雾化吸入碱性成纤维细胞生长因子对血管性痴呆患者血管内皮生长因子的影响

目的:研究雾化吸入碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)对血管性痴呆患者血清血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法:采用临床痴呆评定量表(CDR)筛选出轻度血管性痴呆(VD)患者60例,分成轻度VD治疗组34例,轻度VD对照组26例,另设正常对照组30例,VD对照组患者常规抗动脉硬化、抗血小板聚集及抗痴呆治疗,VD治疗组在其对照组常规治疗基础上给予b FGF 4800 AU/d加入生理盐水10 m L氧气雾化吸入,每次10 min,1次/d,连续14 d。比较2组VD患者治疗前、治疗后14、30 d血清VEGF的表达。结果:2组VD患者治疗前血清VEGF水平明显低于正常对照组,VD治疗组患者治疗后14、30 d血清VEGF水平逐渐升高,与VD对照组比较有统计学意义(P0.01)。结论:b FGF通过鼻黏膜进入中枢神经系统,促进VD患者血清VEGF的表达。     

血管内皮祖细胞促进糖尿病小鼠皮肤创面血管化及愈合的研究

目的:探讨血管内皮祖细胞(EPC)在促进糖尿病小鼠皮肤创面血管化及愈合中的作用。方法:选取21只昆明鼠,随机选取1只行体外分离、培养、鉴定血管EPC,其余20只昆明鼠均建立糖尿病动物模型,依据随机数字表法分为内皮组和对照组,每组10只,对照组给予裸处理,内皮组给予种植有EPC的聚乳酸聚乙醇酸(PLGA)支架处理。结果:处理后7、15 d在创面组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)水平和微血管密度(MVD)、创面愈合率方面,2组明显高于处理后当日,且内皮组明显高于对照组(P 0.05或P 0.01)。结论:血管EPC可有效促进糖尿病小鼠皮肤创面血管化及有利于提高创面的愈合效果,其机制可能与促进创面中VEGF、b FGF等因子表达有关。     

胶原诱导关节炎大鼠滑膜中血管内皮生长因子和内皮抑素的表达及意义

目的观察血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、内皮抑素（endostatin）在胶原诱导关节炎（CIA）大鼠不同时期滑膜中的蛋白表达，通过CD34给血管密度计数．明确生长因子在血管翳形成中的作用机制。方法建立CIA大鼠模型，测量关节体积，计算关节病理积分，并用免疫组织化学染色检测VEGF、bFGF、endostatin和CD34的蛋白表达。结果模型组大鼠滑膜VEGF和bFGF表达明显高于正常组大鼠（P〈0．01），并且二者表达存在相关性（P〈0．01），内皮抑素表达模型组与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论滑膜中生长因子表达失衡在关节炎的形成及发展过程中起重要作用，促血管生长因子表达升高是导致滑膜新生血管形成的主要原因。     

Ad-VEGF165转基因成纤维细胞修饰的再生丝素膜诱导血管形成效应及其分子机制研究

目的研究经腺病毒介导的人血管内皮生长因子165（VEGF165）转基因细胞修饰的再生丝素膜（SF）诱导血管形成活性及其分子机制。方法将WI-38人胚肺成纤维细胞分别培养在有（SFC组）或无（PBS组）再生丝素膜的24孔培养板上,24h后用带绿色荧光蛋白（GFP）基因的空载体腺病毒Ad-GFP（Ad-GFP组/SFCG组）或含有VEGF165目的基因的重组腺病毒Ad-VEGF165（Ad-VEGF165组/SFCV组）感染培养细胞。通过形态学观察和ELISA法检测各组细胞培养上清液中VEGF165目的基因表达及其对细胞自分泌的血管生成素-1（Ang-1）、碱性成纤维细胞生长因子（FGF2）、血小板衍化生长因子（PDGF）表达的影响,并用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）和在兔眼角膜上进行新生血管诱导实验。结果形态学观察发现WI-38细胞在再生丝素膜上不仅贴壁生长良好,而且易被Ad-GFP、Ad-VEGF165腺病毒感染,呈现强荧光。再生丝素膜利于Ad-VEGF165组中VEGF165目的基因在细胞中的高表达（P〈0.05）,而且还可使细胞自分泌的Ang-1表达水平明显升高（P〈0.05）,同时可维持细胞自分泌的FGF2及PDGF稳定表达。Ad-VEGF165组（SFCV组）具有促进CAM上血管生长活性和诱导兔眼角膜组织新生血管生成作用。结论 Ad-VEGF165感染WI-38成纤维细胞所修饰的再生丝素膜,具有诱导血管新生的功能。     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子β_1表达与心肌肥大的研究

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和转化生长因子β1 (TGFβ1 )在人体超负荷性心肌肥厚发生机制中的作用。方法 :用免疫组织化学及原位杂交技术检测 32例 (左、右室心肌各 16例 )肥大心肌组织中b FGF和 TGFβ1 的表达。结果 :无论是压力还是容量超负荷都可使心肌细胞 b FGF、TGFβ1 表达增加 (P <0 .0 5 ,<0 .0 1)。结论 :b FGF和 TGFβ1 可能是介导临床超负荷性心肌肥厚发生的因素之一。     

心肌缺血的分子再血管化

应用促血管生成因子（AF）的蛋白多肽或表达基因治疗心肌缺血的分子再血管化技术成为人们关注的热点。AF包括一大类蛋白多肽,其中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和成纤维细胞生长因子（FGF）的研究最为深入,心肌缺血时VEGF和FGF及其受体表达增加,应用外源VEGF或FGF可以促进侧支和新生血管生成、改善血液灌注及减少缺血面积。心肌缺血的基因治疗是将AF的表达基因转入心脏,在局部产生表达蛋白发挥作用,一系列动物实验证实了其可行性。尽管目前仍有许多问题有待解决,但分子再血管化为终末期冠心病治疗提供了新的希望。     

丙戊酸钠对Kasumi-1细胞VEGF、bFGF表达的影响

目的探讨丙戊酸钠（VPA）对白血病细胞株Kasumi-1细胞生长及血管新生的作用机制。方法不同浓度VPA处理Kasumi-1细胞不同时间,RT-PCR及Western Blot法检测Kasumi-1细胞血管内皮细胞生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA及蛋白水平。结果VPA作用后VEGF mRNA及蛋白表达下调,bFGF mRNA表达下调,均呈剂量依赖性。结论VPA可通过下调VEGF及bFGF表达,抑制血管新生,进而抑制白血病细胞增殖。     

大肠癌患者垂体肿瘤转化基因、碱性成纤维细胞生长因子及血管内皮生长因子-C水平检测意义

目的通过检测大肠癌患者体内垂体肿瘤转化基因(PTTG)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及血管内皮生长因子(VEGF)-C的表达水平,探讨其在大肠癌发生发展过程中的作用及相互间关系。方法接受手术治疗的大肠癌(肿瘤组)患者78例的大肠腺癌组织标本。另外收集经病理证实是正常黏膜的组织标本18例作为正常组。比较两组PTTG、b FGF以及VEGF-C的阳性表达率以及上述三种因子各自与大肠癌临床病理分期的关系。结果肿瘤组PTTG、b FGF以及VEGF-C阳性细胞表达率均明显比正常组高(P0.01)。PTTG、b FGF以及VEGF-C表达在不同的分化程度、性别以及年龄的组别差异无统计学意义(P0.05);而在浸润深度、淋巴结转移情况以及Dukes分期比较均有统计学差异P0.05)。结论PTTG、b FGF和VEGF-C在老年大肠癌的发生和发展过程中发挥着重要的作用,其中促淋巴管以及血管生成的作用在大肠癌发生、发展以及转移、侵袭中均起了重要的作用,已是治疗肿瘤的一个新靶点。     

VEGF、bFGF在再生障碍性贫血患者骨髓中的表达及意义

目的 探讨骨髓微环境-骨髓基质在再生障碍性贫血（AA）发病机制中的作用。方法采用免疫组化方法检测32例AA（AA组）治疗前后（缓解后）及10例正常人（对照组）骨髓组织中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达。结果AA组治疗前骨髓组织中VEGF、bFGF表达水平明显低于对照组,缓解后VEGF、bFGF表达水平较治疗前明显提高（P均〈0．001）。结论骨髓基质损伤是AA的发病机制之一,此为从治疗提供了新思路。     

血清VEGF水平与冠状动脉病变程度的临床研究

冠心病严重威胁着人类的健康,国内外研究证实血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）有强烈的促血管新生作用,能促进缺血心肌侧枝血管明显增加,在冠心病的治疗方面有广阔的临床应用前景。     

沙利度胺对人脐静脉内皮细胞增殖和血管生成的影响

目的 探讨沙利度胺治疗血管发育不良所致消化道出血的机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞至对数生长期,分为空白对照组、溶剂对照组(二甲基亚砜)和不同浓度(10、20、40、60、80、100μg/ml)沙利度胺组,根据加或不加成纤维细胞生长因子(bFGF,10 ng/ml),共分为16组.刺激72 h后,MTT法检测细胞增殖情况,酶联免疫吸附法和实时定量PCR法测定血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达.结果 加或不加bFGF刺激,中、高浓度(≥40/μg/ml)沙利度胺均能抑制人脐静脉内皮细胞增殖.未加bFGF刺激时.20μg/ml沙利度胺能明显抑制VEGF表达.加bFGF刺激时,10 μg/ml沙利度胺即能明显抑制VEGF表达.未检出TNF-α表达.结论 体外实验中,沙利度胺能抑制人脐静脉内皮细胞增殖和VEGF表达,从而抑制血管生成,达到治疗血管发育不良所致消化道出血的目的 .     

参芪止血胶囊对大鼠增生型子宫内膜VEGF和bFGF表达的影响

目的观察参芪止血胶囊(SQZC)对大鼠增生型子宫内膜中血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,探讨其治疗功能性子宫出血病的作用机制。方法 SD大鼠灌胃给予已烯雌酚1mg/kg,每天1次,连续10 d,建立大鼠子宫内膜增生模型。模型大鼠随机分为SQZC 90、180、360 mg/kg的低、中、高剂量组和模型对照组,连续给药14 d。采用免疫组化SP法检测各组大鼠子宫内膜中VEGF和bFGF的表达水平。结果模型组大鼠子宫内膜中VEGF和bFGF的表达水平均显著高于正常对照组(P<0.05)。SQZC中、高剂量组VEGF和bFGF的表达水平显著低于模型对照组(P<0.05)。结论 SQZC可以调理和保护子宫内膜,治疗功血的作用与抑制子宫内膜中VEGF和bFGF因子的过度表达有关。     

血管内皮、碱性成纤维细胞生长因子表达与非小细胞肺癌患者生存期的关系

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与患者生存期的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测96例NSCLC组织中VEGF、bFGF蛋白水平的表达，并探讨二者表达与患者生存期的关系。结果 NSCLC中VEGF、bFGF表达阳性率分别为51．0％(49／96)和58．3％(56／96)，二者具有相关性(P=0．041)，与患者生存期之间无统计学意义。结论 VEGF、bFGF在NSCLC血管形成中起重要作用，但不是NSCLC独立的预后因素。     

低氧对培养心肌细胞表达和分泌血管内皮生长因子的影响

目的　探讨低氧对心肌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法　采用Kuwabara等并加以改进的方法对心肌细胞进行低氧培养 ,并于低氧培养的即刻、2 4、4 8h分别测定培养液中的氧分压。使用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫组织化学和酶联免疫吸附测定 (ELISA)法分别检测低氧培养的不同时间点VEGFmRNA及VEGF蛋白的表达和分泌。结果　与常规培养相比 ,简易低氧培养培养液氧分压降至 5 8mmHg ,并于 3个时间点保持这一水平 (P >0 .0 5 )。从mRNA水平和蛋白水平我们检测到VEGF表达的增加 ,于低氧培养 2 4h达峰值 ,培养液中的峰值浓度为 (72 4 .6 7± 5 6 .87)pg ml。结论　低氧促进心肌细胞表达VEGFmRNA、VEGF蛋白和分泌该蛋白     

养心通脉方含药血清预处理内皮祖细胞对急性心肌梗死兔心肌bFGF、VEGF水平的影响

目的观察养心通脉方含药血清预处理内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)兔心肌血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的影响。方法从35只雄性SPF级兔中随机选取25只建立急性心肌梗死兔模型,随机分为模型组、中药EPCs心肌注射组、中药EPCs耳缘静脉注射组、EPCs心肌注射组、EPCs耳缘静脉注射组,每组5只,另设正常组和假手术组,各5只,通过移植干预后14 d取梗死心肌区及缺血心肌区组织,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测bFGF、VEGF的mRNA表达,蛋白质印迹法(Western Blot)检测bFGF、VEGF蛋白表达。结果在梗死心肌区及缺血心肌区,中药EPCs心肌注射组和中药EPCs耳缘静脉注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达明显高于假手术组、模型组、EPCs心肌注射组、EPCs耳缘静脉注射组,差异均有统计学意义(P<0.05),但中药EPCs心肌注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达与中药EPCs耳缘静脉注射组比较差异均无统计学意义(P>0.05),EPCs心肌注射组bFGF、VEGF的mRNA及蛋白表达与EPCs耳缘静脉注射组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论养心通脉方含药血清预处理EPCs,能够明显增加损伤心肌bFGF、VEGF表达,但耳缘静脉注射与心肌注射疗效相当。     

Role of vascular endothelial growth factor in angiodysplasia: an interventional study with thalidomide

Background and Aim: The pathogenesis of angiodysplasia is still not fully understood and effective therapy is not available. Thalidomide was reported to be effective in the treatment of angiodysplasia, but the mechanisms underlying its activity are, as yet, unknown. We aimed to investigate the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) in angiodysplasia tissues, and the role of hypoxia‐inducible factor‐1α (HIF‐1α) and basic fibroblast growth factor (bFGF) on VEGF expression in human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). Additionally, we aimed to study the role of thalidomide in these parameters. Methods: Immunohistochemistry was performed to visualize VEGF in angiodysplasia lesions. HUVEC were incubated under hypoxic conditions or in the presence of bFGF. Effects of exposure to thalidomide were studied. Cell growth was assessed in methylthiazolyte‐trazolium assays. Enzyme‐linked immunosorbent assays and real‐time polymerase chain reaction were performed to assess the expression of VEGF at protein and mRNA levels. Western blot was performed to detect the expression of HIF‐1α under hypoxic conditions. Results: VEGF was strongly expressed in 75% of patients with angiodysplasia lesions, as compared to expression in patients without angiodysplasia lesions. VEGF was also induced in HUVEC under hypoxic conditions (P < 0.05). bFGF was found to stimulate the proliferation of HUVEC and enhance the expression of VEGF. Thalidomide suppressed bFGF‐induced proliferation significantly and decreased VEGF expression, both at the protein and mRNA levels. Thalidomide also inhibited HIF‐1α in a dose‐dependent manner (P < 0.05). Conclusions: VEGF may play an important role in the pathogenesis of angiodysplasia. Thalidomide can suppress VEGF, either induced by HIF‐1α or bFGF.     

雷公藤甲素对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管新生的调节作用

目的 观察雷公藤甲素(TP)对血管新生的影响,探讨TP治疗关节炎的作用机制.方法 建立胶原诱导关节炎(CIA)大鼠模型,常规苏木素-伊红(HE)染色,测量关节体积,计算关节炎指数和病理积分,分别检测滑膜和血清中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和内皮抑素(endostatin)的蛋白表达,并通过CD34给滑膜血管密度计数(MVD).结果 CIA大鼠滑膜和血清中VEGF、bFGF及滑膜MVD明显高于正常组(X2分别为65.3、31.6,q=9.2,三者P＜0.01),endostatin的表达与正常组差异无统计学意义(X2=0.8,P＞0.05).TP治疗后,滑膜和血清中VEGF、bFGF、滑膜MVD均下降(X2分别为19.7、6.0,q=6.5,三者P＜0.01),而endostatin表达却升高(X2=3.9,P＜O.05),甲氨蝶呤(MTX)则主要以endostatin表达升高为主(X2=17.9,P＜0.01).结论 生长因子的表达失衡可能在关节炎的形成及发展过程中起重要作用,TP能够调整生长因子的失衡状态而发挥治疗作用.     

卡托普利对兔动脉粥样硬化斑块内碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的影响

目的　观察碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和血管内皮生长因子 (VEGF)与动脉粥样硬化 (AS)的关系 ,以及卡托普利 (captopril)对 AS和 b FGF、VEGF表达的影响。方法　 36只兔随机分为 3组 :空白对照组 ( 组 )动物喂饲普通颗粒饲料 ;实验对照组 ( 组 )动物喂饲含 1g/d胆固醇和 3%猪油的饲料 ;实验组 ( 组 )喂饲含 1g/d胆固醇和 3%猪油的饲料 ,同时给予卡托普利 10 mg.kg- 1 .d- 1 。于 12周后处死动物 ,取出主动脉做 b FGF和 VEGF免疫组化定性和定量观察。结果　光镜下 组和 组有明显 AS形成。定量研究 :与 I组相比 , 组和 组 b FGF在主动脉内中膜的表达面积 (μm2 ) (2 6 999.6 8± 9931.82 ,2 4 0 75 .6 2± 2 4 787.6 8对 1386 8.14± 3180 .13)、密度 (5 .4 3±1.6 5 ,3.33± 1.15对 2 .0 7± 0 .78)和密度指数 (15 7886 .4 6± 113340 .0 5 ,73348.6 0± 4 6 0 4 8.81对 2 92 90 .78±15 0 16 .5 8)均有非常显著性增加 (P<0 .0 1) ,但 组与 组相比 ,其 b FGF表达的面积、密度和密度指数均有非常显著性降低 (P<0 .0 1)。与 组相比 , 组和 组 VEGF在主动脉内中膜的表达面积 (30 4 2 5 .4 3± 11114 .14 ,2 55 2 9.31± 10 30 5 .88对 1386 8.14± 3180 .13)、密度 (6 .10± 2 .0 9,6 .10± 2 .     

高糖环境下VEGF与PEDF在GMC中表达及rAAV-AS基因的干预作用

目的 探讨高糖对大鼠肾小球系膜细胞(GMC)色素上皮细胞衍生因子(PEDF) 和血管内皮生长因子(VEGF)表达影响以及腺相关病毒介导血管抑素(rAAV-AS)基因的干预作用.方法 将培养的大鼠GMC株分为6组,高糖作为刺激因素,rAAV-AS 作为干预因素.分别设低糖组、高糖组、高糖加腺相关病毒(rAAV)组及高糖加rAAV-AS 治疗组.用免疫细胞化学及ELISA法测定各组系膜细胞PEDF 以及VEGF蛋白表达.结果 高糖可下调GMC中PEDF蛋白的表达,上调GMC中VEGF蛋白的表达.rAAV-AS可逆转高糖导致GMC的VEGF蛋白表达的增加及PEDF蛋白表达的降低.结论 rAAV-AS可以一定程度改善高糖诱导的VEGF和PEDF表达失衡而发挥对糖尿病肾病(DN)的保护作用.     

In vitro and in vivo effects of bone marrow stem cells on cardiac structure and function

It is hypothesized that the protection of bone marrow stem cells (BMSCs) on ischemic myocardium might be related to the anti-apoptotic effect via paracrine mechanisms. In this study, a wide array of cytokines including vascular endothelial growth factor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF), stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) and insulin growth factor-1 (IGF-1) were detected in the BMSCs cultured medium by ELISA. Myocyte apoptosis was assayed by DNA fragmentation and annexin-V staining. Myocardial infarction model was produced by ligation of mouse left anterior descending coronary artery (LAD). Before LAD ligation, mice were myoablated by irradiation and transplanted with bone marrow cells from transgenic mice expressing green fluorescent protein (GFP). After LAD ligation, animals were administered stem cell factor (SCF, 200 mug/day/kg, i.p.) or saline for 6 days. Animals were sacrificed at 4 weeks after SCF treatment. Apoptotic cardiomyocytes were analyzed by TUNEL. Myocardial function was analyzed by echocardiography and pressure-volume system. Bcl-2 protein was analyzed by Western blotting. Our results showed that cultured BMSCs released VEGF, bFGF, SDF-1 and IGF-1. Hypoxia-induced cell apoptosis was diminished in cardiomyocytes co-cultured with BMSCs. Smaller LV dimension and increased LV ejection fraction were seen in SCF-treated animals. SCF significantly reduced cardiomyocytes apoptosis within peri-infarct area and increased up-regulation expression of Bcl-2 in ischemic area. Moreover, conditioned medium from cultured BMSCs also induced up-regulation of Bcl-2 protein in cardiomyocytes. It is concluded that paracrine mediators secreted by BMSCs might be involved in early repair of ischemic heart by preventing cardiomyocytes apoptosis and improving cardiac function.