一低剂量辐射诱导新基因的转录调控和初步功能分析

目的：克隆低剂量辐射诱导基因，研究辐射对其转录调控作用和生物学功能。方法：用mRNA差异显示技术分离辐射诱导表达基因，用RACE技术获取cDNA旁侧序列，Northern杂交分析基因的转录调节，生物信息学分析基因的结构和功能。结果：获得包括3'端在内的辐射诱导新基因LRIGx的cDNA片段，序列同源性比较显示与人染色体20ql 1.2-12一段DNA高度同源（＞99％），Northern杂交结果揭示该基因转录子全长约8．5kb，在0．2Gy照射后2h出现诱导表达，4h后转录子水平为对照细胞的5倍多，也受0．02Gy更低剂量照射诱导表达，2Gy大剂量照射后1h出现短暂诱导表达，但不如低量照射明显，2h后恢复正常水平，生物信息学分析结果显示该基因编码产物含有解旋酶活性保守区，结论：分离鉴定出一低剂量辐射反应基因，其编码蛋白可能参与DNA代谢（如修复）等细胞辐射反应过程。     

辐射诱导细胞凋亡的基因调控

ｐ５３和Ｂｃｌ－２家庭在辐射诱导的细胞凋亡中起着中心作用，可调节许多凋７亡基因的转录与表达，从而调控细胞凋亡；ｃ－ｍｙｃ是一个双向的凋控基因，可因细胞生长条件的不同而不同；ＩＣＥ基因家庭蛋白则在调控细胞凋亡过程中使一些有关蛋白底物酶解。这些基因及其它凋亡相关基因并不孤立存在，而是互相联系、互相作用，共同调节细胞的增殖、分化与凋亡。     

癌基因和抑癌基因在辐射致癌中的作用

癌基因和抑癌基因在辐射致癌中的作用赵永良，金璀珍，吴德昌辐射是已知的环境致突、致癌因子之一，它可引起各种基因损伤，包括ＤＮＡ链断裂、缺失、基因重组及点突变等，这些基因损伤对于癌症始动及发展是重要的先决条件，近年来分子生物学技术的应用，特别是癌基因、抑...     

Egr—1基因的辐射生物学效应研究进展

Egr-1（early growth response-1）基因是一系列“立即早期基因（immediate early gene）”之一，参与细胞的多种辐射生物效应。研究表明，Egr－1在多种正常细胞和肿瘤细胞受到电脑辐射后的早期就能被激活，它的激活表达与辐照后细胞的生长、周期、凋亡等的改变密切相关。另外，Egr-1基因调控序列具有辐射可诱导特性，这一特点使其具有潜在的临床和基因工程生产应用前景。     

siRNA抑制STAT3基因对HepG2细胞辐射敏感性的影响

目的 研究瞬时转染的siRNA抑制STAT3基因表达对人肝癌HepG2细胞辐射敏感性的影响。方法 以人肝癌HepG2细胞作为研究对象，脂质体包裹化学合成的siRNA进行转染。采用实时RT-PCR和Westernblotting法分别从mRNA水平和蛋白水平检测STAT3基因的表达及编码蛋白磷酸化活化的改变，用CCK-8法和Hoechst33258DNA染色法检测辐射敏感性的变化。结果STAT3特异性的siRNA转染后HepG2细胞中STAT3基因mRNA拷贝数、STAT3蛋白表达和磷酸化水平均明显降低。mRNA水平的抑制效率可达70％。siRNA转染联合60Coγ射线照射后HepG2细胞增殖活力显著低于对照组（P〈0．05）。结论 针对人STAT3基因的siRNA能够抑制HepG2细胞STAT3基因的表达，降低STAT3蛋白活化水平，进而产生辐射增敏作用。     

辐射诱导细胞凋亡的基因调控

ｐ５３和Ｂｃｌ－２家族在辐射诱导的细胞凋亡中起着中心作用，可调节许多凋亡相关基因的转录与表达，从而调控细胞凋亡；ｃ－ｍｙｃ是一个双向的调控基因，可因细胞生长条件的不同而不同；ＩＣＥ基因家族蛋白则在调控细胞凋亡过程中使一些有关蛋白底物酶解。这些基因及其它凋亡相关基因并不孤立存在，而是互相联系、互相作用，共同调节细胞的增殖、分化与凋亡。     

卫量舱内辐射测量数字固态记录器的研制

该固态记录器是卫星舱内辐射测量仪的配套产品，主要由单片机及外扩数据存储器等组成，可按预宁要求进行脉冲计数和实现数据的记录存储。本文介绍了该记录器的软、硬件设计，并给出了部分记录结果，还谈到了提高产品可靠性的措施。     

辐射诱发生殖细胞染色体易位的生物学意义

辐射诱发生殖细胞染色体易位的生物学意义姚素艳自１９５６年以来，世界各国对人类及哺乳动物染色体的研究不断深入，研究技术也不断改进和发展．近年来对染色体的研究已从细胞水平发展到亚细胞及分子水平，不仅认识了染色体的本质，而且发展到应用染色体上的基因来诊断和...     

辐射及细胞因子对p21基因表达的调控作用

p21基因是细胞周期的负向调控因子，在一定的因素诱导下，p21基因可有效地引起细胞周期G1期和G2期阻滞，从而在维持基因组稳定性中起重要作用。辐射及TGFβ1、TNFα、PTEN、IGF等因子均可诱导p21基因表达增高，而E1A、c-jun、Tbx2、PLD1和PLD2等因子则抑制p21基因表达。     

辐射联合外源性野生型p53基因对不同p53状态的黑色素瘤细胞系的生物学效应

目的研究辐射结合腺病毒（Ad CMV）载体介导的p53基因转导对不同p53状态的人黑色素瘤细胞系基因转移效率、凋亡和辐射敏感性的影响。方法用复制缺陷的重组腺病毒载体（AdCMV-p53）介导入p53基因转导1Gy X射线预照射的黑色素瘤细胞系A375（wt p53）和WM983a（mu p53），RT-PCR检测mRNA水平，流式细胞仪测定细胞周期阻滞及外源性P53蛋白表达情况，Tunel法检测细胞凋亡，克隆形成率测定辐射后细胞存活率。用携带报道基因的复制缺陷重组腺病毒载体AdCMV-GFP作为对照。结果1Gy X射线照射可较高地增加AdCMV-p53对A375和WM983a细胞系的基因转导效率，转导的外源性野生型p53可在两种细胞中高效表达，并诱导细胞周期G1期阻滞；单纯转导p53对A375（wt p53）细胞无明显诱导凋亡和生长抑制效应，但可部分诱导WM983a（mu p53）细胞凋亡；而转导p53基因48h后给予X射线辐射，两种细胞的克隆存活率较其对照组均明显减低，外源性p53基因对WM983a（mu p53）细胞的辐射增敏作用较A375（wt p53）细胞明显。结论外源性野生型p53基因过表达可增加黑色素瘤细胞系A375和WM983a的辐射敏感性，但对WM983a细胞系的辐射增敏作用高于A375细胞系。表明p53是基因治疗黑色素瘤较好的候选基因。     

辐射相关基因芯片的制备及其在肺癌细胞中的应用

目的 寻找参与肺癌细胞辐射抗性的基因。方法构建辐射相关的基因芯片，初步筛选出在不同辐射敏感性肺癌细胞系中差异表达的基因。为了评价芯片结果的可靠性，我们对一些差异表达基因进行了RT-PCR验证。结果和辐射敏感的NCI-H446细胞相比，辐射抗性的A549中有18个基因有明显的改变，8个基因是上调，10个基因是下调。在照射后6h和24h，A549细胞中分别有22个基因(19个基因上调，3个下调)和26个基因(8个上调，18个下调)的差异表达；NCI-H446细胞中分别有17个基因(9个基因上调，8个下调)和18个基因(6个上调，12个下调)差异表达。从这些基因中，我们发现一些参与细胞增殖和抗凋亡的基因，在照射后的A549细胞中是增高的，而在NCI-H446细胞中是降低的。另外一些参与DNA修复的基因，在A549中比在NCI-H446细胞中有更高的表达。结论一些参与细胞DNA修复、细胞周期调控、细胞增殖和抗凋亡作用的基因可能有助于A549细胞辐射抗性的形成。     

个体辐射敏感性差异的研究进展及意义

个体对电离辐射损伤效应的敏感性具有很大的差异，早先发现的一些遗传性辐射敏感综合症中，其杂合子亦表现出较高的辐射敏感性和肿瘤易感性。通过对辐射敏感性不同的细胞系间的比较研究发现，某些特定基因改变与辐射敏感性相关，本文从ｐ５３基因突变，细胞凋亡和辐射诱导的遗传不稳定性等方面综述了个体辐射敏感性差异的机制及意义。     

junB启动子X射线辐射敏感区域的检测

目的探讨junB启动子X射线特异性辐射敏感区。方法构建含250、590、900和1560bp junB启动子基因片段及CAT报道基因的4种质粒，转染辐射诱导的白血病细胞系L8704细胞，2Gy X射线照射，RNA提取，Northern印迹及RNA定量分析。结果含900和1560 bp junB启动子基因片段的质粒组CAT RNA表达分别在照射后30和60min达高峰。结论junB启动子590～900bp基因片段为辐射敏感区。     

辐射诱导旁效应研究进展

随着人们对低剂量辐射后发生的间接和延迟效应(如突变、基因不稳定性)的重视，以及新的高效工具(如单细胞微束和先进的培养系统)的应用，过去的十几年对辐射诱导旁效应的产生机制有了许多新的认识和发现。辐射诱导旁效应是受基因调控，由细胞问信号传递途径中介产生的。     

辐射诱导发育脑细胞凋亡的分子调节

近年来辐射诱导脑细胞损伤研究表明，某些基因如即早基因、Ｂｃｌ－２家族、Ｐ５３热休克蛋白、ＡＴ基因 电脑辐射放育的细胞凋亡中发挥重要的调控作用；而神经生长因子、等生物因子在抑制辐射诱导细胞凋亡中具有重要的保护作用。     

辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN的构建及其体外抗肿瘤作用的研究

目的 克隆人野生型抑癌基因PTEN／MMAC1 cDNA序列、构建辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN并研究其体外稳定转染联合X-射线照射对恶性胶质瘤细胞SHG-44增殖的抑制作用。方法 利用RT—nested PCR法从正常人胎盘组织中扩增出约1200bp的PTEN片段，并将其重组人pcDNA3．1-Egr载体中，构建为表达质粒pEgr-hPTEN，体外转染肿瘤细胞并经G418筛选稳定转染细胞株SHG-44-sPTEN，接受不同剂量X射线照射，观察基因-放射联合作用对肿瘤细胞生长的影响。结果 经全自动测序证明克隆得到了野生型PTEN基因；辐射诱导表达载体pEgr—hPTEN构建正确；稳定转染联合X-射线照射可明显抑制肿瘤细胞的恶性增殖，5Gy以内随吸收剂量的增加，肿瘤抑制作用更明显。结论 本研究成功克隆了人野生型抑癌基因PTEN／MMAC1 cDNA序列并构建了辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN，体外基因-放射联合治疗具有明显的肿瘤抑制作用。本研究为提高临床恶性肿瘤放疗疗效奠定了理论和实验基础。     

射线诱导PIRES-Egr-1-IFN-γ在小鼠体内的表达

电离辐射可迅速诱导细胞中早期生长反应（Egr-1）基因的表达，Egr-1基因启动子含有6个CArG元件，电离辐射通过细胞产生活性氧自由基作用于CArG元件诱导Egr-1的表达，用Egr-1启动子经辐射可诱导下游基因的超强表达。根据Egr-1的辐射诱导特性，利用Egr-1启动子区的顺式作用元件以及调节免疫的基因来构建辐射诱导表达调控系统，以实现肿瘤的基因治疗联合放射治疗，又称基因．放射治疗是近年提出的肿瘤治疗新思路。本研究初步探讨放疗诱导Egr-1启动的IFN-γ了基因（PIRES-Egr-1-IFN-γ质粒）在小鼠体内表达的时效和量效关系，为基因．放射治疗的临床应用提供依据。     

个体辐射敏感性差异的研究进展及意义

个体对电离辐射损伤效应的敏感性具有很大的差异。早先发现的一些遗传性辐射敏感综合症中，其杂合子亦表现出较高的辐射敏感性和肿瘤易感性；通过对辐射敏感性不同的细胞系间的比较研究发现，某些特定基因改变与辐射敏感性相关。本文从ｐ５３基因突变、细胞凋亡和辐射诱导的遗传不稳定性等方面综述了个体辐射敏感性差异的机制及意义。     

切尔诺贝利核事故导致的人类甲状腺癌

切尔诺贝利核电站事故是人类核工业历史上空前的灾难性事故，其释放出大量的放射性核素导致北半球许多国家受到污染。近20年的研究证实，白俄罗斯是受影响最严重的国家，尤其是事故后甲状腺癌的急剧增加，是目前惟一得到确认的辐射远后效应，转染重排基因在辐射导致甲状腺癌中的作用受到了密切关注。     

空间环境对黑色素瘤细胞基因表达谱的影响

目的探讨空间环境对黑色素瘤B16细胞基因表达谱的影响。方法利用“细胞在常温条件下长期存活装置”将B16细胞进行无源搭载。返地后常规培养，以常规培养的野生型B16细胞及地面装置组作为对照，甲基噻唑基四唑法测定细胞生长曲线，基因芯片分析细胞18240个基因的差异表达。结果搭载细胞返地培养后，与对照组细胞相比，生长速率差异没有显著性意义。与常规培养的对照相比，地面装置组细胞及空间组细胞分别有61及156个基因发生明显改变；其中35个基因为地面装置组及空间组细胞二者共同与常规对照组细胞差异表达，30个基因为空间培养细胞与地面装置组细胞之间差异表达；差异表达的基因涉及Wnt及Ca^2＋等信号传导途径。结论空间环境作用后，B16肿瘤细胞基因表达改变，一些信号传导途径及能量代谢表现为对空间环境较为敏感。