糖尿病患者血清HCMV pp65特异性IgM表达水平

目的建立检测人HCMV pp65特异性IgM的酶联捕获技术,来分析糖尿病患者HCMV感染状态。方法利用抗人IgM(μ链特异性)抗体包被固相载体,采用辣根过氧化物酶(HRP)标记HCMV pp65单克隆抗体或HCMV pp65抗原,建立抗体捕获HCMV pp65特异性IgM酶联免疫技术。用该法检测727例糖尿病患者及230例健康献血员血清样本,并与HCMV-pp65抗原表达水平进行了比较。结果糖尿病患者血清HCMV pp65-IgM阳性分别为81例(11.14%,酶标抗体法)和78例(10.73%,酶标抗原法),与健康组(0.87%)相比存在统计学差异(P<0.05)。酶标抗体法与酶标抗原法在抗体捕获HCMV pp65特异性IgM检测时不存在显著性差异(P>0.05),且不受RF因子的影响。HCMV pp65-IgM与HCMV pp65蛋白表达呈现良好的相关性。结论酶联捕获HCMV pp65特异性IgM法具有简便、快速、特异和敏感等特点,可诊断HCMV活动性感染。     

HCMV（pp65）抗原血症-肝、肾移植术后巨细胞病毒感染监测的分析

目的通过5000次肝、肾移植术后病人外周血HCMV（pp65）抗原血症检测结果与用ELISA方法检测HCMV特异性IgM、IgG抗体的检测结果进行比较和观察，探讨各种检测方法在检测器官移植术后HCMV感染中的作用。方法应用间接免疫荧光方法，检测2002年1月至2004年11月在我院接受肝、肾移植手术后病人外周血白细胞内人巨细胞病毒（HCMV）的基质磷蛋白（pp65）共检测血标本5000次，阳性病人应用ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体。结果5000次HCMV（PP65）抗原血症检测中，阳性1053次，占21．06％；1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人，ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体，103次出现阳性。1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人中约85．23％出现HCMV感染的症状及HCMV病。结论HCMV（PP65）抗原血症检测与其它检测HCMV方法相比，可以早期、快速、准确的检测出肝、肾移植术后病人巨细胞病毒感染，为临床抗病毒治疗提供依据，使HCMV病的发生率明显降低。     

婴儿肝炎综合征肝脏巨细胞病毒低基质磷酸化蛋白的检测意义

目的：观察人巨细胞病毒（HCMV）低基质磷酸化蛋白（pp65）在婴儿肝炎综合征肝脏组织中的表达,为诊断婴儿巨细胞病毒性肝炎提供科学依据.方法：选择30例婴儿肝炎综合征患儿,在B超介导下进行肝组织活检,免疫组化法检测肝组织中HCMV pp65抗原,观察婴儿巨细胞病毒性肝炎特异性病理改变,同时用ELISA方法检测血清HCMV IgM水平,计算并比较两指标的阳性率.结果：30例婴儿肝炎综合征患儿肝组织HCMVpp65抗原阳性18例,血清IgM阳性6例,阳性率分别为60％、20％.两者阳性率比较差异有显著性（P＜0.01）.结论：通过免疫组织化学检测婴儿肝组织中HCMV pp65抗原表达,可用于诊断婴儿巨细胞病毒性肝炎.     

献血者巨细胞病毒感染筛查的初步研究

目的：探讨检测人巨细胞病毒(HCMV)的低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原对健康献血巨细胞病毒感染情况的筛查。方法：对2003年2～7月收集的103份EDTA抗凝外周血标本，用免疫组化方法进行pp65抗原血症检测，同时以ELISA法检测其中的86份血清中的IgM和IgG抗体。结果：103份标本中共有10份pp65抗原阳性，阳性率为9．71％；ELISA法检测86份标本CMV—IgM抗体全部阴性，CMV—IgG抗体56例阳性，阳性率为62％(56／86)，10份pp65抗原阳性的标本中，CMV—IgG阳性9例。结论：pp65抗原是检测CMV感染的一种敏感、特异的方法，而检测CMV—IgM、CMV—IgG不能预测CMV的活动性感染，因此对需要输注全血、成分血的免疫力低下或各种移植病人，应进行CMVpp65抗原的检测。     

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测及其在肾移植受者CMV病诊断中的临床应用

目的 建立一种简便诊断肾移植受者人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染的方法.方法 运用催化信号扩增法检测外周血白细胞中的人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65,并与抗HCMV-IgM检测法作比较.结果 检测100例肾移植受者中,HCMVpp65抗原阳性47例,IgM抗体检测阳性41例,pp65抗原阳性细胞数为(71±45)个,2×105个WBC,而有症状的CMV病29例,抗原阳性细胞指数为(83±46)个,2×105个WBC.对照组50名健康人,pp65抗原检测全为阴性.pp65的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别是100%、74.6%、61.7%和100%.结论 该法敏感、简便,可作为肾移植术后HCMV病的早期诊断并可指导抗病毒治疗.     

几种CMV相关物检测对诊断肾移植患者CMV感染的评价

目的 比较血中pp65抗原、DNA和IgM抗体检测对肾移植患者巨细胞病毒（CMV）活动性感染的诊断价值,为临床上对CMV感染的诊断和治疗提供参考.方法 收集83位肾移植患者的血标本（共302份）,分离血浆和多型核白细胞,血浆用于CMV-DNA（定性PCR）和IgM抗体（ELISA）检测,白细胞用于pp65抗原血症检测（荧光免疫法）.结果 CMV-DNA阳性率为36.1%,CMV IgM抗体阳性率20.2%,CMV pp65抗原阳性率为38.5%.pp65抗原阳性细胞数与病人的临床症状密切相关.结论 pp65抗原阳性细胞数能反应CMV的数量,可监测早期活动性CMV感染及疗效观察,检测方法特异,灵敏,操作简单,适合临床实验室应用.     

肺结核病人巨细胞病毒感染的检测

为了解肺结核病人的人类巨细胞病毒(HCMV)感染情况,本文采用HCMV AD-169株制备其晚期抗原,用间接酶联免疫吸附法(ELISA)对106例肺结核病人的血清进行检测.结果病人血清内的HCMV特异性IgM,IgA及两者的双阳性率分别为:10.38%,21.70%和15.09%,均显著高于正常对照组(P<0.05).痰菌阳性病人血清内特异性IgM,IgA及两者双阳性率为23.33%,33.33%和33.33%,高于痰菌阴性病人和稳定期结核病人,差异有极显著性意义.提示肺结核病人易合并HCMV感染且与其病情相关.     

肺癌与人类巨细胞病毒感染关系的初步研究

目的：探讨肺癌与人类巨细胞病毒（HCMV）感染的关系。方法：对88例肺癌及117例肺非癌患者，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清HCMV－IgG，IgM抗体，用聚合酶链反应（PCR）法检测尿HCMV－DNA。同时检测其中64例肺癌及67例肺非癌患者的病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA。对肺癌组中抗癌化疗的患者于每一化疗周期复查血清HCMV－IgM，尿HCMV－DNA。结果：肺癌组血清HCMV－IgM阳性率26．1％，病灶局部冲洗或支气管肺泡灌洗回收液HCMV－DNA阳性率26．6％，均显著高于肺非癌组（P＜0．01）；血清HCMV－IgG及尿HCMV－DNA阳性率两组未见明显差别。42例肺癌到化疗第二周期时，血清HCMV－IgM16例由阴性转阳性，尿HCMV－DNA6例转阳性。结论：肺病与HCMV感染有统计学上的相关性；抗癌化疗使肺癌患者HCMV活动性感染明显增多，值得重视。     

CMV-PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染的临床价值

目的 探讨巨细胞病毒PP65抗原（CMV-PP65）检测在预防肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染的临床价值.方法 采用间接免疫荧光法和酶联免疫捕获法检测52例肾移植受者术后CMV-PP65抗原和CMV-IgM抗体.结果 52例肾移植受者中CMV-PP65抗原检测阳性25例,CMV-IgM抗体检测阳性17例,随访3~6个月,共15例发生CMV病,CMV-PP65抗原检测均阳性,CMV-PP65抗原检测的敏感度及阴性预测值均高于CMV-IgM抗体检测;25例患者CMV-PP65抗原检测术后首次出现阳性的平均时间为4.2±3.3周,17例患者CMV-IgM抗体检测术后首次出现阳性的平均时间为8.7±5.8周,两者比较有显著差异性（P〈0.05）.结论 CMV-PP65抗原检测可早期排除和预防肾移植术后CMV感染,值得临床推广应用.     

人巨细胞病毒pp65在脑胶质瘤中的表达

目的 探讨人巨细胞病毒（HCMV）pp65在脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的相关性.方法 手术获取64例脑胶质瘤标本（低级别胶质瘤27例,高级别胶质瘤37例）,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中HCMV pp65蛋白表达,ELISA法检测高级别胶质瘤患者和正常人各20例外周血中HCMV-IgG抗体水平.结果 pp65在高级别胶质瘤中的阳性表达率明显高于低级别胶质瘤（97.3%和22%）,强阳性表达率以胶质母细胞瘤最高;高级别胶质瘤患者血清HCMV-IgG水平明显高于正常人群.结论 HCMV pp65在不同级别的脑胶质瘤中均有表达,且表达水平与肿瘤恶性程度相关.     

人巨细胞病毒部分抗原基因的克隆及表达

目的克隆表达人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）特异性强的抗原决定簇基因,制备特异性抗原。方法从感染HCMV的细胞上清液中提取病毒基因组DNA,用PCR扩增HCMVpp150（ppUL32）、gp52（UL44）、pp65（ppUL83）、ppUL80a蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA序列,将其克隆至pMD-18T载体并测序,然后克隆至表达载体pGEX-4T-1诱导表达,采用免疫印迹法（Western blotting）检测表达产物的抗原性。结果经序列测定各基因片段序列正确,并在pGEX-4T-1表达载体中得到了高效表达,表达的融合蛋白经Western blotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能够与HCMV IgM阳性血清发生特异性反应。结论通过基因工程技术可以有效地获取纯度较高、特异性强的HCMV抗原。为HCMV感染者的早期诊断提供检测用抗原。     

特发性血小板减少性紫癜复发与病毒感染关系的研究

目的探讨儿童ITP复发与病毒感染的关系。方法用酶联免疫法检测65例复发ITP患儿并40例对照组血清巨细胞病毒（CMV）、EB病毒（EBV）、腺病毒（ADV）、单疱病毒（HSV）特异性IgM抗体。结果65例复发ITP患儿感染阳性率为61.5%,较对照组有显著性差异。结论病毒感染是ITP患儿复发的重要因素之一。     

间接ELISA检测无菌性脑膜炎患儿的埃可病毒特异性IgM抗体

目的：研究检测患儿脑脊液和血清标本的特异性IgM在诊断埃可病毒感染的无菌性脑膜炎的实用价值。方法：采用埃可病毒混合抗原包被酶标板,用间接ELISA方法检测脑脊液和血清标本的特异性IgM抗体。结果：在临床诊断为无菌性脑膜炎患儿的78份脑脊液和203份血清标本中分别有14份（17.9%）和48份（23.6%）阳性,而36份细菌性脑膜炎和30份脑外伤患者脑脊液仅1份阳性;细菌性脑膜炎、正常成人血清均为阴性。结论：本方法快速、简便、可靠,适合于临床早期诊断,而脑脊液标本IgM抗体的检测在诊断埃可病毒感染的无菌性脑膜炎可能更为准确。     

肺结核病人疱疹病毒感染的检测和临床意义

目的探讨肺结核病人疱疹病毒活动性感染情况。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）,检测62例肺结核病人和43例正常对照者血清中人巨细胞病毒（HCMV）和单纯疱疹病毒（HSV）特异性IgM抗体以及EB病毒（EBV）衣壳抗原（VCA）IgM抗体。同时,采用PCR-Southern检测肺结核病人和正常人外周血单个核细胞中EBV DNA表达。结果肺结核组血清HCMV-IgM和HSV-IgM阳性率分别为19.4%和12.9%,正常对照组分别为4.7%和0,肺结核组HCMV-IgM和HSV-IgM阳性率均高于正常对照组（χ2=4.75、4.31,P〈0.01）。肺结核组和正常对照组均未检测到EB病毒VCA-IgM,肺结核组EBV DNA阳性率（48.4%）高于正常对照组（4.7%）,差异有显著性（χ2=22.92,P〈0.01）。继发性肺结核疱疹病毒感染率（39.6%）高于原发性肺结核（7.1%）,差异有显著性（χ2=3.84,P〈0.05）。结论部分肺结核病人存在HCMV、HSV以及EBV的活动性感染,人疱疹病毒感染可能影响肺结核病情发生发展。     

HCMV活动性感染与尿路上皮癌的相关性研究

目的分离和鉴定尿路上皮癌患者的肿瘤组织和抗凝血标本中人巨细胞病毒(HCMV),结合临床资料分析比较HCMV活动性感染与尿路上皮癌发生发展及其复发的相关性。方法采集33例经病理检测确诊为尿路上皮癌患者的组织和血标本,进行如下处理:分别采用细胞培养病毒分离法进行病毒分离;PCR法检测患者的抗凝血及组织DNA标本中HCMV UL55和UL83基因;IFA法检测抗凝血标本中HCMV pp65抗原;ELISA法检测HCMV IgG及IgM抗体;记录分析结果,确定尿路上皮癌患者HCMV活动性感染率。结果在33份抗凝血标本中,分离到1株临床分离株,该标本经盲传3代出现典型HCMV特征性细胞病变效应(CPE),经鉴定为HCMV。HCMV UL55和UL83基因、HCMV pp65抗原血症及HCMV IgM抗体检测均为阳性的有6份,因此可以判定在33例尿路上皮癌患者中,HCMV活动性感染者有6例,活动性感染率为18.2%(6/33)。结合患者的临床资料进一步分析发现,尿路上皮癌患者复发及病理分级均与HC-MV活动性感染相关,且HCMV活动性感染者其病理分级程度升高。结论结合临床资料分析发现,尿路上皮癌复发及病理分级程度升高均与HCMV活动性感染有关。     

IgG抗体亲和力指数在HCMV感染的SLE患者中的临床评估

目的用外周血人巨细胞病毒(HCMV)IgG抗体亲和力指数判断人巨细胞病毒在系统性红斑狼疮患者中感染的情况。方法间接酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测122例系统性红斑狼疮患者,85例非系统性红斑狼疮的自身免疫病患者,137例正常人血清中人巨细胞病毒特异性抗体IgM和IgG,并对人巨细胞病毒IgG阳性的血清样本进行IgG抗体亲和力指数(a-vidity index,AI)的检测。结果系统性红斑狼疮患者人巨细胞病毒IgM抗体阳性率为11.48%;IgG抗体阳性率95.08%,其中低亲和力样本占8.62%。非系统性红斑狼疮自身免疫病患者血清中IgM抗体阳性率为1.18%;人巨细胞病毒IgG抗体阳性率95.29%且均为高亲和力抗体。而在137例正常样本中未检测到人巨细胞病毒IgM抗体阳性的样本;IgG抗体阳性率93.43%全部为高亲和力抗体。SLE患者相比非系统性红斑狼疮的自身免疫患者和正常人,其人巨细胞病毒IgM阳性率显著升高,且人巨细胞病毒IgG抗体低亲和力样本在IgG阳性样本中的比例也显著升高。因此,系统性红斑狼疮中的人巨细胞病毒初次感染后期[IgM(-)/IgG(+);AI<45%](10例)和再次或复发感染[IgM(+)/IgG(+);AI>55%](14例)的比例比非系统性红斑狼疮的自身免疫病患者和正常人都显著增多。结论综合HCMV IgG亲和力指数与HCMV IgM的检查结果发现,SLE患者相比正常人或非SLE自身免疫患者,表现出显著上升的原发性HCMV活化感染率与继发性HCMV活化感染率。因此,SLE的罹患与HC-MV感染有密切关联。     

性病患者HCMV与其它病原微生物合并感染的研究

目的 探讨性病患者人巨细胞病毒感染的混杂因子。方法 探讨性病患者人巨细胞病毒感染的混杂因子。采用酶联免疫吸附试验对89例性病患者同时检测HCMV－1gM和其他病原因子。结果 性病患者HCMV－IgM抗体阳性率为25．84％（23／89）,不同性病患者中以淋病HCMV感染率最高;达26．98％;HCMV感染与性病种类无关。性病患者多存在2种或2种以上病原因子感染,最多可同时感染上4种病原微生物。结论 性病患者存在较高的HCMV感染,性病患者多有病原微生物的混合感染。     

冠心病患者HCMV感染及其与TNF和ET关系的临床研究

目的 探讨人类巨细胞病毒（HCMV）感染、肿瘤坏死因子（TNF）及血清内皮素（ET）浓度与动脉粥样硬化的关系。方法 采用酶联免疫法（ELISA）测定不稳定性心绞痛（unstable angina,UA）53例,稳定劳力性心绞痛（stable angina,SA）66例,正常对照组30例血清人类巨细胞病毒抗体,放射免疫法检测ET和TNF的浓度。结果 不稳定性心绞痛组HCMV—IgM阳性26例（49．1％）,HCMV—IgG阳性37例（69．8％）;稳定劳力性心绞痛组CMV—IgM阳性29例（43．9％）,HCMV—IgG阳性41例（62．1％）,正常对照组HCMV—IgM阳性4例（6．7％）,HCMV—IgG阳性H例（26．7％）,与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。不稳定性心绞痛组,稳定劳力性心绞痛组,与正常对照组相比,血清TNF和ET显著增高（P〈0．01）。结论 CHD患者的HCMV感染、内皮细胞功能受损可能参与了冠心病发生发展的过程。     

肺炎支原体感染的血清学检测方法比较

目的比较几种检测方法对呼吸道感染患者血清肺炎支原体（MP）特异性抗体IgM检测的检出率。方法以冷凝集试验（CAT）、明胶颗粒凝集法（PLA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）3种方法对95例呼吸道感染患者血清肺炎支原体IgM抗体进行检测。结果冷凝集试验、明胶颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验检测血清肺炎支原体IgM抗体的敏感性分别为69.1%、96.4%和90.9%,特异性分别为75%、100%和90%,准确度分别为68.4%、97.9%和90.5%。用配对资料四格表法对三种方法的检出率进行分析,经SPSS软件统计分析,冷凝集试验与明胶颗粒凝集法和酶联免疫吸附试验相比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,酶联免疫吸附试验与明胶颗粒凝集法相比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论冷凝集试验与另外两种方法相比有显著差异,而酶联免疫吸附试验与明胶颗粒凝集法两种方法没有显著差异,两者联合应用可以提高阳性率,对临床治疗起到及时的指导。     

汕头市健康无偿献血人群HCMV感染调查

目的了解汕头市健康献血人群人巨细胞病毒（HCMV）感染情况,探讨临床特殊情况用血进行HCMV抗体检测的必要性。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测450份检验合格血液的血清中的HCMV-IgM抗体和HCMV—IgG抗体,并与同期的HBsAg、HCV抗体和HIV（抗体＋抗原）、TP抗体的阳性率作比较。结果汕头市健康无偿献血人群HCMV—IgM的阳性率为2．67％,HCMV—IgG的阳性率为93．78％,远高于同期的HBsAg、HCV抗体和HIV（抗体＋抗原）、TP抗体的阳性率。结论汕头市健康无偿献血人群HCMV阳性率与国内其它地区的报道相近,临床特殊情况用血需对HCMV—IgM进行检测。