85％。此外,还观察到参与突触小球组成的初级传入纤维终末与HRP逆标神经元的树突形成突触联系。以上结果显示：（1）三叉脊束核尾侧亚核Ⅱ层的Calbindin D-28k样或Parvalbumin样阳性神经元可通过突触机制对三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神经元进行调控,影响外周伤害性信息向上位脑结构的传递;（2）三叉神经脊束核尾侧亚核向臂旁核投射的神圣凶可能参与面口部伤害性信息的直接传递。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓向丘脑和臂旁核的谷氨酸能投射

本研究用荧光金逆行追踪与免疫荧光组比技术相结合的方法,对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓向丘脑和臂旁核的谷氨酸能投射进行了观察。磷酸激活的谷氨酸胺酶（PAG）是谷氨酸能神经元的特异性标识物。PAG样阳性胞体主要位于三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层,少量PAG样阳性胞体也见于它们的Ⅱ层外侧部及外侧网状核。将荧光金注入丘脑腹基底复合体后．荧光金逆标神经元主要见于对侧三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层及外侧网状核;将荧光金注入臂旁核后,荧光金逆标神经元也主要见于对侧三叉神经脊束核尾侧亚核和颈髓背角的Ⅰ层及外侧网状核。三叉神经脊束核尾侧亚核向丘脑腹基底复合体投射神经元的12．4％,向臂旁核投射神经元的13．2％呈PAG样阳性;颈髓背角浅层向丘脑瓜基底复合体投射神经元的12．7％,向臂旁核投射神经元的14．3％呈PAG样阳性。向丘脑腹基底复合体和臂旁核投射的PAG／荧光金双标神经元分别占三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内PAG样阳性神经元总数的13％和24．6％,向丘脑腹基底复合体和臂旁核投射的PAG／荧光金双标神经元分别占颈髓背角浅层内PAG样阳性神经元总数的11．6％和30．1％。外侧网状核内的部分PAG样阳性神经元也向丘脑腹基底复合体或臂旁核投射。Ⅰ层内的双?     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内向丘脑或臂旁核投射神经元与 …

用免疫荧光组织化学和三重染色技术观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内向丘脑或臂旁核投射的神经元和下行性５－ＨＴ样和初级传入的ＳＰ样终末之间的联系。将四甲基罗达明注入大鼠丘脑或臂旁核，在ＶＣ的Ⅰ，Ⅱ层内可见ＴＭＲ－ＤＡ逆标神经元，主要位于ＶＣⅠ层。在ＶＣ浅层内还可观察到大量的５－ＨＴ样和ＳＰ匀免疫荧光组织化学染色阳性纤维和终末，５－ＨＴ样阳性纤维有较多的膨体。     

猫丘脑腹后外侧核内皮质—丘脑纤维终末与丘脑—皮质投射神经元之间的突触连接

用ＣＢ－ＨＲＰ逆行追踪与顺行溃变相结合的方法，对描丘脑腹后外侧核内的来自大脑皮质体感Ⅰ区的皮质—丘脑纤维终末与丘脑—皮质投射神经元之间的突触连接进行了电镜观察。向猫大脑皮质体感Ⅰ区内注射ＣＢ－ＨＲＰ５ｈ后，电解损毁原注射部位，术后动物存活４ｄ。电镜下发现丘脑瓜后外侧核内存在５种突触连接方式；（１）溃变的轴突终未与ＨＲＰ标记神经元胞体形成轴－体突触；（２）溃变的轴突终末与ＨＲＰ标记的树突形成轴—树突触；（３）溃变的轴突终末和其它突触前成分共同与中央树突形成汇聚型的突触复合体；（４）溃变的轴突终末与未标记树突形成的轴—树突触；（５）正常的轴突终末与ＨＲＰ标记神经元形成对称型的轴—体突触。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核-臂旁核-丘脑间接联系的研究

目的 观察臂旁核（ＰＢＮ）内向丘脑腹后内侧核（ＶＰＭ）投射神经元和三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ向旁核投射纤维和终末的分布,以及两者之间的突触联系。方法 ＨＲＰ逆行追踪与生物素警聚糖胺（ＢＤＡ）顺行追踪相结合的双标技术,标记结果分别在光镜或电镜下观察。结果 将ＨＲＰ注入ＶＰＭ后,在光镜下可见ＨＲＰ逆标神经元主要位于同侧的臂旁外侧核,Ｋｏｌｌｉｋｅｒ－Ｆｕｓｓ（ＫＦ）核和臂旁内侧核。将ＢＤＡ注入Ｖｃ后     

大鼠脑干面口部运动神经元与5-HT样、SP样、L-ENK样、GABA样和Gly样阳性终末间的突触联系

为了观察５－羟色胺（５－ＨＴ）样、Ｐ物质（ＳＰ）样、亮氨酸－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）样、γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）样和甘氨酸（Ｇｌｙ）样阳性终末与脑干面口部运动核（三叉神经运动核、面神经核和舌下神经核）间的突触联系，用ＨＲＰ逆行追踪与免疫组织化学染色相结合的双标技术，在电镜下对５－ＨＴ样、ＳＰ样、Ｌ－ＥＮＫ样、ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末与ＨＲＰ逆标面口部运动神经元间的突触联系进行了观察。５－ＨＴ样、ＳＰ样、Ｌ－ＥＮＫ样、ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末在脑干面口部运动核内呈均匀分布，没有区域特异性。将ＨＲＰ注入面口部肌肉或相应的周围神经后，ＨＲＰ逆标神经元见于脑干运动核不同部位内支配相应肌肉的运动神经元。５－ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样阳性终末主要与ＨＲＰ逆标运动神经元的树突形成非对称性的轴－树突触；ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末则主要与ＨＲＰ逆标运动神经元的树突形成对称性的轴－树突触；偶见上述阳性轴突终末与ＨＲＰ逆标运动神经元的胞体形成轴－体突触。结果提示：主要来自脑干运动前神经元的５－ＨＴ样、ＳＰ样和Ｌ－ＥＮＫ样阳性终末及ＧＡＢＡ样和Ｇｌｙ样阳性终末可能分别对脑干运动神经元发挥兴奋性或抑制性调控作用     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内囊泡膜谷氨酸转运体样和P物质样阳性终末与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系

应用 GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体 (VGlu T1样和 DNPI样 )以及 SP样阳性纤维和终末与 Sindibis病毒转染表达绿色荧光蛋白阳性神经元之间的联系。目的在于为探索兴奋性神经递质和 SP参与面口部伤害性信息在 Vc浅层内的传递和调控提供形态学依据 ;并为今后更好地开展绿色荧光蛋白基因重组病毒标记法的研究探索新路。结果显示 :(1)绿色荧光蛋白基因重组 Sindibis病毒注入一侧 Vc浅层后 ,仅在同侧 Vc注射部位附近的 ～ 层内观察到 5～ 9个绿色荧光蛋白标记神经元 ,这些神经元的胞体为小型 (≤ 15μm) ,呈圆形、多角形或不规则形 ;(2 ) Vc浅层内均可见大量的 VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性纤维和终末 ,其中 VGlu T1样阳性纤维和终末主要密集分布于 层的内侧部和 层 , 层和 层外侧部较为稀疏 ;而 DNPI则主要密集分布于 层和 层 , 层相对地较为稀疏 ;SP样阳性纤维和终末主要分布于 层和 层 ;(3 ) VGlu T1样、DNPI样和 SP样阳性终扣分别聚集于绿色荧光蛋白标记神经元的胞体或树突周围 ,并与之形成密切接触。以上结果提示 ,Vc浅层内两种囊泡膜谷氨酸转运体样和 SP样神经终     

大鼠三叉神经脊束核Ⅱ尾侧亚核层内CB样、PV样阳性结构的分布及其突触联系

本研究用免疫组织化学方法观察了 Calbindin D-2 8k( CB)样和 Parvalbumin ( PV)样胞体、纤维和终末在三叉神经脊束核尾侧亚核 ( Vc) 层内的分布及它们的突触联系。在光镜下观察到 CB样和 PV样阳性胞体、纤维和终末在 II层内侧带 ( IIi)最为密集 ,PV样阳性神经元的胞体稍大 ,但数量少于 CB样阳性神经元。在电镜下观察到 CB样或 PV样阳性结构主要形成下列 4种突触联系 :( 1)阳性轴突终末与阳性或阴性轴突终末形成对称性轴 -轴突触和少量非对称性轴 -轴突触 ;( 2 )阳性轴突终末与阳性树突形成非对称性和对称性轴 -树突触 ;( 3 ) CB样阳性轴突终末与阴性树突主要形成非对称性轴 -树突触 ,PV样阳性轴突终末与阴性树突主要形成对称性轴 -树突触 ;( 4 )阴性轴突终末与阳性树突形成非对称性和对称性轴 -树突触。另外还可见到 CB样或PV样阳性或阴性树突、轴突及终末与 CB样、PV样阳性或阴性的初级传入纤维终末形成 型和 II型突触小球。 型突触小球数量较多 ,有典型的扇贝样初级传入纤维终末和不均一的小泡 ,线粒体少 ;II型突触小球的初级传入纤维终末粗大而清亮 ,外观不规则 ,有均匀一致的小泡和丰富的线粒体。根据上述结果可以推知在面口部伤害性信息的传递和调控过程中 ,Vc II层神经元发挥着重要的作用     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内向丘脑或臂旁核投射神经元与5-HT样和SP样终末间的联系:激光共聚焦显微镜研究(英文)

用免疫荧光组织化学三重染色技术观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Vc）浅层（Ⅰ层和Ⅱ层）内向丘脑或臂旁核投射的神经元与下行性5-HT样和初级传入的SP样终末之间的联系。将四甲基罗达明（TMR-DA）注入大鼠丘脑或臂旁核,在Vc的Ⅰ、Ⅱ层内可见TMR－DA逆标神经元,主要位于VcⅠ层。在Vc浅层内还可观察到大量的5－HT样和SP样免疫荧光组织化学染色阳性纤维和终未,5－HT样阳性纤维有较多的膨体。Vc内的这些向丘脑或臂旁核投射的TMR－DA逆标神经元与5－HT样和SP样阳性纤维和终末的分布区基本上重叠。在激光共聚焦显微镜下可以看到5－HT样和SP样阳性终末在Vc浅层内分别围绕TMR－DA逆标神经元的胞体和树突的周围并与之形成密切接触;并且观察到5－HT样和SP样阳性终末同时与TMR－DA逆标神经无形成直接的密切接触。提示Vc浅层向丘脑和臂旁核投射的神经元不仅接受外周初级传入的伤害性信息,还接受下行性5-HT能投射纤维的调控。     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内SP受体阳性神经元、FOS阳性神经元及初级传入C纤维和终末分布的研究

用免疫组织化学和组织化学方法对大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核（Ｖｃ）内ＳＰ受体阳性神经元、ＦＯＳ阳性神经元及初级传入Ｃ纤维和终末的分布及相互之间的关系进行了观察。ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突主要分布在此核的Ⅰ、Ⅱ层，Ⅰ层多于Ⅱ层；１０％福尔马林刺激大鼠口周区后诱导的ＦＯＳ阳性神经元分布于此核的Ⅰ～Ⅳ层及其内侧的网状结构，但主要集中在Ⅰ、Ⅱ层，Ⅱ层多于Ⅰ层；ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤维及其终末也密集地分布于此核的Ⅰ、Ⅱ层，且Ⅱ层多于Ⅰ层。多重反应的结果显示：在Ｖｃ的Ⅱ层和Ⅰ层内，ＳＰ受体阳性神经元的胞体及树突和ＦＯＳ阳性神经元胞体的周围可见许多ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维及终末；部分ＳＰ受体阳性神经元也呈ＦＯＳ阳性，少数ＳＰ受体和ＦＯＳ的双重阳性神经元周围也有ＢＳＩ－Ｂ４标记的纤维和终末。以上结果说明：（１）传递面口部痛信号的Ｃ纤维主要终止在尾侧亚核的Ⅰ、Ⅱ层，与ＳＰ受体阳性神经元的分布区重叠，提示这些Ｃ纤维可能含ＳＰ；（２）参与西口部痛信息传递的ＦＯＳ阳性神经元主要分布于Ｖｃ的Ⅱ层，它们与初级传入Ｃ纤维终末的分布区重叠，其中的部分ＰＯＳ阳性神经元也呈ＳＰ受体阳性，从而进一步地证明了ＢＳＩ－Ｂ４标记的初级传入Ｃ纤?     

大鼠丘脑前核内海马下托复合体谷氨酸能传入终末与皮质投射神经元的突触联系

目的 探讨大鼠丘脑前核-海马下托复合体神经元环路的突触结构及谷氨酸分布特征.方法 应用HRP束路追踪结合包埋后胶体金免疫电镜技术.结果 在丘脑前核内,可见HRP顺行标记的海马下托复合体传入轴突终末,终末多为卵圆形,内含圆形透亮突触小泡和数个线粒体.其做为突触前成分与HRP标记的树突或非HRP标记的树突形成非对称性突触.在谷氨酸胶体金免疫反应切片上,胶体金颗粒标记胞体、树突、轴突终末等.HRP标记的轴突终末和一些非HRP标记的与突触后成分形成非对称性突触的轴突终末(Gray Ⅰ型)内,胶体金颗粒密度明显大于背景(胞体、树突、Gray Ⅱ型轴突终末等)的胶体金颗粒密度.其平均胶体金颗粒密度为突触后树突的3倍多,为对称性轴突终末(Gray Ⅱ型)的6倍多.在两张邻近的连续切片,γ-氨基丁酸(GABA)胶体金免疫反应切片上,GABA胶体金颗粒浓重标记Gray Ⅱ型轴突终末,背景标记极少;而非对称性轴突终末(Gray Ⅰ型)胶体金颗粒标记极弱.谷氨酸胶体金免疫反应切片上,Gray Ⅱ型轴突终末胶体金颗粒标记极弱.GABA阳性轴突终末与HRP标记的树突形成对称性突触,在同一树突上可见GABA能轴突终末形成的对称性突触和其他轴突终末形成的非对称性突触.结论 丘脑前核内来自海马下托复合体投射神经元的轴突终末是谷氨酸能的;来自海马下托复合体皮质投射神经元轴突终末,在丘脑前核与投射至海马下托皮质的神经元树突形成非对称性轴-树突触.     

大鼠臂旁核内接受孤束核内脏传入之神经元同时接受中央杏仁核的反馈调节──溃变、HRP法结合包埋后免疫电镜研究

为研究来自孤束核的内脏传导信息在臂旁核水平是否接受中央杏仁核的反馈调节及其递质性质，以及孤束核—臂旁核—中央杏仁核传导通路中，在臂旁核水平是否接受ＧＡＢＡ的调节，本文将ＨＲＰ注入中央杏仁核进行顺、逆行标记，同时将兴奋性氨基酸毒素海人酸注入孤束核进行损毁，观实其顺行溃变终末，取外侧臂旁核超薄切片后结合抗ＧＡＢＡ的免疫电镜染色，观察发现有下列几种标记；（１）顺行溃变终末，所有的都与臂旁核神经元形成非对称性突触；（２）ＨＲＰ标记终末有两类：第一类和臂旁核神经元形成对称性突触，占ＨＲＰ标记终末总数的８０％以上，第二类与臂旁核神经元形成非对称性突触，另外有大量的ＨＲＰ标记的胞体和树突；（３）胶体金标记的ＧＡＢＡ阳性终末，皆与突触后结构形成对称性突触；（４）ＧＡＢＡ／ＨＲＰ双标记终末，具有ＧＡＢＡ免疫阳性终末和第一类ＨＲＰ标记终末的共同特征。上述几种标记在臂旁核内有以下几种关系：（１）溃变终末和ＧＡＢＡ阳性终末与同一个ＨＲＰ标记或非标记的突形成轴－树突触；（２）溃变终末和第一类ＨＲＰ标记终末共同终止于同一非标记讨突；（３）溃变终末与ＨＲＰ标记树突或胞位形成非对称性突触；（４）ＧＡＢＡ／ＨＲＰ双标记终末与非标记树突或胞体?