补肾药对心理应激下生殖轴内分泌网络影响的因子分析模型

为了探讨补肾药对心理应激下生殖轴内分泌网络的影响,从动物实验得到的原始生物学数据入手,对生殖轴内分泌网络的6个重要的生物调节因子做因子分析,建立了补肾药对心理应激下的生殖轴内分泌网络影响的因子分析模型。发现补肾药干预下各个生物因子之间的控制关系进一步复杂,各个生物因子之间相互制约,并有一种向均衡化方向发展的趋势,这是补肾药整合调节作用的结果,起到改善机体功能的作用。     

基于因子分析的定经汤调节卵巢早衰生物学机制研究

目的: 探讨定经汤调节卵巢早衰的生物学机制。方法: SD大鼠90只,随机分为3组:正常组、模型组、定经汤干预组;分别检测其与卵巢早衰相关的生物分子:β-内啡肽 (β-EP) 、白介素-1 (IL-1)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、雌激素受体 (ER)、孕激素受体(PR)、促性腺激素释放激素 (GnRH)、促肾上腺皮质激素释放激素 (CRH)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、孕酮(P)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT);利用因子分析方法探究定经汤干预下各生物分子之间的相互调控关系,并探寻定经汤调节卵巢早衰过程中的关键生物分子。结果: 定经汤干预状态的生殖内分泌网络主调控因子主要包括垂体-卵巢轴上的4个生物分子,垂体-肾上腺轴靶腺层生物分子CORT以及部分下丘脑生物分子;IL-1是定经汤干预状态生殖内分泌网络主调控因子与其他公共因子共有的下丘脑部位的生物分子。结论: 定经汤一方面可以直接调节垂体-肾上腺轴生物分子,另一方面又可以通过下丘脑间接调节垂体-肾上腺轴生物分子;各调控因子之间起枢纽作用的生物分子为IL-1。     

基于人工神经网络模型的抗卵巢早衰中药配伍作用的生物学机制研究

卵巢早衰病因涉及多个方面,心理应激可以诱发.对卵巢早衰的中医分型肝郁型中医治疗强调补肾疏肝为原则.补肾疏肝中药配伍治疗卵巢早衰作用的生物学机制复杂,应用人工神经网络建立下丘脑神经内分泌免疫因子与下丘脑-垂体-卵巢轴调控关系模型,可以定量分析生物系统非线性相关问题,探讨中药配伍作用的复杂生物学机制.     

基于因子分析的心理应激大鼠卵巢早衰生物学机制研究

目的:探讨正常及心理应激状态下影响卵巢早衰的各生物分子之间相互调控关系。方法:SD大鼠60只,随机分为两组:正常组和模型组;分别检测其正常及心理应激状态下与卵巢早衰相关的生物分子:β-EP、IL-1、NOS、NO、ER、PR、GnRH、CRH、FSH、LH、E2、P、ACTH和CORT;利用因子分析方法探究正常及心理应激状态各生物分子之间的相互调控关系,并探寻心理应激导致卵巢早衰过程中的关键生物分子。结果:正常状态主调控因子主要包括下丘脑生物分子和垂体-卵巢轴生物分子;心理应激状态下主调控因子包括垂体-肾上腺轴生物分子ACTH及下丘脑和垂体-卵巢轴生物分子,且IL-1是心理应激状态第1和第2公共因子上共有的下丘脑部位的生物分子。结论:正常状态下丘脑生物分子与垂体-卵巢轴生物分子之间关系密切,垂体-肾上腺轴生物分子相对独立;而心理应激状态主调控关系显示了垂体-肾上腺轴上的生物分子ACTH对下丘脑和垂体-卵巢轴生物分子的反馈影响,初步揭示了心理应激首先引起垂体-肾上腺轴生物分子变化,进而通过下丘脑生物分子IL-1使下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱,导致卵巢早衰的生物学机制。     

从脑源性神经营养因子角度分析补肾活血方药对应激生殖损害的保护作用

脑源性神经营养因子广泛分布于海马、大脑皮质、卵巢等组织,具有促进神经元生长、分化、存活、营养、功能维持、保护修复等作用。应激导致的生殖损害与神经内分泌免疫调节网络失衡密切相关。神经内分泌免疫调节网络中脑源性神经营养因子是影响应激生殖损害发生发展与转归的重要因子,补肾活血汤可保护应激生殖损害,但其具体机制尚未明确,且有待深入研究,本文拟从脑源性神经营养因子角度分析补肾活血方药对应激生殖损害的保护作用,从而为中医药干预应激生殖损害方面提供新的理论依据。     

补肾疏肝药对菟丝子-柴胡调整卵巢早衰机制研究的RBF神经网络模型

为了探讨补肾疏肝药对菟丝子-柴胡调整卵巢早衰的生物学机制,利用因子分析对下丘脑CRF、IL-1、β-End、E2R、PR、NOS、GnRHmRNA以及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴生物分子、下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴生物分子进行分组,对各组内生物分子建立RBF神经网络模型并建立各组之间的RBF神经网络模型。利用模型的预测功能可定量的分析各生物分子之间的动态关系,从而揭示补肾疏肝药对菟丝子-柴胡在调整卵巢早衰中所起的作用。RBF神经网络模型在研究中药配伍作用的复杂生物学机制方面有良好的应用前景。     

基于支持向量回归机的定经汤调节卵巢早衰作用机制研究

目的:探讨定经汤调节卵巢早衰的作用机制。方法:SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、定经汤干预组,分别检测其与卵巢早衰相关的生物分子,如β-EP、IL-1、NOS、NO、Gn RH、CRH、FSH、LH、E2、P、ACTH和CORT;建立基于支持向量回归机的生物分子网络模型,探究定经汤干预下各生物分子之间相互调控关系。结果:卵巢早衰大鼠灌服定经汤后,垂体-卵巢轴及垂体-肾上腺轴靶腺层生物分子指标值上升,垂体-卵巢轴及肾上腺轴的变化反馈到下丘脑,使得IL-1、NOS和NO指标值上升;通过IL-1的枢纽作用,使得β-EP、Gn RH和CRH上升;最后下丘脑生物分子的上升又使得垂体-卵巢轴及肾上腺轴的靶腺层生物分子进一步上升,垂体-卵巢轴垂体层生物分子稍有下降。结论:定经汤干预下卵巢早衰相关生物分子网络趋于平衡,定经汤调节卵巢早衰过程中起到关键作用的生物分子为IL-1。     

急性应激性雌性大鼠生殖内分泌紊乱模型的建立

目的观察急性应激对雌性大鼠生殖内分泌功能的影响.方法对成年雌性大鼠使用急性制动应激,观察应激后血浆雌二醇、孕酮及皮质酮含量变化.结果急性应激可使性成熟雌性大鼠性周期中各期血浆雌二醇水平显著降低,而血浆孕酮和皮质酮水平则显著升高,而且使二者比值严重失常,从而使雌性生殖内分泌陷入紊乱状态.结论本研究结果表明,急性应激可引起雌性生殖内分泌陷入紊乱状态.由于身心应激为女性生殖内分泌紊乱及相关疾病的重要诱因,急性制动应激(心理应激)引起雌性大鼠生殖内分泌功能紊乱的模型,可作为研究防止生殖内分泌功能紊乱性疾病药物的一种疾病动物模型.     

中药复方配伍对慢性心理应激大鼠HPA轴的调节作用

目的：探讨疏肝补肾药白芍和菟丝子中药复方配伍对慢性心理应激大鼠HPA轴的调节作用。方法：Wistar大鼠随机分5组：正常组,模型组,白芍和菟丝子复方配伍组,白芍单方组,菟丝子单方组。除正常组外各组均通过复合刺激复制慢性心理应激模型。通过旷场实验观察各组大鼠的行为学变化,采用放免法检测各组大鼠CRH,ACTH、CROT含量。结果：与正常组比较,模型组体重明显下降,旷场活动明显减少,下丘脑CRH、血清ACTH、CROT显著增高（P〈0．01）;与模型组相比,复方组和白芍组的体重明显增加,而CRH和CROT明显下降,菟丝子组也有一定的下降但是没有显著性差异。结论：白芍和菟丝子复方配伍能够有效调节慢性心理应激大鼠HPA轴的适应性,改善慢性应激大鼠的抑郁状态。     

加味四逆散对慢性轻度不可预计性心理应激模型大鼠神经内分泌免疫网络调控作用的研究

目的:观察慢性心理应激对模型大鼠神经内分泌免疫(NIM)网络的影响以及加味四逆散的调治作用。方法:大鼠随机分为6组:雌性正常组,雌性模型组,雌性加味四逆散组,雄性正常组,雄性模型组,雄性加味四逆散组。建立慢性轻度不可预计性心理应激模型,采用放射免疫方法检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血清肾上腺酮(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,观察肾上腺/胸腺器官形态学改变,流式细胞仪计数外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+。结果:慢性心理应激大鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质(HPA)轴功能亢进,免疫功能受到抑制。加味四逆散可调节慢性心理应激大鼠HPA轴的兴奋性,改善慢性心理应激大鼠免疫功能改变。结论:慢性轻度不可预计性心理应激模型大鼠NIM网络功能发生异常改变,而加味四逆散对其具有一定的调治作用。     

菟丝子黄酮对心理应激雌性大鼠海马-下丘脑-垂体-卵巢轴性激素受体的影响

生殖内分泌系统是易受应激损伤的一个系统,心理应激可引起生殖内分泌紊乱,引发生殖内分泌疾病。目前西医对此类疾病尚缺乏有效的调节手段,主要以激素替代治疗,长期应用激素均有明显的副作用,且疗效不确定,而中医药具有整体调控和多靶点、多方式调节的特点,因而对女性卵巢功能失     

补肾复方对慢性疲劳综合征线虫模型的影响

目的以各种应激状态在线虫上模拟应激疲劳综合征（chronic fatigue syndrome,CFS）,评估补肾复方对成年线虫应激生存状态及整体寿命的影响。方法在高、中、低浓度（500、250、100 mg/L）补肾复方干预下,观察成年线虫对体外环境的热应激（35 ℃）、氧化应激（250 μg/mL）及体内毒性蛋白应激（Aβ1-42转基因突变株CL4176）的耐受能力和平均存活时间,评估补肾复方对正常状态下线虫平均生存时间（25 ℃）、 20 s运动距离、30 s咽泵运动频次及生殖能力的作用效果。结果与对照组比较,补肾复方干预各组均能增加线虫热应激存活时间（P〈0.01）;高、中浓度干预组可增加线虫氧化应激存活时间,减轻蛋白毒性作用,延长线虫生存时间（P〈0.01, P〈0.05）;高浓度干预组亦能增加线虫的运动距离和咽泵运动频次（P〈0.01）。各组间生殖能力比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论补肾复方能增强线虫对内外环境压力的应激能力,延长线虫寿命的同时不干扰线虫正常生殖,提高生命质量,为补肾复方在防治CFS方面的进一步机制探索及药理研究奠定基础。     

慢性应激对卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、LH及β- EP水平的影响

目的:通过检测慢性应激致卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、LH、β-EP水平及观察卵巢组织形态以及激素水平的变化,探讨中药木尼孜其合剂对卵巢早衰的作用。方法:选用90只性成熟Wistar雌鼠,随机选取10只设为正常组(C组),其余80只为应激模型组,模型建成之后从中筛选出成卵巢早衰者分为POF模型组(POF组)及POF药物干预高、中、低剂量组,用ELISA试剂盒检测大鼠血清中E_2、FSH、LH、β-EP激素水平及观察卵巢组织形态变化。结果:木尼孜其合剂对慢性应激致卵巢早衰大鼠卵巢组织形态有一定的改善作用。与正常对照组比较模型对照组的E_2、β-EP激素水平明显降低(P0.05), LH、FSH的水平显著升高(P0.05);与模型对照组比较,各药物干预药组上述指标均有不同程度的改变(P0.05)。结论:慢性应激(湿、寒、光照)能够导致POF的发生,中药木尼孜其合剂有防治卵巢早衰的作用,其作用机制与能够改变血清中E2、β-EP、LH及FSH等激素水平有关。     

王佩娟治疗卵巢早衰经验总结

王佩娟教授结合临床及科研经验,总结出防治卵巢早衰的有效辨治思路和方法。认为卵巢早衰与应激下肾虚血瘀证密切相关,故根据心-肾-子宫轴整体性、NIM网络平衡性及月经周期阴阳变化,采用补肾活血方药及心理治疗对卵巢早衰进行防治,疗效显著。     

补肾活血汤对制动应激雌性大鼠生殖内分泌功能紊乱的影响

目的:探讨补肾活血汤对制动应激所致大鼠生殖内分泌功能紊乱的影响。方法:采用重复制动应激法制造大鼠生殖内分泌功能紊乱模型,按8.0,4.0,2.0 g·kg-1分别ig给予补肾活血汤,以放免法检测大鼠血清中性激素:雌二醇(E2)、孕酮(P)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平;酶免法检测血清中激活素(ACTA)、抑制素(INHB)、卵泡抑素(FS)水平。结果:补肾活血汤8.0,4.0 g·kg-1剂量组可明显升高模型大鼠血清中E2水平,降低异常升高的ACTA水平,升高INHB和FS水平(P<0.05或P<0.01),对生殖内分泌功能紊乱大鼠的卵巢功能有明显的保护作用。结论:补肾活血汤对制动应激所致大鼠生殖内分泌功能紊乱的卵巢功能有明显的保护作用。     

中药一贯煎制剂对卵巢早衰大鼠血清中E_2、FSH、β-EP水平的影响

目的:通过观察卵巢早衰试验大鼠血清中E_2、FSH、β-EP水平和卵巢组织形态的变化,探讨卵巢早衰的病理生理机制以及中药制剂一贯煎对卵巢早衰的作用机制。方法:试验设正常对照组、模型对照组、乙烯雌酚干预组、一贯煎干预组。灌胃给予雷公藤多苷50 mg/kg·d复制卵巢早衰大鼠模型,2周后灌胃给予各组干预药,连续给药6周。之后观察实验大鼠卵巢组织形态学的变化,检测大鼠血清中E_2、FSH、β-EP水平。结果:各组卵巢组织切片形态比较,本实验造模成功,中药制剂一贯煎对卵巢早衰实验大鼠卵巢组织形态有一定的改善作用。与正常对照组比较,模型对照组的E_2、β-EP水平明显降低(P0.05),FSH的水平显著升高(P0.05);与模型对照组比较,各干预药组上述指标均有不同程度的改变(P0.05)。结论:灌胃给予雷公藤多苷可引发大鼠卵巢早衰,中药一贯煎制剂有防治卵巢早衰的作用,其作用机制与能够改变血清中E_2、β-EP、FSH水平有关。     

补肾法对更年期综合征网络机制的影响

目的：探讨补肾法对更年期综合征的治疗作用机制。方法：以去卵巢成年♀大鼠为模型，补肾药片分高、中、低不同剂量对模型大鼠进行治疗，从神经、内分泌、免疫三大系统进行观察。结果：（１）调节植物神经功能；补肾药片不同剂量组均可去卵巢后升高的脑组织５－ＨＴ、５－ＨＩＡＡ的含量明显下降，能使去卵巢后升高的５－ＨＴ／ＮＥ的幽会降至正常组水平。（２）调节生殖内分泌；补肾药片大、中剂量均能明显增加去卵巢后的子宫重量系     

补肾法对下丘脑-垂体-性腺-胸腺轴作用的研究概况

自从Crossman1997年首次提出下丘脑-垂体-性腺-胸腺轴概念以来，神经内分泌网络学说受到广泛注意。中医肾藏精、主生殖，是生育功能的枢纽，这与神经内分泌网络的性腺轴的作用相似。近年来，中医肾本质的研究结果表明，肾包括神经内分泌和免疫等多种功能，而补肾法能调节下丘脑-垂体-性腺轴和免疫功能的紊乱。本就此作了近十年来的献综述。     

补肾健脾活血三类复方对下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺轴及CRF基因表达的影响

目的：为从分子水平来阐明药物对肾阳虚证的主要调节点。方法：采用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）化学发光定量法、放射免疫及细胞免疫技术，观察补肾、健脾、活血三类复方分别对下丘脑一垂体一肾上腺一胸腺（ＨＰＡＴ）轴受抑制模型的下丘脑促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）ｍＲＮＡ表达、神经内分泌和免疫功能的影响。结果：唯有补肾药可通过提高下丘脑ＣＲＦｍＲＮＡ表达来保护ＨＰＡＴ轴免受外源性皮质酮的抑制；健脾药对免疫系统有直接的促进作用；而活血药对ＨＰＡＴ轴无任何影响。结论：药物对肾阳虚证的主要调节点定位在下丘脑。     

舒肝方对心理应激肝郁大鼠神经生殖内分泌的作用

目的:探讨舒肝方(柴胡、芍药、枳壳等)对心理应激肝郁雌性大鼠神经生殖内分泌的影响。方法:以夹尾激怒法建立心理应激肝郁证大鼠模型,检测疏肝补肾中药对大鼠下丘脑垂体和血清NE、DA、5-HT、HVA、DOPAC、5-H IAA以及血清LH、FSH、E2、T、P、PRL水平。结果:模型大鼠下丘脑垂体NE减少,DA、5-HT及5-H IAA含量增加,血清FSH、LH、E2、P降低,NE、DA、5-HT、5-H IAA及T水平升高(P<0.05,P<0.01)。舒肝补肾组血清P及LH水平明显升高;舒肝及舒肝补肾方均能升高模型大鼠下丘脑垂体NE及血清FSH、E2水平,降低下丘脑垂体DA、5-HT、5-H IAA及血清NE、5-HT、T水平;补肾方亦能抑制下丘脑垂体NE、血清FSH、P水平下降及下丘脑垂体与血清5-HT、血清NE、T水平升高。(P<0.05)。结论:心理应激状态下肝郁证雌性大鼠的神经生殖内分泌功能紊乱,舒肝补肾中药具有改善神经生殖内分泌功能的作用。