高效液相色谱法测定杜仲中绿原酸的含量

目的研究杜仲原药材中绿原酸的含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,对杜仲中绿原酸提取时的提取溶剂、方法、时间和次数进行了优选。以LichrospherC18(4.6mm×250mm,5μm)为分析柱,流动相为乙腈-水-磷酸溶液(13∶86.5∶0.5);柱温:25℃;检测波长:327nm;流速:0.8mL/min,采用面积外标法。结果杜仲粉用体积分数为60%甲醇水溶液回流提取2次(每次100mL,第1次1.5h,第2次0.5h),可提出杜仲原药材中绿原酸总量的95.68%。线性范围2.22×10-2～55.40×10-2μg,平均回收率为99.55%,RSD=1.98%(n=6)。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于测定杜仲中绿原酸的含量。     

反相高效液相色谱法测定拳参中儿茶素的含量

<正>拳参收载于《中国药典》2005年版一部,具有清热解毒、消肿、止血的功能。根据文献报道,拳参中含没食子酸、儿茶素、表儿茶素等成分,其中儿茶素的含量较高,近年来的研究表明,儿茶素具有强抗氧化能力、能抑止肿瘤生长,具抗菌消毒等多种药理功效。因此控制本品中儿茶素的含量对保证本品质量具有特别重要的作用。本实验采用高效液相色谱法和梯度洗脱方式测定中药拳参中儿茶素的含量。结果显示该法分离效果好、专属性强。     

反相高效液相色谱法测定珍珠梅中芦丁的含量

目的建立珍珠梅中芦丁含量的测定方法。方法采用YMC-packODS-A(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇水溶液(35∶65);柱温25℃;流速0.4ml·min1。检测波长为256nm。结果此法线性范围1.0～6.0μg,r=0.9990。平均回收率为98.8%,RSD为1.15%(n=5)。结论测定方法简便,精密度高,准确性好,可以作为珍珠梅中黄酮的测定方法。     

反相高效液相色谱法测定鸡血藤中儿茶素类成分的含量

目的:建立鸡血藤中儿茶素类化合物的含量测定方法。方法:以没食子儿茶素(gallocatechin),儿茶素(catechin),表儿茶素(epicatechin)为对照品,反相C₁₈柱,流动相甲醇-冰醋酸-水系统,梯度洗脱,流速0.8mL.min^-1,检测波长270nm。结果:3种对照品分别在0.397~1.986,0.404~2.019,0.405~2.024μg有良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.2%,100.8%,98.8%;RSD分别为1.7%,2.4%,2.4%(n=5)。结论:本法操作简便、快捷,适用于鸡血藤中儿茶素类化合物含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定川芎嗪片中川芎嗪的含量

目的：建立反相高效液相色谱法（RP—HPLC）测定川芎嗪片含量的方法。方法：采用XDB—C18分析柱（4．6mm×150．0mm，6μm），流动相为甲醇-1％醋酸溶液（35：65），流速为1．0ml·min^-1，检测波长为295nm，对川芎嗪片剂进行含量检测，并采用紫外分光光度法进行对比实验。结果：川芎嗪的保留时间为6．82min，其浓度在5～50／μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9998，n=6），平均回收率为100．29％，RSD为1．52％（n=5）。结论：该法简单、结果准确、重复性好，可作为川芎嗪片剂含量测定方法。     

反相高效液相色谱法测定牙痛药水中胡椒碱的含量

目的:建立牙痛药水中胡椒碱的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为DiamonsilTM(钻石)C18(5μm,4.6 mm×150 mm),流动相为甲醇-水(75∶25),柱温为30℃,检测波长为343 nm。结果:胡椒碱的进样量在0.018 6~0.148 8μg的范围内呈现良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为98.08%,RSD为1.75%。结论:采用反相高效液相色谱法测定胡椒碱含量,方法简便、灵敏、准确,可用于牙痛药水的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定姜黄素含量

应用反相高效液相色谱法对市售姜黄素试剂中所含姜黄素（ｃｕｒｃｕｍｉｎ）进行了比较该法简单，迅速，分离度好，结果可靠。     

反相高效液相色谱法对枳壳中辛弗林的含量测定

目的：建立用反相高效液相色谱（RP－HPLC）测定枳壳中辛弗林的含量的方法。方法：采用十八烷基烷键合硅胶柱KromasilC18流动相为甲醇－水－十二烷基硫酸钠（60：40：0．1），检测波长：275nm；流速：1ml/min；柱温：40℃。结果：辛弗林在0．29－2．32μg范围内具有良好线性关系，平均回收率97．7％，RSD＝1．26％（n=6)，具较好的精密度、重复性和稳定性。结论：RP－HPLC测定辛弗林的含量，不仅操作简便、准确，而且重现性好。     

反相高效液相色谱法测定鹅绒萎陵菜中儿茶素的含量

目的:测定鹅绒萎陵菜中主要成分儿茶素及表儿茶素的含量.方法:采用反相高效液相色谱法,以儿茶素为对照品.结果:按选定的色谱条件,儿荼素在4.53～45.34μg范围内线性良好.加样回收率为98.6%,RSD为1.14%(n=6).结论:本方法操作简便、快捷,重现性好.     

反相HPLC测定金荞麦药材和饮片中表儿茶素的含量

 目的 通过研究,以期建立金荞麦药材和饮片中指标成分的含量测定方法。方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.004%磷酸溶液（10∶90）为流动相;检测波长为280 nm;对11批金荞麦药材和12批饮片中的表儿茶素进行了含量测定。结果 11批药材除1批逸出值外,其余10批的平均含量（以干品计）为0.050 4%;12批饮片的平均含量（以干品计）为0.030 6%。结论 所建方法稳定可靠,简单易行。建议以总平均含量的60%,即0.030%作为金荞麦药材中表儿茶素的最低限量纳入质量标准（草案）正文含量测定项下;以总平均含量的70%,即0.020%作为金荞麦饮片中表儿茶素的最低限量纳入质量标准（草案）含量测定项下。     

UPLC-PDA-ESI-MS分析杜仲中化学成分

目的： 建立杜仲药材中化学成分的超高效液相色谱-电喷雾质谱（UPLC-PDA-ESI-MS）分析方法。 方法： 采用ACQUITY UPLC系统,BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,流速0.3 mL·min^-1,梯度洗脱,检测波长190~400 nm,柱温45 ℃。Waters电喷雾三重四级杆质谱仪（TQD）,负离子模式检测,ESI喷雾电压3 kV,去溶剂气温度350 ℃,去溶剂气（N₂）流量650 L·h^-1,锥孔气（N₂）流量50 L·h^-1,扫描范围m/z 100~1 000。 结果： 杜仲中化学成分获得了较好的分离和检测,共鉴定出3个木脂素类、4个环烯醚萜类和4个苯丙素类成分。 结论： 所建方法灵敏度高、分离度好,适用于杜仲药材中化学成分的快速定性鉴定。     

杜仲毛状根培养条件优化及其桃叶珊瑚苷药用成分的研究

目的:诱导杜仲毛状根的发生及筛选优良毛状根系.方法:利用发根农杆菌C58C1诱导杜仲不同外植体产生毛状根,并利用HPLC测定桃叶珊瑚苷含量.结果:采用杜仲无菌苗胚轴经菌液浸染20 min,共培养3 d可得到最佳转化效果.液体培养的生长量优于固体培养,最有利于毛状根生物量和药用成分的积累,并筛选到桃叶珊瑚苷高产根系E_1.结论:可通过毛状根的培养来获得桃叶珊瑚苷药用成分.     

杜仲TIFY转录因子鉴定与表达分析

目的 从全基因组水平对杜仲（Eucommia ulmoides）TIFY基因家族进行鉴定与表达分析,以期为EuTIFYs基因功能深入研究奠定基础。方法 以杜仲基因组数据库为基础,通过美国国立生物技术信息中心（NCBI）,MEME,PlantCare,白质分析专家系统（ExPASy）及TBtools等生物信息学分析软件,对杜仲TIFY基因家族进行鉴定,系统分析该基因家族的理化性质、系统进化、基因结构、启动子顺式作用元件及其在叶片发育及杜仲胶形成中的表达模式。结果 该研究从杜仲基因组中共鉴定到14个EuTIFYs（EuTIFY1~EuTIFY14）,氨基酸数目介于102~357,理论等电点分布在4.99~10.06,相对分子质量区域为10.8~39.14 kDa,亚细胞定位预测在细胞核中,均为亲水性蛋白,14个EuTIFYs分布在13条染色体上。系统进化分为TIFY,JAZ,ZML和PPD 4个亚家族,分别包含3个,4个,5个和2个EuTIFYs蛋白。EuTIFYs启动子区域含有多种光周期及非生物胁迫响应元件,参与植物杜仲生长发育和非生物胁迫。表达模式分析显示,EuTIFYs在杜仲叶片不同发育时期存在表达差异,大部分基因在叶片发育的早期阶段表达量较高,正调控杜仲胶的形成,EuTIFYs蛋白间存在多种互作关系。结论 该研究从杜仲全基因组水平鉴定到14个EuTIFYs,对其结构特点和表达模式进行全面的生物信息学分析,为进一步研究杜仲TIFYs基因功能提供参考。     

RP-HPLC同时测定硬尖神香草中4种成分含量

目的:建立维吾尔族药材硬尖神香草中槲皮素、咖啡酸、木犀草素、金合欢素4种成分的含量测定方法。方法:使用Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.2%乙酸水溶液(30∶70),检测波长340 nm,流速1.0 m L·min~(-1),柱温30℃,进样量10μL。结果:槲皮素、咖啡酸、木犀草素、金合欢素分别在0.120 2~1.081 8 mg(r=0.998 6),0.031~0.279 mg(r=0.999 9),0.052~0.468 mg(r=0.998 9),0.098 1~0.882 9 mg(r=0.998 8)呈良好的线性关系,回收率分别为98.62%(RSD 1.4%),97.38%(RSD 1.7%),99.41%(RSD 1.5%),99.81%(RSD 1.0%),结论:采用RP-HPLC同时测定硬尖神香草中4种成分含量方法,该方法可行且简单有效,可作为硬尖神香草含量测定的理论指标。     

HPLC测定龙须藤中2种多甲氧基黄酮的含量

目的:建立HPLC测定龙须藤中5,7,3’,4’,5’-五甲氧基黄酮和5,6,7,5’-四甲氧基-3’,4’-亚甲二氧基含量的方法.方法:DIKMA PlatisilODS C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B),梯度洗脱(0 min,25％ A;15 min,45％A;40 min,50％ A),流速0.8 mL· min-,检测波长324 nm.结果:5,7,3’,4’,5’-五甲氧基黄酮和5,6,7,5’-四甲氧基-3',4'-亚甲二氧基分别在0.0084～0.3360 μg(r =0.999 9),0.013 4～0.536 0 μg(r =0.999 7)与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.41％,98.65％,RSD分别为0.57％,1.01％.结论:该方法操作简单准确,分离效果、精密度和重复性好,适合于测定该药材中5,7,3’,4’,5’-五甲氧基黄酮和5,6,7,5’-四甲氧基-3’,4’-亚甲二氧基的含量.     

两种杜仲黄酮类化合物对成骨细胞OPG/RANKL及成骨相关转录因子的影响

目的:研究杜仲黄酮类化合物紫云英苷和黄芩素对成骨细胞特异性转录因子Osterix及破骨细胞抑制因子与核因子κB受体活化因子配体比值(OPG/RANKL)的影响。方法:采用MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞,不同浓度紫云英苷和黄芩素和维生素D3组加入质量浓度为30 mg·L-1作用细胞24 h后,用MTT法检测细胞增殖情况,成骨细胞接种于24孔板后,空白组加入培养基,给药组分别加入质量浓度为80 mg·L-1(高浓度),40 mg·L-1(中浓度),7.5 mg·L-1(低浓度)的含紫云英苷或黄芩素,作用24 h后,ELISA法检测钙离子活性,蛋白免疫印迹法检测Osterix,OPG以及RANKL的蛋白表达水平。结果:与空白组相比,紫云英苷和黄芩素可后明显促进MC3T3-E1 Subclone 14成骨细胞的增殖(P<0.05);明显上调OPG和Osterix的表达(P<0.05),同时能降低RANKL的表达(P<0.05)。结论:杜仲黄酮类化合物紫云英苷和黄芩素能促进MC3T3-E1Subclone 14成骨细胞增殖,并上调Osterix和OPG/RANKL。     

RP-HPLC测定桑椹中芦丁的含量

目的:优化桑椹中芦丁的提取条件并建立芦丁的HPLC测定方法。方法:采用单因素考察法优化桑椹中芦丁的提取条件,采用HPLC法测定芦丁的含量,色谱柱为Agilent Zobax C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸(19∶81)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长360 nm,柱温30℃。结果:芦丁最佳提取条件为料液比1∶25,50%乙醇回流60 min,芦丁在0.1～2.0μg有良好线性关系(r=0.999 9)。平均回收率为102.4%,RSD 1.8%(n=6)。结论:该方法简便、准确、可靠,可作为桑椹中芦丁含量测定的方法。     

基于数据库对杜仲研究现状的文献计量学分析＊

目的 通过归纳2000-2020年杜仲研究领域的研究热点，了解国内外杜仲研究现状，为研究学者提供参考。方法 通过检索CNKI和PubMed数据库杜仲研究领域的相关文献，对其发文量、作者、研究机构、被引频次以及高频关键词等用文献计量学的方法以可视图的方式展示杜仲研究的发展脉络，进一步分析出该领域的研究热点，并对未来可能的发展方向进行预测。结果 共检索出CNKI数据库7784篇以及PubMed数据库465篇文献，以可视图谱的方式展现杜仲领域发展脉络。结论 20年来发文量显著增加；学者及机构之间应不断深化交流与合作；近二十年的研究热点主要有以大鼠为疾病动物模型研究杜仲的药理作用，如降血压、降血脂、治骨质疏松等，杜仲的活性成分以木脂素类的松脂醇二葡萄糖苷、环烯醚萜类的桃叶珊瑚甙以及杜仲胶为主；随着科学技术不断进步，重点由栽培育种、化学成分向网络药理学、数据挖掘等方向发展。     

HPLC测定苦豆子不同部位中苦豆碱的含量

目的:建立苦豆子中苦豆碱的HPLC法;对苦豆子药材不同部位中苦豆碱含量进行考察,确定药材最佳采收部位.方法:采用Kromasil NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-无水乙醇-3％磷酸水溶液(70:15:15)为流动相,检测波长205 nm,柱温25℃,流速1.0 mL· min-1.结果:苦豆碱的线性范围为11.21 ～224.20 mg·L-1(r=0.9999),平均回收率(n =6)98.18％ (RSD 4.1％);苦豆子叶、茎中苦豆碱含量分别为0.38％,0.02％,豆荚、花及种子中不含苦豆碱.结论:该方法简便、准确、重复性好,可以作为苦豆子中苦豆碱的含量测定方法;研究结果显示苦豆碱在叶子中含量最高,可以将叶子作为提取分离苦豆碱的最佳药材部位.     

HPLC测定舞草中木犀草素的含量

目的:建立舞草中木犀草素的含量测定方法.方法:采用VP-ODS C18(4.6 mmx250 mm,5μm)色谱柱.以甲醇-0.3％磷酸溶液(60:40)为流动相,流速1.0 mL· min-1,检测波长350 nm.结果:舞草中的木犀草素含量测定方法在0.0407 2 ～0.6515 2进样量与峰面积的线性关系良好(r=0.999 8);平均回收率100.35％,RSD 0.80％.结论:本方法准确、灵敏、重复性好,可用于舞草的质量控制.