奈替米星对豚鼠耳蜗毛细胞凋亡作用的影响

目的研究奈替米星对于豚鼠耳蜗毛细胞的凋亡作用。方法将豚鼠分为生理盐水对照组和奈替米星组,连续给药14 d,利用TUNEL法原位检测动物耳蜗毛细胞的凋亡情况。结果生理盐水对照组豚鼠耳蜗未见凋亡毛细胞,而奈替米星组豚鼠耳蜗基底回中第1、2排外毛细胞丢失,第3排外毛细胞呈阳性表达,第3回中第1排外毛细胞丢失,第2排外毛细胞呈阳性表达。第2回毛细胞中仅见第1排外毛细胞呈阳性表达。结论奈替米星作用于豚鼠耳蜗时可引起外毛细胞凋亡;奈替米星耳毒性的产生可能与其引起耳蜗毛细胞凋亡有关。     

抗生素89—07与奈替米星对豚鼠耳毒性的比较

９２只豚鼠分别肌注４种剂量的抗生素８９－０７、ＮＴＬ及生理盐水、２８ｄ后通过电生理、病理形态学检查，比较抗生素８９－０７与ＮＴＬ对豚鼠的耳毒性。结果显示：抗生素８９－０７与ＮＴＬ对听性脑干电反应阈值无显著影响。抗生素８９－０７较ＮＴＬ对前庭功能影响稍轻。     

地塞米松对庆大霉素和丁胺卡那霉素所致豚鼠耳毒性的保护作用

目的：观察地塞米松能否拮抗庆大霉素和丁胺卡那霉素所致的耳毒性。方法：取听力正常的豚鼠50只，雌雄各半，随机分为5组：庆大霉素组；丁胺卡那霉素组；庆大霉素 地塞米松组；丁胺卡那霉素 地塞米松组和生理盐水对照组。用药2wk后饲养1wk，检查中耳粘膜反应、眼震抑制率及耳蜗的形态学变化。结果：庆大霉素 地塞米松组与庆大霉素组比较；丁胺卡那霉素 地塞米松组与丁胺卡那霉素组相比有显著性差异。结论：地塞米松对庆大霉素与丁胺卡那霉素所造成的耳毒性有明显的保护作用。     

金纳多对奈替米星致耳毒性模型豚鼠的预防和治疗作用研究

目的:研究金纳多注射液对奈替米星导致豚鼠耳毒性的预防和治疗作用。方法:将48只豚鼠随机分成生理盐水对照组、奈替米星组、金纳多预防组和金纳多治疗组,以不同方式给药4wk后,比较各组豚鼠的耳廓反射阈、脑干诱发电位、Ⅲ波时间、血清铁离子浓度和SOD活性以及耳蜗毛细胞扫描电镜图。结果:4wk后金纳多预防组和金纳多治疗组的耳廓反射阈、脑干诱发电位、Ⅲ波时间分别为(33.75±4.20)dB、(25.63±3.71)dB、(3.91±0.18)ms和(27.27±4.54)dB、(32.95±4.30)dB、(4.30±0.16)ms,2组间比较存在显著性差异(P<0.01)。结论:金纳多注射液能预防和治疗奈替米星引起的豚鼠耳毒性,而且预防给药对耳毒性的改善作用大于治疗给药。     

氨基糖苷类抗生素及耳毒性药物的临床应用

我国有听力语言障碍的残疾人1770万，其中聋哑儿有600万，7岁以下的聋儿可达80万，由于药物、遗传、感染、疾病、环境噪声污染、意外事故等原因，每年约新生聋儿3万余名。为有效开展聋儿康复和预防工作，1988年聋儿康复工作作为一项抢救性工程列入国家计划，开始系统实施。1999年卫生部颁布了“常用耳毒性药物临床使用规范”，规定了30种耳毒性药物的使用标准，指导医生正确、规范地使用。减少和避免听力语言残疾的发生。     

氨基糖苷类抗生素耳毒性的防治

氨基糖苷类抗生素具有抗菌谱广 ,对大多数革兰氏阴性需氧杆菌引起的感染显示了良好的效果。但该族类药的耳毒性、肾毒性限制了它的广泛应用。本文就氨基糖苷类的耳毒性症状、预防和治疗作一综述 ,以减少氨基糖苷类抗生素在治疗中的耳毒性发生。     

新氨基糖苷类抗生素威替米星的体外抗菌活性研究

目的评价威替米星对革兰阴性菌的体外抗菌活性。方法采用琼脂平皿稀释法测定威替米星及其对照药威大霉素、庆大霉素、依替米星、阿米卡星、奈替米星、妥布霉素、哌拉西林、头孢噻肟、环丙沙星对892株革兰阴性菌的体外抗菌作用。结果威替米星对892株临床分离革兰阴性菌具有较强的抗菌活性，对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、弗氏柠檬酸杆菌、差异柠檬酸杆菌、摩氏摩根菌、奇异变形菌、粘质沙雷菌、流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌和乙酸钙不动杆菌的MIC50值为0．25～1mg／L。对铜绿假单胞菌、假单胞菌、雷氏普罗威登斯菌的MIC50值分别为8、64、4mg／L。威替米星对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌显示浓度依赖性杀菌作用。威替米星对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的抗菌活性随着pH的升高而增强，而2价金属阳离子可降低其抗菌活性，接种量和血清浓度对其抗菌活性无明显影响。结论威替米星对革兰阴性菌具有较强体外抗菌作用，值得进一步研究和开发。     

氨基糖苷类抗生素耳毒性机制的研究进展

氨基糖苷类抗生素(AmAn)是治疗Gram阴性杆菌感染的重要药物,其通过抑制细菌细胞膜蛋白质的合成,改变膜的完整性而发挥强效杀菌作用,但其听觉损害对其临床应用受到极大限制。现就目前AmAn耳毒性的机制研究进行几个方面综述。     

氨基糖苷类抗生素的体内分析方法

综述了氨基糖苷类抗生素的体内分析方法 .主要有 :生物学分析法 ;薄层色谱法 ;高效液相色谱法 ;差示脉冲极谱及各种免疫法 ,如酶免疫法 ,荧光偏振免疫法 ,胶乳凝集抑制速率比浊法等 .其中高效液相色谱法和免疫法应用较多     

庆大霉素对不同年龄组豚鼠的药动学与耳毒性研究

目的 :观察庆大霉素治疗剂量对幼年和成年豚鼠耳毒性的程度有无差异。方法 :幼年组、成年组豚鼠各 35只 ,对照组各 7只。按照与人类等效剂量肌肉注射庆大霉素 ,用高效液相法分析两组药动学特点 ;用光镜和电镜观察两组耳蜗损伤情况。结果 :单剂给药 2组均为二室开放模型 ,峰浓度和达峰时间差异无显著性 ;多次给药幼年组血药浓度明显高于同点成年组 ,存在明显体内药物蓄积 ;耳蜗损伤情况 ,幼年组较成年组重 ,且停药后毛细胞缺失数持续增加。结论 :等效人类治疗剂量的庆大霉素对幼年组豚鼠造成的耳毒性损害较成年组严重 ,且随用药时间延长而加重。幼年豚鼠的这种高敏性可能与药物从体内排出慢、易蓄积有关。     

顺铂抑制豚鼠耳蜗外毛细胞钙激活的钾电流

目的　研究顺铂对豚鼠耳蜗外毛细胞钙激活的钾电流作用。方法　豚鼠被迅速断头处死 ,暴露耳蜗 ,在解剖显微镜下去除耳蜗侧壁 ,经胰蛋白酶消化并轻轻吹打 ,以获得单离的豚鼠耳蜗外毛细胞。静置后在倒置相差显微镜下观察。应用膜片钳制技术从单离的豚鼠耳蜗外毛细胞获得钙激活的钾通道记录 ,并观察顺铂对它的作用。结果　结果表明该通道活动受到细胞外浓度为 10 -5mol·L-1的顺铂的抑制。结论　顺铂可抑制豚鼠耳蜗外毛细胞的钙激活的钾电流     

庆大霉素对组胺所致豚鼠离体肠肌收缩的拮抗作用

目的观察庆大霉素对组胺所致豚鼠离体回肠的拮抗作用。方法离体豚鼠回肠经庆大霉素预处理后加入不同浓度组胺,记录肠肌收缩的幅度。结果发现庆大霉素能部分对抗组胺诱发的肠肌收缩,对组胺的减活指数为4.45,甚至对肠肌也有直接的舒张作用。结论庆大霉素对肠肌具有舒张作用,此作用在庆大霉素口服治疗感染性胃肠炎方面具有减轻症状的意义。     

Protective role of pyrroloquinoline quinone against gentamicin induced cochlear hair cell ototoxicity

Gentamicin (GM) is one of the commonly used antibiotics in the aminoglycoside class but is ototoxic, which constantly impacts the quality of human life. Pyrroloquinoline quinone (PQQ) as a redox cofactor produced by bacteria was found in soil and foods that exert an antioxidant and redox modulator. It is well documented that the PQQ can alleviate inflammatory responses and cytotoxicity. However, our understanding of PQQ in ototoxicity remains unclear. We reported that PQQ could protect against GM-induced ototoxicity in House Ear Institute-Organ of Corti 1 (HEI-OC1) cells in vitro. To evaluate reactive oxygen species (ROS) production and mitochondrial function, ROS and JC-1 staining, oxygen consumption rate (OCR), and extracellular acidification rate (ECAR) measurements in living cells, mitochondrial dynamics analysis was performed. GM-mediated damage was performed by reducing the production of ROS and inhibiting mitochondria biogenesis and dynamics. PQQ ameliorated the cellular oxidative stress and recovered mitochondrial membrane potential, facilitating the recovery of mitochondrial biogenesis and dynamics. Our in vitro findings improve our understanding of the GM-induced ototoxicity with therapeutic implications for PQQ.     

Baicalin attenuates gentamicin‐induced cochlear hair cell ototoxicity

Gentamicin can lead to cochlear hair cells associated ototoxicity by inducing apoptosis and oxidative stress, which can be alleviated by baicalin, one flavonoid extracted from the root of Scutellaria baicalensis. The role of baicalin in protecting gentamicin‐induced hearing loss is unclear. Interference with oxidative stress was investigated in this study using House Ear Institute‐Organ of Corti1 (HEI‐OC1) cells, which were simultaneously treated with baicalin (0‐400 μm ) and gentamicin (0.2 or 1 mm ). MTT was used to assay cell viability and apoptosis was detected with Annexin V‐fluorescein isothiocyanate staining. The production of reactive oxygen species was indicated by 2,7‐dichlorofluorescein diacetate fluorescence intensity and mitochondrial depolarization was assayed by JC1‐mitochondrial membrane potential assay. Poly(ADP‐ribose) polymerase (PARP), cleaved‐caspase 3 and cleaved‐PARP expression were analyzed with western blot. Baicalin improved the viability of HEI‐OC1 cells and significantly reduced the oxidative stress and mitochondrial depolarization compared with the gentamicin treatment group. Gentamicin treatment increased the activation of PARP and caspase‐3, while such an increase could be downregulated by baicalin. Baicalin attenuates gentamicin‐induced cochlear hair cells ototoxicity, and such inhibition may be mediated by the regulation of reactive oxygen species production, mitochondrial depolarization, and caspase‐3 and PARP activation.     

豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性BK电流

目的研究豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞乙酰胆碱(ACh)-敏感性钾电流的特性。方法应用全细胞膜片钳技术检测新鲜单离的豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞ACh-敏感性钾电流的离子特性及其药理学特点。结果①细胞外ACh激活一缓慢持久的外向性电流,其效应呈浓度依赖性,半数激活浓度为45μmol.L-1。②ACh-敏感性钾电流对钾通道阻断剂TEA(tetraethylammon ium)、IBTX(ibe-riotoxin)和Cs+敏感,而对4-AP(4-am inopyride)和apam in不敏感。③细胞内应用钙离子螯合剂BAPTA[b is(2-am inophe-noxy)ethane-N,N,N,′N-t′etra-acetic ac id],ACh-敏感性钾电流的幅值迅速被抑制。④ACh-敏感性钾电流对细胞外液中钙离子浓度变化敏感,0.2 mmol.L-1低钙外液中ACh-敏感性钾电流被抑制,电流最大值由0~10 mV向-20 mV~-30 mV超极化方向移动。结论细胞外ACh激活豚鼠球囊和椭圆囊Ⅱ型前庭毛细胞产生大电导钙依赖性钾电流(BK)。ACh-敏感性BK电流在豚鼠Ⅱ型前庭毛细胞超极化保护机制中具有重要的作用。     

Wnt通路对胰岛素样生长因子-1抑制小鼠毛细胞凋亡的作用

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)抑制小鼠毛细胞凋亡作用的调控机制。方法体外培养新生小鼠耳蜗基底膜。在分别含有正常对照培养液(A组)、0.5 mmol/L庆大霉素(GM)(B组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF(C组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+5μg/mL wif(D组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+10μg/mLwif(E组)、0.5 mmol/L GM+1 ng/mL IGF+15μg/mL wif(F组)的成分中培养24 h后收集细胞及固定。应用TUNEL法观察各组耳蜗毛细胞的凋亡情况。应用Western blot及Real-time PCR法观察Caspase-3的表达情况。结果 B组耳蜗毛细胞经刺激后,细胞凋亡数量及Caspase-3 mRNA和蛋白表达较A组明显上升(P<0.01),C组耳蜗毛细胞经IGF刺激后,细胞凋亡数量及Caspase-3mRNA和蛋白表达较B组明显下降(P<0.01),应用Wnt阻断剂(wif)后D、E及F组细胞凋亡数量及Caspase-3 mRNA和蛋白表达较C组升高,其中F组升高显著(P<0.01)。结论 IGF可能通过激活Wnt通路抑制毛细胞凋亡。     

氨基糖苷类药物耳毒性的斑马鱼模型的研究

氨基糖苷类抗生素因其抗菌谱广、抗菌能力强,半个多世纪以来一直是临床上常用的抗菌素之一。但氨基糖苷类抗生素具有很强的耳毒和肾毒作用,在药物致聋因素中排在首位。本研究以庆大霉素(gentamycin)、新霉素(neomycin)、链霉素(streptomycin)等3种氨基糖苷类抗生素为代表性药物,研究其对斑马鱼胚胎发育的毒性作用和对幼体毛细胞的损伤作用,并探索了该损伤与听觉相关基因之间的联系。结果显示:①3种药物的致死作用都具有明显的浓度依赖性,其致死作用的强弱顺序为链霉素>新霉素>庆大霉素;②3种药物处理的5 dpf(day past fertilization)幼体出现身体失衡及体位异常,以及耳囊结构的异常变化;③毛细胞染色实验可观察到,3种药物作用的毛细胞和神经丘均出现明显的损伤和数量减少;④与听觉器官发育相关的基因eya1、val、otx2、dlx6a均随3种抗生素药物浓度的升高,出现差异性的表达水平下调。本研究首次探索了这3种耳毒性氨基糖苷类抗生素处理与斑马鱼听囊结构和听觉基因表达的相关性;并证明利用斑马鱼建立简便、准确、直观、快速地检测药物耳毒性的模型和检测方法的可行性。     

常咯啉对豚鼠心室乳头肌的频率及使用依赖性等电生理作用

运用标准玻璃微电极、微机实时分析技术及特异性离子阻断剂研究常咯啉(CRL)对豚鼠心室乳头肌的作用。常咯啉对动作电位的(?)_(max)呈现浓度依赖、频率依赖和使用依赖性阻断作用。用钾离子阻断剂CsCl 15μmol/L后,常咯啉不再缩短APD,用高钾使细胞部分除极后,常咯啉使动作电位的(?)_(max)下降,APD延长,ERP相对延长。部分除极标本用钙离子阻断剂维拉帕米3μg/ml后,常咯啉不再延长APD。可见,常咯啉不仅阻钠内流,且可能有促钾外流和促钙内流的作用。