血小板减少性紫癜患儿巨细胞病毒感染的研究

研究人类巨细胞病毒（HCMV）感染与原发性血小板减少性紫癜（ITP）之间的关系，采用ACD抗凝外周血HCMV－DNA PCR以及非抗凝血清CMV－IgM、IgG ELISA方法，进行HCMV感染的检测。结果显示，ITP患儿组HCMV－DNA PCR阳性率为71．7％，体检儿童对照组为20．8％，P＜0．01，差异有显著性。ITP患儿组CMV－IgM阳性率为41．5％，CMV－IgG阳性率为75．5％，体检儿童对照组中未检出CMV－IgM阳性者，CMV－IgG阳性率为22．9％，P＜0．01差异有显著性。结论认为：HCMV感染与ITP密切相关，HCMV病毒是ITP致病病因中很重要的一个致病病毒，对ITP患者的实验室检测不仅需要血液学检测而且需要HCMV等病毒学检测，对HCMV活动性感染的ITP患者加用更昔洛韦，可能会很好地提高疗效。     

聚合酶链反应在检测脑性瘫痪患儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的　探讨聚合酶链反应 (PCR)在检测脑性瘫痪 (CP)患儿人巨细胞病毒 (HCMV)感染中的意义。方法　对 5 6例CP患儿用PCR检测尿巨细胞病毒 (CMV)DNA ,病毒分离检测尿标本 ,观察CMV特征性致细胞病变效应 (CPE) ,ELISA检测血清CMVIgM和IgG。结果　PCR检测CMVDNA阳性率为 5 3 .6% ,9例CMV病毒分离结果阳性 ;CMVIgM、IgG阳性率分别为 12 .5 %、3 7.5 % ;病毒分离 :CMVIgM阳性与CMVDNA阳性的符合率分别为 10 0 %、10 % ,前两者与后者比较均有显著差异 (P <0 .0 1) ;CMVIgG阳性与PCR阳性符合率为 6.7% ,两者无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论　PCR检测CMVDNA能够早期快速检测到CP患儿CMV感染 ,可应用于CP患儿中CMV感染的检测 ,为早期干预提供可靠依据。     

南京市0～8岁儿童巨细胞病毒感染流行病学调查

目的 调查儿童巨细胞病毒(CMV)感染率及首次感染的年龄,为了解中国CMV感染现状提供循证医学证据.方法 随机抽取2011年6月至9月在南京市儿童医院体检的837例儿童.男513例,女324例;年龄1d～8岁,平均3.6岁.采用固相ELISA酶联免疫试剂,定性检测体检儿童血清中CMV IgM抗体、定量检测CMV IgG抗体浓度及IgG亲合力指数.结果 837例儿童血清中,CMV IgG阳性690例,阳性率为82.4％.其中男童阳性427例,阳性率83.2％;女童阳性263例,阳性率81.2％,男童与女童CMV IgG阳性率之间差异无统计学意义(x2=0.584,P=0.445).在92例6月龄以内的儿童中,其中86例CMV IgG阳性,阳性率为93.5％;7月龄之后阳性率逐渐下降,在9月龄下降至最低,为66.7％,然后随年龄增长而升至80.0％左右(x2=15.4,P＜0.001).从837例儿童中按年龄段随机抽取352例,同时检测其血清CMV IgM,共23例阳性,总IgM阳性率为6.5％,其中以2～3月龄婴儿阳性率最高,达58.3％,之后逐渐下降,6岁以后未检出CMV IgM阳性病例(x2=5.1,P ＜0.001).进一步检测23例活动性感染标本的IgG抗体亲合力指数,发现13例IgG亲合力指数＜30％,原发感染率为56.5％,其中以＜1岁儿童居多(7例),占总原发感染数的53.8％.结论 目前南京地区儿童CMV感染率大约为80.0％,低于成人,其首次感染多数发生在3月龄前.     

巨细胞病毒感染对儿童肾病综合征的影响初探

目的　为了探索巨细胞病毒 (CMV)感染与儿童特发性肾病综合征 (INS)的关系。方法　 采用聚合酶反应 (PCR)测定 140例住院儿童CMVDNA ,并对CMV阳性的INS患儿的临床特征及感染原因作一分析。结果　 4 0例INS患儿CMV阳性率 50 % ,而非肾脏病 10 0例儿童阳性率 2 3% (P<0 .0 1)。CMV阳性INS患儿具有年龄偏大 ,90 %为复发病例 ,病程相对长 ,肾炎型占 75% ,血IgG明显低于CMV阴性组 (P <0 .0 5) ,6 0 %对激素治疗不敏感的临床特点。结论　对CMV感染与INS患儿的关系应作深入研究 ,对CMV阳性的INS患儿应做肾活检测定CMV。     

人细小病毒B19感染与儿童急性特发性血小板减少性紫癜发病关系的探讨

目的　探讨人细小病毒B19(以下称B19)感染与特发性血小板减少性紫癜 (ITP)发病的关系。方法　对 5 2例ITP患儿及 32例健康儿童进行近期B19感染的检查 ,包括B19 DNA检查、间接免疫荧光法检测B19表面蛋白抗原 ;并比较ITP患儿中B19检测阴性及阳性患儿有关ITP的临床资料、实验室特征及预后。结果　5 2例ITP中B19 DNA阳性 12例 (2 3 1% ) ,健康儿童B19 DNA均为阴性 ,两组间差异有显著意义 (P <0 0 5 )。5 2例ITP患儿仅有 2例检测到B19抗原阳性 ,健康儿童所有标本均为阴性 ,两组间差别无显著意义 (P >0 0 5 )。5 2例ITP患儿B19检测阳性和阴性者中分别有 83 8% (10 /12 )和 5 0 % (2 0 /4 0 )的患儿初诊时病程 <2周 ;75 %(9/12 )和 4 0 % (16 /4 0 )入院时血小板计数呈重度低下 (<2 5 0× 10 9/L)。差别均有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　B19感染可能为儿童ITP的重要病毒病原 ;B19感染者ITP起病似乎更急 ,血小板减低更明显。     

特发性血小板减少性紫癜患儿骨髓巨细胞病毒抗原的检测及临床价值

目的探讨骨髓中人巨细胞病毒（HCMV）感染在小儿特发性血小板减少性紫癜（ITP）中的作用及机制。方法采用二步法免疫组化检测81例ITP患儿骨髓中HCMV早期抗原,并行外周血血小板计数及ELISA法检测血HCMV-IgM。结果ITP患儿骨髓HCMV阳性率（61.73%）明显高于血HCMV-IgM阳性率（20.99%）,P〈0.01;慢性ITP骨髓HCMV阳性率（92.31%）高于急性ITP（55.88%）,P〈0.05;慢性ITP血HCMV-IgM、IgG阳性率与急性ITP相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。骨髓HCMV阳性组的平均年龄、治疗前血小板数、治疗后血小板上升值与阴性组相比,差异具有统计学意义（P〈0.05）,骨髓巨核细胞数及产板型巨核细胞数与阴性组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;血HCMV-IgM阳性组的平均年龄、治疗前血小板数、治疗后血小板上升值与阴性组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;血HCMV-IgG阳性组的上述三项指标与阴性组相比,差异亦无统计学意义（P〉0.05）。骨髓HCMV阳性细胞数量分级与治疗前血小板计数之间无相关关系（P〉0.05）。结论HCMV感染在ITP中广泛存在,骨髓HCMV抗原的检测是评价ITP患儿HCMV感染的敏感、特异的指标;骨髓HCMV感染的ITP患儿存在病情加重、疗效不佳及慢性化的趋势;在骨髓HCMV致ITP的机制中,可能主要是影响外周免疫系统从而破坏成熟的血小板,而不是对血细胞生成的抑制。     

小儿巨细胞病毒活动性感染的两种诊断方法比较

目的　通过血清人巨细胞病毒 (HCMV)IgM和尿快速培养HCMV检测临床标本的比较 ,进一步评价血清特异性IgM诊断活动性HCMV感染的价值。 方法　①ELISA法检测患儿血抗HCMV IgG、IgM。②通过检测尿培养物中HCMV即刻早期抗原 (IEA)快速诊断活动性HCMV感染。结果　① 119例尿培养阳性者 ,血抗HCMV IgG均为阳性。②与尿快速培养法相比 ,血IgM的特异性和敏感性分别达到 97 7%和 6 9 7% ;血IgM阳性数与尿快速培养阳性数比率在≤ 1个月、～ 1岁和～ 3岁组分别为 4 5 8%、75 75和 82 4 % ,表明IgM检测结果在各年龄组均有假阴性 ,其中尤以 1个月以下婴儿多见。③ 2例 3个月左右患儿血IgM阳性而尿培养阴性。 11例随访患儿中 ,9例在结束更昔洛韦治疗后 1个月复查 ,3例IgM迟于尿培养转阴 ,2例尿培养阴性而血IgM仍为阳性 ,表明IgM检测结果可有假阳性。 结论　血清特异性IgM检测可用于诊断活动性CMV感染 ,但其意义有一定局限性 ,应结合其他指标综合判断     

特发性血小板减少性紫癜患儿合并柯萨奇B组病毒感染的临床特点及分析

目的　探讨特发性血小板减少性紫癜 (ITP)患儿合并柯萨奇病毒B组 (CVB)感染的临床特点。方法　对 44例ITP患儿做骨髓细胞学分类 ,同时进行CVB、巨细胞病毒 (CMV)、EB病毒、乙肝病毒 (HBV)检查及血常规动态观察。结果　ITP患儿合并病毒感染中CVB明显多于EB、CMV、HBV等 ,有CVB感染阳性与CVB感染阴性的ITP患儿比较 ,骨髓巨核细胞总数明显增高 (P <0 0 1) ,外周血血小板计数和平均血小板体积明显降低(均P <0 0 1)。结论　CVB感染对ITP患儿血小板系统可能具有抑制作用     

儿童抽动障碍与病原微生物感染及其免疫的相关性

目的 探讨儿童抽动障碍(TD)与EB病毒(EBV)、人巨细胞病毒(HCMV)、肺炎支原体(MP)感染的相关性.方法 选择TD患儿49例为病例组.健康对照组为本院同期体检的健康儿童47例.检测二组外周血EBV DNA水平、咽拭子MP DNA水平及尿HCMV DNA水平,并检测血T淋巴细胞亚群及IgA、IgG、IgM水平.结果 病例组EBV、MP及HCMV的DNA检出率分别为22.49％、14.29％及6.12％;健康对照组分别为2.13％、2.13％及0,病例组显著高于健康对照组(Pa＜0.015).病例组CD4+T淋巴细胞、CD4+/CD8+淋巴细胞比值分别为(34.71 ±4.62)％和0.96±0.22,较健康对照组[(40.02±2.53)％、1.31±0.07]显著降低(Pa＜0.05);CD8+[(36.28±3.95)％]较健康对照组[(30.65±6.51)％]显著升高(P＜0.01).而CD3+二组比较差异无统计学意义(P＞0.05).病例组IgG[(9.43±2.95)g·L-1]显著低于健康对照组[(16.23±3.13) g·L-1],差异有统计学意义(P＜0.01).结论 EBV、HCMV、MP等感染引起的免疫紊乱可能是导致儿童TD发生的因素之一.     

母婴配对巨细胞病毒感染的研究

目的进一步探讨母婴之间巨细胞病毒(CMV)的感染与传播.方法对36对母婴配对的尿和16例母乳标本进行CMV分离,其中26例检测CMVIgM抗体.结果婴儿尿CMV分离阳性率为47.2%,其中1个月内、～4个月、～1岁婴儿阳性率分别为0、60.0%和33.3%,存在显著差异(χ2＝6.57,P＜0.05).母亲母乳CMV分离阳性率为75%,显著高于其尿的排毒率5.6%(χ2＝23.74,P＜0.01).在喂养方式中,纯母乳喂养儿CMV阳性率为57.7%与非纯母乳喂养儿的20%相比,差异显著(χ2＝4.12,P＜0.05).在不同病种中,婴儿肝炎综合征(婴肝)患儿CMV培养及IgM的阳性率为55%,支气管肺炎患儿CMV阳性率则高达80%,而6例其它病种患儿仅2例阳性.结论母乳是婴儿获得CMV感染的主要来源.婴肝及小婴儿肺炎以CMV感染为主.     

婴儿期特发性血小板减少性紫癜与人巨细胞病毒感染的关系

目的探讨婴儿期特发性血小板减少性紫癜(ITP)与人巨细胞病毒(HCMV)感染及免疫功能的关系。方法对54例ITP患儿(病例组)及30例正常婴儿(对照组)采用酶联免疫吸附法(ELISA)行HCMV抗体检测,PCR法行HCMV DNA检测,并对病例组采用直接免疫荧光染色法行血T细胞亚群检测,比较两组差异。结果两组HCMV抗体、DNA阳性数比较,差异有显著性意义(P均<0.01)。病例组HCMV-IgM阳性与阴性者T细胞亚群CD4 、CD8 及CD4 /CD8 比较,差异有显著性意义(P均<0.01)。结论婴儿期HCMV感染可能为ITP发病的重要因素之一。免疫功能紊乱与ITP发生、发展密切相关。     

Role of myeloid human cytomegalovirus infection in children's idiopathic thrombocytopenic purpura

This project explores the specificity of myeloid human cytomegalovirus (HCMV) infection in pathogenesis of idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP). Eighty-one subjects with ITP were observed. HCMV early antigen and related myeloid cells in bone marrow, and platelet, HCMV IgM, and IgG in blood were tested. The results presented potent evidence that myeloid HCMV infection is a specific factor in children's ITP: patients of ITP with myeloid HCMV infection had a tendency for exacerbation, refractoriness, and chronic advance. However, HCMV did not affect the quantity of megakaryocyte, which showed the complicated relationships between HCMV and ITP.     

ROLE OF MYELOID HUMAN CYTOMEGALOVIRUS INFECTION IN CHILDREN'S IDIOPATHIC THROMBOCYTOPENIC PURPURA

This project explores the specificity of myeloid human cytomegalovirus (HCMV) infection in pathogenesis of idiopathic thrombocytopenic purpura (ITP). Eighty-one subjects with ITP were observed. HCMV early antigen and related myeloid cells in bone marrow, and platelet, HCMV IgM, and IgG in blood were tested. The results presented potent evidence that myeloid HCMV infection is a specific factor in children's ITP: patients of ITP with myeloid HCMV infection had a tendency for exacerbation, refractoriness, and chronic advance. However, HCMV did not affect the quantity of megakaryocyte, which showed the complicated relationships between HCMV and ITP.     

特发性血小板减少性紫癜巨核系祖细胞巨细胞病毒感染的临床研究

目的特发性血小板减少性紫癜（ITP）是儿童常见的出血性疾病,其病因尚不十分清楚。很多研究表明,该病的发生与病毒感染密切相关。探讨人类巨细胞病毒（HCMV）感染巨核系祖细胞致ITP血小板减少的发病机制及其有效的治疗方法。方法HCMV相关ITP骨髓巨核细胞集落形成单位（CFU-MK）体外培养技术收集集落细胞,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HCMV晚期抗原基因mRNA,并给予更昔洛韦治疗。结果46例血清HCMV-DNAPCR阳性或血清HCMV-IgM阳性的ITP骨髓巨核细胞集落形成单位（CFU-MK）集落细胞HCMV晚期抗原基因mRNA阳性19例,更昔洛韦治疗有效16例;mRNA阴性27例,更昔洛韦治疗有效4例。阳性组疗效高于阴性组,P〈0．01,差异有统计学意义。结论HCMV可感染CFU—MK而成为1TP血小板减少的原因之一。巨核系祖细胞HCMV晚期抗原基因mRNA检测阳性者更昔洛韦治疗有效,能使血小板上升或恢复正常。     

Detection of HCMV DNA in placenta, amniotic fluid and fetuses of seropositive women by nested PCR

Human cytomegalovirus (HCMV) is the most common viral cause of intrauterine infection throughout the world. Its distribution patterns in different clinical samples are poorly understood. This study was performed to determine the frequency of CMV DNA positivity in maternal/fetus sera, placentas and amniotic fluid, together with maternal/fetus serology. Clinical specimens were obtained from 92 pregnant women who delivered by cesarean section. 98% of women and their neonates were HCMV IgG positive and 5.4% of these mothers were IgM positive, while no IgM was detected in neonates of IgM positive mothers. Among the IgG positive mothers, IgM was detected in 3.3% of their fetuses. 5.4% and 3.3% of maternal and fetal sera were HCMV DNA positive, respectively. The three neonates who were positive for HCMV DNA in sera were also positive for HCMV IgM and the PCR of their amnions was positive (p < 0.0001). 9.8% of placenta samples and 4.3% of amniotic fluid specimens were positive for HCMV DNA while among these placenta samples, two amnions were PCR positive (p = 0.046). Our results showed that there is not always a correlation between placenta and amnion infections. This may be due to reactivation of HCMV leading to placenta infection, as all affected placentas do not pass infection to fetuses and amniotic fluids. Detection of HCMV DNA in amnion and fetus plasma and the existence of fetus IgM against HCMV can also occur without clinical symptoms.     

更昔洛韦治疗特发性血小板减少性紫癜应用指征

目的探讨更昔洛韦(GCV)治疗人巨细胞病毒(HCMV)感染相关的特发性血小板减少性紫癜的(ITP)应用指征。方法选择血清HCMV DNA PCR和(或)HCMV IgM检测呈阳性ITP患儿46例,采用逆转聚合酶扩增反应(RT-PCR)检测巨核系祖细胞中HCMV晚期抗原mRNA,并行GCV治疗,判定其疗效及应用指征。结果46例血清HCMV-DNA PCR阳性和(或)血清HCMV-IgM阳性的ITP骨髓巨核祖细胞HCMV晚期抗原基因mRNA阳性19例,GCV治疗有效16例,mRNA阴性27例,GCV治疗有效4例。阳性组疗效高于阴性组,有显著性差异(P<0.01)。结论HCMV感染的ITP患儿,若对常规治疗无效,应检测其巨核祖细胞内HCMV晚期抗原基因mRNA,阳性者是应用更昔洛韦的有效指征。     

病毒感染与慢性特发性血小板减少性紫癜

目的为探讨病毒感染与慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)的关系。方法选择32例CITP患者(年龄8个月~13岁,男13,女19)及30例健康查体正常对照儿童(年龄1岁~14岁,男14,女16)。采用间接ELISA法测定两组血清巨细胞病毒(CMV)、肝炎病毒[包括乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)]和人类疱疹病毒(HHV)相关抗体。结果慢性ITP患儿各种病毒相关抗体阳性率高于对照组,其中巨细胞病毒抗体阳性率两组间比较差别具有显著性意义(P<0·05)。结论①慢性反复性病毒感染可能是导致ITP反复发作的重要原因之一,②临床上对ITP患者特别是慢性ITP患者应该常规进行病毒学实验室检查,有助于判断预后,指导治疗。     

特发性血小板减少性紫癜患儿血清微小病毒B_(19)检测及意义

目的探讨人微小病毒B19(HPVB19)感染与儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病的关系。方法采用酶联免疫法(ELISA)对46例ITP患儿利30例健康儿童的血清标本进行HPVB19-IgM、IgG及血小板相关抗体检测。结果46例ITP患儿血清中HPVB19抗体总刚性率43.48%(20/46),30例健康儿童HPVB19-IgM、IgG均为阴性,2组间差异有统计学意义(P<0.01);ITP组中急性型与慢性型之间HPVB19抗体总阳性率差异有统计学意义(P<0.05);病毒感染刚性患儿的血小板相关抗体明显高于病毒感染阴性患儿,差异有统计学意义(P<0.01)。结论ITP患儿血清中HPVB19抗体总刚性率高,尤其是急性型;HPVB19感染后可导致血小板相关抗体升高而致血小板减少。     

尿巨细胞病毒定量检测在巨细胞病毒感染诊断中的意义

目的探讨尿巨细胞病毒(CMV)定量检测在儿科CMV感染诊断中的意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应 (FQ-PCR)方法检测110例确诊或疑诊CMV感染和81例对照患儿尿CMV-DNA,并与血清抗体检测、pp65抗原检测比较,对更昔洛韦治疗的17例病人进行治疗后尿CMV-DNA;拷贝监测。结果 1．确诊或疑诊为CMV活动性感染患儿110例,其中82例尿中检测到CMV-DNA;对照11例检测到尿CMV-DNA,其中10例为正常健康儿童;且不同年龄组CMV-DNA的阳性率不同。17 例更昔洛韦治疗后,尿CMV-DNA的平均拷贝数明显下降(P<0．001)。2．FQ-PCR、pp65、IgM检测方法敏感性分别为87％、 74％、59％,特异性分别为97％、86％、69％;与其他两种方法比较,FQ-PCR方法敏感性和特异性均明显高(P均<0.001)。结论 FQ-PCR检测尿CMV-DNA对诊断活动性CMV感染有一定意义,量化结果便于治疗过程中进行连续的监测。     

新生儿室管膜下囊肿的病因研究

为了探讨新生儿室管膜下囊肿（ＳＥＣ）与先天性感染的关系，采用ＥＬＩＳＡ酶标法检测母婴双方囊肿组与对照组各７０例血巨细胞病毒（ＣＭＶ）、风疹病毒、弓形虫的抗体，并应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术直接检测病原ＤＮＡ（风疹病毒除外），同时作尿ＣＭＶ的ＰＣＲ检测。结果：囊肿组新生儿血ＣＭＶ－ＩｇＭ抗体和ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率显著高于对照组（分别为１７．１％、５．７％和１２．９％、２．９％）；且尿ＣＭＶ－ＰＣＲ的阳性率达４０．０％（２８／７０），高于对照组的１７．１％（１２／７０）；分别进行两组自身对照，尿ＣＭＶ－ＰＣＲ的阳性率显著高于血ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率（Ｐ＜０．０５）。囊肿组母亲的尿ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率亦显著高于对照组（３０％、１０％、Ｐ＜０．０１）。提示新生儿ＳＥＣ是宫内感染损害中枢神经系统的表现之一，与先天性ＣＭＶ感染有关，尿ＣＭＶ－ＰＣＲ检查可作为宫内ＣＭＶ感染的首选实验室诊断方法。