3组癌细胞中CD37和CD53的表达

目的：观察３组癌细胞中ＴＭ４ＳＦ蛋白ＣＤ３７、ＣＤ５３的表达。方法：利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交,观察ＣＤ３７、ＣＤ５３ ｍＲＮＡ在人前列腺癌细胞、肺癌细胞和人黑色素瘤细胞３组８种细胞系中的表达。结果和结论：ＴＭ４ＳＦ蛋白ＣＤ３７、ＣＤ５３在前列腺癌细胞、肺癌细胞以及黑色素瘤细胞系中均不表达。     

CD133在人NSCLC组织和细胞系中表达的初步研究

目的观察经典的肿瘤干细胞标记分子CD133在人NCSLC组织和肺癌细胞系中的表达情况。方法用CD133多抗经免疫组化染色观察12例不同类型NSCLC组织中CD133的表达,经免疫荧光染色观察CD133在H446、SPC-A1肺癌细胞中的表达。用AC133单抗经流式和激光共聚焦观察人NSCLC组织、肺癌细胞系中糖基化CD133抗原(AC133抗原)的免疫活性。结果CD133多抗染色发现CD133在NSCLC组织、正常肺组织、H446细胞和SPC-A1细胞中普遍表达。AC133单抗染色发现不同类型NSCLC组织均有少量AC133( )细胞,而在H446、SPC-A1肺癌细胞及正常肺组织中未检测到AC133( )细胞。结论不同类型NSCLC组织中有少量的AC133( )细胞,为深入研究肺癌发生、发展的分子机制提供了新的靶点。     

8种不同转移潜能人癌细胞系中nm23基因的表达

目的:探讨肿瘤转移抑制基因nm23在人前列腺癌细胞、肺癌细胞和人黑色素瘤细胞系中的转移抑制作用.方法:应用Northern blot杂交法检测8种不同转移潜能人癌细胞中(PC3,PC3M,PAa,PG,WM35,WM1341b,WM983a和WM451) nm23基因的表达.结果:nm23 mRNA在8种不同转移潜能的人癌细胞中都有表达,且nm23表达水平也未见差异.结论:nm23基因可能与这些细胞系(前列腺癌细胞、肺癌细胞及黑色素瘤) 的转移抑制无关.     

CD147RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞系生物学行为的影响

目的 研究针对CD147 RNA干扰对前列腺癌PC-3细胞系生物学行为的影响.方法 利用针对CD147 RNA干扰片段构建的表达载体转染PC-3细胞,获得稳定表达株.通过RT-PCR和Western blotting 鉴定后进行前列腺癌细胞侵袭力实验和动物实验.结果 RT-PCR和Western blotting结果表明干扰片段可以较好地封闭前列腺癌PC-3细胞CD147分子mRNA和蛋白表达水平;与转染空质粒组相比.CD147干扰组前列腺癌PC-3细胞侵袭力下降,荷瘤裸鼠成瘤力下降(P＜0.05),抑瘤率达32.82%.结论 KNA干扰封闭CD147基因能抑制前列腺癌细胞的侵袭力和成瘤力.有可能成为前列腺癌基因治疗的新途径.     

CD44在小细胞肺癌中的异质性表达及意义

目的：探讨细胞粘附分子CD44在小细胞肺癌中的表达是否存在异质性及其临床意义。方法：应用免疫荧光细胞化学和免疫组织化学法检测3种小细胞肺癌细胞系和50例小细胞肺癌组织中CD44的表达。流式细胞仪分选出CD44^＋和CD44^-细胞亚群,体外Transwell实验研究细胞系中CD44不同表达强度细胞侵袭能力的差异。结果：H69、H209和H1688细胞系均呈CD44阳性表达,阳性百分率分别为82％±9．4％、79％±8．4％和88％±7．5％;不同细胞系之间及同一细胞系内表达强度均有差异。50例小细胞肺癌组织中23例可见CD44阳性表达,阳性率46％。CD44阳性癌细胞在癌巢中呈散在分布,癌巢周边部分的癌细胞及血管周围浸润的癌细胞呈聚集阳性表达。淋巴结转移组的阳性率为53．6％（22／41）,无淋巴结转移组的阳性率为11．1％（1／9）,两组间阳性率差异有统计学意义（P〈0．05）,CD44阳性表达与临床参数（患者性别、年龄、肿瘤大小）无相关性。体外侵袭实验发现H209和H1688细胞系中CD44^＋细胞亚群侵袭能力强于CD44^-细胞亚群。结论：CD44在小细胞肺癌细胞系及组织中有表达,且其表达存在异质性,CD44可能与癌浸润转移有关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导分子(CD147)在前列腺癌组织中的表达

目的 研究细胞外基质金属蛋白酶诱导分子(CD147)在前列腺癌组织中的表达情况,探讨其临床意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测101例前列腺癌,90例前列腺增生组织,36例正常前列腺组织和15例胚胎前列腺组织中CD147的表达情况,并对CD147与前列腺癌临床病理的关系进行统计学分析.结果 胚胎组织,正常前列腺组织,前列腺增生及前列腺癌CD147阳性率分别为:0%,5.6%,23.3%,67.3%.前列腺癌CD147阳性率最高,与其他3组在统计学上存在差异(P<0.001).CD147蛋白的表达与肿瘤的TNM分期、WHO分级和包膜侵犯呈正相关.结论 CD147检测有助于提高前列腺癌的早期诊断率,希望成为反映肿瘤恶性程度及预后判断的标记物.     

CD133和CD44在前列腺癌中的表达及意义

目的 探讨CD133和CD44在前列腺癌中的表达及意义.方法 72例前列腺癌组织标本作为病例组,以33例正常前列腺组织作为观察组,应用免疫组织化学技术检测二组CD133和CD44的表达,并分析其不同临床病理特征中表达的差异.结果 观察组中CD133和CD44的表达阳性率均明显高于对照组,差异均有显著的统计学意义(P＜0.01),CD133和CD44的表达与前列腺癌病理分级分级,临床分期,远处转移等指标密切相关(P＜0 05).结论 前列腺癌中CD133和CD44异常表达,二者在前列腺癌中发挥重要作用.     

RNA干扰CD147稳定表达前列腺癌PC-3细胞株的建立

目的 为研究CD147分子在前列腺癌PC-3细胞中的生物学功能,通过RNA干扰(RNAi)技术建立稳定低表达CD147分子的前列腺癌PC-3细胞株.方法 利用脂质体2000将靶向CD147干扰质粒导入前列腺癌细胞中,干扰前列腺癌细胞中CD147分子的表达;有限稀释法获取单个细胞克隆,通过G418筛选出抗性克隆并利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术和Western-blot免疫印迹法分别从转录水平和蛋白水平进行鉴定.结果 与转染pSilencer-Scramble对照质粒比较,转染pSilencer-CD147干扰质粒明显抑制CD147基因和蛋白表达水平(P<0.05).结论 靶向CD147的干涉载体能有效沉默PC-3细胞中CD147基因和蛋白的表达,通过G418筛选建立出稳定细胞株,为进一步研究CD147的功能打下基础.     

肺癌患者淋巴细胞亚群CD3~+CD4~+和CD3~+CD8~+及其表面受体NKG2D、NKG2A的表达及相关分析

目的观察非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞亚群CD3+CD4+和CD3+CD8+及其表面受体NKG2D、NKG2A的表达水平,分析其表达水平与肺癌肿瘤免疫逃逸的相关性。方法采集34例肺癌患者外周血,按照TNM分期分为早期组(Ⅰ期和Ⅱ期)和晚期组(Ⅲ期、Ⅳ期),用流式细胞仪检测外周血,分析淋巴细胞亚群CD3+CD4+和CD3+CD8+及其表面受体NKG2D、NKG2A的表达及相关性。结果晚期组CD3+CD4+的表达水平较早期组降低,而CD3+CD8+的表达水平升高(P<0.05);晚期组肺癌患者CD3+CD4+NKG2D表达率(6.69±3.58%)高于早期组的表达率(2.38±1.13%),CD3+CD4+NKG2A表达率(2.28±0.88%)低于早期组的表达率(5.46±2.09%)(P<0.01);晚期组肺癌患者CD3+CD8+NKG2D表达率(90.57±2.49%)低于早期组的表达率(93.51±3.19%),CD3+CD8+NKG2A表达率(12.32±4.24%)高于早期组的表达率(7.15±3.30%)(P<0.01)。结论非小细胞肺癌病理分期间淋巴细胞亚群CD3+CD4+和CD3+CD8+表达水平的改变,NKG2D、NKG2A在CD3+CD4+和CD3+CD8+表面的表达失衡,可能是肿瘤免疫逃逸的机制之一。     

前列腺癌患者外周血CD4 + CD25+调节性T细胞及FOXP3 mRNA的表达及临床意义

[摘要] 目的 探讨CD4 + CD25 +调节性T细胞和FOXP3在前列腺癌发病过程中的作用。方法 应用流式细胞术检测30例前列腺癌、40例前列腺增生患者及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+ CD25+ 调节性T细胞占CD4 +T细胞的比例, 应用RT-PCR技术检测人外周血PBMC FOXP3基因的表达。结果 前列腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例高于前列腺增生患者和健康志愿者,前列腺增生患者和健康志愿者之间差异无统计学意义（P>0.05）;前列腺癌患者外周血PBMC中FOXP3 mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平( P < 0.05) , 前列腺增生患者和健康志愿者之间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 CD4+CD25+调节性T细胞及其特异标志物FOXP3在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用, 该细胞群比例的增加可能参与前列腺癌的发生。 结论: CD4+CD25+调节性T细胞及其特异标志物FOXP3在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用, 该细胞群比例的增加可能参与前列腺癌的发生。     

肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在不同转移潜能癌细胞中的表达

目的 探讨新发现的肿瘤转移抑制基因ＫＡＩ１／ＣＤ８２与人癌细胞转移潜能的关系,方法 应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交及聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法,检测３组８种不同转移具有转移性的前列腺癌细胞系ＰＣ３和ＰＣ３Ｍ及高转移性的人肺ＰＧ细胞,ＫＡＩ１ｍＲＮＡ的表达降低（积分吸光度分别为０．０３１９,０．０２６６和０．０５４９）而在无转移性的人肺ＰＡａ细胞则为高表达（积分吸光度     

脐血CD3AK细胞对不同肿瘤细胞株杀伤活性的比较

目的:比较脐血CD3AK细胞在体外对不同肿瘤细胞株的杀伤活性。方法:脐血单个核细胞经CD3McAb和rIL-2诱导成CD3AK细胞,作用于不同的肿瘤细胞株(食管癌Eca109,胃癌BGC823,肺癌A549和白血病HL-60),用MTT法测其杀伤活性。结果:脐血CD3AK细胞对HL-60的杀伤活性高于对Eca109、A549和BGC823的杀伤活性(P<0.05),而对后3者的杀伤活性间差异无统计学意义。结论:脐血CD3AK细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤活性存在差异,临床上应引起注意。     

CD40与其配体的连接对于肺癌细胞调节功能的研究

目的 研究CI40与其配体(CD40L)的连接对于肺癌细胞的调节功能,评价CI40作为治疗靶抗原的潜能。方法 通过基因克隆技术、Western蛋白印迹、流式细胞术等研究CD40L对于7株肺癌细胞系(包括1例转染CD40 cDNA细胞系)的细胞表型、细胞生长、细胞周期和凋亡的影响。结果 CD40L使高表达CI40的肺癌细胞系上主要组织相容性抗原—Ⅰ类分子(MHC—Ⅰ)、CD54和Fas分子的表达增强,上皮生长因子受体(EGFR)的表达减弱;CD40L作用5d后,CD54平均荧光强度(mean值)大约上调了4—10倍,MHC—Ⅰ上调了4—8倍,Fas上调了2．7—6倍,EGFR下调了2—3倍。细胞生长受到抑制,第5天受抑最明显(受抑率≥30％);CD40L停用后,这些变化有所恢复;CD40L对于CD40中低表达和不表达的细胞系无明显影响;所有细胞系均无凋亡发生。结论 CI40高表达肺癌细胞上CI40的表达具有免疫导向治疗靶抗原的潜能。     

A novel serine protease SNC19 associated with human colorectal cancer

Objective To study the structure and function of a novel serine protease gene associated w ith human colorectal cancer SNC19.Methods The cDNA sequence was determined by both manual and automatic sequencing techniq ues. The full length cDNA sequence was obtained by the 5’-Rapid Amplification of cDNA Ends technique and web-based analysis. Open reading frame analysis and protein function prediction were also performed. Northern blot was used to det ect the expression of SNC19 in various human normal tissues and tumor cell lines . Fluorescent in situ hybridization combined with fluorescent R-banding techni que was employed to map the SNC19 gene on human chromosome.Results Full length SNC19 cDNA, size 3152 bp, encodes a protein highly homologous to a m ouse serine protease epithin. In normal human tissues, high SNC19 expression le vels were observed in the kidney, pancreas, prostate, small intestine and colon; moderate SNC19 expression levels were observed in the placenta, lung, liver, sp leen thymus, testis and peripheral blood lymphocytes; and extremely low expressi on levels were observed in the heart, brain, skeletal muscle and ovary. In tumo r cell lines, colorectal cancer cells SW480, SW620, SW1116 and Colo205, breast c ancer cell Bcap37 and gastric cancer cells MKN28 and SGC7901 showed high levels of SNC19 expression; cervical cancer cell HeLa-S3, lung cancer PAA, oral epithe lial cancer cell KB and lymphoma cell Raji showed moderate levels of SNC19 expre ssion; and tongue squamous cancer cell Tca8113, leukemia cells HL-60, K562, MOL T-4, lung cancer cell A549 and melanoma cell G361 showed very low levels of SNC 19 expression. SNC19 was mapped to human chromosome 11q24-25. Conclusion SNC19 encodes a novel human serine protease with 855 amino acid residues. As a novel serine protease associated with human colorectal cancer, the expression of SNC19 in various tissues and cell lines may have very important impact on their phenotypes and biological behaviors.     

KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的相关性

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的关系.方法:应用Northern blot杂交检测不同转移潜能人黑色素瘤细胞中KAI1和nm23基因的表达.结果:4种不同转移潜能的人黑色素瘤细胞中(WM35,WM451,WM983a,WM1341b),KAI1 mRNA和nm23 mRNA均有表达且表达量基本一致,KAI1在4种细胞中的积分光密度值分别为0.1798,0.1800,0.1501,0.1582;nm23分别为1.0428,1.0607,1.0141,1.0754.结论:KAI1基因与nm23基因的表达降低与人黑色素瘤的浸润转移无关.     

CD44变异体V6、V7/8在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨ＣＤ４４Ｖ６、Ｖ７／８与非小细胞肺癌患者的淋巴结转移及预后的关系。方法 采用免疫组化观察ＣＤ４４Ｖ６、Ｖ７／８在７６例原发性非小细胞肺癌组织及转移吉中的表达。结果 在肺癌中ＣＤ４４Ｖ６、Ｖ７＝８表达鳞癌欧于腺癌;在正常肺组织中无表达。淋巴结转移病便中ＣＤ４４Ｖ６３３／３６（９１％）表达阳性,在２５例转移淋巴结中２４例表达阳性（９６％）。ＣＤ４４Ｖ６在Ⅲ￣Ⅳ期患者表达高于Ⅰ￣Ⅱ期患者。结论     

CD133+细胞在局部晚期结肠癌中的异常表达

目的 探讨CD133+肿瘤细胞对结肠癌患者预后的影响。方法 收集有完整随访资料的104例IIIB期(T3-4N1M0)结肠癌根治术后石蜡包埋组织标本及临床资料,采用免疫组化方法检测癌组织及邻近癌旁相对正常组织中CD133抗原的表达情况,分析其与患者临床特征和预后的关系。结果 肿瘤组织中的CD133+肿瘤细胞比较少见而且分布不均匀。CD133染色见于结肠癌细胞膜的腺腔面及基底,在癌巢"出芽"处及有腺管结构的低分化腺癌也可见CD133染色。生存分析显示CD133及T分期都是IIIB结肠癌的独立预后因素。肿瘤组织中CD133+细胞＜5%的患者5年生存率较高（77.4%）,≥ 5％则为45.2%。CD133的表达与其他临床病理参数均无相关性。结论 CD133+肿瘤细胞是IIIB期结肠癌患者5年生存率的独立预后因素, CD133+肿瘤细胞促进了IIIB期结肠癌的进展。     

NB4细胞和HL60细胞向粒细胞分化过程中细胞表面CD11b和CD18表达的比较

目的:比较髓系白血病细胞株NB4细胞和HL60细胞向粒细胞分化过程中细胞表面抗原CD11b和CD18的表达。方法:用全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞和HL60细胞向粒细胞定向分化,用MGG染色法进行初步鉴定,用FACS检测并比较两株细胞在分化前后细胞表面CD11b和CD18的变化,用Western blot检测两株细胞分化前后CD18的蛋白表达。结果:与分化前相比,两株细胞分化后细胞表面CD11b和CD18的表达均明显升高,并且这样的变化在NB4细胞中较HL60细胞更加显著。结论:分化NB4细胞可能较分化HL60细胞是更方便的粒细胞模型。     

CD24和SLeX在肺癌组织中的表达及意义

目的:探讨CD24和SLeX在肺癌组织中的表达及意义,阐明其与肺癌发生和发展的关系。方法:采用免疫组织化学方法分析CD24和SLeX在70例肺癌组织中的表达。结果:CD24和SLeX在非小细胞肺癌组织中阳性表达率分别为41.3%和63.5%,在小细胞肺癌组织中分别呈无表达和弱表达。CD24和SLeX在腺癌组织中阳性表达率分别为55.9%和76.5%,均明显高于鳞癌(24.1%和48.3%)(P<0.05)。在肺腺癌、鳞癌组,CD24阳性表达与患者年龄、性别、吸烟指数、肿瘤分期分级无关联(P>0.05)。而SLeX肺腺癌、鳞癌中,Ⅲ期的阳性表达率(83.3%)高于Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率(55.6%),低分化肺癌(80.8%)高于高、中分化肺癌(51.4%),女性患者(76.7%)高于男性(51.5%),组间比较差异有显著性(P<0.05)。CD24和SLeX呈阳性表达者平均生存时间明显低于阴性表达者(P<0.05)。结论:CD24和SLeX与肺癌的发生、发展关系密切,可以做为判断肺癌患者预后的指标。