蟾蜍灵抗癌作用机制研究进展

 蟾蜍灵是传统中药蟾酥的有效成分之一,国内外许多研究证实它对多种白血病细胞和一些实体恶性肿瘤细胞有显著抑制增殖作用,其机制可能是通过抑制内皮细胞增生和血管生成、诱导细胞分化和凋亡等实现的。随着研究的不断深入,显示蟾蜍灵具有广泛的抗肿瘤作用,其发挥效用的浓度低,具有潜在的临床应用价值。     

蟾毒灵与顺铂协同抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的机制探讨

目的 探讨蟾毒灵（Bufalin）联合顺铂对乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响,并探讨可能的协同机制。方法 采用MTT法检测空白对照组（仅培养液）、单纯细胞对照组和实验组的细胞增殖率,实验组加入不同浓度的顺铂或Bufalin单药或以固定比例（Bufalin∶顺铂=1 nmol／L∶1 μmol／L）联合作用24 h。分别采用20 nmol／L Bufalin、20 μmol／L顺铂单药或联合作用24 h,用流式细胞术检测细胞凋亡,并用Western Blotting检测活化的Met（p-Met）、Met、活化的Src（p-Src）、Src、PARP及其裂解cleaved PARP蛋白的表达。结果 MTT法检测显示,顺铂和Bufalin均以剂量依赖方式抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖。在顺铂≥0.1 μmol／L和Bufalin≥0.1 nmol／L时两药联合作用可协同抑制MCF-7细胞增殖（0＜CI＜0.433）。流式细胞术检测显示,20 μmol／L顺铂作用24 h可诱导（10.7±4.8）％ 的MCF-7细胞凋亡,而20 nmol／L Bufalin作用24 h未明显诱导细胞凋亡,20 nmol／L Bufalin与20 μmol／L顺铂联合作用24 h后可诱导（40.8±8.5）％的MCF-7细胞凋亡。Western Blotting检测显示,顺铂作用后可导致Met和Src活化,Bufalin与顺铂联合作用后可抑制顺铂诱导的Met和Src活化,同时上调PARP裂解。结论 Bufalin可能通过抑制顺铂诱导的Met和Src活化与顺铂协同抑制MCF-7细胞增殖,增强顺铂诱导的细胞凋亡。     

蟾毒灵对人骨肉瘤细胞化疗增敏作用的实验研究

目的 探讨蟾毒灵对人骨肉瘤细胞Saos 2和U2OS的化疗增敏作用。方法 采用无毒剂量的蟾毒灵联合不同浓度的阿霉素（0.01、0.1、1.0μg／ml ADM）和顺铂（0.5、1.0、2.0μg／ml DDP）分别作用于Saos-2和U2OS细胞24h,用CCK-8法观察药物对细胞增殖的抑制作用,Hoechst 33258 染色法观察细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果CCK-8法检测显示,蟾毒灵对Saos 2和U2OS细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性;无细胞毒剂量（0.005μmol／L）的蟾毒灵可以显著增强不同浓度ADM和DDP 对Saos-2和U2OS细胞增殖的抑制作用（q＞1.15）。Hoechst 33258染色法显示,蟾毒灵联合DDP或ADM后Saos-2和U2OS细胞的凋亡形态学变化较DDP或ADM单药更显著。流式细胞术检测显示,0.005μmol／L蟾毒灵联合1.0μg／ml DDP或2.0μg／ml ADM组Saos-2和U2OS细胞的凋亡率显著高于DDP或ADM单药组（q＞1.15,P＜0.05）。结论 无毒剂量的蟾毒灵可以增强化疗药物诱导的人骨肉瘤细胞凋亡的能力,具有化疗增敏作用。     

蟾毒灵抗肿瘤作用分子机制

蟾酥在中医药抗肿瘤治疗方面已有悠久的历史,其单体蟾毒灵被认为是具有抗肿瘤活性的有效成分之一.从诱导肿瘤细胞凋亡、分化,抑制细胞增殖及血管生成,增强放化疗药物的敏感性等方面阐述蟾毒灵抗肿瘤作用的分子机制,可以为深入研究蟾毒灵及其发展和临床用药提供依据.     

蟾蜍灵对宫颈癌细胞的增殖抑制作用及其机制研究

背景与目的：宫颈癌仍然是妇科肿瘤致死病因的第二位,部分原因为化疗耐药。蟾蜍灵是传统中药蟾酥的成分之一,目前在国内广泛应用于肿瘤的治疗中。该研究旨在探讨蟾蜍灵对宫颈癌细胞ME180和C33A的增殖抑制作用及相关机制。方法：采用CCK8(cell counting kit-8)法检测蟾蜍灵对宫颈癌细胞增殖的抑制作用,采用葡萄糖检测分析试剂盒(glucose assay kit)进行细胞内糖代谢检测分析,采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞内葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)和己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)的mRNA的表达水平,采用蛋白［质］印迹法(Western blot)检测原癌基因C-MYC和缺氧诱导因子1α(Hif-1α)表达的变化。结果：CCK8法结果显示,蟾蜍灵能明显抑制宫颈癌细胞ME180和C33A细胞增殖(P=0.027,P=0.018)。糖代谢检测结果显示,蟾蜍灵处理组葡萄糖代谢水平显著降低(P=0.034,P=0.036)。qRT-PCR检测结果显示,蟾蜍灵处理组糖代谢相关指标GLUT1(P=0.019,P=0.016)和HK2(P=0.039,P=0.041)的表达水平明显下调。Western blot检测结果显示,蟾蜍灵处理后宫颈癌细胞内C-MYC和Hif-1α蛋白表达水平显著下调。结论：蟾蜍灵可以通过降低宫颈癌细胞ME180和C33A糖代谢水平,从而抑制细胞增殖。     

维泰醇和维康醇的抗肿瘤效应

维泰醇和维康醇是从真菌诱变株的菌丝体中提取纯化的单体化合物,近年的体外和体内实验研究证实它们具有特异性抗肿瘤功效.体外实验研究表明,它们可以抑制多种肿瘤包括前列腺癌、骨肉瘤、黑色素瘤的细胞分裂和增殖,改变细胞周期蛋白表达水平而引起细胞周期停滞,阻断肿瘤细胞浸润和转移,减少新生血管形成,降低肿瘤细胞中Bcl-2等促进细胞存活蛋白的表达以及激发细胞内氧自由基水平等导致细胞凋亡,但是对良性细胞没有显著的致死效应.动物实验表明,这两种化合物能显著抑制多种人类肿瘤的异植瘤生长,而对正常组织器官的不良反应较小,有望开发成为新型抗肿瘤药物.     

鞣花酸抗肿瘤作用的分子机制

鞣花酸是一种存在于多种植物中的天然多酚组分,近年来,越来越多的实验证实鞣花酸通过调节细胞转运因子和激活多信号途径方式抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡。由于其安全性和有效性,可作为肿瘤的化学预防剂,联合化学药物治疗肿瘤。     

鞣花酸抗肿瘤作用的分子机制

鞣花酸是一种存在于多种植物中的天然多酚组分,近年来,越来越多的实验证实鞣花酸通过调节细胞转运因子和激活多信号途径方式抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡。由于其安全性和有效性,可作为肿瘤的化学预防剂,联合化学药物治疗肿瘤。     

山奈酚的抗肿瘤作用

山奈酚是一种广泛存在于水果、蔬菜、中草药等天然植物中的黄酮类化合物,具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗焦虑、镇痛和抗过敏等广泛的药理作用。研究发现,山奈酚可降低罹患癌症的风险,可通过诱导细胞凋亡、调节细胞周期、抑制新生血管生成和肿瘤转移等作用抑制肿瘤细胞增殖和侵袭,并可通过调节氧化应激反应和抑制炎性因子发挥抗肿瘤作用,在肿瘤防治中具有广阔的应用前景。     

免疫毒素的抗肿瘤研究及其改善策略

免疫毒素由特异性的单克隆抗体或生长因子与具有杀伤作用的毒素分子通过化学交联构建而成.它通过抑制癌细胞的蛋白合成或促进癌细胞凋亡发挥抗癌作用.与其他抗肿瘤药物相比,具有毒性强和特异性高的优点,在肿瘤治疗中显示出巨大的应用前景.但进入临床应用还存在很多限制性因素.     

TRAIL作用机制及其在肿瘤治疗中的研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)具有特异性抗肿瘤活性,可通过死亡受体途径及转录因子途径发挥诱导肿瘤细胞凋亡作用.而正常细胞则通过诱骗受体、FLIP及凋亡抑制蛋白来逃逸TRAIL诱导的凋亡.TRAIL与化疗药物、基因治疗联合应用能明显提高肿瘤治疗的靶向性,同时还可以逆转肿瘤细胞对TRAIL的抵抗现象.因此TRAIL作为新型抗肿瘤药物有望应用于临床治疗.     

表没食子儿茶素没食子酸酯的抗肿瘤机制

 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是一种具有抗肿瘤活性的天然药物,可通过抑制肿瘤细胞增殖、血管生成及促进肿瘤细胞凋亡等机制发挥抗肿瘤作用。EGCG在抗消化系统、生殖系统、呼吸系统等肿瘤的机制研究中取得的新发现,缩短了EGCG应用于临床肿瘤治疗的进程。     

Selective Inhibitory Effect of Bufalin on Growth of Human Tumor Cells in vitro: Association with the Induction of Apoptosis in Leukemia HL-60 Cells

We found that bufalin, an active principle of the Chinese medicine chan'su , has selective inhibitory effects on the growth of various human cancer cells. In order to examine whether the growth-inhibitory effect of bufalin on human cancer cells is associated with apoptosis, human leukemia cells were treated with bufalin. HL-60, ML1, and U937 leukemia cells treated with bufalin at 10⁻⁸ M and above had condensed and fragmented nuclei. Flow cytometric analysis of these cells treated with bufalin showed fragmented DNA smaller than that of the G1 phase. DNA of HL-60 cells treated with bufalin showed a ladder pattern characteristic of apoptosis, as analyzed by agarose gel electrophoretic analysis. DNA synthesis and topoisomerase II activity of HL-60 cells were markedly inhibited as the concentration of bufalin was increased. The concentration needed for inducing apoptosis of HL-60 cells was 10⁻⁸ M , which is comparable to that of camptothecin, but lower than those of other antitumor drugs such as cisplatin, VP16 and all- trans retinoic acid. Apoptosis was not observed when human mononuclear and polymorphonuclear cells were treated with 10⁻⁶ M bufalin for 24 h. These results indicate the association of the growth-inhibitory effect of bufalin with the induction of apoptosis, at least in HL-60 cells, and suggest the usefulness of bufalin for differentiation-apoptosis-inducing therapy for cancer.     

TRAIL的抗肿瘤机制及其应用

目的:总结国内外关于TRAIL的抗肿瘤机制及应用的研究进展.方法:应用MEDLINE及CNKI期刊全文数据库系统,以"TRAIL、机制和治疗"等为关键词,检索2000-2010年的相关文献.纳入标准:1)TRAIL的结构及受体;2)TRAIL的作用机制;3)TRAIL的应用及临床试验.根据纳入标准,纳入分析23篇文献.结果:TRAIL在TNF家族中最显著的特征是对肿瘤细胞和转化细胞具有选择性的凋亡诱导作用,而对正常的组织和细胞不具有明显的毒性反应,并且与其他试剂联合应用具有协同抗肿瘤作用.结论:相对于化疗药物的毒副反应,TRAIL的独特优势为其在肿瘤治疗中奠定了良好基础,可以为目前的肿瘤治疗提供更有效,更安全的新方法.     

蟾毒灵诱导骨肉瘤U-2OS和U-2OS/MTX300细胞系的凋亡

目的 研究蟾毒灵对人骨肉瘤细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用.方法 以不同浓度的蟾毒灵分别作用于骨肉瘤细胞U-2OS和甲氨蝶呤(MTX)耐药骨肉瘤细胞U-2OS/MTX300.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,DNA琼脂糖凝胶电泳检测DNA ladder凋亡条带,Western blot法检测凋亡相关蛋白p53、bax和bcl-2的表达.结果 蟾毒灵能明显抑制骨肉瘤细胞的增殖,其对U-2OS和U-2OS/MTX300细胞的IC50值分别为(8.49±2.1)ng/ml和(10.19±1.7)ng/ml(P＞0.05).蟾毒灵处理U2OS和U-2OS/MTX300细胞48 h后,细胞均出现明显的染色质凝集,有典型的凋亡小体产生.同时,蟾毒灵能诱导骨肉瘤细胞凋亡,其作用机制是通过阻滞细胞周期于G2/M期、上调p53、bax表达和下调bcl-2的表达来实现.结论 蟾毒灵能显著抑制人骨肉瘤细胞U-2OS和U-2OS/MTX300的生长,并诱导细胞凋亡,其抗骨肉瘤作用不受MTX耐药的影响.     

蟾毒灵与紫杉醇协同抑制乳腺癌细胞增殖的机制

目的:研究蟾毒灵(Bufalin)与紫杉醇是否可协同抑制乳腺癌细胞增殖,探索可能的协同机制.方法:采用MTT法测定细胞活力、采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western Blot法检测AKT、p-AKT、p38、p-p38、β-actin蛋白的表达.结果:MTT结果显紫杉醇和Bufalin可以剂量依赖方式抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖.两药联合作用可协同抑制MCF-7细胞增殖.流式分析显40nmoL/L的紫杉醇作用24小时可诱导乳腺癌MCF-7发生明显的G2M期阻滞和12.5％的细胞凋亡,10nmol/L的Bufalin作用24小时未诱导明显的细胞凋亡,10nmol/L的Bufalin与40nmol/L的紫杉醇联合作用24小时后可诱导23.7％的MCF-7细胞凋亡.Western Blot分析显紫杉醇作用后导致AKT和p38的活化,Bufalin与紫杉醇联合作用后可抑制紫杉醇诱导的AKT活化,增强紫杉醇诱导的p38活化.结论:Bufalin可通过抑制AKT的活化、上调p38的活化与紫杉醇协同抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡.     

槲皮素抗肿瘤作用机制

槲皮素能抑制多种肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡,干扰细胞信号传导,逆转肿瘤细胞的多药耐药和增强其他药物的抗肿瘤作用.随着分子生物学技术的不断发展,槲皮素抗肿瘤的分子机制逐渐被阐明,将为肿瘤的预防和治疗提供更好的理论依据.     

青蒿素类药物抗肿瘤机制及特点

青蒿素(artemisinin)及其衍生物是一类抗疟药。研究表明,青蒿素还可通过抑制细胞增殖,诱导肿瘤细胞、血管内皮细胞凋亡以及产生自由基等发挥抗肿瘤作用。其抗肿瘤作用还与亚铁离子(Fe2+)的参与及青蒿素类药物的构象有关,并能克服肿瘤细胞的多药耐药。     

Livin基因在肿瘤中的研究

 Livin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,在多种肿瘤中高表达,与肿瘤的发生、发展、治疗及预后密切相关。多种研究证明,RNA干扰Livin后能抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞凋亡,并能增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性。Livin在caspases的作用下发生裂解,产生的缩短片段具有促进肿瘤细胞凋亡的作用,为肿瘤治疗提供了新的方向。     

青蒿素类药物抗肿瘤机制及特点

青蒿素（artemisinin）及其衍生物是一类抗疟药。研究表明，青蒿素还可通过抑制细胞增殖，诱导肿瘤细胞、血管内皮细胞凋亡以及产生自由基等发挥抗肿瘤作用。其抗肿瘤作用还与亚铁离子（Fe^2＋）的参与及青蒿素类药物的构象有关，并能克服肿瘤细胞的多药耐药。