注射用红花提取物纯化方法优选

目的优选注射用红花提取物的纯化方法。方法以红花黄色素(safflor yellow,SY)或羟基红花黄色素A(hydroxy safflor yellow A,HSYA)的转移率、质量分数,杂质的清除效果和复溶性作为考察指标,采用明胶沉淀法、澄清剂法、石硫醇法、碱性醇沉法和大孔吸附树脂法进行纯化,优选纯化条件,并对纯化结果进行比较。结果采用大孔吸附树脂纯化红花提取物,HSYA的转移率及纯度较高,杂质清除效果较好,复溶性较好。结论通过对不同纯化方法的比较,大孔吸附树脂法可提高红花提取物的纯化效果,优于其他纯化方法。     

羟基红花黄色素A抗氧化作用的研究

红花Carthamus tinctorius L.为活血化瘀药，可活血通经、化瘀止痛，临床上主要以水煎液人药。组织缺血一再灌注等过程中，自由基引发的氧化反应为许多血液循环障碍疾病的重要损伤机制。红花水提液可清除羟自由基，抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化。羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A，HSYA)为红花主要水溶性活血化瘀有效成分，     

4种除杂工艺对红花水提物的除杂效果比较

目的：评价4种除杂工艺对红花黄色素水提物的除杂效果。方法：通过高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）测定红花水提物中羟基红花黄色素A的含量，以有效成分的含量及浸膏得率为指标，对大孔树脂法、澄清剂A、澄清剂B及乙醇沉淀4种除杂工艺进行比较。结果：优化除杂工艺为：水提液浓缩比例1：3，3％的澄清剂B，絮凝150min。结论：红花水提物提取工艺可用澄清剂替代乙醇。     

羟基红花黄色素A的现代研究新进展

羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)是中药红花提取物中主要的水溶性成分之一,HSYA的活性相继被发现,国内外利用现代分析仪器和分子生物学技术对其结构和作用机制以及相关作用靶点开展了较为深入系统的研究。本文从HSYA的提取、分离、纯化、含量测定、稳定性、药动学以及药理作用等来综述近几年国内外对HSYA的研究成果,以期对HSYA的进一步开发利用提供依据。     

羟基红花黄色素A抗凝作用的研究

红花为菊科植物Carthamus tinctorius L.的干燥花,为活血化瘀代表药,常用于治疗冠心病、脑血栓等心脑血管疾病。羟基红花黄色素A(hydroxy-safflor yellow A,HSYA)是红花主要有效成分,具抗血小板激活因子的作用[1],红花黄色素为红花抗血栓有效部位[2]。红花黄色素所含主要成分为     

红花黄色素对氧自由基引起人红细胞膜损伤的保护作用

目的:研究羟基红花黄色素A(HSYA)和红花黄色素B(SYB)对超氧阴离子自由基(O2-.)引发的人红细胞膜氧化损伤的保护作用。方法:采用邻苯三酚制备人红细胞膜过氧化损伤模型,研究HSYA和SYB对人红细胞膜氧化损伤的影响。结果:O2-.能引起红细胞膜脂质过氧化,使膜流动性下降。而红细胞膜经过一定量的HSYA和SYB预处理后,膜流动性提高。结论:HSYA和SYB对氧自由基引发的红细胞膜损伤具有一定的保护作用。     

大孔吸附树脂纯化红花提取物的研究

目的探讨大孔吸附树脂对红花提取物的纯化条件及纯化效果。方法通过红花黄色素(SY)在树脂上的吸附量和解吸率筛选树脂的种类;以SY的保留率和转移率为指标考察药液的pH值、上柱吸附体积流量、树脂药材比、树脂柱径高比、清洗液的pH值及体积流量、洗脱液的种类及体积流量等纯化条件。与乙醇沉淀法进行纯化效果的比较。结果优化后的纯化条件为采用HPD 400A作为吸附树脂,树脂药材比为4∶1,树脂柱径高比为1∶6,上柱药液和清洗液pH值为2.0,50%乙醇作为洗脱液,上柱吸附体积流量为4 BV/h,清洗和洗脱体积流量为10BV/h。在该纯化条件下,SY的转移率为88.8%,与乙醇沉淀法相当,固形物中SY的质量分数约为乙醇沉淀法的2.6倍,固形物的质量(固形物得率)仅为乙醇沉淀法的38.5%。结论通过纯化条件的优化大大提高了SY的转移率,大孔吸附树脂法对红花提取物的纯化效果优于乙醇沉淀法。     

羟基红花黄色素A对脑缺血再灌注大鼠MMP-9和claudin-5蛋白水平的影响

目的 探讨羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A,HSYA）减轻大鼠脑缺血引起的血脑脊液屏障通透性增加的分子机制.方法 本研究利用大鼠脑缺血再灌注模型,研究HSYA对脑缺血后半影区和核心区基质金属蛋白酶-9（metalloproteinase-9,MMP-9）和紧密连接蛋白claudin-5水平的变化.结果 HSYA处理可以减少半影区MMP-9蛋白水平,而MMP-9的下游底物claudin-5的蛋白水平则显著增加.HSYA并不显著改变缺血核心区MMP-9和claudin-5蛋白水平.结论 本研究证明,活血化瘀中药HSYA可能通过减少半影区MMP-9蛋白水平,提高claudin-5的水平,从而减少半影区血脑脊液屏障损伤,为深入研究HSYA保护血脑脊液屏障的机制提供了参考.     

羟基红花黄色素A人工抗原的制备

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的偶联方法,获得具有免疫原性的羟基红花黄色素A人工抗原。方法通过偶联物透析液的颜色变化、紫外图谱、红外扫描图谱及动物免疫试验来鉴定制备的人工抗原。结果HSYA-BSA人工抗原在紫外扫描中表现出HSYA和BSA的特征吸收峰;在红外扫描中HSYA-BSA具有HSYA特征官能团的吸收峰和氨基酸的特征吸收峰;间接ELISA检测结果显示产生抗HSYA的特异性抗体,血清效价可达1∶3 200;标准曲线方程计算得BSA和HSYA的结合率是1∶50。结论通过直接偶联法成功制备出具有免疫原性的羟基红花黄色素A人工抗原。     

HPLC测定三十五昧沉香丸中羟基红花黄色素A的含量

目的：建立高效液相色谱法测定三十五味沉香丸中羟基红花黄色素A的含量。方法：色谱柱为Elite—ODS C18（250mm×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-水-磷酸（27：73：0．05）;流速：1．0mL／min;检测波长：403nm;柱温：室温。结果：羟基红花黄色素A选样量在0．15～0．35μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为99．20％,RSD为0．43％（n=9）。结论：采用HPLC法测定三十五味沉香丸中羟基红花黄色素A的含量,样品处理方法简便,测定结果准确,方法专属性强,精密度高,重复性好。     

红花黄色素提取工艺的研究

目的对红花黄色素的提取工艺进行优化。方法采用单因素试验法和正交试验法,以红花黄色素的提取率为主要考察指标,以红花黄色素在固形物中的质量分数及总出膏率为参考指标,对提取工艺进行考察。结果红花黄色素的最佳提取工艺:以12倍量水浸泡30min,70℃下动态提取2次,每次20min。结论该工艺可提高红花中红花黄色素的提取率。     

红花黄色素改善大鼠缺氧心肌能量代谢的研究

目的 探讨红花黄色素(SY)缓解大鼠心肌缺氧性损伤作用及其对能量代谢的影响。方法 建立大鼠离体心脏的冠状动脉灌流模型，以2，4—二硝基苯肼比色法测心室肌组织乳酸脱氢酶(LDH)漏出量，以荧光素酶法测心室肌组织ATP含量，透射电镜观察心尖部组织超微结构；制备大鼠心室肌组织线粒体混悬液，分别以比浊法与荧光偏振法观察线粒体肿胀与膜流动性的变化。结果 SY可减少大鼠低灌流离体心脏LDH漏出，缓解心室肌组织ATP含量下降及其超微结构的损伤；SY可缓解大鼠心肌线粒体混悬液中线粒体的肿胀及其膜流动性下降。结论 SY可改善大鼠心肌能量代谢，进而缓解心肌缺氧性损伤。     

羟基红花黄色素A缓解大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

目的 以整体和离体实验观察羟基红花黄色素A (HSYA) 缓解心肌细胞凋亡的作用。方法 以异丙肾上腺素 (ISO) 造成大鼠急性心肌缺血,以 TUNEL 法检测心肌组织细胞凋亡,免疫组化法和 RT-PCR 法观察心肌组织中 bax、bcl-2 基因表达的变化;用缺糖缺氧/再复氧模型诱导原代培养心肌细胞凋亡,以 PI 流式细胞法观察凋亡情况,以 Rhodamine 123 荧光法考察线粒体膜电位的变化。结果 60、120、240 mg/kg HSYA ip 给药可以减轻心肌缺血大鼠的线粒体肿胀、核凝集及固缩,降低心肌细胞凋亡率 (P＜0.01),下调心肌组织 Bax 蛋白 (P＜0.05) 及 bax mRNA 的表达 (P＜0.01)。0.64、1.3、2.5 mmol/L HSYA 可减少缺氧/再复氧造成的细胞凋亡 (P＜0.05),且可缓解该损伤造成的心肌线粒体膜电位下降 (P＜0.05)。结论 抑制心肌细胞凋亡是 HSYA 缓解心肌缺血的重要机制。     

Selective myelosuppression following yellow phosphorus ingestion

Toxicity from accidental and intentional ingestion of yellow phosphorus, ubiquitously present in fireworks and rodenticides, has recently become more frequent. Gastrointestinal, renal, neurologic, and cardiovascular manifestations are common, with mortality of 23 per cent to 73 per cent. Reports of haematological abnormalities are rare. We report only the second case of severe neutropenia secondary to selective myelosuppression in a 14-year-old girl following intentional ingestion of yellow phosphorus. Leucocyte counts recovered spontaneously without further complications. Our case indicates that, besides hepatic and renal function monitoring, physicians should meticulously monitor blood counts in such cases for early detection of marrow suppression. Further studies are required to elucidate the complex mechanisms and significance of this unusual toxicity of yellow phosphorus.     

羟基红花黄色素A抑制异常增殖血管内皮细胞的机制研究

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)抑制异常增殖血管内皮细胞的作用机理。方法建立人结肠腺癌细胞LS180上清液和人脐静脉内皮细胞ECV304体外共培养模型,通过实时荧光定量PCR检测ECV304细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及其受体(b FGFR)、HSPG2、p53、c-myc mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清VEGF、VEGFR(KDR)、b FGF、b FGFR蛋白的表达。结果在共培养细胞模型中,0.66、0.33 mg/L浓度的HSYA对血管生成促进因子VEGF及其受体KDR、b FGF及其受体b FGFR和癌基因c-myc及与细胞增殖相关蛋白多糖HSPG2的mRNA表达具有抑制作用;对抑癌基因p53 mRNA的表达具有促进作用。0.66、0.33 mg/L浓度的HSYA对血管生成促进因子VEGF及其受体KDR、b FGF及其受体b FGFR的蛋白表达具有抑制作用。结论 HSYA抑制新生血管的生成、抑制共培养模型中血管内皮细胞的异常增殖,其可能的作用机理是通过调控VEGF及其受体、b FGF及其受体、HSPG2、c-myc和野生型p53的表达发挥抗肿瘤作用,揭示HSYA可能是潜在的肿瘤血管生成抑制剂。     

羟基红花黄色素A对卵巢癌细胞PI3K/Akt信号通路的影响

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人顺铂耐药的卵巢癌A2780/DDP细胞株顺铂耐药性的逆转作用及具体机制。方法培养A2780/DDP细胞,接种至20只BALB/C雌性裸鼠,按随机数字表法分为对照组、红花组、顺铂组和联合组,每组5只,均采用腹腔注射给药的方式,对照组予0.9%氯化钠溶液,顺铂组按3mg/kg剂量给予顺铂,红花组按1.1g/kg给予HSYA,联合组予HSYA(1.1g/kg)联合顺铂(3mg/kg),每3天给药1次,连续给药4周。第5周后处死小鼠,解剖取瘤记录瘤重并计算抑瘤率,HE染色观察各组肿瘤的病理改变,Western blot检测Akt、p-Akt蛋白表达。结果对照组瘤重(4.71±0.17)g,顺铂组瘤重(3.53±0.28)g,抑瘤率25.08%,红花组瘤重(4.54±0.25)g,抑瘤率3.61%,联合组瘤重(2.76±0.17)g,抑瘤率41.36%。与对照组和顺铂组相比,联合组的肿瘤质量下降(P0.05),抑瘤率明显增加(P0.05);HE染色显示,与顺铂组比较联合组肿瘤坏死程度更高;Western blot结果示,对照组Akt蛋白相对表达水平为(0.61±0.11),顺铂组为(0.62±0.09),红花组为(0.42±0.10),联合组为(0.44±0.07)。与对照组比较,顺铂组Akt、p-Akt蛋白表达无统计学差异(P0.05),与对照组与顺铂组比较,红花组与联合组的Akt、p-Akt蛋白表达较低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 HSYA可能通过下调PI3K/AKT通路的关键组分Akt、p-Akt蛋白,来增强A2780/DDP对顺铂的化疗敏感性,逆转顺铂耐药。     

红花黄色素A在大鼠体内的药动学研究

目的　研究红花黄色素 A在大鼠体内的药动学。方法　建立 RP-HPLC法定量测定大鼠血浆中红花黄色素 A含量。色谱条件 :色谱柱为 Hypersil ODS2柱 (2 0 0 mm× 4.6mm,5 μm) ;流动相为甲醇 -0 .2 %乙酸水溶液(2 4∶ 76) ;流速为 0 .8m L/min;核黄素为内标 ;检测波长为 410 nm。健康大鼠禁食 2 4h后 ,尾 iv红花黄色素 A生理盐水溶液 ,测定不同时间的血药浓度。用 3 P87药动学程序对血药浓度 -时间数据进行拟合。结果　大鼠 iv红花黄色素 A后 ,其主要药动学参数为 :Vc(0 .3 0± 0 .0 4) L/kg,CL (1.12± 0 .3 3 ) m L/mim,Ke(0 .91± 0 .19) h-1 ,t1 / 2(0 .76± 0 .10 ) h,曲线下面积 AUC(2 4.97± 4.83 ) (μg· h) /m L。结论　红花黄色素 A在大鼠体内呈一室开放模型 ,进入体内迅速分布 ,代谢消除也较快     

羟基红花黄色素A在大鼠体内的药代动力学

目的：研究羟基红花黄色素A在大鼠体内的药代动力学.方法：羟基红花黄色素A大鼠尾静脉注射给药和灌胃给药，HPLC测定血浆中药物的含量，3P97计算药代动力学参数；大鼠胆管插管收集给药后24h胆汁；代谢笼收集大鼠给药后24h尿样和粪便。结果：静脉注射给药符合二室开放模型，胆汁累积排泄量为1．32％，尿中24h累积排泄率为88．6％，粪便中没有检测到药物。灌胃给药绝对生物利用度是1．2％；胆汁累积排泄量为0．062％；尿中24h累积排泄率为2．9％；粪便24h累积排泄率为48％。结论：羟基红花黄色素A大鼠口服吸收较差，有胆汁外排效应；血中药物以肾排泄为主。     

黄磷烧伤的治疗体会

目的 总结黄磷烧伤后创面治疗正确、有效的方法及体会。 方法 对20例黄磷烧伤病人根据烧伤面积大小及严重程度分别采用局部清创、削痂、植皮及全身抗感染、对症支持等综合治疗。 结果 本组20例病人均获临床治愈，治疗效果满意。 结论 黄磷烧伤治疗的关键是迅速彻底清创，防止吸收中毒，预防感染。程度较深的创面应早期立即削痂，特殊部位行削痂植皮，对提高疗效、促进创面愈合有积极作用。