深低温冷冻同种异体月骨移植临床应用6例报告

目的　研究深低温冷冻同种异体月骨移植治疗月骨无菌性坏死的临床疗效。方法　应用深低温冷冻同种异体月骨移植治疗月骨无菌性坏死 6例 ,随访 10年以上。结果　 6例患者切口一期愈合 ,术后无明显排异反应及手术并发症。随访 10年以上 ,摄X线片显示月骨轮廓清晰 ,大小正常 ,骨小梁排列整齐 ,整个月骨密度均匀一致无明显脱钙 ,腕关节活动无疼痛 ,活动范围屈和 (或 )伸 3 0～ 0～ 2 5°能完成日常劳动 ,病人关节功能恢复满意。结论　深低温冷冻同种异体月骨移植治疗月骨无菌性坏死疗效满意。     

同种异体肌腱保存方法研究进展

同种异体肌腱移植是修复肌腱缺损,尤其是多条肌腱缺损较为理想的方法,常用的同种异体肌腱的保存方法有冷冻法、冻干法、化学处理加真空冻干或冷冻法等。笔者就异体肌腱的保存方法做一综述。     

去细胞神经同种异体移植的运动功能恢复

目的 研究去细胞同种异体神经移植修复大型哺乳类动物粗大和长段周围神经缺损的效果。方法 15只犬分为去细胞神经同种异体移植组（实验组）6只、自体神经移植组（对照组Ⅰ）6只、新鲜神经同种异体移植组（对照组Ⅱ组）3只。右侧坐骨神经主干造成5cm长缺损，分别以上述三种神经移植物桥接修复，术后6个月进行步态分析。结果 实验组和对照组Ⅰ功能恢复一般情况相似，对照组Ⅱ无任何恢复；实验组和对照组Ⅰ的右后肢运动及步态周期非常相似，踝关节跖屈及背伸肌群的肌力均有一定程度的恢复，但不及正常犬。结论 化学去细胞神经同种异体移植修复犬坐骨神经长段缺损，在术后6个月近期运动功能恢复与自体神经移植相似。     

不同处理的同种异体骨对成骨细胞增殖和活性的影响

为探讨各同种异体骨对成骨细胞增殖和活性的影响，将5种同种异体兔骨分别与DMEM培养液匀浆，取各上清液与兔成骨细胞复合后体外培养，以MTT比色法检测细胞增殖活性并进行碱性磷酸酶定量测定。结果显示，冷冻骨（FB）、冻干骨（LB）对成骨细胞增殖和活性有抑制，而脱钙骨基质（DBM）、骨基质明胶（BMG）及去抗原自溶同种异体骨（AAA）则表现出促进作用。说明除FB、LB外，其余3种同种异体骨均具有良好的细胞相容性，且可提高成骨细胞的增殖能力和功能活性。     

冷冻同种异体肌腱小鼠移植的细胞毒、IL－2水平及组织学观察

了解冷冻同种异体肌腱移植术后宿主的免疫排斥反应。方法采用ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠肌袋模型，植入冷冻Ｃ５７小鼠跟腱，观察术后各期宿主血清微量细胞毒性，局部组织浆ＩＬ－２水平和局部组织学变化。结论经冷冻／冻干处理后，同种异体肌腱移植免疫斥反应显著降低，但未消失。     

冻融异种神经匀浆结合硅胶管套接法修复周围神经缺损的实验研究

目的　探讨冻融异种神经匀浆结合硅胶管套接对周围神经再生的影响。方法　Wistar大鼠 2 4只 ,分成 2组 ,切断其右侧坐骨神经造成 10mm缺损。A组于硅胶管内注入冻融异种神经匀浆悬浮液 30 μl,B组于硅胶管内注入 30 μl生理盐水。于术后 16周分别进行大体、电生理、组织学观察和形态学分析。 结果　A组的再生神经运动传导速度快于B组 ,再生有髓神经纤维数亦高于B组 ,经统计学处理有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论　深低温冷冻处理是一种有效的降低异种神经抗原性的方法 ,冻融异种神经匀浆有明显促神经再生作用。     

低温冷冻和酒精处理的同种异体周围神经移植的效果比较

目的 比较低温冷冻和酒精处理的同种异体周围神经移植的疗效。方法 取45只成年雄性SD大白鼠，随机分为A、B、C、D4组。A、B、C组为实验组，每组10只；D组为供体组，15只，切取双侧坐骨神经15mm作为供神经。A组的供体神经在－196℃下保存3周，37℃生理盐水复温后桥接于受体一侧坐骨神经10mm缺损段；B组用70％酒精浸泡8小时后，桥接于受体一侧坐骨神经10mm缺损段；C组的供体神经不经任何预处理，桥接于受体一侧坐骨神经10mm缺损段。术后17周进行电生理测定，光镜观察及移植异体神经中段的轴突计数。结果 A、B实验组的电生理测定及移植神经中段的轴突计数结果无显著性差异，光镜下的形态学变化相似。A、B组与C组、电生理测定与移植体中段轴突计数均有显著性差异。结论 两种预处理方法降低异体神经的抗原性具有相似的近期效果。     

鸦胆子在异体肌腱移植中抗排异作用的实验研究

目前 ,国内外不少学者对异体肌腱移植的研究和应用作了大量研究 ,如深低温冷冻、冷冻干燥、西药贮存液如双氧水等处理。而目前国内外文献用中药处理和保存异体肌腱的方法尚未见报道。笔者进行了中药鸦胆子在异体肌腱移植中抗排异作用的研究 ,获得成功。一、材料与方法(一 )实验动物成年豚鼠 10 4只 ,体重 35 0～ 40 0ｇ,由浙江大学实验动物中心提供 ,雌雄不分 ,同等条件饲养。饲料中均未用免疫抑制剂。(二 )实验仪器普通冰箱 ,拉力测试机 (浙江大学材料力学系提供 ) ,ＣＳＳ - 44 10 0电子万能实验机 ,淋巴细胞分离液 (上海试制二厂 ,批号 9…     

同种异体动脉在平时四肢大血管火器伤修复中的应用

目的探讨平时四肢大血管火器伤中血管损伤的修复方法。方法2002年5月～2005年9月，应用15条经深低温保存的同种异体动脉移植修复肱动脉损伤5例、腋动脉损伤1例，胴动脉损伤1例、股动脉缺损7例（14例患者），移植血管平均长9．5cm。术后按显微外科常规观察治疗效果。结果14例术后均无早期排异反应，伤口经Ⅱ期处理后全部愈合，愈合后2～3周经超声多普勒检测，血管通畅率为100％。随访4～12个月，肢体功能恢复良好，未见迟发排异反应。结论经深低温处理的同种异体动脉可作为临床修复平时四肢大血管火器伤较为理想的生物性材料。     

深低温冷冻保存同种异体肌腱移植修复陈旧性跟腱断裂研究

目的：探讨深低温冷冻保存同种异体肌腱移植修复陈旧性跟腱断裂的临床效果。方法2010年1月-2012年9月收治急性创伤所致跟腱断裂一期未行修复导致的陈旧性跟腱断裂患者共32例,缺损长度3-6（4.6±1.0）cm,手术所用肌腱为经过深低温处理的同种异体胫前肌肌腱。在跟腱远端和近端用2-0可吸收抗菌薇乔采用双束 Kessler 法端端吻合,术后常规跖屈20-30°位固定踝关节,足背肢具或石膏板固定4-6 w。3例合并皮肤缺损者,行腓肠神经营养皮瓣转移覆盖创面。术后采用美国足踝外科协会（ AOFAS）踝与后足评分行疗效评价。结果术后32例均获随访1年以上,平均随访（15.0±3.5）个月,其中29例切口Ⅰ期愈合,2例切口Ⅱ期愈合,1例因为排异反应取出移植肌腱由于疤痕愈合未行再次肌腱移植,目前可以正常行走。术后踝关节功能恢复良好,AOFAS 足踝评分从术前（50.5±5.5）分提高到术后（90.5±6.5）分。结论修复陈旧性跟腱断裂可用深低温冷冻保存同种异体肌腱,手术效果可,并可避免取自体腱造成二次损伤和并发症,患者更容易接受,移植物可长期保存,但长期效果仍需长期随访。     

血管植入游离神经移植段修复周围神经缺损的实验研究

用血管植入游离神经移植，带血管蒂神经移植和单纯游离神经移植桥接１０ｍｍ神经缺损，观察５天￣３个月，毛细血管染色，血管灌注和再生神经组织学及电生理检测结果表明，血管植入神经移植和带血管蒂移植早期移植体血管化程度，以及后期再生神经纤维面积恢复率，神经传导速度均相似，且明显优于游离神经移植。     

周围神经损伤对脊髓运动神经元NT—3表达的影响

目的：探讨周围神经损伤对脊髓运动神经元神经营养因子－3（NT－3）水平变化规律及与神经元病理变化的相关性。方法：切断大鼠坐骨神经复制周围神经损伤模型,免疫组织化学染色NT－3阳性脊髓运动神经元、图像分析计算其吸光度以反映NT－3的水平。结果：成鼠或乳鼠坐骨神经损伤后运动神经NT－3水平均很快下降,致伤后第2周降至最低水平,随后逐渐恢复,至4周仍未恢复到对照组水平;神经元病理改变过程与此相似,但乳鼠NT－3基础水平高于成鼠。结论：周围神经损伤后脊髓运动神经元NT－3水平将发生变化。运动神经元内源性NT－3水平与其病变程度呈负相关。     

神经桥接材料与周围神经修复

周围神经损伤的长段缺损需要神经移植修复。自体神经移植一直被认为是桥接周围神经缺损最好的方法，但其来源有限，且存在供区并发症。 最近研究表明，神经移植可以通过不同的桥接材料来完成。这些周围神经桥接体，作为一种调节和改变神经再生的细胞和分子环境的载体，对周围神经损伤的修复有不同影响。     

坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元内神经生长因子的时程变化

以坐骨神经损伤的豚鼠为动物模型，采用免疫细胞化学方法，研究脊髓前角运动细胞神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）的变化。结果表明，ＮＧＦ－ｉｒ免疫阳性产物见于前角运动核背外侧群（ＤＬ）、腹外侧群（ＶＬ）、中间群（Ｃ）、后背外侧群（ＲＤＬ），损伤侧ＮＧＦ免疫反应染色明显深于对照侧，第４ｄ染色达到高峰。提示ＮＧＦ在坐骨神经损伤后，可能具有营养、保护及促进损伤神经再生作用     

兔面神经撞击伤后生长相关蛋白、神经丝蛋白变化及丙酸睾丸酮促修复作用

目的　探讨兔面神经撞击伤后生长相关蛋白 (GAP - 4 3 )、神经丝蛋白 (NFP2 0 0 )的变化及丙酸睾丸酮 (TP)的促修复作用。方法　将 84只兔分为等渗盐水对照组和TP治疗组 ,用生物撞击机致面神经干中度损伤。采用免疫组化和Western印迹等方法观察GAP - 4 3、NFP2 0 0 的变化。结果　伤后两组面神经核内GAP - 4 3免疫反应阳性神经元数量和含量迅速增加 ,并于伤后 2周达高峰 ,TP治疗组显著高于对照组 ;伤后 7天 ,NFP2 0 0 免疫反应阳性神经元和含量降至最低 ,对照组更为明显。伤后早期神经纤维变性、髓鞘崩解 ,伤后 2周治疗组可见少量新生神经纤维。结论　GAP- 4 3和NFP2 0 0 的表达与神经的再生修复过程密切相关 ,TP具有显著的促面神经损伤修复作用。     

坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰段脊髓病理改变

目的　研究坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰段脊髓的病理改变。方法　火器伤组致伤靶点为兔右后肢外侧坐骨神经体表投影线中点 ,切割伤组在同一水平切断右坐骨神经 ,分别在光电镜下观察伤后 1天、3天 ,1周、2周、4周、12周时腰段脊髓的病理改变。结果　火器伤组可见腰段脊髓有小出血灶、神经元水肿、空泡样变、运动神经元数量减少等变化 ,切割伤组则未见这些病理改变。结论　火器伤组腰段脊髓损伤较切割伤组重 ,运动神经元存活数量显著减少     

γ刀照射三叉神经的剂量-效应关系研究

目的 探讨伽玛刀不同剂量照射大鼠三叉神经(感觉根)后对照射范围内三叉神经组织的损伤以及对周围临近脑干组织和脑桥的影响,为优化伽玛刀照射剂量提供理论依据。方法 选用成年雄性SD大鼠65只,分别以不同照射剂量(20、40、80、160 Gy)照射三叉神经,观察照射后1周、2周、4周大鼠行为学变化,取全脑组织进行HE、Nissl、MAPLC3B、53BP1、XRCC1染色观察细胞形态学和自噬以及DNA损伤和修复等变化。结果 所有剂量组照射大鼠均存活。20和40 Gy组均无行为学和病理学改变;80和160 Gy组均出现了照射部位毛发脱落;HE、Nissle、LC3B、53BP1及XRCC1染色发现,受照部位组织在80和160 Gy照射后,可见神经元细胞固缩、膨胀,神经元细胞发生自噬以及DNA损伤明显,160 Gy组DNA损伤明显加重。40 Gy照射后,神经元发生DNA损伤修复的程度较其他剂量增高。结论 伽玛刀照射三叉神经根对神经元有明显的剂量-效应关系。     

PirB蛋白在中枢神经损伤修复中的作用

中枢神经系统损伤后再生困难的一个重要原因是因为髓鞘中存在与其相关的神经生长抑制性因子,而Pir B蛋白是新发现的这些因子的共同受体。许多研究发现Pir B在中枢神经系统中广泛表达,并参与调控神经元发育、生长导向及可塑性等作用,阻抑Pir B功能后存在促进中枢神经系统神经再生修复的作用。深入了解Pir B的功能可能为神经再生带来新的希望。     

局部冷冻活体骨骼肌桥接周围神经缺损的实验研究

使用经局部冷冻处理的活体骨骼肌桥接大鼠的１０ｍｍ坐骨神经缺损，以完全变性骨骼肌桥为对照组；分别在术后３天至９周的不同时间里，使用放射性同位素标记法测量肌桥血流量，肌肉张力测定，部分标本进行免疫组化染色及超微结构观察，实验结果表明，实验组肌桥血流量在３天内恢复到正常；６９周实验组肌桥及神经远端的神经纤维数及髓鞘厚度均大于对照组，局部冷冻活体骨骼肌有望用于临床上粗大神经缺损的桥接。