弓形虫感染鼠尿中循环抗原的检测

用快速ELISA检测弓形虫感染鼠的尿液，在轻、中、重三个感染组分别在感染后第5、4、3d检测到弓形虫循环抗原。实验结果显示弓形虫循环抗原的浓度与感染天数相平行，这在国内为首次报道。用免疫印迹法分析感染小鼠尿中形虫循环抗原，其特异区带为75、67、55、43、30、28、22kDa。     

弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原的检测

目的：探索弓形虫感染早期诊断方法。方法：用快速ＥＬＩＳＡ检测弓形虫感染鼠血清中弓形虫循环抗原。结果：在轻、中、重３个感染组,分别于感染后ｄ４、ｄ４及ｄ３检测到弓形虫循环抗原。结论：感染虫体数量越多则弓形虫循环抗原测出时间越早,ＯＤ值亦越高。检测弓形虫循环抗原具有早期诊断价值。     

弓形虫感染的循环抗原检测的研究

本文首次报道应用竞争抑制酶联免疫吸附试验(I-ELISA)观察到人工感染弓形虫兔血清循环抗原的消长规律。在感染后1d即可测出循环抗原(CA),4d后CA水平升高,10—13d达高峰,然后迅速下降,感染60d后测不到。提示CA的检测对弓形虫的活动性感染具有较好的诊断价值。结果还表明I-ELISA是一种敏感、特异性高、简便而快速的检测CA的方法。     

脑脊液中弓形虫循环抗原的组分分析

本文在国内首先应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）阳性脑脊液标本进行抗原组分分析，并用正常人脑脊液、ＲＨ株弓形虫速殖子的代谢抗原（ＭＡ）及细胞质抗原（ＣＡ）作为平行对照。结果显示，脑脊液及ＲＨ株ＭＡ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白区带范围均在１４－１０８ｋＤ和３８－６７ｋＤ处有明显的电泳区带。ＥＬＩＢ反庆后均在５０ｋＤ处出现明显的反应区带。从而证实，脑脊液标本中的ＣＡｇ为弓形虫虫体在宿主     

脑脊液中弓形虫循环抗原的组分分析

本文在国内首先应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＥＬＩＢ对弓形虫循环抗原（ＣＡｇ）阳性脑脊液标本进行抗原组分分析，并用正常人脑脊液、ＲＨ株弓形虫速殖子的代谢抗原（ＭＡ）及细胞质抗原（ＣＡ）作为平行对照。结果显示，脑脊液及ＲＨ株ＭＡ的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ蛋白区带范围均在１４～１０８ｋＤ处，在３８～６７ｋＤ处有明显的电泳区带。ＥＬＩＢ反应后均在５０ｋＤ处出现明显的反应区带。从而证实，脑脊液标本中的ＣＡｇ为弓形虫虫体在宿主体内增殖的代谢及裂解产物。同时提示，酶联免疫印迹技术（ＥＬＩＢ）可代替弓形虫的病原学检查，以作为弓形虫病急性、活动性感染的确诊指标。     

Dot-ELISA检测弓形虫循环抗原的方法学研究

本文对 Dot-ELISA 检测弓形虫循环抗原(CAg)的方法学进行了研究。结果显示,其最佳试验条件为:纯化的特异抗体1;100稀释,与被检样本在37℃孵育2h;第二抗体-HRP 1:2000稀释,置室温30min;DAB 量5mg/10ml、H_2O_22μl。在该条件下,检测 TBS、正常的人血清、小鼠血清、猪血清、人尿和脑脊液内弓形虫抗原量,最低检出阈值依次是3.84pg/ml、96pg/ml、0.48ng/ml、0.48ng/ml、12ng/ml、12ng/ml,并呈良好的重复性。以5×10~3形虫 RH 株速殖子感染小鼠,d_3呈弱阳性,d_4明显阳性。用该条件检测人恶性疟原虫、旋毛虫和猪囊虫抗原,未呈现交叉反应。     

应用免疫-PCR检测弓形虫循环抗原的实验研究

目的　控索弓形虫感染早期诊断方法。方法　用链亲素将生物素化的二抗和生物素化的 DNA偶联起来 ,通过PCR扩增标记 DNA检测固定的抗原 ,建立了弓形虫循环抗原免疫— PCR检测技术 ,用该技术和 EL ISA法平行检测系列稀释的弓形虫的感染鼠阳性血清中的 CAg以及实验感染鼠血清中 CAg的动态变化 ,对比研究二者之间的敏感性。结果　免疫—PCR法检测弓形虫 CAg吴阳性的血清最高稀释度为 1∶ 10 0 0 ,EL ISA法检测弓形虫 CAg呈阳性的血清最高稀释度为 1∶ 5 ,免疫— PCR最早在鼠感染弓形虫后第 3天测到 CAg,EL ISA最早在鼠感染弓形虫后第 5天测到 CAg。结论　免疫— PCR是一种特异性强、敏感性高的弓形虫 CAg检测方法 ,敏感性较 EL ISA法提高了 2 0 0倍 ,免疫— PCR检出阳性结果时间早 ,为弓形虫病早期诊断提供了科学依据     

双抗体ELISA检测人血清弓形虫循环抗原的初步研究

应用抗弓形虫抗体酶联免疫吸附试验夹心法(双抗体ELISA),检测不同人群血清循环抗原(CAg)。肉类加工人员、饮食服务人员的阳性率分别为9.3%(15/161)及3.9%(3/76),献血员未检出阳性者(0/72),肉类加工人员与献血员的CAg阳性率间差异非常显著(P<0.01),提示弓形虫感染与接触肉类食品似有密切关系。该法检测抗核抗体、类风湿因子、抗链球菌溶血素“O”等阳性者血清93份,均为阴性。方法的特异性试验的抑制率>70%;重现性试验的变异系数<10%。结果表明,该法具有较高的敏感性和特异性,认为可作为人体弓形虫急性感染的诊断方法。     

循环抗原阳性对弓形虫病诊断价值的研究

应用双抗体ＥＬＩＳＡ检测弓形虫循环抗原阳性者的血液及组织液样本４１例，进行病原学对照检查，结果２９例检获弓形虫，两者的符合率达７０．７％。不同样本中的虫体检率依次为羊水３／３，乳汁１／１，脑脊液２１／３０，血清３／６。另外，对２９例疑似中枢神经系统弓形虫病患乾，取 脊液进行不同免疫学指标检测。     

小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体

目的： 探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法： 将日本血吸虫病患者尿液用１５％ 三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ小鼠制备单克隆抗体。结果： 建立了 ２ 株分泌抗人尿日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株２ Ｅ６ 及２ Ｂ１１,两者免疫球蛋白鉴定均属 Ｉｇ Ｍ 类, Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ测得单抗对尿液循环抗原（ Ｉ Ｈ Ｕ Ｃ Ａｇ）,效价分别为２．５６×１０５ 和６．４×１０４ 。琼脂双扩散试验显示２ 株单抗与正常人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线,而２ Ｅ６ 与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用２ Ｂ１１ 和２ Ｅ６ 腹水为捕捉抗体, Ｈ Ｒ Ｐ Ｈ１１ 为酶标抗体检测 １２ 例急性血吸虫病患者尿液,依次为６ 例和３ 例阳性,８ 例正常人尿液均为阴性。结论： 用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠制备单克隆抗体用于检测日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。     

血清、尿中日本血吸虫循环抗原水平动态的实验研究

本研究采用ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的方法,平行地对日本血吸虫病家兔血清和尿液中的日本血吸虫肠相关趋阴极抗原的水平动态进行检测。结果显示,家兔在感染血吸虫第４周后尿液中有２８．６％（２／７）可检出ＣＡｇ,１０至１２周达到高峰７１．４％（５／７）;血清中ＣＡｇ于感染后第２周可检出,８至１０周达到高峰,以后缓慢下降。提示家兔在感染１０周左右可能是尿液中ＣＡｇ检出的理想时期。     

黑热病患者尿中循环抗原的检测及识别抗原分子的研究

“致死性疾病”在苏丹蔓延。我国黑热病亦回升。急迫需要建立新的、对病人无损伤的诊断方法。作者等已建立用血清ＭｃＡｂ－ＡＳＴ诊断黑热病的方法。本文报道用同法检测病人尿中循环抗原的结果。对１７例确诊黑热病患者尿液的检测，１６例呈阳性反应，阳性率９４％。正常人对照３０例均呈阴性结果。１５／１５例黑热病息者血清ＭｃＡｂ－ＡＳＴ显阳性。同一病倒尿样、血清反应的阳性程度相近。取尿液较之任何采样途经都更为简便，特别是对婴幼儿发病率高的山丘疫区，更为适合。免疫印迹法显示识别出二条特异区带。其分子量分别为４５ｋＤ和２２ｋＤ。进一步鉴定出黑热病患者尿中的Ｌ．ｄ抗原。系国内外首次报道。     

检测日本血吸虫感染兔尿中循环抗原的研究

目的：建立检测尿液中血吸虫循环抗原的方法。方法：从感染家兔尿中提取血吸虫循环抗原,并用所提取的抗原制备和筛选抗该抗原的特异性单克隆抗体。用单抗二抗一步法酶联免疫试验检测感染家兔中的日本血吸虫循环抗原。结果：２２只家兔感染前尿液中的循环抗原全部阴性;感染后尿液中循环抗原的阳性率与感染度及感染时间有关。感染２５条尾蚴的家兔在感染后３ｗｋ未能测到循环抗原,而感染２００条尾蚴的家兔在感染３ｗｋ和６ｗｋ的尿循环抗原阳性率分别为４０％和１００％。结论：用感染兔尿中提取的循环抗原所制备的单抗作为探针,可用于检测感染动物尿液中血吸虫循环抗原     

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用ＭｃＡｂ－ＲＩＨＡ和ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ平行对比检测浓缩５倍的重感染家兔尿样６１份和正常家兔尿样３０份。两法的阳性率分别为８１．９７％和７８．６９％；假阳性率分别为１３．３３％和０％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。     

检测日本血吸虫病家兔尿中循环抗原的实验研究

本研究首次用单克隆抗体证实了日本血吸虫病家兔尿液中存在日本血吸虫肠相关趋阴极抗原。用McAb-RIHA和McAb-Dot-ELISA平行对比检测浓缩5倍的重感染家兔尿样61份和正常空兔尿样30份。两法的阳性率分别为81.97％和78.69％;假阳性率分别为13.33％和O％。认为可进一步用于检测日本血吸虫病患者尿排泄抗原的研究。     

试剂条双夹心酶联免疫吸附试验检测日本血吸虫感染者经尿液排泄的循环趋阴极抗原

目的：建立一种检测感染宿主尿内排泄抗原的简易免疫学试验。方法：用经改良的兼具ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和酶标板－ＥＬＩＳＡ优点的试剂条双夹心酶联免疫吸附试验，检测了家兔及人宿主尿样本中的日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原（ＣＣＡ）。结果：１０只高感染兔尿样经透析冻干保存达１０年，复原后检测均呈强阳性反应，滴度可达５１２－１，１２只经相同处理的正常兔尿，仅１只出现８－１以下的弱反应。５８例采自四川省的感染者和６０例正常对照者尿液的ＣＣＡ检测，敏感性和特异性分别为４３．１％和９６．７％。与板－ＥＬＩＳＡ比较，检出率相仿而呈现一定的互补效应，互补检出率为５８．６％。兔尿样内加入适量捕获单抗，反应强度即出现剂量依赖的竞争抑制，提示了尿内被检测到的靶微粒具有被抗ＣＣＡ单抗特异地识别的属性。对于采用同一检测系统不同方法的互补检测性也进行了讨论。结论：实验结果不仅显示了试剂条夹心ＥＬＩＳＡ适合现场应用的诸多优点，也证明用于特异地检测感染宿主尿内排泄抗原的可行性。     

日本血吸虫感染动物血清中CAb CAg及CIC水平的动态

本文对感染10条与50条单、双性血吸虫的4组家兔,在感染后2—18wk,连续检测了血吸虫CAb、CAg及CIC水平,并与正常对照兔进行了对比.结果表明,CAg在感染早期显示高水平,CAb在感染中期呈现明显高峰,而CIC在感染后期也有较高水平.阐明了血吸虫感染宿主血清中CAb、CAg和CIC水平的消长规律,也提示了感染宿主CAb、CAg及CIC水平与感染度和单、双性感染有关.