复叶耳蕨提取物体外抗 HIV-1整合酶活性的研究

目的 对鳞毛蕨科复叶耳蕨属植物复叶耳蕨不同提取部位体外抗HIV-1整合酶活性进行研究.方法 在体外无细胞系统内采用酶联免疫吸附测定HIV-1整和酶的半数抑制浓度(IC50).结果 复叶耳蕨醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物抑制HIV-1 整合酶的半数有效浓度IC50分别为 44.30,16.02μg/ml,水提取物抑制HIV-1整合酶的半数有效浓度IC50>100μg/ml.结论 复叶耳蕨醋酸乙酯提取物与正丁醇提取物具有体外抑制HIV-1 整合酶活性.     

刺头复叶耳蕨不同提取部位体外抗HIV-1蛋白酶活性的研究

目的 对鳞毛蕨科复叶耳蕨属植物刺头复叶耳蕨不同提取部位体外抗HIV-l蛋白酶活性进行研究.方法 用荧光光度法测定蛋白酶的半数抑制浓度(IC5o).结果 刺头复叶耳蕨乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物抑制HIV-1蛋白酶的半数有效浓度IC50分别为0.73,1.17,2.47 μg/ml.结论 刺头复叶耳蕨乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物与水提取物具有体外抑制HIV-1蛋白酶活性.     

复方肝舒康抗乙肝病毒活性研究

目的:研究复方肝舒康各提取部位的体外抗乙肝病毒(HBV)作用。方法:取各萃取部位作用于乙肝病毒DNA转染人肝癌细胞系2215细胞,以细胞病变(CPE)考察药物对该细胞的毒性,采用酶联法(ELISA)检测药物对2215细胞分泌的表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)表达的抑制作用。结果:石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位的半数毒性浓度(TC50)分别为125、375、62.5μg/mL。最大无毒浓度(TC0)分别为62.5、125、31.3μg/mL;石油醚部位、乙酸乙酯部位对2215细胞的HBsAg表达抑制作用的半数有效浓度(IC50)分别为48.6、14.0μg/mL,对2215细胞的HBeAg表达抑制作用的半数有效浓度(IC50)52.4、19.7μg/mL,而正丁醇部位均大于125μg/mL。石油醚部位的治疗指数(TI)值分别为2.57和2.43,乙酸乙酯部位的治疗指数分别为26.7和19.04,正丁醇部位均小于2。结论:复方肝舒康提取物乙酸乙酯部位体外抗乙肝病毒的作用最强,石油醚部位抗乙肝病毒作用较弱,正丁醇部位对乙肝病毒无作用。     

蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性及机制的初步研究

目的研究蒲葵籽提取物的体外抗HIV-1活性,对有活性粗提物进行初步机制研究。方法采用细胞毒性、合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护实验和HIV-1 p24抗原测定等实验对蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性进行筛选和确认;采用重组HIV-1逆转录酶和蛋白酶活性抑制实验,融合阻断实验初步探讨活性粗提物的作用机制。结果蒲葵籽的醋酸乙酯(P3)提取物具有较强的体外抗HIV-1活性,P3抑制HIV-1诱导C8166细胞形成合胞体的EC50为5.64μg/mL,对C8166细胞的毒性较小,CC50大于200μg/mL,治疗指数(TI)大于35.46;P3抑制HIV-1急性感染中p24抗原表达的EC50为23.04μg/mL,抑制正常C8166细胞与慢性感染细胞H9/HIV-1 B融合的EC50为8.00μg/mL;P3在质量浓度为200μg/mL时,对HIV-1逆转录酶的抑制率为28.86%;P3抑制重组HIV-1蛋白酶活性的EC50为1.77μg/mL。结论蒲葵籽的醋酸乙酯提取物(P3)具有较强的体外抗HIV-1活性,其作用机制可能主要为阻断病毒进入和抑制HIV-1蛋白酶活性。     

西藏红缨合耳菊提取物对酪氨酸酶的抑制作用

目的:研究西藏红缨合耳菊提取物对酪氨酸酶的抑制作用。方法:将红缨合耳菊的70%乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,然后测定各部分对酪氨酸酶的抑制作用,并进行酶抑制动力学研究。结果:乙酸乙酯、正丁醇的萃取部分对酪氨酸酶的活性抑制较强;对单酚酶抑制作用明显并有延迟作用,半数抑制浓度(IC50)分别为57.8、140μg/ml;对双酚酶的抑制作用显示浓度依赖关系,IC50分别为41.2、59.6μg/ml,相比熊果苷抑制双酚酶活性的IC50值1.44mg/ml,抑制效果分别是熊果苷的35、24倍;抑制类型:乙酸乙酯部分为竞争性抑制,Ki为19.7μg/ml,正丁醇部分为非竞争性抑制,Ki为60.7μg/ml。结论:西藏红缨合耳菊乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇萃取部分对酪氨酸酶活性抑制较强。     

西黄丸不同溶剂提取部位对A549细胞的抑制作用研究

目的：以水、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚为提取溶剂,研究西黄丸不同极性部位对人肺腺癌细胞株A549的抑制作用,为西黄丸的剂型改造提供实验依据。方法：以MTT法测定水、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚提取液对A549的抑制作用,计算每种溶剂提取物的半数抑制浓度（IC50）。结果：水、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚提取溶剂对A549的IC50分别为396．4,27．3,122．3,43．6μg／mL。结论：乙酸乙酯提取溶剂对A549的抑制效果最好,石油醚次之,且随浓度增加呈剂量依赖关系。为提高西黄丸药效物质浓度．剂型改造提供了实验依据。     

三叶青提取物抗人类免疫缺陷病毒活性研究

目的:探讨三叶青提取物对人类免疫缺陷病毒(HIV)活性的抑制作用。方法:以不同HIV-1病毒株(实验株HIV-1_(IIIB)、HIV-1耐药株HIV-174V、HIV-1临床分离株HIV-1_(KM018))为研究对象,通过合胞体抑制等多种方法检测三叶青提取物对不同病毒株的抑制作用,MTT法、ELISA法及荧光法分别检测三叶青提取物体外细胞毒性、提取物对HIV-1逆转录酶及蛋白酶活性的抑制作用。结果:三叶青提取物对C8166、MT4、PBMC的体外细胞毒性作用CC50值分别为158.73μg/m L、96.42μg/m L、120.67μg/m L。三叶青提取物对不同HIV-1病毒株有不同程度的抑制作用,EC50值在3.54~78.56μg/m L之间,TI值在2.03~43.18之间;其中实验株HIV-1_(IIIB)急性感染C8166细胞抑制HIV-1 p24抗原表达EC50值最大,C8166细胞形成合胞体TI值最大。提取物对HIV-1慢性感染细胞与正常T淋巴细胞C8166融合阻断、重组HIV-1逆转录酶抑制的EC50值分别为14.79μg/m L、170.15μg/m L。结论:三叶青提取物体外对HIV-1活性有一定的抑制作用,且可能是通过抑制HIV-1病毒至细胞及HIV-1逆转录酶活性达到抗HIV活性的目的。     

白花蛇舌草抗乙肝病毒化合物体外筛选

目的 找出白花蛇舌草中抗乙肝病毒(RBV)的有效部位及活性成分.方法 选取白花蛇舌草有效部位及分离单体进行抗乙肝病毒体外活性测试.结果 从白花蛇舌草全草的95％乙醇提取物中,分离提取得到6个化合物;白花蛇舌草乙酸乙酯提取物在半数毒性浓度下对乙肝病毒表面抗原(HbsAg)和乙型肝炎e抗原(HbeAg)的50％抑制浓度(IC50)分别为236.4μg/ml和396.2μg/ml,治疗指数(TI)分别为3.40和2.03.结论 乙酸乙酯提取物属于低毒有效部位,其抗病毒机制值得进一步研究与开发,其余样品的治疗指数偏低或者毒性过强.     

石见穿乙醇提取物氯仿部位抗HIV-1活性的体外实验研究

目的筛选出中药石见穿乙醇提取物中具有抗HIV-1活性的有效部位。方法选用CEMx174细胞感染BK132HIV-1病毒为体外实验模型,利用系统溶剂分离法,根据极性大小依次用石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇从石见穿75%醇提物浸膏中萃取4个部位,通过体外药效学实验,采用病毒引起合胞体数量和RT-PCR法,以细胞病变效应(CPE)、细胞内HIVRNA表达水平和上清中病毒载量为评价指标,观察各部位的抗HIV-1活性及有效部位的药效作用。结果显微镜下观察,仅石见穿氯仿部位组观察不到合胞体的形成,与阳性组基本一致;该部位在浓度20μg·ml-1时,细胞内HIVRNA相对量明显低于病毒组(P 0. 05),与AZT阳性组比较无明显差异(P 0. 05),上清中病毒载量也明显低于病毒组(P 0. 05),其余4个浓度(10,5,2. 5,1. 25μg·ml-1)有一定的量效关系。结论中药石见穿醇提物仅氯仿部位对HIV-1的复制有明显抑制作用,抑制效果与阳性药物AZT无明显差异,有效浓度为20μg·ml-1,具有一定的开发和研究前景。     

云南松松塔提取物体外抗HIV-1活性初步研究

目的研究云南松松塔提取物(C:醇提水沉后经碱提酸沉法得到的沉淀;D:滤液1倍醇沉得到的沉淀;F:滤液2倍醇沉过滤后再5倍醇沉得到的沉淀;H:醇提水沉后水溶液五倍醇沉得到的沉淀)体外抗HIV-1活性,明确云南松松塔提取物活性组段。方法采用细胞毒性实验、合胞体形成抑制实验、HIV-1感染细胞保护实验筛选云南松松塔提取物体外抗HIV-1活性组段。结果云南松松塔提取物对C8166细胞毒性小,其CC50均大于5000μg·ml-1;云南松松塔提取物C、D、F、H抑制C8166细胞合胞体形成的EC50分别为232.59,56.46,47.44,1687.72μg·ml-1。云南松松塔四个提取物对MT4细胞毒性小,均大于1000μg·ml-1,在1000μg·ml-1时,云南松松塔提取物对HIV-1感染的MT4细胞的保护率分别为(42.39±0.36)%、(15.94±6.15)%、(29.86±3.41)%、(14.98±10.75)%。结论云南松松塔提取物C、D、F均有体外抗HIV-1活性;云南松松塔提取物H无体外抗HIV-1活性;云南松松塔四个提取物对HIV-1感染MT-4细胞保护作用弱。     

南湖菱壳中α-葡萄糖苷酶抑制活性成分研究

目的:研究南湖菱壳的化学成分及体外抑制α-葡萄糖苷酶活性。方法:对醋酸乙酯和正丁醇部位采用各种色谱法分离,运用多种波谱技术鉴定结构。结果:从南湖菱的醋酸乙酯和正丁醇部位共分离鉴定9个化合物,分别为4,23,24-三甲基胆甾-22-烯-3-醇(1),豆甾醇(2),α-香树脂醇(3),(+)-nyasol(4),齐墩果酸(5),熊果酸(6),常春藤皂苷元(7),3,23-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(8),β-胡萝卜苷(9)。南湖菱壳总提取物、石油醚部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位均有体外α-葡萄糖苷酶抑制活性;化合物5(IC502.88 mg·L-1)和6(IC504.42 mg·L-1)具有体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。结论:除化合物2外,其他化合物均为首次从该属中分离得到;化合物1～9均为首次从该植物中分离得到。     

锁阳中粗多酚和粗多糖抗氧化活性的比较△

目的:比较锁阳粗多酚和粗多糖的抗氧化活性,为锁阳入药提供依据.方法:100 g锁阳粉末提取粗多酚和粗多糖.采用超声波辅助乙醇法提取粗多酚,依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取.同时用水提醇沉法提取粗多糖.用DPPH·法和ABTS+法进行锁阳粗多酚和粗多糖的抗氧化活性检测.结果:多酚粗提物中的总酚含量达到了922.9 mgGAE·g-1(没食子酸当量),而多糖粗提物中的多糖含量为366.6 mg·g-1(葡萄糖当量).DPPH.法检测锁阳粗多酚和粗多糖的IC50值分别为79.3 μg· mL-1和145.6 μg· mL-1.经ABTS+法检测,二者的TEAC值分别为2.12 mmol·g-1和0.69 mmol·g-1.结论:锁阳粗多酚的抗氧化活性远高于锁阳粗多糖.     

HIV-1 integrase inhibitory substances from Coleus parvifolius

For the purpose of discovering anti-HIV-1 agents from natural sources, water and EtOH extracts of 50 Thai plants were screened for their inhibitory activity against HIV-1 integrase (IN), an enzyme essential for viral replication. Of these plants, an EtOH extract of Coleus parvifolius Benth. (aerial parts) showed potent activity against HIV-1 IN with an IC50 value of 9.2 microg/mL. From this extract, 11 compounds were isolated and identified as luteolin 5-O-beta-d-glucopyranoside (1), luteolin (2), luteolin 7-methyl ether (3), luteolin 5-O-beta-d-glucuronide (4), 5-O-beta-d-glucopyranosyl-luteolin 7-methyl ether (5), rosmarinic acid (6), rosmarinic acid methyl ester (7), daucosterol (8), a mixture of alpha- and beta-amyrin (9, 10) and phytol (11). Of these compounds, rosmarinic acid methyl ester (7), rosmarinic acid (6), luteolin (2) and luteolin 7-methyl ether (3) exhibited inhibitory activities against HIV-1 IN with IC50 values of 3.1, 5.0, 11.0 and 11.0 microM, respectively. Among rosmarinic acid derivatives, the HIV-1 IN inhibitory activity increased in turn for a dimer (IC50 = 5.0 microM), a trimer (IC50 = 1.4 microM), and a tetramer (IC50 = 1.0 microM).     

丹参复合有效部位抗HIV-1活性的实验研究

目的 研究和评价云南丹参复合有效部位(DS MEF)的抗艾滋病病毒1型（human immunodeficiency virus type 1,HIV-1）活性。方法 采用放射性核素3H掺入法、荧光方法和酶联免疫吸附实验分别测定其对HIV-1逆转录酶、蛋白酶和整合酶的抑制作用;采用传代人T淋巴细胞MT- 4细胞、慢性HIV-1 ⅢB感染传代人T淋巴细胞H 9细胞和健康人新鲜外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),用HIV-1实验室传代的ⅢB病毒株和临床分离的齐多夫定(zidovudine,AZT)敏感株018a及AZT耐药株018c感染细胞测定其对细胞的毒性和在细胞培养内对HIV-1 P 24的抑制作用;灌胃或腹腔注射1次不同剂量DS MEF后测定其对昆明种小鼠的急性毒性。结果 DS-MEF抑制HIV-1整合酶、逆转录酶和蛋白酶的半数抑制浓度（50% inhibiting concentration,IC50）分别为(2.59±0.50)mg/L、(27.39±11.18)mg/L和(9.38±2.45)mg/L;对MT 4细胞毒性的半数有毒浓度（50% toxic concentration,TC50）为(1319±607)mg/L,抗HIV-1活性的IC50为(0.224±0.163)mg/L,选择指数(selected index, SI)为58.7;在HIV-1ⅢB慢性感染的H 9细胞培养内对细胞毒性的TC50为(18.11±9.84)mg/L,抑制HIV 1 P 24抗原的IC50为(17.230±21.114)mg/L,SI为1.1。对PBMC细胞毒性的TC50为(288.70±0.08)mg/L,抑制AZT敏感株HIV-1 018a的IC50为(26.42±11.16)mg/L,SI为10.9,抑制AZT耐药株HIV-1 018c的IC50为(27.87±5.35)mg/L,SI为10.4;与AZT和奈韦拉平均有协同抗HIV-1的作用,联合指数分别为0.78和0.67。灌胃20 g/kg DS-MEF对小鼠无明显毒性,无毒剂量>20 g/kg,腹腔注射后对小鼠的半数致死剂量为1.18 g/kg。结论 DS- MEF毒性小,具有多环节多功能地抑制HIV-1的作用。     

锁阳中粗多酚和粗多糖抗氧化活性的比较

目的：比较锁阳粗多酚和粗多糖的抗氧化活性,为锁阳入药提供依据。方法：100g锁阳粉末提取粗多酚和粗多糖。采用超声波辅助乙醇法提取粗多酚,依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取。同时用水提醇沉法提取粗多糖。用DPPH·法和ABTS＋法进行锁阳粗多酚和粗多糖的抗氧化活性检测。结果：多酚粗提物中的总酚含量达到了922．9mgGAE·g-1（没食子酸当量）,而多糖粗提物中的多糖含量为366．6mg·g-1（葡萄糖当量）。DPPH·法检测锁阳粗多酚和粗多糖的IC50值分别为79．3μg·mL-1和145．6p,g·mL-1。经ABTS’法检测,二者的TEAC值分别为2．12mmol·g-1和0．69mmol·g-1。结论：锁阳粗多酚的抗氧化活性远高于锁阳粗多糖。     

金铁锁体外抗氧化活性研究

目的:研究金铁锁体外抗氧化活性.方法:采用清除采用清除二苯代苦味酰基( DPPH)自由基、清除[2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐](ABTS)自由基及铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,对金铁锁体外抗氧化活性进行评价,并阳性对照没食子酸丙酯(PG)、丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT)比较.结果:金铁锁3个提取物体外抗氧化活性均弱于阳性对照PG,BHA,BHA.在3个提取物中,金铁锁乙酸乙酯提取物清除ABTS自由基(IC50=40.54mg·L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC=(696.9±2.42) μmol·g-1]较强;正丁醇清除ABTS自由基(IC50=83.38 mg· L-1)及还原Fe3+的能力[TEAC =(166.1±1.06) μmol· g-1]次之,石油醚提取物最弱.结论:金铁锁乙酸乙酯部位体外抗氧化活性较强.     

中药刺桐抗氧化成分的分离与活性评价研究

采用95%乙醇对刺桐中化学成分进行了分离提取,采用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水作为溶剂对95%乙醇提取物进行了进一步的分离提取,获得4个不同极性的提取部位。以抗坏血酸（VC）做为阳性对照,利用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基法和铁离子还原/抗氧化能力（FRAP）法对4个不同极性的组分进行抗氧化活性评价,研究结果表明,中药刺桐具有较好的抗氧化能力,其中,乙酸乙酯部位（EVE）抗氧化能力最强,为此,我们利用硅胶柱色谱对乙酸乙酯部位（EVE）进行了进一步分离,共获得10个组分。采用上述活性评价的方法对所获得的乙酸乙酯10个组分进行了抗氧化活性评价,发现EVE-B组分抗氧化活性最高,其清除DPPH自由基能力（IC50=8.42μg·L^-1）强于阳性对照VC（IC50=9.51μg·L^-1）,总抗氧化能力远远高于VC。     

复叶耳蕨地上部分微量元素锌铁铜锰含量测定

目的 测定复叶耳蕨地上部分微量元素Zn,Fe,Cu,Mn的含量. 方法利用微波消解法处理样品, 火焰原子吸收分光光度法测定.结果 复叶耳蕨地上部分Zn,Fe,Cu,Mn含量分别为 175.51,286.91,14.38,78.84 μg/ g.结论 复叶耳蕨地上部分含有丰富的Zn,Fe,Cu,Mn,该方法简便, 结果准确可靠, 可用于实际样品的测定.     

了哥王不同提取部位抑菌作用研究

目的比较了哥王不同提取部位的体外抑菌作用。方法采用二倍稀释法测定不同提取物对11种细菌的最低抑茵浓度。结果乙酸乙酯提取物的抑菌效果显著强于正丁醇提取物，且两者对葡萄球菌属的细菌抑菌作用最强，水提取物基本没有抑菌作用。结论了哥王乙酸乙酯提取物抑菌效果显著，具有广谱抗菌作用。