小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织HMGB1表达的影响及机制研究

目的 研究小剂量氢化可的松(HC)对内毒索(LPS)诱导的脓毒症大鼠晚期炎症介质高迁移率蛋白B-1(HMGB1)表达的影响及核因子κB(NF-κB)信号转导途径在发病机制中的作用.方法 实验用雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、小剂量HC干预组(C组).B组和C组设立2、8、16、24四个时段点,分别为B2、B8、B16、B24、C2、C8、C16、C24组.腹腔注射LPS(1 mg/kg)建立脓毒症大鼠模型,尾静脉注射小剂量HC(6 mg/kg)作为干预.72只大鼠每组8只采集各组大鼠海马组织,进行蛋白免疫印迹分析检测HMGB1水平.54只大鼠每组6只,采用免疫组化SP法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-κB、IκB的表达.结果 HMGB1在A组可见微量表达,B8组表达量始增加,以B16、B24组为高(P<0.05),B组HMGB1表达有持续增加趋势.C组HMGB1表达较B组呈减少趋势,以C16、C24组减少明显,差异有统计学意义(P<0.05).B组NF-κB表达较A组显著上调,以B8组最高(P<0.05),IκB表达先降低后逐步上升,较A组也明显增加,以B24组为高(P<0.05),C组NF-κB表达较B组显著下调,以C2、C8组为著(P<0.05);IκB表达较B组明显增加,以C8、C16、C24组为著(P<0.05).结论 小剂最HC对晚期炎症介质HMGB1有明显抑制作用,NF-κB信号转导途径在其中起到重要作用.     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠海马组织核因子kB表达的影响

目的 研究小剂量氢化可的松（HC）对内毒素诱导的脓毒症大鼠海马组织核因子-kB（NF-kB）、抑制因子kB（IkB）表达的影响。方法雄性Wistar大鼠54只随机分为：对照组（A组）6只，模型组（B组）24只、小剂量HC干预组（C组）24只。腹腔注射脂多糖（LPS）1mg／kg建立脓毒症大鼠模型，尾静脉注射小剂量HC（6mg／kg）作为干预，分别在注射后2、8、16、24h分时段麻醉并灌注固定取脑。B组和C组每个时段点各6只。采用免疫组织化学方法及医学图像分析系统检测大鼠海马NF-kB、IkB的表达。结果模型组NF-kB表达较正常对照组显著上调（P〈0．05），IkB表达先降低后逐步上升，较对照组亦明显增加（P〈0．05），以8h为最高；干预组海马NF-kB表达较模型组显著下调（P〈0．05）；IkB表达较模型组明显增加（P〈0．05）。结论小剂量HC可通过诱生IkB来抑制NF-kB的表达，进而调控LPS诱导的脓毒症脑功能障碍，NF-kB信号转导途径在其发病机制中起重要作用。     

小剂量氢化可的松对脓毒症大鼠早、晚期炎症介质表达的影响

目的 研究小剂量氢化可的松（HC）对内毒素（LPS）诱导的脓毒症大鼠早、晚期炎症介质表达的影响。方法 将72只雄性Wistar大鼠随机分为3组：对照组（A组）8只、模型组（B组）32只、小剂量HC干预组（C组）32只。B组和C组设立2、8、16、24h四个时段点，每个时段点各8只（相应的8个亚组用B2、138、B16、B24及C2、C18、C16、C24表示）。腹腔注射LPS（1mg／kg）建立脓毒症大鼠模型，C组腹腔注射LPS后即刻尾静脉注射小剂量HC（6mg／kg），分别在注射后2、8、16、24h分时段采集各组大鼠血清，采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验检测各组血清TNF-α和IL-1β含量。采集各组大鼠海马组织5mg，制备细胞总蛋白质，进行蛋白质电泳及蛋白免疫印迹分析，检测高迁移率蛋白（HMG）B1水平。结果 各组血清TNF-α、IL-1β水平均以B2组为高，与A组比较，差异有显著性（P〈0．05），C2组与B2组比较下降明显，差异有非常显著性（P〈0．01）。其余各组TNF-α，IL-1β水平与A组及同时点两两比较，差异无显著性（P〉0．05）。A组海马组织可见微量HMGB1表达；B组在B8表达量始增加，以B16、]324为高（P〈0．05）。B组HMGBl表达有持续增加趋势。C组HMGB1表达较B组呈减少趋势，以C16、C24组减少明显，差异有显著性（P〈0．05）。结论 小剂量HC对早、晚期炎症介质TNF-α，IL-1β、HMGB1的表达有明显抑制作用。     

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对脂多糖诱导小鼠巨噬细胞核因子-κB活化及核因子-κB抑制蛋白α磷酸化的影响

目的研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)磷酸化的影响。方法提取健康6~8周龄昆明种小鼠腹腔巨噬细胞,培养成活后调细胞水平为2×105mL-1,对照组加入等量9g/L盐水,LPS组加入LPS,使其终水平10μg/mL,LPS刺激细胞24h,SPC干预组加入不同水平SPC,干预细胞2h后加入终水平为10μg/mLLPS刺激24h。免疫细胞化学法观测NF-κB激活、IκBα磷酸化的表达。结果对照组小鼠巨噬细胞细胞核内NF-κBp65水平很低,LPS组细胞核NF-κBp65水平显著高于对照组(P<0.01),不同水平SPC干预组小鼠巨噬细胞NF-κBp65水平降低,即NF-κBp65表达减少,且呈水平依赖性降低(P<0.01)。细胞质内磷酸化的IκBα表达同胞核NF-κBp65水平变化基本一致。结论SPC抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞内NF-κB活化,可能是通过抑制IκBα磷酸化及降解途径完成。     

TNF-α和IκBα在内毒素致新生大鼠肺出血中的作用研究(英文)

目的：探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和核因子-κB抑制 蛋白α(IκBα)在内毒素脂多糖(LPS)致新生大鼠肺出血发生机制中的作用。方法：将48只7～10日龄Wistar大鼠分为LPS组和生理盐水(NS)组。LPS组腹腔注射LPS 5 mg/kg,按LPS⑸浜蠊鄄斓氖奔浞治0 min,1 h,2 h,4 h,8 h,16 h和24 h组,每组6只;NS组腹腔注射等量生理盐水作为对照。对鼠肺进行大体和光镜观察,分别采用酶联免疫 吸附(ELISA)、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot杂交法动态观察肺组织TNF-α蛋白和mRNA表达及IκBα表达的变化。结果：LPS注射后1 h可引起新生 大鼠明显的肺出血及炎性改变。肺组织TNF-α蛋白含量从LPS注射后1 h增加,2 h达高峰; TNF-α mRNA的表达从LPS注射后 0.5 h 明显增强(P<0.01),2 h达高峰;而I κBα于LPS注射后 1 h 起表达很快减弱,明显低于NS组(P<0.05),8 h表达最 弱(P<0.01)。结论：LPS可致新生大鼠肺出血。新生大鼠肺出血可 能与肺组织IκBα蛋白表达减弱,导致NF-κB活化、TNF-α基因转录上调及蛋白合成增加有关。     

黄芩甙对大鼠感染性脑水肿NF-κB活性的影响

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)及其抑制蛋白(IκB)在百日咳菌液所致的大鼠感染性脑水肿模型中的变化及黄芩甙对感染性脑水肿的保护作用是否与抑制NF-κB活化和IκB降解有关。方法健康SD大鼠45只随机分成三组：生理盐水对照组(NS组);百日咳菌感染性脑水肿模型组(PB组);黄芩甙治疗组(BC组)。BC组动物从注菌后1 h起每4 h腹腔注射黄芩甙一次。用电泳迁移率改变法(EMSA)检测各组动物脑组织的NF-κB与靶基因DNA的结合活性,用Western印迹分析法检测各组动物脑组织的IκBα表达。结果在NS组、BP 1 h组NF-κB活性较弱,BP 2 h组NF-κB活性增加,以后持续升高,并以PB 24 h组活性最强;PB 2 h组IκBα表达开始减少,24 h降到最低。BC 2 h,4 h,8 h,24 h组NF-κB活性低于相应PB组。黄芩甙组IκBα表达比相应PB组增多。结论百日咳菌所致的大鼠感染性脑水肿模型中NF-κB的活性明显增强,NF-κB活化可能参与了感染性脑水肿发病机制。黄芩甙对感染性脑水肿的保护作用可能是通过抑制NF-κB异常活化和IκBα降解起作用的。     

热性惊厥大鼠体内脑源性神经营养因子及核因子-κB的变化

目的 研究反复热性惊厥(FS)后脑源性神经营养因子/核因子-κB(BDNF/NF-κB)信号通路的改变.方法 51只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=14)、高热对照组(HC组,n=19)和热性惊厥组(FS组,n=18).水浴法建立FS模型.酶联免疫吸附法与免疫组织化学法检测血清与海马BDNF、NF-κB的表达.结果 酶联免疫吸附法检测结果显示,FS组血清与海马BDNF水平均明显高于NC组和HC组(P值均＜0.01).免疫组织化学法检测结果显示,FS组各脑区BDNF阳性神经元明显增多,且其光密度值明显高于NC组和HC组(P＜0.01);FS组各脑区NF-κB阳性细胞光密度值亦均明显高于NC组和HC组(P＜0.01);HC组胞核中NF-κB表达和光密度值也均明显高于NC组(P＜0.01);脑组织各区BDNF的表达与NF-κB的表达呈正相关关系(r=0.78,P＜0.01).结论 反复FS后BDNF、NF-κB表达均明显增加,且二者呈正相关,提示FS发病过程中BDNF/NF-κB信号通路可能被激活.     

肠三叶因子对肠组织核因子-κB及肿瘤坏死因子-α的调节及与肠损伤保护作用的关系

目的 探讨肠三叶因子(ITF)对肠组织NF-KB及TNF-α的调节及与肠损伤保护作用的关系.方法 24只10日龄的Wistar幼鼠随机分为正常对照组(NS组),脂多糖(LPS)组,ITF组,每组8只.NS组予9 g/L盐水1 mL/kg腹腔注射;LPS组予LPS(5 g/L)5 mg/kg腹腔注射;ITF组予重组ITF(5 g/L)0.1 mL/只+LPS 5 mg/kg腹腔注射.于腹腔注射后3h处死幼鼠,留取远端回肠组织,HE染色,光镜下行肠组织病理学检查.RT-PCR检测肠组织NF-κB mRNA表达水平.免疫组织化学检测肠组织NF-κB蛋白定位表达.ELISA法检测肠组织TNF-α分泌水平.结果 光镜下NS组肠组织结构正常,ITF组和LPS组均可见肠黏膜间质和上皮细胞水肿,ITF组较LPS组明显减轻;ITF组肠组织NF-KB mRNA和NF-κB蛋白表达均较LPS组明显下降(P均＜0.01);ITF组肠组织TNF-α分泌较LPS组明显减少(P＜0.01).结论 ITF减轻肠组织损伤的保护作用可能与其下调NF-KB mRNA和蛋白的表达及降低炎性介质TNF-α的分泌相关.     

幼鼠脓毒症模型中Rankl调控胸腺自然调节性T细胞免疫平衡的作用机制研究

目的 探讨核因子κB受体激活因子配体（receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,Rankl）对脓毒症幼鼠胸腺自然调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）的免疫调控机制。方法 采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）腹腔注射构建SD雄性幼鼠脓毒症模型。48只幼鼠按LPS浓度梯度分为4组,分别注射生理盐水（对照组）和5、8、10 mg/kg LPS,每组12只。24只幼鼠按给药分组,随机分为对照组、脓毒症组、野黄芩苷（Rankl抑制剂）组、白桦脂酸（NF-κB激动剂）组共4组,每组6只。取胸腺组织行免疫组化染色,计算Rankl、自身免疫调节因子（autoimmunity regulator,Aire）、叉头翼状螺旋转录因子（forkhead box P3,Foxp3）阳性细胞的平均光密度。胸腺组织匀浆免疫印迹法测定Rankl、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65、Aire、Foxp3的蛋白表达水平。统计学分析采用单因素方差分析和t检验。结果 不同浓度梯...     

孤儿核受体RORC在脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞的表达及调控机制

目的观察脓毒症肺损伤大鼠孤儿核受体RORC基因表达及血清IL-17水平,探讨Th17细胞在肺损伤中的作用及可能的调控机制。方法24只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamates,PDTC)预防组。静脉注射脂多糖(LPS,6mg/kg)复制急性肺损伤(ALI)的动物模型,在注射后12h处死。PDTC预防组在注射LPS前30min予以PDTC(120mg/kg)腹腔注射。测定肺湿/干重比(W/D),石蜡包埋切片经苏木素-伊红(HE)染色行肺组织病理评分,免疫组织化学法检测肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AM)核因子-κBP65(nuclear factor-κBP65,NF-κBP65)表达,ELISA法检测血清IL-17水平,实时荧光定量PCR法检测AM孤儿核受体RORC基因表达。结果与对照组相比,模型组肺干/湿比、肺组织病理评分、AM的NF-κBP65表达、血清IL-17水平、AM孤儿核受体RORC基因表达增加(P<0.05);与模型组相比,PDTC预防组上述改变得以逆转。结论Th17细胞可能参与了肺损伤的病理过程...     

微小RNA在B淋巴细胞发育及B淋巴细胞肿瘤中的作用

微小RNA(miRNA)是一种内源性的单链RNA,含19～25个核苷酸,其在转录后水平与靶mRNA的3’非编码区相作用,通过抑制靶mRNA的翻译或降解靶mRNA来抑制基因的表达。近年来研究发现,miRNA在细胞的分化、增殖和凋亡等生理过程中发挥重要作用,其异常表达促使了多种疾病的发生和发展。B淋巴细胞是细胞免疫重要组成部分,大量的研究表明,miRNA参与B淋巴细胞的发育和B淋巴细胞肿瘤的发生。现就几年来关于miRNA-17-92簇、miRNA-150、miRNA-155和miRNA-181在正常B淋巴细胞发育过程中的表达情况及在B淋巴细胞肿瘤中异常变化的研究作一综述。     

The protective efficacy of recombinant hepatitis B vaccine in newborn infants of hepatitis B e antigen-positive-hepatitis B surface antigen carrier mothers

Recombinant hepatitis B vaccine has been shown to be as safe and effective as plasma-derived vaccines. However, its efficacy in the prevention of perinatal infection has not been fully evaluated in an endemic area. We recruited 110 high risk infants born to hepatitis B e antigen-positive-hepatitis B surface antigen (HBsAg) carrier mothers in a study of recombinant vaccine efficacy. They were randomized into 2 groups, A (54 infants) and B (56 infants), to receive 4 doses of vaccine, containing 20 or 10 micrograms of surface antigen, respectively, at 0, 1, 2 and 12 months of age. An additional 60 high risk infants were recruited later (Group C) and received three 20-micrograms doses of vaccine at 0, 1 and 6 months of age. All infants also received a dose (145 IU) of hepatitis B immunoglobulin soon after birth. Sera were collected at 0, 1, 2, 3, 6, 12 and 14 months of age to assay HBsAg and anti-HBs. At 12 months of age the HBsAg carrier rates were 7.4 and 1.8%, in Groups A and B, respectively. In Group C the HBsAg-positive rate was 3.3%. HBsAg was invariably first observed between 0 and 2 months of age. Virtually all noncarrier infants developed substantial titers of anti-HBs at 12 months of age. No serious adverse effect was observed after vaccination.     

Transient hepatitis B surface antigenemia after neonatal hepatitis B immunization

Following immunization with hepatitis B vaccine, 39 infants were followed prospectively for hepatitis B surface antigen (HBsAg). A total of 69.2% of the infants tested positive for antigenemia at least once. Antigenemia was identified most often at 2–3 days (43.5 %) and 5–6 days (43.5 %) after immunization. The longest documented duration of antigenemia was 21 days. In all cases the antigenemia was transient and cleared by the 28th day post-vaccination.     

Use of hepatitis B vaccine alone or in combination with hepatitis B immunoglobulin for immunoprophylaxis of perinatal hepatitis B infection.

The efficacy of hepatitis B vaccine alone or in combination with immunoglobulin in neonates born to HBsAG positive mothers was investigated. Twenty-four infants were given three doses (at 0, 1, 2 months) of the vaccine alone, while 27 infants were given hepatitis B immunoglobulin (HBIG) and three doses of the vaccine. Fifty-eight infants born to HBsAg positive mothers who did not agree for vaccination or could not come for follow-up constituted the control group. The overall seroprotection rates (anti-HBS levels > or = 10 IU/l) were almost similar in both the groups at 6 months (81 and 76 per cent, respectively). However, the seroprotection rates in babies born to HBeAg positive mothers were better with combination of HBIG and vaccine (71 v. 57 per cent, respectively). It was also observed that seroprotection rates in babies born to anti-HBe positive mothers were even better (100 and 90 per cent in vaccine alone and combination group, respectively). No chronic carrier was detected in babies born to anti-HBe positive mothers.     

Parvovirus B19

Zusammenfassung Infektionen mit Parvovirus B19 verursachen eine der klassischen Kinderkrankheiten, die Ringelröteln (Erythema infectiosum). In den letzten Jahren fand man, dass Parvovirus-B19-Infektionen neben dieser meist problemlos verlaufenden Symptomatik auch mit schweren Erkrankungen unterschiedlicher Organbereiche wie Arthritiden und Arthralgien, Anämien, Thrombo- und Granulozytopenien, Hepatitiden, Enzephalitiden, Meningitiden und Myokarditiden einhergehen können. Hierbei persistiert das Virus oft über längere Zeiträume im Blut oder in bestimmten Geweben. Besonders gefährdet sind Immunsupprimierte. Infektionen bei schwangeren Frauen können zu Spontanaborten, Totgeburten oder Hydrops fetalis führen. Aufgrund der neuen epidemiologischen Daten sollten Infektion und Übertragungswege des Parvovirus B19 mehr Beachtung als bisher erfahren.     

乙型肝炎高危儿免疫预防效果及乙肝病毒母婴传播影响因素分析

目的 分析乙型肝炎病毒(HBV)母婴传播影响因素及乙肝高危儿免疫预防的效果,为儿童乙肝防治提供科学依据。方法 回顾性调查539例HBsAg阳性产妇及其6个月至5岁的乙肝高危儿551例,并检测乙肝高危儿的乙肝标志物,分析乙肝病毒母婴传播的影响因素。结果 乙肝疫苗接种率为100%,96.6%联合注射了乙肝疫苗和乙肝免疫球蛋白(HBIG)。各年龄段乙肝高危儿的HBsAg阳性率差异无统计学意义;HBsAb阳性率随年龄增长逐步下降 (P<0.01)。高危儿母亲为HBsAg、HBeAg双阳性者较单纯HBsAg阳性的乙肝感染率高 (15.1% vs 0.2%,P<0.01)。单纯接种乙肝疫苗的高危儿乙肝感染率 (28.6%)高于联合免疫注射者 (2.8%),P<0.01。结论 乙肝高危儿HBsAb阳性率随年龄增高逐渐下降。母亲HBsAg、HBeAg双阳性和出生未联合免疫注射是乙肝病毒母婴传播的危险因素。