RUNX3基因甲基化与鼻咽癌的临床生物学行为关系

目的探讨RUNX3基因甲基化与鼻咽癌临床生物学行为关系。方法运用甲基化特异性PCR对54例鼻咽癌组织、18例慢性鼻咽炎症组织和20例正常鼻咽上皮组织的RUNX3基因启动子区甲基化状态进行检测。结果 RUNX3基因在鼻咽癌组织中启动子甲基化频率为59%(32/54);而在慢性鼻咽炎症组织和正常鼻咽上皮组织中均未检测到RUNX3基因启动子甲基化。RUNX3基因启动子区甲基化与患者临床生物学行为无明显相关关系。结论 RUNX3基因甲基化具有肿瘤特异性,RUNX3基因甲基化参与鼻咽癌发生发展,但目前尚不能作为判断鼻咽癌临床预后预测指标。     

鼻咽刷洗物RUNX3基因甲基化在鼻咽癌早期诊断中价值研究

目的探讨鼻咽刷洗物检测RUNX3基因甲基化在鼻咽癌早期诊断中价值。方法运用甲基化特异性PCR检测54例鼻咽癌患者、18例慢性鼻咽炎患者和20例健康志愿者配对鼻咽部组织及鼻咽刷洗物中RUNX3基因启动子区甲基化情况。结果鼻咽癌患者鼻咽部癌组织RUNX3基因甲基化频率59.26%(32/54),鼻咽刷洗物51.85%(28/54);而在慢性鼻咽炎患者和健康者鼻咽部组织及鼻咽刷洗物中均未检测到RUNX3基因启动子甲基化。鼻咽癌组织与鼻咽刷洗物中RUNX3基因甲基化密切相关(r=0.86),RUNX3基因甲基化与患者临床病理特征无明显相关关系。结论鼻咽刷洗物检测RUNX3基因甲基化具有肿瘤特异性,对早期诊断鼻咽癌有一定的临床价值。     

鼻咽癌肿瘤抑制基因甲基化的研究进展

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）好发于中国南方各省及东南亚地区,其病因涉及EB病毒感染、遗传因素、饮食与环境因素。多年来对NPC的研究关注于对早期癌细胞有主要影响的基因突变与杂合子缺失,随着肿瘤分子生物学及其研究技术的迅速发展,表观遗传学事件如DNA甲基化和组蛋白乙酰化等在肿瘤发生发展过程中的重要作用被逐步证实。     

早期鼻咽癌基因甲基化谱的初步构建

摘 要: 【目的】 分析早期鼻咽癌的基因甲基化状态,初步构建早期鼻咽癌的基因甲基化谱?【方法】 收集I期(T1N0M0)鼻咽癌石蜡标本及炎性增生性鼻咽组织各4例,分别提取DNA,富集两组样品基因组甲基化片段后采用甲基化芯片(NimbleGen)对两组标本进行高通量测序分析,对杂交信号进行扫描及初步数据处理,分析并筛选出两组标本的差异甲基化基因?【结果】 4例鼻咽癌石蜡标本中均出现甲基化的基因数目为1 134个,而4例炎性增生性鼻咽组织中均出现甲基化的基因有2 091个,4例鼻咽癌标本全部发生甲基化但4例炎性增生性鼻咽组织全未发生甲基化的基因有218个,提示此218个基因可能为早期鼻咽癌患者的甲基化基因谱?另外,4例鼻咽癌标本全未发生甲基化而4例炎性增生性鼻咽组织全部发生甲基化的基因数目为1 558个?【结论】 本研究初步构建了早期鼻咽癌的基因甲基化谱,为进一步建立更为精确的甲基化谱奠定了基础,同时也为寻找鼻咽癌新的分子标志物提供了可能?     

Parkin基因甲基化对鼻咽癌早期诊断及预后判断的价值研究

目的研究Parkin基因甲基化在鼻咽癌早期诊断及预后判断中的价值。方法运用甲基化特异性PCR检测54例鼻咽癌组织、16例慢性鼻咽炎症组织和16例正常鼻咽上皮组织中Parkin基因启动子区甲基化情况,并分析其与鼻咽癌临床生物学因素的关系。结果慢性鼻咽炎症组织和正常鼻咽上皮组织中均未检测到Parkin基因甲基化,而在鼻咽癌组织中甲基化率为62.96%(34/54),3种鼻咽组织Parkin基因甲基化情况比较有统计学差异（P＜0.05）。进一步统计学分析发现鼻咽癌组织Parkin基因甲基化与其临床生物学因素均无关（均P＞0.05）。结论Parkin基因甲基化具有肿瘤特异性,与鼻咽癌发生、发展密切相关,有望成为早期分子生物学辅助诊断的标志物,但不能作为判断鼻咽癌预后的预测指标。     

DNA启动子甲基化与鼻咽癌研究进展

DNA甲基化是表观遗传学重要组成部分之一,而表观遗传学主要是研究理化、生物等环境因素以及饮食习惯等对遗传因素的作用,并由这一作用引起DNA序列的遗传物质改变.鼻咽癌易受理化、生物等环境因素的影响,是多基因遗传性肿瘤.现研究发现鼻咽癌与细胞凋亡和细胞周期调控基因、DNA修复基因、CHFR基因、ras相关基因、DLC-1基因等启动子区异常甲基化相关.     

乳腺癌中RUNX3基因启动子区甲基化及基因表达研究

目的 通过检测乳腺癌中RUNX3基因启动子甲基化状态及其对mRNA表达的影响,探讨RUNX3在乳腺癌发生、发展中的意义.方法 运用甲基化特异性PCR(MSP)检测40例乳腺浸润性导管癌和20例乳腺良性病变标本中RUNX3基因启动子甲基化状态,同时采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测该基因的表达情况.结果 乳腺癌组织中RUNX3基因的甲基化率为47.5%,明显高于乳腺良性病变组织的甲基化率,其差异具有显著性(P<0.05);同时乳腺癌组织中RUNX3基因表达缺失率为40%,明显高于乳腺良性病变,其差异也具有显著性(P<0.05).乳腺癌中RUNX3基因启动子甲基化水平与患者的病理组织学分级有相关性,差异有统计学意义(P<0.05),与患者的年龄、淋巴结转移无相关性.RUNX3基因表达与患者的临床病理特征均无相关性.结论 RUNX3基因启动子的高甲基化可能是乳腺癌中一类重要的分子改变,也是导致RUNX3基因表达下降的原因之一,并参与了肿瘤的演进.     

结肠癌中RUNX3基因表达和启动子甲基化及其临床意义

目的 探讨RUNX3基因表达和启动子甲基化在结肠癌发生发展过程中的作用及其临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测RUNX3基因表达,用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测RUNX3基因启动子甲基化.结果 47例结肠癌中,癌旁肠粘膜、原发灶、肝转移灶中RUNX3表达阳性率分别为100%(47/47)、38.3%(18/47)、14.3%(1/7).原发灶和肝转移灶中RUNX3表达明显降低(P<0.01).癌旁肠粘膜组织、癌原发灶、肝转移灶组织中RUNX3基因启动子甲基化阳性率分别为10.6%(5/47),44.7%(21/47),57.1%(4/7),3种组织RUNX3基因启动子甲基化率的差别有显著性意义(P<0.01).在7例出现肝转移者中发生RUNX3失活者6例,其中4例(66.7%)存在RUNX3基因启动子甲基化.结论 RUNX3基因启动子甲基化和RUNX3蛋白表达在结肠癌的癌旁组织和原发癌灶间存在显著的差异,可能与结肠癌的发生发展有关.     

鼻咽癌中p73基因启动子甲基化状态及转录表达的研究

目的探讨鼻咽癌组织中p73基因启动子区甲基化状态及其对转录表达影响。方法运用甲基化特异性PCR和半定量反转录PCR法检测20例正常鼻咽上皮组织、54例鼻咽癌组织中p73基因启动子甲基化状态及其转录表达水平,分析鼻咽癌组织中p73基因甲基化与临床资料的关系以及p73基因甲基化对转录表达的影响。结果 54例鼻咽癌组织中p73基因启动子甲基化阳性率为38.89%(21/54),而正常鼻咽上皮组织中未检测到p73基因启动子甲基化;两组间p73基因启动子甲基化阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。鼻咽癌组织中p73基因启动子甲基化与临床资料无关。21例甲基化鼻咽癌组织p73基因相对转录表达水平为1.04±0.64,33例非甲基化鼻咽癌组织p73基因相对转录表达水平为1.51±0.75,两者间有统计学差异(P<0.05),20例正常鼻咽上皮组织p73基因相对转录表达水平为1.12±0.31。结论鼻咽癌组织中p73基因甲基化与转录表达相关,是基因表达调节的一种重要方式,p73基因甲基化具有肿瘤特异性,p73基因甲基化与鼻咽癌发生发展有关。     

鼻咽癌转化基因的 2.8kb EcoRI 片段在鼻咽癌中不存在点突变

用改进的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术对鼻咽癌活检组织进行筛查，以检测Ｔｘ基因中与转化有关的序列在鼻咽癌中是否存在突变。在被检测的１１例配对的鼻咽癌标本中均未检测到泳动速率的改变。提示在多数鼻咽癌中基因突变不是Ｔｘ基因的活化方式。     

EB病毒基因在鼻咽癌组织转录表达的研究

本研究在转录水平上,利用转录载体PGEM-2与两种EB病毒基因片段(LMP和FBER-1)分别构建重组质粒,以SP~6和T~7RNA聚合酶合成含有~35标记的单链反义RNA(Anti-sense RNA或cRNA)和正义RNA(sense RNA),并分别与经病理确诊的鼻咽癌组织40例进行组织原位杂交,结果显示与40例鼻咽癌组织原位杂交后,LMP单链反义RNA有36例呈阳性,其阳性率为90％;EBER-1反义RNA40例均呈阳性,阳性率为100％;两种基因片段的单链正义RNA均为阴性。     

子宫内膜癌组织Syk基因的表达及其甲基化分析

目的 探讨脾酪氨酸激酶(Syk)基因在子宫内膜癌组织表达及该基因启动子甲基化与子宫内膜癌发生、发展的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应检测52例子宫内膜癌组织及其癌周正常组织中Syk基因的表达,同时采用巢式双重甲基化特异性PCR(MSP)方法检测该基因启动子甲基化情况.结果 Syk基因在子宫内膜癌中的表达显著低于相应的癌周正常组织(P=0.000);子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因表达率显著低于无淋巴结转移组(χ2=8.32,P<0.01).Syk基因启动子甲基化发生率在子宫内膜癌组织中明显高于相应的癌周正常组织(P=0.000);子宫内膜癌有淋巴结转移组Syk基因启动子甲基化发生率显著高于无淋巴结转移组(χ2=8.15,P<0.01);发生甲基化的肿瘤组织中,均无Syk mRNA的表达.结论 Syk基因启动子甲基化可能是导致Syk基因失活的原因之一,Syk基因启动子甲基化可能与子宫内膜癌发生发展有关.     

胆囊癌组织bcl-2和p53基因甲基化水平研究

目的:探讨胆囊癌组织总甲基化水平、bcl-2和p53基因甲基化水平在胆囊癌发病中的作用。方法:改进的酶联免疫吸附技术检测45例胆囊癌组织和40例胆囊炎组织基因组总甲基化水平,应用甲基化特异性PCR技术检测bcl-2和p53基因甲基化水平,应用荧光RT-PCR技术检测bcl-2和p53 mRNA的表达。结果:胆囊癌组织基因组总甲基化水平明显低于胆囊炎,差异具有统计学意义(P<0.05)。胆囊癌组织p53基因甲基化发生率高于胆囊炎(64.4%vs17.5%),差异具有统计学意义(P<0.05);胆囊癌组织bcl-2基因甲基化发生率与胆囊炎比较差异无统计学意义(17.8%vs 15.0%,P>0.05)。胆囊癌组织bcl-2 mRNA的表达明显高于胆囊炎、p53 mRNA的表达明显低于胆囊炎,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:基因组总甲基化水平降低和p53高甲基化可能是胆囊癌发生的分子机制之一。     

FREQUENT STRUCTURE ALTERATIONS OF p53 GENE IN NASOPHARYNGEAL CARCINOMA

By southern hybridization with 1.8 kb cDNA probe,a high freqnency (40.5%) of structural abnormality of p 53 gene was observed in primary nasopharyngeal carcinoma (NPC) biopsies. The regioas of exons 1 to 4 of the gene were examined by poiymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism, no point nmtation was found. Because very low rate of point mutation had been reported in exons 5 to 8,we considered that structural ahnormality in the region of exons 1 to 8 of the gene might be uncommon in NPC. The speetrophotometer scaaning analysis of outoradiograms and rehybridization investigation of nitrocellulose filter with exon 11 probe indicated that most of structure aberrations we observed might be rearrangement occurring in exon ll.     

p53基因与5-Fu联合作用对鼻咽癌细胞生长的影响

目的:通过转染野生型p53基因,并与5-Fu联合作用,观察其对两种鼻咽癌细胞生长的影响.方法:将克隆有野生型p53基因的pUHD10-3-p53质粒,用脂质体(Lipofectamine)介导分别转染人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞,同时在培养液中加入5-Fu,用四甲基偶氮唑(MTT)法分析细胞生长情况.结果:人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞分别加入含5-Fu的培养液后,第4天生长抑制率分别为49.46%、54.85%.CNE1和CNE2细胞分别转染wt-p53基因后,第4天生长抑制率分别为47.14%、45.90%.人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞分别转染wt-p53基因后应用5-Fu处理,细胞的生长抑制率第4天分别可达到84.74%、85.82%,其生长作用均明显受到抑制.结论:野生型p53基因与5-Fu联合作用,对人鼻咽癌CNE1及CNE2细胞生长有明显的抑制效果.     

抑癌基因RUNX3的研究进展

人类runt相关转录因子3(RUNX3)基因属RUNT家族成员,在细胞生长发育过程中起着重要作用。RUNX3基因位于染色体1p36.1,是一种肿瘤抑制基因,其抑癌机制尚不完全清楚。近年来的研究表明,RUNX3基因的表达异常在多种肿瘤的发生和发展中起到重要作用。研究RUNX3在肿瘤中的表达与意义对于肿瘤诊断和预后有重要价值,也为新的表观遗传学治疗恶性肿瘤治疗提供新的依据。     

人鼻咽癌癌基因及其产物的研究

作者应用外源性DNA转染技术,以人鼻咽癌组DNA,在体外对NIH/3T3细胞进行转染实验。结果观察到在第1、2轮转染中,均获得明显转化灶。并以人Alu顺序为探针,经分子杂交证明1、2轮转化细胞DNA中含有人顺序。以转化细胞注入裸鼠皮下,能诱发形成纤维肉瘤。本实验表明人鼻咽癌DNA中存在具有转化活性的转化基因(癌基因),并已转移至细胞内,发生了明显的恶性转化。作者应用免疫组化技术,观察了Ha-ras基因产物p21蛋白质在人鼻咽癌中的表达。其结果表明,p21在人鼻咽癌中具有阳性表达,其阳性率为90.4％。     

Runx3和Survivin在胃癌中的表达及其相关性

目的：探讨Runx3、survivin蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组化SABC方法,检测Runx3、survivin蛋白在8例正常胃粘膜、15例异型增生、47例胃癌组织中的表达。结果：Runx3、survivin在正常胃黏膜、异型增生及胃癌组织中的阳性表达率分别87.5%、53.3%、36.2%和0%、33.3%、70.2%。Runx3的表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度有关（P〈0.05）;survivin的表达与胃癌组织学分类、淋巴结转移相关（P〈0.05）,（2）Runx3与sur-vivin在正常胃粘膜（P〈0.010,r=-0.6255）和胃癌组织中的表达呈负相关（P〈0.05,r=-0.3271）。结论：Runx3、survivin表达在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用,联合检测Runx3和survivin蛋白的表达更能反映胃癌的生物学行为,优于单项检测。