连翘不同极性部位对酪氨酸酶活性抑制作用研究

目的 研究连翘对酪氨酸酶活性的抑制作用.方法 将连翘用80％的乙醇水溶液回流提取,得到总提取物,再用不同极性的有机溶剂石油醚、二氯甲烷、正丁醇进一步萃取,得到不同极性部位.将总提取物和各部位浸膏溶于不同体积的溶剂,以L-酪氨酸为底物,加入酪氨酸酶,使终浓度为1.0,0.5,0.2,0.1,0.04mg·ml-1,测定药物干预前后反应体系在475 nm波长处吸光度值变化,计算各组分对酪氨酸酶活性的抑制率.结果 在各组分中,连翘的二氯甲烷部位对酪氨酸酶活性的抑制率最高,当终浓度为1.0 mg·ml-1时,抑制率为57.3％,抑制率随着浓度的增加而升高,其IC50为0.57mg·ml-1;其他组分也均有不同程度的抑制作用,其中正丁醇部位、水溶部位和总提取物随浓度的增加具有双向调节作用.结论 连翘具有较好的抑制酪氨酸酶活性的作用,可以抑制黑色素的形成.此实验为进一步研究连翘中酪氨酸酶活性抑制成分及其作用机理提供基础.     

补骨脂酚对酪氨酸酶活性的影响及动力学分析

目的:采用酶促反应动力学方法研究补骨脂酚对酪氨酸单酚酶和二酚酶活性的影响,并考察补骨脂酚对酪氨酸酶的作用机制及动力学参数。方法:在p H 6.8的磷酸盐缓冲体系中,分别以L-酪氨酸和左旋多巴为底物,37℃反应后在475 nm处测定吸光度,研究补骨脂酚对酪氨酸酶催化反应进程和酶活性抑制的影响,计算抑制动力学参数。结果:补骨脂酚对酪氨酸单酚酶和二酚酶均有抑制作用,半抑制浓度分别为1.49,0.41 mmol·L~(-1),其中对酪氨酸二酚酶的抑制作用表现为可逆抑制,其抑制作用表现为竞争性抑制,抑制常数0.955 mmol·L~(-1)。结论:在低浓度范围内,补骨脂酚对酪氨酸酶的抑制作用较熊果苷更明显,具有开发成天然酪氨酸酶抑制剂的潜力。     

12种中药的水及乙醇提取液对酪氨酸酶抑制作用的比较

[目的]比较12种常用美白中药70%乙醇提液与水提液对酪氨酸酶活性的抑制能力。[方法]利用受试物抑制蘑菇酪氨酸酶催化底物(L-多巴)发生反应从而减少黑色素生成的原理,以维生素C作标准对照,用分光光度计测定反应液在475 nm的吸光度,通过吸光度比较各受试物对酪氨酸酶活性的抑制能力。[结果]12种中药均对无细胞系蘑菇酪氨酸酶活性有不同程度的抑制作用,其中甘草等5种中药的70%乙醇提物对酪氨酸酶的抑制作用强于其水提物的抑制作用;桑叶等7种中药的水提物对酪氨酸酶的抑制作用强于其醇提物的抑制作用。[结论]通过对比常用美白中药的醇、水提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用,筛选天然物作为纯天然美白化妆品原料,拥有广阔的发展前景。     

AKR1C3酶抑制剂筛选模型的建立及在中药五环三萜类活性成分筛选中的应用

目的:建立与优化AKR1C3抑制剂类抗去势抵抗性前列腺癌药物筛选模型,并运用此模型对中药五环三萜类化合物进行体外活性筛选和构效关系分析。方法:优化酶催化反应的辅酶NADPH浓度、底物9,10-菲醌浓度、酶浓度、反应温度、预孵育时间等因素,建立AKR1C3酶抑制剂筛选模型,采用阳性对照药物甲氯酚那酸及雷公藤红素等6种五环三萜化合物验证模型的可靠性。结果:优化后的反应体系为:0.15 mmol/L辅酶NADPH、8μmol/L底物9,10-菲醌、0.33μmol/L酶,反应温度为30℃,预孵育时间和反应时间均为10 min。运用该模型测定的甲氯酚那酸的IC_(50)值为0.516μmol/L,与文献报道值相符。6种五环三萜类化合物中,雷公藤红素和甘草次酸对AKR1C3酶的抑制活性最强。结论:建立的模型可应用于AKR1C3抑制剂的筛选,并为靶向AKR1C3的抗去势抵抗性前列腺癌中药及中药复方活性成分的筛选和作用机制研究提供良好的技术平台。     

基于谱效-构效关系筛选大黄中酪氨酸酶活性抑制成分的方法研究

目的 建立一种基于谱效-构效结合的高效天然化合物活性筛选体系,并采用该体系筛选大黄中酪氨酸酶抑制剂.方法 根据酪氨酸酶催化底物发生反应的原理,以大黄为例依次经过不同极性溶剂提取,分别检测各极性提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用;针对活性组分通过UPLC-Q/TOF鉴定活性成分,采用计算机辅助药物设计评价构效关系,进一步筛选抑制剂分子,并结合酶学检测验证药效成分.结果 通过建立的谱效-构效结合筛选体系获得大黄中大黄素、藜芦酚-4'-O-β-D-葡萄糖苷等9种具有间二羟基苯酚、邻三羟基苯酚结构的化合物可能具有酪氨酸酶活性抑制作用.结论 大黄中大黄素和藜芦酚衍生物对酪氨酸酶活性具有明显的抑制作用;谱效-构效相结合的筛选模式为天然化合物活性筛选提供了便捷方法.     

B16细胞中酪氨酸酶活性测定的方法学研究

目的:建立筒便快速的酶学法测定B16小鼠黑素瘤细胞中酪氨酸酶的活性。方法:培养一定量的B16细胞,提取细胞中的总蛋白,进行蛋白定量,考察孵育时间和反应的酶蛋白浓度,用酶标仪在475nm测定酪氨酸酶催化左旋多巴反应中多巴醌的生成量。结果:孵育时闻在0～25min范围内,r=0.9951,线性关系良好,酶蛋白浓度在0.05～0.3μg/mL范围内,r=0.9969。结论:用本法测定细胞中的酪氨酸酶活性,简便可靠,可为色素障碍性疾病药物的细胞筛选提供进一步的参考数据。     

光甘草定抑制酪氨酸酶及体外抗氧化活性的研究

目的:评价光甘草定对蘑菇酪氨酸酶活性的影响及探讨其机理,并进行光甘草定体外抗氧化活性的考察。方法:以单酚酶和二酚酶为底物,测定光甘草定对酪氨酸酶活性的影响,采用比色法考察其对DPPH.和.OH的清除率。结果:光甘草定对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的活性均有抑制作用,IC50分别为1.28μmol/L和1.56μmol/L,Lineweaver-Burk图显示光甘草定对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制作用表现为可逆性竞争型抑制;DPPH.和.OH实验显示光甘草定具有较强的体外抗氧化作用。结论:光甘草定有显著的抑制酶活性及体外抗氧化作用,可能是通过抑制黑色素生成的限速酶——酪氨酸酶和清除自由基来达到美白肌肤的作用。     

玄参中β-葡萄糖苷酶活性测定条件及干燥过程中酶活性变化的研究

采用p NPG法测定玄参中β-葡萄糖苷酶的活性,通过单因素及均匀设计实验对提取液的种类、反应体系、反应时间、温度、以及底物浓度等提取条件与反应条件进行了筛选,并在此基础上测定了新鲜玄参在40~100℃干燥温度中酶活性的变化。结果显示,柠檬酸磷酸缓冲液提取效果较好,50℃环境下反应30 min时酶促反应产生的吸光度最大,均匀设计实验确定最佳提取液pH 7.0、酶反应体系pH 6.0、底物浓度20 mmol·L~(-1)。酶活性变化受干燥温度和失水率影响,60~100℃干燥过程中温度升高,随着失水率加快酶活性迅速下降,而40,50℃干燥过程中一定的酶活性始终存在。该研究为环烯醚萜苷类水解机制和最佳干燥工艺的研究奠定了理论基础。     

53味治疗白癜风中药水提物对蘑菇酪氨酸酶活性的影响

目的:研究治疗白癜风的53味中药对蘑菇酪氨酸酶活性的影响。方法:采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定酪氨酸酶活性,反应物2mL,37℃孵育10min后,加0.15%DL-多巴1mL,再孵育2min,用分光光度计于475nm处测定吸光度A值(A475)。共分为4组,每种药物实验均重复3次。结果:生地黄、沙苑子、苍耳子等47味中药有上调蘑菇酪氨酸酶活性的作用。结论:上调酪氨酸酶活性的中药对临床治疗白癜风具有重要参考价值。     

姜酚类化合物的酪氨酸酶抑制活性

姜酚类是生姜所含的辛味成分,此次合成具有各种侧链结构的姜酚类化合物,并就其酪氨酸酶抑制活性进行了探讨。方法:①制备磷酸盐缓冲液(以磷酸二氢钠1.000g及磷酸氢二钠1.186g溶于蒸馏水500ml)、基质液(将L-DOPA32.7mg溶于蒸馏水200ml),受试品的二甲亚砜溶液以磷酸盐缓冲液稀释1     

基于ICP-MS法的桂枝茯苓胶囊中无机元素分析

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立桂枝茯苓胶囊(GFC)中29种无机元素(Li、Be、B、Na、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sn、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb、Bi)的测定方法。方法 GFC样品以浓硝酸为消解试剂经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法测定其中29种无机元素含量。结果待检测的29种无机元素在各的自线性范围内线性关系良好,r≥0.999 4;各元素的检出限在0.012~4.105μg/L,定量限在0.045~14.500μg/L,平均加样回收率在79.88%~105.76%,RSD≤4.55%。测定的12批样品中Ca、Na、Mg含量较高,均超过300μg/g;Fe、Mn、Sr含量也相对较高,而有害元素Be、As、Cd、Sb、Hg、Tl、Bi含量相对较低,均在0.030μg/g以下。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于GFC中无机元素的测定。     

基于ICP-MS法的麝香保心丸中26种无机元素分析

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立麝香保心丸中26种无机元素(Li、Na、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Sr、Mo、Cd、Sb、Ba、Hg、Tl、Pb、Bi)的测定方法。方法麝香保心丸样品以浓硝酸为消解试剂经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法测定其中26种无机元素的量。结果待检测的26种元素线性关系良好,相关系数r≥0.999 4,各元素的检出限在0.010~2.987μg/L,定量限在0.035~10.000μg/L,回收率在79.88%~105.76%,RSD≤4.55%。测定的12批样品中Ca、Mg、Na、Fe量较高,均超过1.000 mg/g;Mn、Cu、Zn、Al、Ga量也相对较高,而Sb、Hg、Tl、Bi量相对较低,均在0.050μg/g以下。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于麝香保心丸中无机元素的测定。     

10 Jahre Akupunktur mit Stoßwellen

In 2002, an already available shock wave device was modified according to my suggestions to enable its use for the stimulation of acupuncture points. Since then, the device has been used in the treatment of more than 1 000 patients.     

基于ICP-MS法分析九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素

目的采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法建立九味熄风颗粒中25种重金属及微量元素(Li、Mg、Cd、Sn、Al、Mn、Fe、Ti、V、Co、Zn、Ga、Cr、Ni、Tl、Pb、Cu、As、Be、B、Sb、Ba、Sr、Hg、Bi)的测定方法。方法九味熄风颗粒样品经微波消解后,以Ge、In元素为内标,以灌木枝叶标准物质作为质控标准物质,采用ICP-MS法进行测定。结果检测的25种元素线性关系良好,相关系数R2≥0.999 2,各元素的检出限在0.009~16.051μg/L,回收率在70.75%~107.66%,RSD≤6.44%。测定的6批样品中Cr、Sn、Hg、Pb均未检出,Tl、Cd、As、Cu的量均较低或未检出,Cd≤0.011μg/g,Cu≤0.373μg/g,Tl≤0.021μg/g,As≤0.571μg/g。结论该方法操作简便,分析速度快,灵敏度高,适用于九味熄风颗粒中重金属及微量元素的测定。     

蜂蜜炼制前后黄酮类成分种类和含量变化分析

目的研究中药辅料蜂蜜炼制前后黄酮类成分变化。方法参考《中药药剂学》,对不同来源的6种蜂蜜进行炼制。供试品经固相萃取法富集黄酮类成分。采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(HPLC-TQ-MS)法测定,Thermo Accucore RP-MS色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L/min,柱温30℃。质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),正离子检测模式,多反应监测模式(MRM)扫描分析。结果蜂蜜中共检测到12种黄酮类成分,包括黄酮苷元、二氢黄酮苷元和异黄酮苷元。黄酮苷元有8种:槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、高良姜素和白杨素;二氢黄酮苷元有3种:短叶松素、柚皮素和乔松素;异黄酮苷元染料木素。不同蜜源蜂蜜所含黄酮类成分种类和含量存在明显差异。6个蜂蜜样品炼制后,都发现了蜂蜜中没有报道过的芦丁和芸香柚皮苷,12种检测到的蜂蜜黄酮类成分在炼制后其量都有不同程度的变化,椴树蜜的槲皮素、桑黄素、木犀草素、山柰酚、芹菜素、汉黄芩素、乔松素和白杨素量均有增加,短叶松素、柚皮素和高良姜素量没增加反而还有下降的;洋槐蜜中除芹菜素量增加不明显外,其余均有所增加,尤其是槲皮素和桑黄素增加的较为明显;百花蜜和枣花蜜12种黄酮类成分量均显著增加。结论炼制可造成蜂蜜中黄酮类成分的种类和含量发生改变。     

基于ICP-MS法分析银杏叶系列品种中25种无机元素

目的建立银杏叶制剂中25种无机元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,并对不同剂型银杏叶制剂中无机元素量进行比较分析。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定25种无机元素量,绘制无机元素指纹谱图,并进行方法学考察。结果 25种无机元素在各自的线性范围内线性关系良好,r≥0.950 0,精密度、稳定性和重复性试验的RSD值均符合定量分析要求;加样回收率为91.35%～108.86%,RSD在0.05%～4.45%。银杏叶制剂中检测了25种无机元素量,并绘制无机元素指纹图谱,发现其谱图具有一定的特征性;银杏叶片中元素Hg、Al、Cr的量较高,有害无机元素的量超标应引起关注。结论通过无机元素在银杏叶制剂中的组成分布及其量的变化规律研究,为银杏叶制剂的质量控制及安全性评价提供依据,同时为临床使用提供一定参考。     

Gibt es eine Beziehung zwischen Qigong und Moderner Physik?

Based on the principle of completeness, Qigong is described as a method uniting external and internal paths to insight, and this can be perceived while practicing it. The common principle which we approach in every Qigong exercise is named the Dao. In quantum physics, there are also phenomena showing an underlying unity: entanglement of atomic systems.     

Biopotency Assays, a Model with Integration Feature for Quality Control Research of CMM

正As known,the development of quality control(QC)and quality assessment(QA)in the products of Chinese materia medica(CMM)is difficult and challenging.Some of the well-known analysis methods,such as IR,UV,HPLC,NMR GC-MS,and LC-MS have been applied in chemical components of the QC of CMMs and have gained significantimpact and advancement in modern analytical fields.In fact,the variables of CMM quality are caused by intrinsic and     

Journal of Acupuncture and Tuina Science Instructions for Authors

正The Journal of Acupuncture and Tuina Science,a journal with an international scope(ISSN 1672-3597,CN 31-1908/R,Bimonthly),is embodied by‘Springer Verlag'Database,Index Copernicus(IC)and Chinese Scientific and Technical Paper and Citations Data(CSTPCD).You can search full text on http://www.springerlink.com/content/1672-3597.