不同年龄组血浆HNE、α_1-AT之正常值及SLE病人的变化

人中性粒细胞弹性蛋白酶(Human neutrophil elastase简称HNE)及其抑制剂α1-抗胰蛋白酶(α_1-Antitrypsin简称α_1-AT)的平衡失调与多种疾病的发病学有关。因目前缺乏中国人的血浆HNE、α_1-AT之正常值,常难于判断各种病人之测定值的病理生理意     

何为Pi(蛋白酶抑制剂)无效等位基因或PiQO:一个以α_1抗胰蛋白酶Mheerlen突变为主要内容的问题

α_1抗胰蛋白酶(AAT)是人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶抑制剂。炎症期间,嗜中性白细胞释放的人嗜中性白细胞弹性蛋白酶(HNE)能使肺结缔组织降解,而 AAT的主要生理功能之一就是保护下呼吸道免受HNE 的损伤。又因 AAT 蛋白在肝细胞内蓄积,所以 AAT 缺失者发生进行性肺损伤及儿童期肝病的危险性增高。     

用基因突变直接分析来检测α_1-抗胰蛋白酶缺乏

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)是由肝脏合成的一个重要血浆蛋白酶抑制因子,其主要作用场所在肺泡,能抑制多形核白细胞弹性蛋白酶,防止肺弹性蛋白被水解。若弹性蛋白酶过盛,肺泡出现永久性损伤,最终导致肺气肿。遗传性酶缺乏者发生肺气肿为一般人辞的20～30倍。此外,缺酶的幼儿的14%将发展成为致死的肝硬化。α_1-AT的合成受一个常染色体上Pi位     

α_1-抗胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂——变异和反变异

人的血浆含有几种蛋白酶抑制剂,这些蛋白酶抑制剂约占血浆总蛋白含量的10%.如广谱抑制剂α_2-巨球蛋白即为重要一例.但这类抑制剂中研究最多、血浆含量最高的是具有特异性的α_1-抗胰蛋白酶,虽然它可以抑制大部分的丝氨酸蛋白酶,但它主要是抑制弹性蛋白酶特别是抑制嗜中性白细胞释放的弹性蛋白酶.现已证明α_1-抗胰蛋白酶是一族新的同源蛋白的主要成员.这一族同源蛋白可以抑制丝氨酸蛋白酶,故统称为丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin).研究α_1-抗胰蛋白酶所获     

人体α_1-抗胰蛋白酶的分子遗传学研究进展

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)是一种重要的血浆蛋白酶抑制剂,具有抑制各种不同丝氨酸蛋白酶的能力。原位杂交研究已经证明,α_1-AT基因位于14q31—32。由于α_1-AT的遗传性缺陷可以导致肺气肿的产生,因此对α_1-AT的研究一直受到广泛的重视。     

α_1抗胰蛋白酶缺乏症的产前诊断

α_1抗胰蛋白酶(α_1-AT)是广泛分布于人血清及其它体液和组织中的一种蛋白水解酶抑制剂,能抑制血清中蛋白酶活力的90%。它是一种由肝脏合成的糖蛋白,正常血浆中含有180～250mg/dl。在代谢旺盛的情况下,如肿瘤、妊娠等,血中α_1-AT水平明显增高。应用区带电泳技术分析人类α_1-AT电泳的迁移率,发现人群中存在着多态现象,最常见的为MM型,同时还观察到这种MM型的不同亚型在一些种族中有所差异。现已鉴定出近50种α_1-AT的变异类型,其中有些变异类型如S、Z等可导致α_1-AT的遗传缺陷。α_1-AT缺陷的结果与肺气肿、婴儿早期肝硬化和脉管炎,肾炎等病的发生发展有关。大量的研究表     

α-抗胰蛋白酶Pi~F等位基因与肺部疾病相关吗?

人类α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)属蛋白酶,它是肝脏合成的抑制性血浆蛋白质。现已鉴定出许多种α_1-AT遗传变异体,这些变异体受Pi等位基因控制,最常见的等位基因是Pi~(M1)、Pi~(M2)和Pi~(M3)。另三种罕见的等位基因(Pi~O、Pi~Z和Pi~S)与血清α_1-AT水平减低有关。Pi~O纯合子的个体,血清α_1AT水平极低。而Pi~Z和Pi~S等位基因纯合子个     

油酸性肺损伤修复过程中某些酶活性的变化

以油酸(0.1ml/kg体重)静脉注入形成大白鼠急性肺损伤模型。观察到注油酸后1天内肺重增加,镜检可见水肿及白细胞在肺间质浸润。支气管肺泡冲洗液(BALF)中蛋白质含量及弹性蛋白酶(ELS)、α-抗胰蛋白酶(α_1-AT)、β-葡萄糖醛酸酶(β-g)活性均明显增高。之后以上变化逐渐减轻。至注油酸后7天,肺组织学检查几乎完全恢复正常,BALF中各指标也降至正常对照水平。提示油酸引起的急性肺损伤可以在较短时间内完全恢复。讨论了ELS和α_1-AT的平衡在损伤修复中的作用。同时提出了油酸除损伤肺脏外,对其它器官的损伤作用值得注意。     

α_1-抗胰蛋白酶和丝氨酸蛋白酶抑制剂——变异和反变异

人的血浆有几种蛋白酶抑制剂,这些蛋白酶抑制剂约占血浆总蛋白含量的10％。如广谱抑制剂α_2-巨球蛋白即为重要一例。但这类抑制剂中研究最多、血浆含量最高的是具有特异性的α_1-抗胰蛋白酶,虽然它可以抑制大部分的丝氨酸蛋白酶,但它主要是抑制弹性蛋白酶特别是抑制嗜中性白细胞释放的弹性蛋白酶。α_1-抗胰蛋白酶的功能是通过其基因缺陷导致结缔组织过早破坏使肺失去弹性引起肺气肿的过程而了解的。这种基因缺陷分子病理的广泛研究最近在完成正常和变异分子结构的研究时达到了高峰。现已证明α_1-抗胰蛋白酶是一族新的同源蛋白     

吸烟者血清α1-抗胰蛋白酶、中性粒细胞弹性蛋白酶及组胺的变化

慢性阻塞性肺疾患 (COPD)是常见病、多发病。吸烟是COPD发病的重要因素 ,但其发病机理至今尚未完全阐明。九五期间我们的工作曾表明 ,吸烟伴有COPD者血清α1 抗胰蛋白酶 (α1 AT)明显低于不伴有COPD者[1 ] ,提示α1 AT可能是一重要的宿主高危因素。在此基础上本文继续观察吸烟伴和不伴COPD者血清α1 AT、中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) ,组胺含量及NE α1 AT比值变化 ,为COPD的发病学及早期诊断提供线索。1　材料与方法按病例 对照设计方法 ,从数据库中随机抽取吸烟 (吸烟指数≥ 30 0 )伴COPD者 (病例组 ,FE1 % <70 % )和…     

α_1抗胰蛋白酶

本文主要叙述α_1抗胰蛋白酶(α_1AT)的分子结构、α_1AT基因组成及其转录、转译、表达的作用。同时对α_1AT基因突变的不同类型所引起的各种α_1AT缺乏症以及α_1AT、中性白细胞弹性蛋白酶和肺气肿发生的关系作简要介绍。     

嗜中性粒细胞弹性蛋白酶体外促进嗜中性粒细胞型鼻息肉中MUC5AC 合成和释放

目的:探讨人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)体外干预对嗜中性粒细胞型鼻息肉(NNP)上皮中杯状细胞(GC)合成和释放黏蛋白(MUC5AC)的影响。方法:收集正常鼻黏膜组织和NP组织,免疫荧光染色法鉴定鼻息肉(NP)内表型。将2种组织进行体外培养,HE染色检测GC数量,ELISA和RT-PCR法检测MUC5AC mRNA及蛋白表达。将HNE加入体外培养的NNP组织,进行GC计数,ELISA和RT-PCR法分别检测NNP培养基中MUC5AC mRNA表达。结果:与正常鼻黏膜组织相比,体外培养的NNP组织中GC数明显上升,MUC5AC mRNA及蛋白水平显著上升,当HNE对NNP组织进行体外干预后,GC数及MUC5AC mRNA及蛋白水平均显著上调。结论:HNE体外干预可促进NNP中MUC5AC的合成和释放。     

吸烟对肺弹性蛋白分解的影响

吸烟与呼吸道疾病关系密切,与肺气肿的关系尤其引人注意,吸烟与肺弹性蛋白分解的关系及其发生机理值得研究。作者检测了25例无临床症状的吸烟男性和29例相应年龄的不吸烟正常男性血清中肺弹性蛋白碎片含量及43例无临床症状的吸烟男性和12例相应年龄的不吸烟正常男性血浆中中性粒细胞弹性蛋白酶(Human Neutrophil Elastase)筒称HNE)含     

用人McAb检测血清中α_2M含量

<正> α_2-巨球蛋白(α_2-Macroglobulin,α_2M)具有重要的免疫调节作用。α_2M的测定对多种疾病的临床研究有重要价值。我们用自己研制的抗人α_2M单克隆抗体(McAb)建立了火箭免疫定量技术检测人血清中α_2M含量,为McAb的临床实际应用提供了可能。     

急性肺损伤大鼠肺组织CC16的表达及其对肺局部炎症反应的调控

研究CC16在内毒素急性肺损伤(ALI)发病中的作用。取56只雄性SD大鼠随机分为对照组、内毒素致伤后0.5、1、2、4、6、24h组。用体视学方法测定大鼠肺泡隔面积密度(PASAD)和肺泡隔中性粒细胞(PMN)数。大鼠肺组织匀浆液中CC16蛋白含量测定用Westernblot法,促炎因子TNF和IL-6含量测定用放免分析法。肺组织CC16mRNA表达水平测定用半定量RT-PCR法。大鼠肺组织中核因子NF-κB的表达与活化用免疫荧光和Westernblot法。结果显示静脉注射内毒素后6h内,大鼠PASAD逐渐增大,于6h达最大,24h基本恢复至正常,肺泡隔PMN数进行性增多,于6h达峰值,24h恢复。伤后各时相点CC16蛋白水平分别为(0.740±0.212)、(0.630±0.148)、(0.603±0.111)、(0.570±0.125)、(0.529±0.124)、(0.614±0.185),均明显低于对照组(1.000),差异有高度统计学意义(P<0.01)。致伤后各时相点大鼠CC16mRNA表达水平均明显低于对照组水平,差异有统计学意义。致伤后各时相点肺组织中NF-κB阳性细胞数均明显多于对照组。致伤后各时相点大鼠肺匀浆液中IκB-α含量明显低于对照组。肺匀浆液中促炎因子TNF水平于致伤后0.5h开始迅速升高,于伤后1h达峰值,其后维持在一种高水平状态,于6h后开始恢复。肺匀浆液中IL-6水平于伤后1h开始明显升高,于伤后4h达峰值,6h后开始恢复。CC16与上述多种指标显著相关,提示CC16对肺局部炎症反应有调控作用。CC16表达变化在内毒素致急性肺损伤的发病中有重要作用。     

大鼠急性心肌缺血后心肌及血淋巴细胞肾上腺素能受体的变化

用亚型选择性标记配基~3H CGP12177及~3H-哌唑嗪分别观察急性缺血时大鼠心肌β_1肾上腺素能受体(β_1AR)及α_1AR的变化。同时用~3H-DHA测定血淋巴细胞βAR的改变。8只Wistar大鼠在急性缺血60分钟后β_1AR密度为97.5±13.1fmol/mg蛋白,较12只正常对照组(49.6±5.1fmot/mg蛋白)增高96.6%,P<0.01;较7只手术对照组61.7±8.9fmol/mg蛋白增高58.5%,P<0.05。缺血组9只大鼠平均α_1AR密度564.2±     

弹力蛋白酶和基质金属蛋白酶在肺组织破坏中协同作用的实验研究

目的：采用肺成纤维细胞三维立体培养技术，直接观察弹力蛋白酶和基质金属蛋白酶对肺的主要成分之一胶原组织的降解作用。方法： 用明胶酶谱法和Western blotting法测定MMP-1、2、 3、9和TIMP-1和2 (金属蛋白酶抑制因子), 同时测定胶原含量。结果： TNF-α和IL-1β诱导培养在立体胶原内的肺成纤维细胞产生MMP-1、3和9, 但是只引起少量胶原降解（2.8%±1.5%, P＞0.05），同时加入中性粒细胞弹力蛋白酶(NE), 结果导致胶原完全降解（Ｐ＜0.01）。NE 使MMP-1、2、3和9由非活化的形式转化为较小分子量的活化分子，同时，清除TIMP-1和2。胶原降解后基质发生强烈收缩。结论： 基质金属蛋白酶可直接降解肺内胶原和其它间质组织，导致肺组织破坏，中性粒细胞弹力蛋白酶通过活化基质金属蛋白酶引起或加速细胞外基质的破坏。基质金属蛋白酶与弹力蛋白酶的协同作用可能是肺气肿等肺组织破坏的机理。     

中性粒细胞分泌MMP-2和MMP-9发挥促肿瘤作用

目的肿瘤相关中性粒细胞(tumor-associated neutrophils,TANs)分为抗肿瘤的N1型和促肿瘤的N2型,N2型TANs的作用机制尚不清楚。本研究探讨以胃癌细胞培养上清模拟胃癌微环境或用干扰素β抗体抑制细胞干扰素β,能否诱导正常人中性粒细胞分泌基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2),影响肿瘤的发生发展。方法收集51例正常人外周血,用中性粒细胞分离液分离中性粒细胞,分别用胃癌MGC-803细胞培养上清干预正常人中性粒细胞;用抗干扰素β(interferon beta,IFN-β)抗体干预正常人中性粒细胞。用Real-time PCR法检测2种干预前后中性粒细胞MMP-9和MMP-2 m RNA的变化,以ELISA法检测2种干预前后中性粒细胞分泌MMP-9和MMP-2的情况,明胶酶谱法检测2种干预前后中性粒细胞分泌的MMP-9和MMP-2的酶活性。结果中性粒细胞在MGC-803上清诱导下,MMP-9和MMP-2 m RNA水平、酶含量和酶活性均增加(P<0.01);中性粒细胞经抗IFN-β抗体干预后,MMP-9和MMP-2 m RNA水平、酶含量和酶活性亦显著高于对照组(P<0.01)。结论胃癌微环境或抑制干扰素β均可使中性粒细胞MMP-9和MMP-2分泌量和酶活性增加,促进肿瘤发展,发挥N2型TANs的作用。     

尿液五种微量蛋白与内生肌酐清除率相关性分析：附257例分析

尿微量蛋白测定用于诊断早期肾损害,已广泛应用于临床。本文用放免法(RIA)检测50例正常人、144例原发性高血压(EH)及113例Ⅱ型糖尿病(DM)患者尿α_1-微球蛋白(α_1-m)、β_2-微球蛋白(β_2-m)、Tamm-Horsfall蛋白(THP)、白蛋白(Alb)、免疫球蛋白G(IgG)含量及内生肌酐清除率(cCr)值。探讨尿蛋白与CCr之间的相关性。 资料和方法 一、分组:对照(c)组50例(男29,女21),年龄40.90±10.62岁,血压正常,无心、肝、肾及内分泌疾病。EH组144例(男91,女53),年龄49.73±10.20岁。病程10.1±9.6年。糖尿病(DM)组113例(男68,女45),年龄46.2±8.6岁,病程9.1±3.6年。按CCr(ml/min)范围:>100、80～、50～、<50各分四组:即EH_1组(50例)、EH_2组(58例)、EH_3组(22例)、EH_4组(14例);DM_1组(34例)、DM_2组(41例)、DM_3组(22例)、DM_4组(16例),共八组。各组年龄经方差分析无差异(p>0.05)。 二、标本采集与测定方法:受检者留24h尿,测尿肌酐(UCr)水平,同时采晨空腹静脉血,测血肌酐     

用抗α_2-M单克隆抗体ELISA技术测定尿液中α_2-M(摘要)

有关生理与病理情况下尿液中的α_2-M含量,至今未见正式报告。我们应用本科自制鼠抗人α_2-M单克隆抗体,建立ELISA技术,对尿液中α_2-M含量进行测定,发现此法敏感性高,可直接从尿液中测出低迷26ng/ml的α_2-M,批内误差(cv)为11％,现将结果报告如下: 料材和方法 1.鼠抗人α_2-M单克隆抗体、羊抗人α_2-M多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记兔抗羊IgG均由本科自制。