熊果酸抑制鼻咽癌细胞的作用

目的:苦丁茶熊果酸的抑制鼻咽癌细胞的作用。方法:自苦丁茶的老叶中提取熊果酸并对其进行纯化与鉴定;使用不同浓度的熊果酸作用在已培养好的鼻咽癌细胞内,分别对24h、48h、72h、96h及120h后使用四甲基偶氮唑蓝比色法对熊果酸对鼻咽癌细胞的抑制作用情况进行检测,并采取用流式细胞术分析细胞周期和其死亡率。结果:浓度不同的熊果酸在不同时间段内对鼻咽癌细胞的抑制作用均较为明显;经流式细胞术结果表明,熊果酸阻滞鼻癌细胞于G0/G1期。结论:熊果酸对于鼻咽癌细胞的抑制作用明显,可有效的阻滞癌细胞,诱导细胞死亡。     

熊果酸抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长及凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用.方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞株的增殖抑制作用;流式细胞术测定其对肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响.结果:不同浓度熊果酸对SMMC-7721细胞的增殖有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),呈时间和剂量依赖关系;24,72 h的半数抑制浓度(IC50)为12.59,8.32 mg·L-1.流式细胞仪检测结果表明,熊果酸12.5 mg·L-1对肝癌SMMC-7721细胞凋亡率14.07％,凋亡率随药物浓度的增加而上升;SMMC-7721细胞阻滞S期,作用与药物剂量呈正相关.结论:熊果酸对肝癌细胞株SMMC-7721增殖有明显的抑制作用,抗肿瘤作用机制可能与诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞于S期有关.     

熊果酸诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的作用及机制

目的研究熊果酸(Ursolicacid,UA)抑制人食管癌Eca-109细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用及机制。方法MTT比色法检测熊果酸对Eca-109细胞的增殖抑制作用;透射电镜观察经熊果酸处理后Eca-109细胞超微结构的改变;流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率;Westernblot法检测P27kip1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果20～50μmol/L熊果酸对Eca-109细胞具有显著的抑制作用(P<0.01);电镜下,18.32～36.65μmol/L熊果酸处理过的Eca-109细胞可见典型的凋亡形态及坏死形态;流式细胞检测显示细胞凋亡率及G0/G1期细胞随着熊果酸浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Westernblot检测结果提示熊果酸能使Bcl-2表达下降而Bax、P27kip1增加。结论熊果酸对人食管癌细胞系Eca-109具有显著的增殖抑制、诱导细胞凋亡作用。其作用与提高P27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期,下调Bcl-2的表达和增加Bax的表达有关。     

小檗碱对胃癌SGC7901细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨小檗碱对胃癌细胞系SGC7901的抑制作用及相关机制。方法:采用MTT的方法观察不同浓度小檗碱对SGC7901细胞的24h和48h抑制率,并计算24h和48h的50%抑制浓度(IC50)值;采用流式细胞技术检测不同浓度小檗碱作用48h后胃癌细胞系SGC7901凋亡的发生率和细胞周期的变化。结果:小檗碱对胃癌细胞SGC7901生长的抑制作用呈现出时间和剂量依赖性。24h和48h IC50分别为74.16、36.84μmol/L。1μmol/L至120μmol/L浓度梯度的小檗碱干预48h后,SGC7901凋亡率发生率逐渐增加。其中5、10、25、50、75、120μmol/L与对照组比较有统计学差异(P0.05),120μmol/L时凋亡发生率达到35.43%;5、25、75μmol/L浓度的小檗碱作用后,SGC7901胃癌细胞G0/G1期细胞比例较对照组明显升高(P0.05),而S期细胞比例则随浓度增加呈现出下降趋势,其中25、75μmol/L浓度组与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),对G2/M期细胞,各组比例变化无明显差别。结论:小檗碱对胃癌细胞系SGC7901具有时间和浓度依赖性的抑制作用,抑制作用与阻滞细胞周期于G0/G1期,抑制DNA合成和诱导凋亡有关。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究虎眼万年青总皂苷对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响.方法 用MTT比色法检测虎眼万年青总皂苷对MDA-MB-231细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡与细胞周期变化;透射电镜观察细胞形态学变化.结果 虎眼万年青总皂苷对MDA-MB-231细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;可诱导细胞发生凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性,使细胞周期明显阻滞于G0/G1期;电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变.结论 虎眼万年青总皂苷可抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与虎眼万年青总皂苷将癌细胞阻止于G0/G1期相关.     

光诱导金丝桃素对人鼻咽癌细胞CNE-2的毒作用和凋亡研究

目的:探讨以发光二极管为光源,金丝桃素光动力疗法对体外培养鼻咽癌细胞CNE-2的毒作用和凋亡影响。方法:体外培养CNE-2细胞分别加入不同浓度的金丝桃素,另设血卟啉阳性对照组,避光培养6h,分别用黄色和红色发光二极管照射90min,积累能量为5.67J/cm2,培养24h后用MTT法检测金丝桃素和血卟啉在光照条件下对鼻咽癌细胞CNE-2的影响,并用流式细胞仪进行细胞周期分析和凋亡检测。结果:MTT结果显示光活化金丝桃素和血卟啉呈剂量依赖性抑制鼻咽癌细胞的生长,IC50分别为0.049和0.650μg/mL;流式细胞仪分析表明金丝桃素经光照后,可使细胞停留在S期和G2期,并诱导细胞凋亡,0.20μg/mL金丝桃素作用18、28、48h,凋亡率分别达到9.97%、72.19%、92.24%。结论:金丝桃素经光诱导后,可有效抑制体外培养鼻咽癌细胞的增殖,并诱导鼻咽癌细胞凋亡。     

Survivin在槲皮素诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡中的调节作用研究

目的研究槲皮素诱导肝癌细胞SMMC7721凋亡,探讨其诱导SMMC7721细胞凋亡与survivin蛋白表达和caspase-3活性的关系。方法采用MTT法检测槲皮素对肝癌SMMC7721细胞生长的抑制作用,Hoechst 33258荧光染色对细胞凋亡进行形态学检测,流式细胞术检测细胞周期变化,免疫细胞化学检测survivin蛋白表达,分光光度法检测caspase-3的活性变化。结果槲皮素抑制肝癌SMMC7721细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48 h的IC50为84.24μmol.L-1。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经槲皮素处理,肝癌SMMC7721细胞周期阻滞于G0/G1期,且SMMC7721细胞survivin蛋白表达下降,caspase-3活性升高。结论槲皮素能诱导SMMC7721细胞凋亡,其机制可能是使肝癌SMMC7721细胞周期阻滞于G0/G1期,并下调survivin蛋白的表达,直接激活caspase-3而诱导SMMC7721细胞凋亡。     

橙皮苷提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的影响

目的 探讨赣南脐橙果皮提取物橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的作用及其机制.方法 MTT法检测橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;流式细胞术检测橙皮苷处理CNE-2Z细胞后细胞周期的变化.结果 不同浓度橙皮苷分别处理CNE-2Z细胞24,48,72 h后,均能抑制CNE-2Z细胞体外增殖;不同时间对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F = 1898.865,P < 0.001),不同药物浓度对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F =5454.040,P < 0.001),时间和药物浓度两个因素对CNE-2Z细胞增殖有交互作用(F＝118.909,P <0.001).在1～100μmol/L浓度范围内,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增大,且随看时间的延长,抑制率也逐渐升高.当浓度大于100μmol/L后,其抑制作用不再随药物浓度增加而进一步增强(P> 0.05).100μmol/L橙皮苷作用CNE-2Z细胞24,48,72 h,随着时间延长G0/G1期细胞比例下降(P<0.01),S期细胞比例增加(P<0.01),G2/M期细胞为0,细胞阻滞于S期.结论 橙皮苷能有效动员人鼻咽癌CNE-2Z细胞从细胞周期的G0/G1期进入S期,干扰细胞从S期进入G2期,导致大量细胞堆积于S期解旋复制,阻滞了细胞周期,从而抑制细胞的分裂增殖,诱导细胞周期特异性的细胞调亡.     

蛇毒复合酶对人肝癌细胞BEL-7402的抑瘤研究

观察蛇毒复合酶对人肝癌细胞 BEL - 74 0 2体外生长的抑制作用。经体外细胞培养 ,采用台盼兰染法、细胞形态观察和流式细胞术 ,检测人肝癌细胞的生长抑制率 ,以及细胞形态和细胞周期的变化。结果 ,蛇毒复合酶对人肝癌细胞有极强的抑瘤作用 ,8h和 12 0 h抑瘤率分别达 79.5%和 94 .5%。镜检及涂片染色发现癌细胞胞膜破裂、胞质外溢。流式细胞术分析显示蛇毒复合酶主要杀伤 G0 / G1期人肝癌细胞 ,同时 ,阻滞 S期细胞进入 G2 / M期。说明 :蛇毒复合酶对人肝癌细胞具有一定体外抑瘤作用 ,其作用机理与破坏细胞胞膜和干扰细胞生长周期有关。     

熊果酸诱导HL-60细胞凋亡机制的探讨

目的：本实验拟用熊果酸干预处理人急性早幼粒白血病HL-60细胞,体外培养实验,证实其对HL-60细胞的增殖抑制和促进诱导凋亡作用,并通过免疫细胞化学方法检测bcl-2,survivin在熊果酸与该细胞株作用后表达,探讨熊果酸诱导HL-60细胞调亡可能的分子机制。方法：荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率：琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA;免疫细胞化学方法检测Bcl-2、Survivin蛋白。结果：荧光显微镜下观察,80gmol／LUA作用24h的HL一60细胞可看到典型的细胞凋亡形态学变化;40umol／L、80umol／LuA可使G0／G1期细胞增多,出现G0／G1期阻滞,S期和G2／M期细胞数减少,凋亡细胞峰（sub-G1）及凋亡率逐渐增高,Bcl-2、Survivin蛋白表达降低,当UA浓度为40gmol／L时,P〈0．01,有显著性差异。结论：UA呈浓度和时间依赖性抑制HL．60细胞增殖,诱导其凋亡机制可能与下调Bcl-2、Survivin蛋白表达有关。     

基于Hedgehog信号通路的熊果酸诱导结直肠癌SW480细胞凋亡的机制研究

目的 研究熊果酸通过经典Hedgehog信号通路影响人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用及其机制.方法 通过显微镜观察熊果酸对SW480细胞形态的影响;采用MTT比色法检测熊果酸对细胞活力的影响;细胞划痕实验检测熊果酸对细胞迁移的影响;Hoechest/PI染色法观察熊果酸对细胞凋亡的影响;荧光探针法检测熊果酸对细...     

芦笋有效成分熊果酸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨芦笋有效成分熊果酸对ＨＬ－６０细胞增殖、凋亡的影响。方法：Ｅ和ＭＴＴ法、ＤＮＡ凝胶电泳、形态学方法等测定熊果酸对ＨＨＬ－６０细胞增殖、凋亡的影响。结果：熊果酸抑制ＨＬ－６０细胞增殖，对ＨＬ－６０细胞的半数生长的抑制剂量（ＩＣ５０）为８．２６μｍｏｌ／Ｌ，并能导其发生凋亡结论：熊果酸通过抑制ＨＬ－６０细胞增殖和诱导其凋亡发挥抗肿瘤作用。     

Clarification of the phenotypic characteristics and anti-tumor activity of Hedyotis diffusa

Hedyotis diffusa Willd. (Rubiaceae) is an important folk herb used to prevent and cure hepatitis and liver cancer in Taiwan. For differentiation of H. diffusa from counterfeits, macroscopic and microscopic characters of H. diffusa, H. corymbosa and H. tenelliflora were examined in this study. According to Trypan blue exclusion assay and Western blot analysis, H. diffusa had a significant inhibition of cell growth and induction of cell apoptosis in COLO 205 (colon cancer), Hep 3B (hepatocellular carcinoma) and H460 (lung cancer) cell lines. This study also used high-performance liquid chromatography (HPLC) to determine the quality control of H. diffusa. The HPLC data showed that ursolic and oleanolic acid are the components of the H. diffusa, consisting of approximately 4.66-4.80% and 1.86-1.96%, respectively. Our study also demonstrated that ursolic acid has significant anti-tumor activity in COLO 205, Hep 3B and H460 cancer cells.     

靶向熊果酸脂质纳米粒抗宫颈癌的作用研究

目的探讨靶向熊果酸脂质纳米制剂抗宫颈癌的作用效果。方法利用新型靶向性功能材料叶酸-CONH-聚乙二醇-NH-胆固醇合成靶向熊果酸脂质纳米粒,采用MTT法对比靶向熊果酸脂质纳米粒的人宫颈癌HeLa细胞和宫颈正常鳞状上皮细胞的增殖抑制作用的差异性;用流式细胞术考察其促细胞凋亡作用;应用蛋白免疫印迹(Western blotting)检测Bcl-2、Bax、Livin及Caspase-3的蛋白表达,用实时荧光定量-聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测基因表达,探索靶向熊果酸脂质纳米粒抗宫颈肿瘤的作用机制。初步考察靶向熊果酸脂质纳米粒在荷瘤鼠体内的抗肿瘤作用。结果靶向熊果酸脂质纳米粒对HeLa细胞具有显著的细胞增殖抑制及促细胞凋亡作用;使细胞中Livin、Bcl-2基因或蛋白表达增加,Caspase-3、Bax基因或蛋白表达减少;体内抑瘤效率高于普通熊果酸脂质纳米粒。结论靶向熊果酸脂质纳米粒可有效传输药物至肿瘤组织,抑制细胞的增殖,促使其凋亡,具有一定的体内抗肿瘤效果。     

长叶胡颓子体外抑制肿瘤细胞增殖的研究

目的研究长叶胡颓子乙醇提取物、三萜酸部位、熊果酸对4株肿瘤细胞增殖的体外抑制作用以及熊果酸抗肿瘤作用机制。方法采用MTT法测定长叶胡颓子乙醇提取物、三萜酸部位和熊果酸在25、50、100、200μg/mL时对人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、肠癌细胞LOVO、HCT-8实体瘤细胞增殖的体外抑制作用;并在上述药物剂量下,观察熊果酸作用72 h后对SGC-7901细胞形态的影响,以及作用24 h后对SGC-7901细胞凋亡的诱导作用。结果长叶胡颓子乙醇提取物、三萜酸部位、熊果酸对4株肿瘤细胞的增殖具有较强的体外抑制作用,其中对于胃癌细胞的抑制作用为熊果酸〉三萜酸部位〉乙醇提取物;对肠癌细胞的抑制作用为三萜酸部位〉熊果酸〉乙醇提取物,同时熊果酸能显著改变SGC-7901细胞的形态,并且SGC-7901细胞的凋亡率与熊果酸的剂量呈相关性。结论三萜酸是长叶胡颓子发挥体外抗肠癌细胞增殖作用的主要有效部位;熊果酸是其发挥体外抗胃癌细胞增殖作用的主要活性成分,熊果酸抑制胃癌细胞增殖机制为诱导细胞凋亡,为开发新的抗癌药物提供参考。     

Pharmacological research progress of ursolic acid for the treatment of liver diseases

Ursolic acid is a natural pentacyclic triterpenoid with various pharmacological activities such as anti-inflammatory, hepatoprotective, antitumor, and hypoglycemic activity. This natural product is widely present in many common Chinese herbal medicines such as Hedyotis diffusa and Prunella vulgaris. The present review highlights the pharmacological research progress of ursolic acid in liver disease, with a focus on providing directions for future research and clinical practice of ursolic acid. Modern studies have demonstrated that ursolic acid can adjust the activities of enzymes such as superoxide dismutase and NADPH oxidase to balance oxidative stress, reduce inflammation, as well as to repair damaged liver. Research also showed that ursolic acid targeted lipid metabolic genes, activating autophagy and reducing lipid deposition in hepatocytes, further preventing the progress of fatty liver. Besides, the combination of ursolic acid with caspase-3 was able to prevent apoptosis and relieve liver injury. Furthermore, ursolic acid was showed to target the intestine by alleviating mucosal injury and restoring the balance of the intestinal microecology and protect liver through the enterohepatic axis. In terms of antitumor activity, ursolic acid targeted several tumor suppressor genes including gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten and p53, and affected the expression of cyclin and apoptosis-related proteins involving Bax, Bcl-2, and Bcl-x, which acted on signal transduction pathways including phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B, extracellular regulated protein kinases and proteina fosforilata 21 wide-type actiated factorlp 1. The same compound interacted with caspases, resulting in inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis. In addition, ursolic acid also exerted anticancer activity through inhibiting angiogenesis, tumor invasion and metastasis, and improving immunity. Other studies have noted the importance of nano-preparations of ursolic acid for its clinical applications. This review provides essential information on the role of ursolic acid in liver protection. Further research on the mechanisms of action of ursolic acid would be useful for its pharmaceutical development and clinical application.     

熊果酸对乳腺癌细胞caspase-3和PARP表达的影响

目的:探讨三萜类中药成分熊果酸(UA)诱导乳腺癌细胞MCF-7的凋亡作用,并通过分析UA作用后MCF-7细胞的caspase-3和多聚ADP核糖多聚糖(PARP)蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法:采用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理细胞株,采用MTT法、活细胞原位光镜和荧光染色技术、流式细胞技术(FCM)、荧光免疫组织化学技术,图象分析技术,研究UA对caspase-3和PARP蛋白表达的影响,诱导细胞凋亡的作用。结果:UA剂量依赖性的抑制MCF-7细胞增殖,半数生长抑制剂量(IC₅₀)为(22.6±3.0)μmol.L^-1,诱导caspase-3和PARP表达增加,使细胞呈现典型的凋亡形态学特征,核质浓集,有凋亡小体。结论:UA诱导MCF-7细胞凋亡,其机制涉及到caspase-3和PARP依赖性凋亡调节信号通路。